甘蔗黄叶病毒P0基因的克隆与原核表达及抗血清制备

根据已发表ScYLV-P0基因系列设计特异性引物,应用RT-PCR技术从甘蔗病叶的mRNA扩增得到目的DNA片段.以pET32a（＋）为原核表达载体,构建重组表达质粒pET32a-P0.经过双酶切鉴定和DNA测序后,将重组表达质粒转入大肠杆菌BL21 （DE3）pLySs,在30℃培养条件下IPTG诱导表达.通过SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况.表达结果显示,在该表达系统中,融合表达蛋白P0是以包涵体形式的蛋白存在;P0融合蛋白大小约45kDa,与P0开放阅读框的理论推算值29.991 kDa加上载体自身蛋白约18 kDa相符,用Ni2＋-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清,通过酶联法（ID-ELISA）测定本实验制备的ScYLY-P0抗血清工作浓度为1：25000.     

转甘蔗抗虫基因CpTI的RT-PCR检测

利用已修饰的CpTI基因进行转基因检测,根据修饰后的目的基因片段序列对两个甘蔗品种（P44和福农94-0403）的转基因甘蔗进行RT-PCR检测研究,结果在被检测的10株甘蔗中验证了3株已转入植株中,RT-PCR检测到的20、25、26号植株均呈阳性,证明被修饰的sck基因已成功转入甘蔗。     

甘蔗宿根矮化病巢式PCR检测体系

利用LG和Cxx两对引物,通过实验优化设计,建立了比较可靠的甘蔗宿根矮化病巢式PCR检测体系。     

苹果树黄叶病防治试验

苹果树黄叶病不单是缺素引起的生理病害,还是由土壤环境条件恶化或病毒引起的根部病理性病害而导致的。因此在防治时要想彻底根治,必须从治疗病理性病害入手才可能收到良好的效果。根据这一发病机理,采用枝干输液法,以应用杀菌剂治疗病理性病害为前提,辅以营养剂治疗生理缺素症。试验结果表明,以800倍甲基托布津加500倍壮丰优,或再加500倍杨馥成牌活力素的效果最好,它显著地优于生产上普遍使用的单一补充营养元素的防治效果,为经济有效地进行苹果树黄叶病的防治提供了一条崭新的途径。     

苦瓜黄叶应引起注意的几个问题

1　造成苦瓜黄叶的各种原因及其为害症状1 1　病菌感染引发白粉病　病原体子囊菌在瓜类病株残体上越冬 ,通过空气和流水传播感染 ,高温高湿条件下较易发生 ,是春季苦瓜最严重的病害。其为害症状 :叶面由淡黄转为深黄 ,叶片背面有大小不一、但颜色相同的一块块白色粉状物 ,发病由根部叶片向上发展 ,直至整株叶片变黄 ,高温高湿特别雨天过后 ,病菌通过空气流动和流水传播 ,迅速扩散蔓延 ,造成大面积危害 ,如果任其发展 ,植株十多天时间将会枯黄死亡。1 2　缺水和涝害　土壤缺水 ,影响土壤肥力的转化和植株对土壤肥力的吸收 ,抑制土壤中化学、…     

PCR检测甘蔗宿根矮化病研究简述

对甘蔗宿根矮化病的常规PCR、优化PCR、巢式PCR、荧光定量PCR等检测技术进行了简述,以期为甘蔗宿根矮化病的早期诊断、田间发生动态监测、脱毒种苗的生产及对外甘蔗品种/材料交换提供帮助.     

甘蔗糖分的快速测定方法

通过对32份甘蔗品种材料进行检测,同时与常规测定方法相比较,研究建立了一种甘蔗糖分快速测定法。试验结果表明：两种方法甘蔗糖分和糖锤度测定值的差异均不显著;甘蔗糖分所得值绝对误差变化幅度为0-0．49,绝对误差平均值为0．26;糖锤度值绝对误差变化幅度为0-0．14,绝对误差平均值为0．025。快速测定方法所得结果与常规测定法所得结果有很好的相关程度（甘蔗糖分r=0．9718^＊＊,糖锤度r=0．9993^＊＊）,误差在允许范围内。     

出口甘蔗品种主要病害的检疫及血清学检测

严格按照国际标准检疫程序要求,对提供出口澳大利亚的26个甘蔗品种在昆明专用甘蔗检疫温室进行了两个生长周期的病虫疫情监测,未发现疫情;同时,利用已建立的血清学检测技术对甘蔗宿根矮化病、花叶病进行了检测,结果均呈阴性,符合对方的标准和要求,确保了国际合作甘蔗品种交换的安全和正常进行。     

高接苹果树缺铁黄叶病防治研究

１９９７～１９９８年试验结果表明,高接更新苹果树５月份出现黄叶时用６００倍Ｆｅ－Ｎ根系输液处理能够获得较好的复绿效果,Ｆｅ－ＥＭ有一定的复绿效果,ＪＧ－１型复绿注射剂用于根系输液容易发生肥害。     

弥勒蔗区甘蔗宿根矮化病发生分布及病原检测

为明确云南弥勒蔗区甘蔗宿根矮化病（RSD）的分布、发生危害情况,对云南弥勒蔗区RSD的发生和分布进行了调查和田间采样,采用PCR法对田间采集的60个样本进行RSD检测.结果表明：52个样本为阳性,阳性检出率86.67％,确认弥勒蔗区存在RSD;通过系统分析,明确了不同品种、不同植期、不同蔗地RSD发生状况,为弥勒蔗区推广应用温水脱毒健康种苗、有效防控甘蔗宿根矮化病提供了科学依据.     

