水飞蓟发状根培养体系的建立及其水飞蓟宾含量的测定

实验采用6种发根农杆菌R1601,R15834,R1000,A4,R1025,R1感染水飞蓟植体,诱导水飞蓟发状根及其水飞蓟宾的产生。6种发根农杆菌均能诱导水飞蓟产生发状根,A4表现出较强的对水飞蓟的感染能力。实验通过侵染时间、预培养、共培养、pH等因素确定了诱导水飞蓟发状根产生的条件,确定MS液体培养基适合水飞蓟发状根的增殖。经过PCR分子鉴定,发根农杆菌中的DNA质粒成功的整合到转化根的基因组中。使用液相色谱测定了水飞蓟发状根中水飞蓟宾含量是水飞蓟植物中的2.5倍。实验所建立的水飞蓟发状根培养系统,为研究水飞蓟发状根大量培养生产水飞蓟宾奠定了基础。     

水飞蓟宾琥珀酸单酯的合成及其保肝活性研究

将水飞蓟宾进行衍生化,制备水溶性衍生物。水飞蓟宾与丁二酸酐在碱性条件下反应,生成水飞蓟宾-3,23-二琥珀酸单酯和水飞蓟宾-3-琥珀酸单酯,其结构经UV、IR、1H-NMR和MS波谱确证。在本反应条件下,可以选择性地对水飞蓟宾分子中的醇羟基进行酯化,制得水溶性好的衍生物。对产物进行抗急性干损伤的研究,产物可降低ALT活性,对CCl4致小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

水飞蓟宾及其衍生物生物活性及作用机制的研究进展

水飞蓟宾从水飞蓟Silybum marianum的种子中提取分离得到,属于黄酮木脂素类化合物,临床上常用于治疗急、慢性肝炎或肝功能异常的恢复.近年来研究发现水飞蓟宾具有抗肿瘤和抗代谢功能失调作用,通过调节活性氧水平实现对肿瘤的抑制作用,对糖尿病的治疗作用主要是通过保护靶器官和提高胰高血糖素样肽受体的表达实现的.对水飞蓟...     

水飞蓟宾纳米粒的制备及其理化性质研究

目的 制备水飞蓟宾纳米粒并对其进行质量评价.方法 采用乳化-蒸发-固化法制备水飞蓟宾纳米粒,以包封率、多分散指数、载药量等为评价指标优化制备工艺.考察体外释药规律,考察3～5℃、15～25℃、37℃(相对湿度为75%)条件下纳米粒的稳定性.结果 以硬脂酸和表面活性剂为载体材料,优化工艺制备的水飞蓟宾纳米粒包封率为96.88%,多分散指数为0.168,载药量为7.55%.差示量热分析确证形成了纳米粒,水飞蓟宾以无定形态分散在纳米粒内.纳米粒体外释放缓慢,可用Higuchi方程拟合.纳米粒静置观察具有良好的稳定性.结论 采用乳化-蒸发-固化法可制备得到水飞蓟宾纳米粒,工艺简便,粒径和分散度小,包封率和载药量高,体外释药缓慢,稳定性好.     

黄柏胶囊与抗生素的体外联合抗菌作用研究

目的研究黄柏胶囊的体外抗菌及与抗生素联合抗菌作用,为拓展临床使用奠定实验基础。方法运用微量液体稀释法检测黄柏胶囊对常见病原性细菌和单细胞真菌的最小抑菌浓度（MIC）。采用棋盘格法检测黄柏胶囊与不同抗生素及抗真菌药物对常见病原性细菌和单细胞真菌的MIC,并计算出FIC指数。结果黄柏胶囊对金黄色葡萄球菌（MIC=2．5g／L）和大肠埃希菌（MIC=12．5g／L）,以及单细胞真菌（MIC=2．5g／L）具有较好的抑制作用。黄柏胶囊与林可霉素联合用药后对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌、及与头孢曲松联合用药对肺炎克雷伯菌的抗菌作用,与阿米卡星联合用药的抗菌作用表现为拮抗作用外,黄柏胶囊分别与头孢曲松、阿米卡星、林可霉素联合用药后对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌联合用药的抗菌作用均表现为协同作用（FIC：0．1～0．506）。黄柏胶囊与氟康唑联合用药后对白假丝酵母菌和新生隐球菌均表现为协同作用（FIC：0．314）。结论黄柏胶囊对部分病原性细菌和单细胞真菌具有较好的抑制作用,与抗菌药物联合应用时主要表现出协同抑菌作用,为临床中西药联合使用黄柏胶囊提供了实验依据。     

