羟基喜树碱阳离子聚合物纳米粒的制备和体外性质评价

目的:合成直链聚乙烯亚胺(linear polyethyleneimine,LPEI)接枝单甲氧基聚乙二醇(methoxypolyethylene,mPEG)/聚己内酯(polyε-Caprolactone,PCL)的双亲性阳离子聚合物(mPEG-LPEI-PCL)用于制备阳离子型10-羟基喜树碱纳米粒(10-hydroxycamptothecin nanoparticles,HCPT-NPs),并对其体外性质进行评价。方法:通过IR和1H-NMR表征聚合物结构;采用改进的薄膜分散法制备HCPT-NPs,然后考察纳米制剂的粒径、电势、包封率、稳定性和形态,透析法研究HCPT-NPs的体外释放。结果:HCPT-NPs平均粒径为(155.6±9.6)nm,Zeta电位为(29.6±3.2)mV,包封率和载药量分别为(92.6±1.1)%和(4.49±0.02)%,释放速率随pH值升高而加快。结论:成功合成双亲性聚合物mPEG-LPEI-PCL,该聚合物能自组装形成核-壳结构纳米粒,4℃下稳定性良好。     

羟基喜树碱半固体脂质纳米粒的制备和体外释药特性

目的：制备羟基喜树碱的半固体脂质纳米粒（HCPT-SSLN），初步考察其体外释药规律。方法：采用乳化蒸发-低温固化法制备HCPT-SSLN；用激光粒度仪测定其粒径和ξ电位；考察其混悬液和冻千粉的物理稳定性；用透析法考察其体外释药性质。结果：HCPT-SSLN纳米粒平均粒径为130．5nm，裁药量为2．51％，包封率为79．19％，ξ电位为-33．1mV;室温（25℃）和4℃下放置6个月，纳米粒冻干粉和混悬液外观、粒径及包封率无明显变化；体外释药规律符合Weibull方程lnln[1／（1-Q）]=0．26331nt＋0．0509（R^2=0．9485）。结论：制备的HCPT-SSLN包封率高，稳定性好，大小均匀，体外释药具有缓释特点。     

还原响应型甲氨蝶呤/羟基喜树碱纳米粒的制备及体外评价

目的 合成药物-聚合物偶联物透明质酸-二硫键-甲氨蝶呤-亚油酸(hyaluronic acid-disulfide bond-methotrexate- linoleic acid,HA-SS-MTX-LA),并以其为载体包载羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)制备纳米粒(nanoparticles,NPs)(HA-SS-MTX-LA@HCPT NPs),考察该NPs的体外释药行为及体外抗肿瘤活性。方法 在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺的催化下,通过酰胺化反应合成药物-聚合物偶联物HA-SS-MTX-LA,并采用核磁共振氢谱、傅里叶变换红外光谱确证其化学结构。采用超声法制备HA-SS-MTX-LA NPs,以临界聚集浓度和粒径为指标,筛选获得LA和HA-SS-MTX的最佳投料比。以HCPT为模型药物,采用乳化溶剂挥发法包载药物,考察HA-SS- MTX-LA NPs的共载药性能。通过体外释放试验考察HA-SS-MTX-LA@HCPT NPs的还原响应性,采用MTT法考察其体外抗肿瘤活性。结果 成功制得HA-SS-MTX-LA NPs,LA和HA-SS-MTX的最佳摩尔投料比为1∶1,临界聚集浓度为60.50 mg×mL^-1,NPs粒径为(226.6±2.5)nm,PDI为0.180±0.036。HA-SS-MTX-LA@HCPT NPs的粒径为(257.59±1.41)nm,PDI为0.132±0.009,包封率为(72.46±0.73)%,载药量为(11.51±0.32)%。体外释放结果表明药物在高浓度谷胱甘肽条件下可快速释放,MTT试验结果表明HA-SS-MTX-LA@HCPT NPs对HepG2细胞和Bel-7402细胞生长具有显著的抑制作用。结论 制得的HA-SS-MTX-LA@HCPT NPs粒径均匀,包封率和载药量较高,具有良好的共载药性能、还原响应性和抗肿瘤活性,同时可进一步提高HCPT和MTX的体外抗肿瘤效果。     

