细胞壁缺陷结核分枝杆菌对动物及细胞致病作用的研究

目的了解细胞壁缺陷结核分枝杆菌对动物及细胞的致病作用,初步探讨细胞壁缺陷结核分枝杆菌的致病机制。方法将结核分枝杆菌稳定L型(TBL)接种Vero细胞和PPD试验阴性的豚鼠腹股沟皮下,观察细胞病变和动物的发病情况、PPD反应、组织病理学改变以及分离培养结核分枝杆菌及其L型。结果结核分枝杆菌L型感染72h后,细胞形成空泡、变圆、脱落和裂解,L型粘附于细胞表面或侵入细胞内生长。高剂量L型感染豚鼠,可见局部皮肤红肿及腹股沟淋巴结肿大,但PPD试验阴性。病理学检查可见结核的典型和非典型增生现象,抗酸染色可发现抗酸阳性圆球体。L型感染的动物中,80%病变淋巴结组织可分离到结核分枝杆菌L型,20%可同时检出细菌型。结论细胞壁缺陷结核分枝杆菌仍然具有致病性,但毒力较亲代细菌型明显减弱,不能引起动物形成PPD阳性反应。     

氟嗪酸对结核及鸟型分枝杆菌和利福平对结核分枝杆菌的作用

氟嗪酸(Ofloxacin,OFL)为一新的广谱喹诺酮类(Quinolone)药,利福平(RFP)为第一线抗结核药。本文旨在研究OFL 对培养的人肺泡巨噬细胞(MP)内致病结核分枝杆菌(TB)及鸟型分枝     

结核分枝杆菌的复苏因子

1998年Mukamolova在细菌因子一文中首先提出了复苏因子（Resuscitation promoting factor Rpf）的新概念，并证实复苏因子是由有活性的微球菌分泌的一种蛋白质．它在皮摩尔级浓度就能有效地促进休眠的非生长同源菌的复苏和生长。Mukamolova同时也证实微球菌复苏因子类似基因广泛地存在于富含G＋C的革兰氏阳性菌中（如链霉菌：分枝杆菌；棒状杆菌），并找到了结核分枝杆菌复苏因子家族（RpfA、RpfB、RpfC、RpfD、RpfE）。     

Toll样受体在结核分枝杆菌致病机制中的作用研究进展

结核分枝杆菌是肺结核的致病菌,它可寄生在细胞内并长期存活.目前结核杆菌的致病机制及机体对其的免疫反应尚未完全阐明.Toll样受体属于模式识别受体,在结核杆菌宿主防御反应中具有极为重要的作用.Toll样受体作为连接天然免疫与获得性免疫的"桥梁",在机体免疫调节中的作用已愈来愈受关注.关于Toll样受体与结核杆菌的相关研究已成为生命科学领域的热点.     

Toll样受体在结核分枝杆菌致病机制中的作用研究进展

结核分枝杆菌是肺结核的致病菌,它可寄生在细胞内并长期存活.目前结核杆菌的致病机制及机体对其的免疫反应尚未完全阐明.Toll样受体属于模式识别受体,在结核杆菌宿主防御反应中具有极为重要的作用.Toll样受体作为连接天然免疫与获得性免疫的"桥梁",在机体免疫调节中的作用已愈来愈受关注.关于Toll样受体与结核杆菌的相关研究已成为生命科学领域的热点.     

Toll样受体在结核分枝杆菌致病机制中的作用研究进展

结核分枝杆菌是肺结核的致病菌,它可寄生在细胞内并长期存活.目前结核杆菌的致病机制及机体对其的免疫反应尚未完全阐明.Toll样受体属于模式识别受体,在结核杆菌宿主防御反应中具有极为重要的作用.Toll样受体作为连接天然免疫与获得性免疫的"桥梁",在机体免疫调节中的作用已愈来愈受关注.关于Toll样受体与结核杆菌的相关研究已成为生命科学领域的热点.     

重组结核分枝杆菌11 000蛋白对结核分枝杆菌感染的鉴别作用

目的 研究重组结核分枝杆菌11 000蛋白对结核分枝杆菌感染的鉴别作用.方法 以不同分枝杆菌分别致敏豚鼠,致敏成功后给所有动物皮内注射重组结核分枝杆菌11 000蛋白和结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)或胞内分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD-B),用双盲法记录注射后24 h和(或)48 h注射局部皮肤反应的纵、横径,计算其均值.结果 PPD或PPD-B对所有分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤反应均为阳性,局部硬结直径均大于10 mm;重组结核分枝杆菌11 000蛋白对结核分枝杆菌活菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验为阳性,局部硬结直径依次为(14.7±2.0)、(9.3±3.8)、(18.7±2.4)和(14.8±4.2) mm,而对灭活结核分枝杆菌、卡介苗和其他非结核分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验均为阴性.结论 重组结核分枝杆菌11 000蛋白可有效鉴别结核分枝杆菌活菌感染和卡介苗接种、结核分枝杆菌死菌致敏以及其他非结核分枝杆菌的感染.     

