抗孕激素RU486和ZK98734对双池培养的颗粒细胞和内泡膜细胞分泌功能…

本文观察了ＲＵ４８６和ＺＫ９８７３４对培养在羊膜双池培养系统中的猪卵巢颗粒细胞和内泡膜细胞在甾体激素生成过程中的影响。生长在单膜两侧的颗粒细胞和内泡膜细胞在加入或不加ＦＳＨ、ＬＨ及不同浓度ＲＵ４８６或ＺＫ９８７３４的条件下培养４８ｈ。用ＲＩＡ测定内、外池培养液中的孕酮（Ｐ）和雌二醇（Ｅ２）的浓度并与单独培养的结果相比较，同时亦与大鼠颗粒细胞的结果作比较。结果表明：１．有ＦＳＨ刺激时，两种抗孕激素均     

ZK98734和Gestodene对孕妇NK活性的影响

ＺＫ９８７３４和Ｇｅｓｔｏｄｅｎｅ对孕妇ＮＫ活性的影响何志英，刘承权，胡炎，顾敦瑜（上海市计划生育科学研究所，上海，２０００３２）应惠芳（上海市虹口区妇幼保健院，上海，２０００８０）ＺＫ９８７３４和Ｇｅｓｔｏｄｅｎｅ是两种新合成的生育调节药物，它们分...     

RU486对人绒毛膜滋养层、蜕膜细胞以及小鼠胚胎与子宫内膜“共培养”的影响

本文报道RU 486对离体人绒毛膜滋养层、蜕膜细胞的影响。并在小鼠胚胎与子宫内膜“共培养”模型上,观察不同浓度的RU 486对着床前、后胚胎及子宫内膜的作用。实验结果发现:当RU 486浓度为10～60μg/ml时,对绒毛滋养层细胞无直接影响;仅在浓度60μg/ml时,对蜕膜有轻度抑制作用。RU 486对小鼠胚胎及子宫内膜均有不同程度的影响,且随药物浓度的增加而作用增强。当浓度达10μg/ml时,几乎完全抑制胚胎的发育,并发生萎缩及退行性变化,同时子宫内膜也遭严重破坏。     

RU486合并前列腺素终止早孕的效果及对性激素影响的研究

4O例早孕妇女,停经49天以内,给予RU 486合并前列腺素(Sulprostone)终止早孕。对象随机分为两组(每组20例)。组Ⅰ,口服RU 486 25mg2次/日×4天,在第四天上午肌注Sulprostone 0.25mg;组Ⅱ,RU 486 25mg2次/日×3天,在第三天上午肌注Sulprostone 0.25mg。对象必须从服药的第一天起连续四天(组Ⅱ三天)上午来门诊,此外第8、15及43天亦须来门诊,接受访视及取血,用以测定B-hCG、E_2、P、PRL及Cortisol等。检测结果,血清B-hCG及E_2水平在服药期间继续上升,但流产后迅即下降;PRL及Cortisol在服药期间及服药后,血清水平上下波动不大;P在服药期间水平未见上升,但流产后迅即下降。40例对象,不论服药三天或四天,均发生完全流产,无一例需要刮宫或输血。     

RU486对子宫内膜增生症腺上皮中NF-κB/p65、p16和ki67蛋白表达水平的影响

目的:探讨NF-κB/p65、p16、ki67在RU486治疗子宫内膜增生症前后腺上皮中表达变化的意义。方法:37例因阴道不规则出血刮宫诊断为子宫内膜增生症的患者,按10 mg/d剂量连续服用3个月的RU486进行治疗。采用SP非生物素二步法的免疫组织化学染色法检测治疗前后子宫内膜腺上皮NF-κB/p65、p16、ki67蛋白的表达情况。结果:治疗后NF-κB/p65蛋白的阳性信号强于治疗前(P<0.05),而治疗前后p16蛋白的阳性信号无明显差异(P>0.05),但极强阳性大腺体的数量明显多于其它大腺体(P<0.01);治疗后与治疗前相比ki67蛋白表达量明显下降(P<0.05)。结论:RU486治疗子宫内膜增生症可能与NF-κB/p65介导的信号通路有关;RU486可通过非p16相关的机制降低子宫内膜细胞的增殖活性。     