新型羟基喜树碱纳米粒形态的影响因素考察

目的 考察实验室制备的新型棒状羟基喜树碱纳米粒形态的影响因素。 方法 选择不同投料比、不同制备方法及是否存在其他稳定剂为考察因素,分别进行以新型树枝状大分子PAMAM-co-0.25OEG,PGD为稳定剂的羟基喜树碱纳米粒的制备,并观察纳米粒在电镜下的形态。 结果 以PGD为稳定剂的羟基喜树碱纳米粒在电镜下的形态不受制备方法的影响,但和药物与稳定剂的比例,即投料比有关,当投料比从4:1增加至1:3时,较多PGD稳定剂的存在更容易包裹药物形成球形纳米粒。Chol-PEG600稳定剂与PGD稳定剂同时存在时,高载药量的羟基喜树碱纳米粒中也会存在球形粒子。结论 羟基喜树碱纳米粒的形态与稳定剂的用量及其结构有关,且稳定剂性质不同,粒径大小相同的纳米粒电位也相差较大。     

羟基喜树碱半固体脂质纳米粒的体外药剂学性质研究

目的：制备羟基喜树碱的半固体脂质纳米粒(HCPT-SSLN)。方法：在单因素考察的基础上,通过正交设计优选处方和制备工艺,并对优化条件下制备的HCPT-SSLN进行质量评价。结果：制备的HCPT-SSLN平均粒径为130.5 nm,多分散系数为0.18,载药量为2.51%,包封率为79.19%,Zeta电位为-33.1 mV;体外释药规律符合Weibull方程lnln［1/(1-Q)］=0.263 3lnt+0.050 9（r＝0.948 5）;HCPT-SSLN 4 ℃下放置6个月,纳米粒外观、粒径及包封率无明显变化。结论：所制备的HCPT-SSLN包封率和载药量较高,粒径分布均匀,稳定性良好,体外释药具有缓释特点,为羟基喜树碱的临床应用提供了更广阔的前景。     

阿霉素壳寡糖纳米粒的制备及体外抗肿瘤研究

目的制备负载阿霉素的壳寡糖纳米粒,并研究其理化性质和体外抗肿瘤细胞毒性。方法采用离子凝胶法制备负载阿霉素的壳寡糖纳米粒;透射电镜观察纳米粒形态,激光粒度仪测定粒径和表面电位,紫外分光光度法测量包封率、载药量,考察载药纳米粒的体外释药特性;采用MTT法对载药壳寡糖纳米粒在体外乳腺癌细胞株MCF-7的细胞毒作用进行评价。结果制得的阿霉素壳寡糖纳米粒呈球形或类球形,形态较为完整,平均粒径为(136.77±1.21)nm,表面电位为(20.53±0.31)m V,包封率为(56.99±1.40)%,载药量为(15.49±0.38)%,168 h的累积释放率为72.15%;阿霉素和载药纳米粒对MCF-7细胞增殖的抑制作用存在明显的浓度和时间依赖性,且载药纳米粒对MCF-7细胞增殖的抑制作用随时间增加而逐渐强于游离阿霉素。结论此方法制备的阿霉素壳寡糖纳米粒粒径较小,药物释放具有明显的缓释作用,并具有较好的抗肿瘤作用。     

HPLC法测定羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒中的药物含量

目的建立羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecin,HCPT)人血清白蛋白纳米粒(human serum al-bumin nanoparticle,HSA-NP)中药物含量的测定方法。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比45∶55),流速1.0 mL.min-1,紫外检测波长266 nm,柱温35℃。结果在本实验条件下制剂中辅料对HCPT含量的测定无干扰,HCPT质量浓度在2.0~10.0 mg.L-1内线性关系良好(r=0.999 9,n=5),HCPT平均加样回收率为100.2%,RSD为1.0%(n=9)。结论本法准确可靠、简便易行,可用于羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒(HCPT-HSA-NP)中药物含量的测定。     