水飞蓟宾纳米胶束的制备及其鼠体内药物动力学研究

 目的 以聚维酮-磷酯-胆酸盐三元胶束为载体制备水飞蓟宾纳米胶束,并考察其体外性质及鼠体内药动学行为。方法 制备水飞蓟宾纳米胶束;透射电镜观察胶束形态;光子相关光谱粒径仪测定粒径分布和Zeta电位;紫外分光光度法考察载 药胶束的含药量;高效液相色谱法测定小鼠血药浓度,BAPP2．0药动程序处理数据。结果 水飞蓟宾纳米胶束多呈球形,粒径 小于100 nm,平均粒径为61．2 nm,Zeta电位为-44．8 mV,含药量达到4．19 g·L^-1;浓度数据经二室模型拟合后表明,与参比制 剂相比水飞蓟宾纳米胶束在小鼠体内的K_a增大,达峰时间缩短,MRT延长,峰浓度和AUC_0～∞增加。结论 聚维酮-磷酯-胆酸 盐三元胶束有望成为难溶性药物的新型载体。     

双环醇与水飞蓟宾联合治疗抗结核药物致肝损害的疗效观察

抗结核治疗中由于联合用药,其中多种抗结核药物均可对肝脏造成不同程度的损伤,特别是在强化抗结核治疗阶段尤为明显。视肝损伤的程度不同,可在加强护肝的基础上调整抗结核方案或停止抗结核治疗,从而影响了抗结核治疗的效果。我科自2010年3月至2011年3月采用双环醇片与水飞蓟宾胶囊联合治疗抗结核药物所致肝功能损害36例,疗效满意,现报道如下。     

吸收促进剂对水飞蓟宾及其磷脂复合物肠吸收的影响

目的:考察吸收促进剂对水飞蓟宾及其磷脂复合物肠道吸收的影响.方法:采用大鼠在体单向肠灌流法研究药物在大鼠的十二指肠、空肠、回肠及结肠的吸收情况.结果:水飞蓟宾及其磷脂复合物在各肠段均有吸收,以空肠和回肠段吸收较好,且其磷脂复合物在各肠段吸收均高于药物本身.聚山梨醇酯对水飞蓟宾及其磷脂复合物无明显促进吸收作用,甘胆酸钠和卡波姆有较弱的吸收促进作用,十二烷基硫酸钠对水飞蓟宾具有较强的促进吸收作用,而对其磷脂复合物作用较弱;聚氧乙烯氢化蓖麻油对水飞蓟宾和磷脂复合物均有较强的促进作用.结论:合理改善药物结构及选择适宜吸收促进剂能改善药物的吸收.     