干扰CLDN6基因表达通过调控MAPK/ERK信号通路对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的:探讨Claudin-6(CLDN6)在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的表达及其对卵巢颗粒细胞(GC)增殖与凋亡的影响和可能作用机制.方法:SD雌性大鼠皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)诱导建立PCOS模型,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和West-ern blot法检测卵巢组织中CLDN6表达.分离培养原...     

炎症因子对人颗粒细胞凋亡调控基因P53、Bax、Casepase-3、Bcl-2、Survivin表达的影响

目的:探讨炎症因子对人颗粒细胞凋亡调控基因P53、Bax、Casepase-3、Bcl-2、Survivin表达的影响。方法:选择行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的非多囊卵巢综合征(PCOS)患者50例,提取卵泡液中颗粒细胞进行体外培养,随机分为炎症因子处理组和对照组,处理组分别加入5nmol/L白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNFα),比较各组颗粒细胞的增殖速率及凋亡调控基因的表达是否存在差异。结果:IL-1、IL-6、TNFα处理组体外培养48小时后颗粒细胞增殖速率低于对照组(P0.05);处理组促凋亡基因P53、Bax、Casepase-3的表达水平高于对照组(P0.05),而抗凋亡基因Bcl-2、Survivin的表达水平低于对照组(P0.05)。结论:炎症因子IL-1、IL-6、TNFα抑制人颗粒细胞增殖,并诱发颗粒细胞凋亡。     

孕二烯酮对大鼠卵巢颗粒细胞分泌甾体激素及芳香化酶的作用

目的:观察孕二烯酮对离体原代培养大鼠颗粒细胞分泌雌、孕激素功能及芳香化酶表达的抑制作用。方法:用活细胞计数法(CCK-8法)计算细胞存活率及半数抑制率(IC50)。加入卵泡刺激素和雄烯二酮刺激颗粒细胞分泌激素。用磁性均相酶联免疫法测定培养液中雌、孕激素含量。用大恒MIVNT显微图象分析软件分析免疫组化方法中芳香化酶表达。结果:孕二烯酮杀伤细胞的IC50为41μg/ml(95%可性限38.6-44.1μg/ml)。孕二烯酮5μg/ml,10μg/ml和20μg/ml在不影响活细胞数的情况下对颗粒细胞分泌雌激素的抑制率分别为4.5%,14.3%,38.7%;而其对分泌孕激素的抑制率分别为42.8%,53.1%和61.9%。免疫组化亦证明孕二烯酮能影响颗粒细胞中芳香化酶的表达。结论:孕二烯酮能直接抑制离体培养的大鼠颗粒细胞分泌雌、孕激素;且可能是通过抑制芳香化酶的活性而产生作用。     

RU486对人妊娠组织糖蛋白影响的研究

用组织化学方法观察了ＲＵ４８６对人妊娠组织糖蛋白含量和成份的影响。结果表明：ＲＵ４８６可使蜕膜腺细胞内酸性糖蛋白增多，蜕膜细胞内及细胞间的中性糖蛋白增多；并使绒毛间质的硫酸性糖蛋白减少，唾液酸性糖白增多，糖蛋白分布不均。提示ＲＵ４８６对妊娠组织的糖蛋白合成有影响。这些糖蛋白成份和量的变化在蜕膜和绒毛尚未出现明显形态改变时即已发生。认为这些变化可能是ＲＵ４８６引起胚胎变性、妊娠中止的机理之一。     