喜树碱固体脂质纳米粒的研究

目的：为提高喜树碱的疗效,降低毒副作用,制备了该药的固体脂质纳米粒。方法：采用热融分散技术制备了喜树碱固体脂质纳米粒,反相高效液相色谱—荧光检测法测定了体外和体内喜树碱的浓度。结果：纳米粒平均粒径为d_ln=196.8 nm,载药量为4.8%,包封率为99.5%,表面带有负电荷,在pH 7.4的磷酸缓冲溶液中体外释药符合Weibull方程。以喜树碱溶液为对照组,Poloxamer 188包衣的喜树碱固体脂质纳米粒静脉注射后药物在血液中的滞留时间显著延长,小鼠脑、心、肝、脾、血浆、肾和肺中的分布显著增加。结论：喜树碱固体脂质纳米粒在体内具有良好的靶向性,对提高药物的疗效,降低药物毒副作用等方面有重大意义。     

羟基喜树碱纳米脂质载体的制备及体外释放

采用“熔融乳化-高压均质法”制备以PEG40硬脂酸酯、PEG100硬脂酸酯修饰的纳米脂质载体PEG40-NLC和PEG100-NLC，并考察释放装置、NLC中脂质材料用量及释放介质流速对体外释放的影响。结果表明，PEG40-NLC和PEG100-NLC在桨-反向动态透析法和流通池-动态透析法中的释放曲线相似，而在转篮-动态透析法中的释放曲线与前二种装置的释放曲线均有显著性差异。随着NLC脂质材料用量增大，释放过程中药物扩散作用增强。对流通池法，释放介质流速增大，药物的释放加快。     

载药纳米粒的研究进展

综述了聚合物、固体脂质及长循环3种纳米粒的载体材料、制备方法的研究进展。     

含碳酸氢铵羟基喜树碱粉雾剂的研制

目的:提高10-羟基喜树碱(HPCT)粉雾剂的沉积性能。方法:利用喷雾干燥法制备HPCT粉雾剂,考察处方中加入碳酸氢铵后粉末的密度、比表面积、表面形态、粒度及体外沉积性能。结果:制备出了敲击密度为0.015g·mL-1、比表面积为19.81m2·g-1、体积平均直径为15.64μm的粉末,该低密度、大粒径的多孔性粉粒大大提高了药物的体外沉积性能,粉雾剂的体外沉积率由18.0%提高至51.6%。结论:加入碳酸氢铵能够显著提高HPCT粉雾剂的沉积性能。     

川芎嗪壳聚糖纳米粒的制备及体外靶向分布研究

目的：制备川芎嗪壳聚糖纳米粒,考察纳米粒在人癌细胞的靶向分布。方法：以壳聚糖为载体,用离子交联法制备川芎嗪纳米粒。用激光粒度分析仪检测粒径,用透射电镜观察纳米粒的形态。用HPLC法测定纳米粒的包封率、载药量和体外释放度。以川芎嗪溶液为对照,测定纳米粒在人乳腺癌MCF-7细胞株、人肺腺癌A549细胞株和人白血病K562细胞株中的浓度,评价其靶向性。结果：制备的川芎嗪壳聚糖纳米粒为圆球形,平均粒径为（118.6±2.2） nm,分散系数（0.117±0.016）（n=3）,包封率（79.7±0.4）%,载药量（24.3±0.2）%,缓慢释药96 h累积释药率达75%。纳米粒在人乳腺癌MCF-7细胞株、人肺腺癌A549细胞株和人白血病K562细胞株中的浓度显著高于川芎嗪溶液（P＜0.05）。结论：制备的川芎嗪壳聚糖纳米粒对人癌细胞有靶向浓集作用。     

一种透明质酸修饰的7-乙基-10-羟基喜树碱纳米混悬液的制剂制备和抗肿瘤研究

目的:制备透明质酸(HA)修饰7-乙基-10-羟基喜树碱纳米混悬液(S1C1),探究其抗肿瘤治疗作用,为纳米制剂临床应用提供参考。方法:经电荷吸附法制备纳米混悬液(S1C1-HA);经动态光散射粒径仪进行制剂表征和粒径稳定性考察;运用高效液相色谱法(HPLC)测定S1C1-HA的包封率和载药量;采用噻唑蓝法考察游离纳米混悬液对4T1细胞的增殖抑制作用;运用3D多细胞肿瘤球考察纳米混悬剂的肿瘤球渗透力;通过考察纳米混悬液的体内药动学行为、脏器分布行为和抗肿瘤治疗,评价制剂的体内药效。结果:S1C1-HA平均粒径138.04 nm,电位－8.03 mV,体外24 h内粒径稳定性良好,载药量5.44%,包封率90.07%;S1C1半数抑制浓度为S1C1-HA的4.59倍,S1C1-HA的肿瘤渗透能力显著增强;S1C1-HA的半衰期和药时曲线下面积为S1C1的5.55,17.12倍,其体内抗肿瘤治疗效果显著增强。结论:修饰后S1C1-HA能显著增强药物的稳定性、细胞毒性、肿瘤渗透能力,有更优异的体内生物利用度和抗肿瘤治疗作用,S1C1-HA较S1C1更有临床应用潜力。     