麻黄附子细辛汤联合抗生素的体外抗肺炎链球菌作用研究

目的：研究麻黄附子细辛汤与抗生素联合应用对抗生素的增效作用,为研究中药对抗生素增效的作用机制和筛选活性成分奠定实验基础。方法：将麻黄附子细辛汤复方、中药复方加头孢唑林、头孢唑林分别加入培养基中,同时制作未加药物的空白培养基作为空白组和阴性组,以及单纯加入替加环素的培养基作为阳性组,分别接种肺炎链球菌后37 ℃培养过夜,空白组不接种细菌,每12 h取出计数,计算活菌数;同时使用连续稀释法检测其各自最小抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC);并且用纸片法检测抑菌圈。结果：1）中药复方组12 h时发现细菌逐渐生长,直至培养120 h后细菌浓度才逐渐下降,直至培养180 h时细菌浓度保持不变,头孢唑林组培养12 h时细菌数逐渐减少,到60 h时细菌减少的趋势停止,中药复方联合头孢唑林组培养12 h时细菌数逐渐减少,并在培养144 h时各组细菌均无生长迹象,替加环素药物干预后细菌数急剧下降,但是直到观察结束仍有部分细菌存活,阴性组细菌随着培养时间的逐渐延长呈现缓慢生长趋势,空白组无细菌生长。2)麻黄附子细辛汤对肺炎链球菌(MIC=1.25 mg/mL,MBC=2.5 mg/mL);头孢唑林对肺炎链球菌（MIC=0.625 mg/mL,MBC=1.25 mg/mL);中药复方联合头孢唑林对肺炎链球菌（MIC=0.312 mg/mL,MBC=1.25 mg/m,);替加环素对肺炎链球菌（MIC=0.156 mg/mL,MBC=1.25 mg/mL)。3)中药复方联合头孢唑林抑菌环直径和阳性对照组相近,其次是头孢唑林组,中药单独使用的抑菌环直径小于头孢唑林组,麻黄附子细辛汤与头孢唑林联合用药对肺炎链球菌的抗菌效应均增强,麻黄附子细辛汤与头孢唑林联合用药的抗茵作用表现为协同作用(FIC=0.59)。结论：麻黄附子细辛汤联合抗生素具有更明显的抗菌效应,可能与它激活耐药细菌生长有关。     

双黄连粉针与4种抗生素伍用的体外最小抑菌浓度研究

双黄连粉针在体外单用时无杀菌活性,但与青霉素、头孢唑啉、头孢噻肟、苯唑青霉素等４种抗生素伍用体外最小抑菌浓度分别伍用,可使双黄连对细菌的ＭＩＣ下降了８５～９０％,而且这种变化在双黄连与抗生素伍用时,抗生素对上述细菌的ＭＩＣ下降更为显著,为５０～９９％。双黄连与头孢噻肟合用,比单用头孢肟对铜绿假单胞菌的敏感度提高２－８倍;与头孢唑啉、苯唑青霉素合用比单用头孢唑啉、苯唑青霉素对耐苯唑青霉素金葡菌的敏感度提高１－４倍     

Screening of some kenyan medicinal plants for antibacterial activity

Eleven medicinal plants used by traditional healers in Machakos and Kitui District were screened, namely: Ajuga remota Benth, Aloe secundiflora Engl, Amaranthus hybridus L, Cassia didymobotrya Fes, Croton macrostachyus Del, Entada leptostachya Harms, Erythrina abyssinica DC, Harrisonia abyssinica Oliv, Schkuhria pinnata O. Ktze, Terminalia kilimandscharica Engl and Ziziphus abyssinica Hochst for potential antibacterial activity against four medically important bacterial strains, namely: Bacillus cereus ATCC 11778, Escherichia coli ATCC 25922, Micrococcus lutea ATCC 9341 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. The antibacterial activity of methanol extracts was determined as the minimum inhibitory concentration (MIC). The plant extracts were more active against Gram‐positive (G+) than Gram‐negative (G?) bacteria. The positive controls were streptomycin and benzylpenicillin for G? and G+ bacteria, respectively, both had a significant MIC at <1 mg/mL. The most susceptible bacteria were B. cereus, followed by M. lutea, while the most resistant bacteria were Ps. aeruginosa, followed by E. coli. The present study supports the use of these plants by the herbalists in the management of bacterial ailments. H. abyssinica and T. kilimandscharica showed the best antibacterial activity; hence these plants can be further subjected to phytochemical and pharmacological evaluation. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