米非司酮对体外大鼠卵巢颗粒细胞Fas表达影响的研究

目的:探讨米非司酮抑制卵泡发育的可能机制。方法:收集腹腔注射60 IU孕马血清促性腺激素(PMSG)的未成年SD雌性大鼠的卵巢颗粒细胞(GC)进行体外培养,采用电子显微镜对未处理的颗粒细胞进行鉴定,运用免疫细胞化学法观察不同浓度米非司酮(10-6 mol/L、10-5 mol/L、10-4 mol/L)对GC中Fas表达的影响。结果:原代培养大鼠卵巢GC活细胞数可达80%-85%;免疫细胞化学结果显示GC中Fas蛋白表达随米非司酮处理剂量的增加而增强,阳性表达率10-6 mol/L组(0.290±0.065)、10-5 mol/L组(0.364±0.075)和10-4 mol/L组(0.557±0.067)与对照组(0.194±0.082)之间均有统计学差异(P<0.01),各组间也均有差异(P<0.05)。结论:调节颗粒细胞表面凋亡因子Fas蛋白的表达可能是米非司酮诱导颗粒细胞凋亡、抑制卵泡发育的机制之一。     

正常卵巢与多囊卵巢的颗粒细胞E_2和P的产生及其卵泡液中E_2和雄烯二酮(A)含量的比较

为了解正常卵巢与多囊卵巢(PCO)颗粒细胞功能的异同.本研究对12例正常人卵泡期的25个卵泡和7例PCO的约60个卵泡的颗粒细胞进行了培养,用放免法测定卵泡液中雌二醇(E_2)和雄烯二酮(A)及培养液中E_2和孕酮(P)的含量.结果表明PCO的颗粒细胞对FSH和LH刺激更敏感,产生更多的E_2和P.FSH(10ng/ml)作用下PCO组产生的E_2和P分别比正常组高8.8倍(P<0.001)和2.6倍(P<0.05).LH(10ng/ml)作用下PCO组产生的E_2和P也分别高4.8倍(P<0.01)和2.0倍(P>0.05);PCO卵泡液中A的含量明显高于正常对照(P<0.05).PCO的颗粒细胞甾体激素合成酶的活性增高,可能是PCOS病人的高LH和高INS血症起关键作用.     

催乳素及多巴胺对大鼠卵巢颗粒细胞产生甾体激素的影响

使用含有FSH和雄烯二酮的DME-F 12培养液培养未成熟大鼠的卵巢颗粒细胞,观察了不同剂量的催乳素和多巴胺对颗粒细胞合成孕酮和雌二醇的影响。结果表明,低浓度的催乳素(0.5 μg/ml)促进孕酮产生,高浓度时(5 μg/ml)抑制孕酮产生。催乳素能抑制雌二醇产生。低浓度的多巴胺(0.5 μg/ml)不影响这两种甾体激素的产生。当浓度为5μg/ml时能明显抑制这两种激素的产生。但是,多巴胺对颗粒细胞发挥作用的机制需进一步研究。     

丙戊酸钠对卵泡内膜细胞雄激素分泌及相关甾体合成酶改变的影响

目的:研究丙戊酸钠(VPA)对卵泡内膜细胞睾酮生成以及细胞色素P45017α羟化酶(CYP17)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)mRNA的影响。方法:采用猪的卵泡内膜细胞进行体外原代培养,并给予不同浓度的VPA(0mg/L、50mg/L、100mg/L和250mg/L)处理,48h后收集培养液,采用ELISA法检测细胞睾酮的分泌,采用荧光实时RT-PCR(TaqMan.assay)方法检测卵泡内膜细胞中CYP17、P450scc和StARmRNA表达。结果:VPA刺激了卵泡内膜细胞睾酮的分泌(P<0.05),且CYP17(P<0.01)、P450scc(P<0.01)和StAR(P<0.01)mRNA表达增加。结论:VPA可直接作用于卵泡内膜细胞,改变CYP17、P450scc和StARmRNA表达,引起雄激素的分泌变化。临床上长期服用VPA的癫痫妇女出现类似于PCOS患者的生殖内分泌功能紊乱,可能与该药物本身作用有密切联系。     