番茄黄化曲叶病及抗病育种研究概况

番茄黄化曲叶病是热带、亚热带地区最具毁灭性的番茄病毒病之一。随着保护地的发展,温室烟粉虱在北方保护地越冬、传播、危害,现已成为影响我国乃至全世界番茄生产的主要限制因素之一。从番茄黄化曲叶病毒病为害情况、病毒研究概况、抗病品种选育进展等方面进行了综合阐述。     

江苏省番茄黄化曲叶病的病原分子诊断

 2007年冬季在江苏省兴化市和南京市一些日光温室大棚中发生了一种新的番茄病毒病,主要表现为植株矮缩,叶片上卷,叶缘黄化等,危害十分严重。为明确其病原,对田间表现典型症状的20份病样进行了分子检测,结果全部检测到粉虱传双生病毒;对其中12份进行序列同源性分析,发现其同源性超过98%,说明其极可能是一个分离物;将该序列与Genbank进行BLAST分析,发现其与番茄黄化曲叶病毒的同源性最高,达99％。     

我国番茄黄化曲叶病发生规律和研究进展

番茄黄化曲叶病在我国快速蔓延,给多个地区的番茄生产造成了极大损失,并且病情还有逐年加重的趋势。对番茄黄化曲叶病在我国各地发生情况进行了调查．针对目前番茄黄化曲叶病的病毒类型、抗病性鉴定方法、抗性基因定位及分子标记辅助育种、基因工程育种等方面的研究现状进行了综述,并提出了目前我国番茄黄化曲叶病的基本防治策略。     

河南周口番茄黄化曲叶病病原分子鉴定

应用分子生物学的方法鉴定了河南周口地区番茄黄化曲叶病的病原.鉴定结果表明,侵染河南周口番茄的双生病毒为番茄黄化曲叶病毒,与安徽AH-HB1分离物相似性最高,达到98.7%;从构建的系统关系树也可以看出,河南周口的番茄黄化曲叶病毒与安徽AH-HB1分离物的亲缘关系最近,推测河南周口番茄黄化曲叶病毒可能来源于安徽.     

灵芝多糖及香菇多糖对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果

为了对烟粉虱传播的番茄黄化曲叶病毒病提供防治策略,以番茄为试材,研究了灵芝多糖及香菇多糖对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果.结果表明:在发病前用含灵芝多糖的慧动力水剂与呋虫胺混用,连续喷雾处理,可杀死烟粉虱并提高植株抗病性,对黄化曲叶病毒病预防效果在91.9％以上,且以0.3％灵芝多糖水剂250倍液+20％呋虫胺可溶性粉剂...     

检疫性病害甘蔗白叶病的发生危害与防控对策

结合田间调查分析了甘蔗白叶病的症状、致病病原、侵染途径和发病条件等,并根据其发生危害特点,提出了相应的防控对策.     

蔗叶不同还田模式对土壤水分和甘蔗产量的影响

田间试验研究了蔗叶不同还田模式对旱地蔗园土壤水分和甘蔗产量的影响。结果表明,蔗叶不同还田模式的甘蔗产量差异不显著,蔗叶全覆盖还田与蔗叶隔行覆盖还田处理的总苗数较焚烧处理差异达极显著性水平（P〈0.01）,有效茎与焚烧处理差异达显著性水平（P〈0.05）。蔗叶全覆盖还田与蔗叶隔行覆盖还田对宿根蔗垄上前期与后期的土壤水分保持效果较好,不同蔗叶还田模式对甘蔗行间的土壤水分保持效果较好。     

PaLCuCNV和TYLCCNV复合侵染引起更严重的番茄黄化曲叶病

 从四川攀枝花市田间采集36份表现严重矮化、黄化和曲叶症状的番茄病株样本,利用双生病毒简并引物PA/PB从所有样本中均扩增得到约500 bp的片段,经全序列测定及分析,检测出中国番木瓜曲叶病毒（Papaya leaf curl China virus,PaLCuCNV）和中国番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV）,这两种双生病毒的复合侵染率达97.2%。系统进化分析表明,这两种双生病毒分别与已报道的PaLCuCNV河南番茄分离物（PaLCuCNV-[HeNZMI]）及TYLCCNV云南元谋烟草分离物（TYLCCNV-[Y295]）的核苷酸序列相似性最高,分别为99.1%和97.9%。检测发现,所有分离物均伴随有卫星DNA β分子,全序列测定表明所得9个DNA β分子均为TYLCCNV的卫星TYLCCNB,且与其四川番茄分离物（TYLCCNB-[SC65]）的核苷酸序列相似性最高,为87.7% ~ 94.5%。本文首次报道PaLCuCNV与TYLCCNV/TYLCCNB病害复合体复合侵染番茄引起更严重的番茄黄化曲叶病。