线叶菊抗菌作用研究

目的:研究线叶菊体内、外的抗菌作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法:体外抗菌实验采用微量稀释法测定线叶菊对12种临床常见病原菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。体内抗菌实验采用小鼠ip细菌的干酵母混悬液,观察7 d内动物的死亡率。利用透射电镜对部分病原菌与线叶菊作用前后的细菌形态学进行考察。结果:线叶菊对12种临床常见病原菌有不同程度的抑菌和杀菌作用,特别是对耐药金黄色葡萄球菌的MIC为0.43 g.L-1,MBC为0.86 g.L-1。体内实验高剂量组对由金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、耐药金黄色葡萄球菌和耐药肺炎克雷伯氏菌导致的感染动物均具有保护作用,呈量效关系,中剂量组对绿脓杆菌和耐药金黄色葡萄球菌仍有作用。电镜结果显示线叶菊能够消融细菌的细胞壁。结论:线叶菊对12种临床常见病原菌的体外抗菌作用均优于双黄连口服液,特别是对头孢阳性对照组无作用的耐药绿脓杆菌仍具有抑菌和杀菌作用。体内抗菌实验结果表明线叶菊对小鼠全身感染动物模型具有保护作用,特别对头孢克肟无作用的耐药金黄色葡萄球菌导致的感染动物依然具有保护作用。同时线叶菊能够破坏细菌的细胞壁。     

Antibacterial potential of Antarctic lichens against human pathogenic Gram-positive bacteria

Extracts from five Antarctic lichens (L3, Stereocaulon alpinum; L5, Ramalina terebrata; L6, Caloplaca sp.; L8, Lecanora sp.; and L17, Caloplaca regalis) were tested for antimicrobial activities against several clinically important microbes by disk diffusion. The minimum inhibitory concentration (MIC) of each extract was determined by a broth dilution method. Extracts from L3, L5, L6 and L8 were active against two Gram(+) strains. B. subtilis was more sensitive to lichen extracts (except L5) than S. aureus. The MIC of lichen extracts against B. subtilis and S. aureus was observed from 36.7 +/- 0.3 to 953.8 +/- 85.8 microg/mL and 68.5 +/- 0.6 to >1000 microg/mL, respectively. Comparisons of MIC values of Antarctic lichen crude extracts to previously published MIC values of some reported lichen metabolites against Gram(+) bacteria indicated that Antarctic lichens might be an enriched source of effective antibacterial agents against clinically relevant Gram(+) species.     

微量量热法研究天然中药的抗菌作用

 目的：利用微量量热法研究细菌在不同条件下的生长规律，评价天然中药的抗菌作用。方法：利用热活性检测仪，测定了白色葡萄球菌、大肠杆菌、福氏1a，1b，5b，6，x，y，3及绿脓杆菌在不同条件下的生长热谱曲线。根据细菌生长的Malthus模型，计算出各细菌在指定条件下的生长速率常数。以生长速率常数大小为依据评价天然中药的抗菌性能。结果：定性研究了黄连水煎液对白色葡萄球菌等8种细菌的抗菌作用。定量测定了丹参水煎液对福氏3和绿脓杆菌的抗菌作用，拟合出其抑菌生长的临界剂量分别为299.6μl／10ml和41.5μl／10ml。结论：微量量热法是体外研究天然中药抗菌作用的具有理论研究意义和实际应用价值的新方法。     

新鲜胡椒叶的抑菌效果研究

目的 探索新鲜胡椒叶是否具有体外抑菌效果及其抑菌程度.方法 采用琼脂平板纸片扩散法及试管稀释法测定新鲜胡椒叶的体外抑菌效果及最低抑菌浓度(MIC).结果 腐生葡萄球菌在琼脂平板上无抑菌效果,在反应管中均有细菌生长.金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、普通变形杆菌、痢疾杆菌和流感嗜血杆菌在琼脂平板及反应管中均有明显抑菌现象.结论 新鲜胡椒叶对常见的肠道杆菌、化脓性球菌具有明显的抑菌作用,特别是对流感嗜血杆菌有强大的抑菌效果.     