孕妇及非孕妇口服不同剂量RU 486后的药物动力学研究

非孕妇(n=9)及早孕妇(n=36)口服不同剂量RU 486后,以HPLC测定服药后RU486及其代谢产物RU 42633、RU 42848和RU 42698的血浆浓度,结果显示不论妊娠与否,药物的吸收及代谢都很迅速;服药后20 min 即可测得血浆中的RU 486及其代谢产物;母药达峰时间Tmax 均为1～2h,其峰浓度Cmax 对数与剂量对数之间呈显著正相关。服相同剂量后,非孕组药-时曲线水平及药时曲线下面积AUC 大于早孕组,但两组间并无显著性差异(P>0.05)。无论非孕组及早孕组,口服25 mg、100 mg 和200 mg后,RU 486代谢符合二室开放模型,口服400 mg 和600mg 后则呈非线性动力学过程。     

人绒毛膜促性腺激素和胰岛素对多囊卵巢综合征卵泡内膜细胞雄激素分泌的影响

目的检验多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者卵巢卵泡内膜细胞（简称内膜细胞）雄激素合成是否异常。方法对来自８例ＰＣＯＳ的卵巢卵泡与１８例正常妇女卵巢卵泡内膜细胞进行单层培养，采用放射免疫法测定两者在基础状态、人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和胰岛素（ＩＮＳ）刺激作用下培养液中１７α羟孕酮（ＯＨＰ）、雄烯二酮（Ａ）、孕酮（Ｐ）。结果在基础状态、ｈＣＧ与ＩＮＳ刺激作用下，ＰＣＯＳ患者的卵巢内膜细胞分泌Ａ、ＯＨＰ和Ｐ的量与正常妇女相比，除在基础状态下Ｐ无明显增加外（Ｐ＞０．０５），其余均显著增加，分别为几倍到十几倍（Ｐ＜００５～０００１）。此外，ｈＣＧ和ＩＮＳ还有协同刺激作用。ＰＣＯＳ患者３种激素分泌的持续时间比正常妇女长。结论ＰＣＯＳ患者的卵巢内膜细胞存在雄激素的合成异常，ＩＮＳ可能起关键作用。     

Effect of mifepristone on estrogen and progesterone receptors in human endometrial and endometriotic cells in vitro

OBJECTIVE: To investigate the expressions of estrogen (E) receptor and progesterone (P) receptor in human eutopic and ectopic endometrium and the effect of mifepristone (RU486) on them. DESIGN: Prospective study. SETTING: University hospital. PATIENT(S): Twenty-two patients with ovarian endometriosis and 13 patients with uterine leiomyoma were recruited. INTERVENTION(S): Samples of ovarian endometrioma cyst tissue and endometrium were obtained from the 22 patients. A sample of endometrium was obtained from the 13 patients. MAIN OUTCOME MEASURE(S): Expressions of E and P receptors were determined using immunocytochemical method. RESULT(S): P receptor expression in endometrial epithelial cells with endometriosis was significantly higher than that without endometriosis in the early secretory phase. Estrogen receptor and epithelial P receptor expressions in endometriotic cells were significantly lower than those of endometrial cells during the proliferative phase, similar with the latter during the early secretory phase and significantly higher during the late secretory phase. RU486 down-regulated the expressions of E and P receptors in both the eutopic and the ectopic endometrial cells, and in some cases this down-regulating effect was more apparent when the concentration of RU486 was higher. CONCLUSION(S): Different steroid receptor expressions indicate different hormonal regulation between endometriotic and endometrial cells. The down-regulating effect on E and P receptors may be one of the therapeutic mechanisms of RU486 on endometriosis.