7-乙基-10-羟基喜树碱脂质体在大鼠体内的代谢和排泄

目的考察7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)脂质体经静脉注射后,在大鼠尿液、粪便中的代谢产物以及以SN-38原形药物排泄的量。方法大鼠尾静脉单次给予2.77 mg/kg SN-38脂质体,分别于0～6、6～12、12～24、24～48 h分段收集尿液、粪便,采用UPLC/Q-TOFMS法对SN-38脂质体在大鼠尿液、粪便中的代谢产物进行鉴定,并且建立HPLC法,用于大鼠尿液及粪便样品中SN-38原形药物的排泄量的测定。结果 SN-38脂质体的在大鼠体内的代谢产物经鉴定为SN-38G。48 h内脂质体组共有1.57%的原形药物经过尿液排出,共有12.94%的SN-38原形药物经过粪便排出。结论 SN-38脂质体只有少部分以原形药物经尿液和粪便排出体外。     

7-乙基-10-羟基喜树碱的合成

用喜树碱乙基化制得的7-乙基喜树碱在冰乙酸中用双氧水氧化成N-氧化物,再经光照重排制得7-乙基-10-羟基喜树碱,并优化了反应条件,总收率49%.     

羟基喜树碱/羟丙基-β-环糊精包合作用研究

目的:研究羟基喜树碱/羟丙基-β-环糊精的包合,寻找改善羟基喜树碱溶解度的新方法.方法:研磨法制备包合物,以差示热分析法和红外光谱法对包合物进行鉴定,采用紫外分光光度法、相溶解度法、计算机模拟计算法验证羟基喜树碱/羟丙基-β-环糊精包合物的形成.结果:羟基喜树碱能够与羟丙基-β-环糊精形成物质的量比为1∶1的包合物,且溶解度由原来的0.22μg·mL-1增至包合后的38.2μg·mL-1.结论:羟丙基-β-环糊精可提高羟基喜树碱的溶解度.     

羟基喜树碱脂肪乳与市售注射液在家兔肝脏中分布的比较

目的考察羟基喜树碱（HCPT）自制脂肪乳和市售注射液静脉推注给药后,药物在家兔肝脏的分布。方法采用2步乳化法制备HCPT脂肪乳,静脉推注自制脂肪乳和市售注射液,采用HPLC法测定家兔肝脏药物含量。结果与市售注射液相比,给药0.5、1、3、4h后自制脂肪乳在肝脏中药物的浓度分别提高了3.0、3.4、7.1、8.4倍。结论以脂肪乳作为药物载体大幅度提高了羟基喜树碱在肝脏中的分布。     

Intracellular target delivery of 10-hydroxycamptothecin with solid lipid nanoparticles against multidrug resistance

The main objective of this study was to design a suitable drug delivery system for 10-hydroxycamptothecin (HCPT). In this study, HCPT-loaded solid lipid nanoparticle (HCPT-loaded SLN) was successfully prepared. The HCPT-loaded SLN was characterized by size, entrapment efficiency and drug release manner. The cytotoxicity of HCPT-loaded SLN was assessed in vitro using HepG2/HCPT cells and in vivo utilizing human tumor xenograft nude mouse model. HCPT-loaded SLN indicated the ability to target HepG2/HCPT cells and accumulated higher drug content in HepG2/HCPT cells. HCPT-loaded SLN enhanced the cytotoxicity of HCPT in a concentration-dependent manner. Based on these results, HCPT-loaded SLN suggested being a promising vehicle for liver-targeted drug delivery. Moreover, it can be of clinical interest to overcome multidrug resistance (MDR) effectively.