中药成分联合抗生素抗MRSA作用的研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是引起医院内和社区感染的重要病原菌,具有多重耐药性,因此,需要不断寻求新型抗菌药物及抗菌方法。通过将活性微弱的中药成分联合抗生素协同使用成为新的抗菌治疗措施。现就其联合作用方法、联合抗菌效果及作用机制研究进展进行综述,以期为今后联合抗菌研究提供参考。     

应用压电微生物传感仪研究五味消毒饮抑菌作用的量效关系

目的 研究五味消毒饮对细菌生长、代谢的影响及量效关系。方法 用多通道串联式压电传感仪（MSPQC）测定五味消毒饮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌生长代谢影响的频移曲线,根据曲线中细菌的检出时间（FDT）以及频移的大小得出最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）,绘制出五味消毒饮的质量浓度与FDT的线性关系曲线,进行量效关系分析。用传统试管稀释法进行平行实验。结果 五味消毒饮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌有不同程度的抑制作用,质量浓度越高抑菌效果越强,其中对大肠杆菌的抑制作用最强,24 h内对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的MIC分别为0.7、0.8、0.8 g/mL,MBC均为0.9 g/mL。结论 用MSPQC检测抑菌类中药的量效关系具有实时、灵敏、定量、快速等优势。     

匙羹藤提取物体外抑菌活性的观察

目的观察匙羹藤提取物（Gymnema sylvestre extractant，GE）的体外抑菌活性。方法采用琼脂稀释的实验方法，分别测定匙羹藤提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌以及绿脓杆菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果匙羹藤提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌以及绿脓杆菌的MIC分别为0．625、1．25、1．25、2．5mg／mL。结论匙羹藤提取物对多种细菌具有抑菌作用。     

7种抗菌药物对临床常见致病菌抗菌活性的比较

 采取琼脂平析稀释法测定了泰宁（ｉｍｉｐｅｎｅｍ／ｃｉｌａｓｔａｉｎ）等７种抗菌药物对２１５株临床常见致病菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并统计了敏感率。结果表明７种抗菌药物对大多数受试菌均显示了较高的抗菌活性，其中泰宁的抗菌活性最强，金黄色葡萄球菌、变形杆菌属、大肠埃希菌、肺炎克雷白菌对泰宁的敏感率达９７．６％～１００．０％；而１７．０２％的绿脓假单胞菌对泰宁耐药；有２～６株绿脓假单胞菌和１株肺炎克雷白菌对泰宁和其它抗菌药物呈现部分交叉耐药性。而环丙沙星与其它抗菌药物对不同受试菌呈现２．３８％～１９．０５％的交叉耐药率。该结果提示对其它β－内酰胺类抗菌药物耐药的致病菌引起的严重感染，可考虑选用泰宁。     

水飞蓟宾自微乳化胶囊剂的制备及大鼠体内药动学

目的 研制水飞蓟宾自微乳化胶囊剂并对其进行体内外评价.方法 通过正交设计和伪三元相图的绘制,对自微乳化系统中的油相、乳化剂及助乳化剂的组成、用量进行研究,筛选最佳处方组成和组成比例.以自制水飞蓟宾胶囊作对照,RP-HPLC测定大鼠灌胃后的血药浓度,用3p97计算药物动力学参数.结果 水飞蓟宾最佳自微乳化给药系统处方组成及其比例为水飞蓟宾-中链甘油三酯-Cremophor RH40-PEG400=3.85∶16.15∶60∶20,所形成的微乳的平均粒径为14.6 nm,在人工胃液和人工肠液中16 min内累积溶出百分率均超过95％,自制水飞蓟宾颗粒胶囊溶出很少.胶囊内容物水飞蓟宾预乳化浓缩液(SLB-PMC)和水飞蓟宾颗粒浓度-时间数据符合一级吸收单室模型,水飞蓟宾预乳化浓缩液的Cmax为0.70 μg/mL,而自制水飞蓟宾颗粒仅为0.104 μg/mL,水飞蓟宾预乳化浓缩液的AUC比水飞蓟宾颗粒提高了11.7倍,其相对生物利用度为1 265.22％.结论 将水飞蓟宾制成自微乳化胶囊能显著提高其体外溶出和体内吸收.