结核分枝杆菌复苏因子对结核性胸腔积液中结核分枝杆菌生长促进作用的探索

目的探讨结核分枝杆菌复苏因子（resuscitationpromotingfactor,Rpf）对结核性胸腔积液中病原菌生长的促进作用,以期提高临床标本体外培养阳性率,缩短培养时间。方法选择2012年10月至2013年10月期间北京胸科医院62例结核性胸膜炎患者,抽取胸腔积液经过离心处理后分别接种于改良罗氏培养基,以及含高、低浓度Rpf的MiddleBrook7H11固体培养基（简称“7H11培养基”）和生理盐水7H11培养基（生理盐水阴性对照组）中,每隔3d观察菌落形成情况,阳性者行抗酸染色（AFB）、PCR扩增试验及DNA测序进行菌种鉴定,观察比较高、低浓度Rpf对Mtb的促进生长作用。利用统计软件SPSS17．0进行统计学分析。Rpf培养组与改良罗氏培养组,以及Rpf培养组与生理盐水阴性对照组Mtb培养阳性率比较采用配对计数资料的x2检验;不同浓度Rpf培养组与生理盐水阴性对照组可视菌落平均时间（d）和阳性菌落数量比较采用配对样本t检验。以P〈0．05为差异有统计学意义。结果（1）结核性胸腔积液改良罗氏培养组中的Mtb培养阳性率为16．1％（10／62）,含Rpf的7H11培养基中的Mtb培养阳性率为43．5％（27／62）,两者比较差异具有统计学意义（x2=12．84,P〈0．01）;（2）含高、低浓度Rpf7H11培养基的可视菌落形成时间各为（20．92±0．58）d和（21．69±0．50）d,两组间差异无统计学意义（t=0．085,P〉0．05）,但显著快于生理盐水对照组（不含Rpf）的（38．08±0．94）d（t值分别为10．19、9．91,P值均GO．001）;（3）含高、低浓度Rpf的7H11培养基菌落形成单位数各为（34．12±4．06）×10^2和（37．27±5．63）×10^2,两组间差异无统计学意义（t=0．45,P〉0．05）,但显著多于生理盐水对照组（3．77±0．88）×10^2（t值分别为5．88、7．30,P值均〈0．001）。结论接种结核性胸腔积液后,含Rpf的7H11培养基较改良罗氏培养基可提高Mtb的培养阳性率,并缩短培养时间。     

结核分枝杆菌相关毒力因子研究进展

在宿主环境长期演化的过程中,结核分枝杆菌通过逃避和修改宿主对感染的反应,能完全或部分适应在宿主细胞内的存活。促进该病原体成功入侵宿主细胞的因素很多,过去几十年的大量研究使人们对结核分枝杆菌复杂的发病机制有了更深入的了解,其独特的Ⅶ型分泌系统及其细胞膜的多种复合脂质已成为这方面关注最多的热点。本综述总结了近年来结核分枝杆菌相关毒力因子的研究结果,期望从这些毒力因子中寻找新的药物靶标。     

结核分枝杆菌及结核疫苗新作用方式的研究

结核病主要是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病,是严重威胁人类健康的重大公共卫生问题。目前,卡介苗仍是唯一被批准应用于人体的预防性疫苗,其对婴幼儿具有较好的保护效果,但对成年人的保护作用存在巨大争议。巨噬细胞和树突状细胞吞噬结核分枝杆菌之后,启动适应性免疫应答,活化的效应性CD4⁺和CD8⁺T细胞通过释放细胞因子和细胞毒作用发挥免疫效应。然而,结核分枝杆菌可通过抑制吞噬溶酶体形成、改变代谢途径、抑制抗原提呈等作用发生免疫逃逸,使其在宿主体内长期存在。近年来,随着多组学的发展,针对结核分枝杆菌感染免疫机制的研究有了一定的进展,但通过接种疫苗对结核病进行防控的结果依然不尽人意。本文重点探讨了结核分枝杆菌和宿主之间的免疫反应以及逃逸机制,并概述了结核疫苗的研发情况,有助于我们利用结核菌感染的免疫学知识对结核病疫苗进行快速高效的研发。     

结核分枝杆菌复活促进因子的研究进展

分枝杆菌包括藤黄微球菌,鸟分枝杆菌,母牛分枝杆菌,结核分枝杆菌等均能分泌一类可促同类休眠菌复苏和生长繁殖的蛋白质,它们同属一个蛋白家族,被称为复苏促进因子。本文以结核分枝杆菌复苏促进因子为核心,介绍其编码基因,分子特性,生物学行为,表达情况和免疫原性的研究近况,为进一步的研究奠定基础。     

结核分枝杆菌感染中缺氧诱导因子-1α对巨噬细胞能量代谢的调控作用研究进展

［摘要］　巨噬细胞作为机体免疫系统的重要组成部分,其通过能量代谢直接影响宿主体内清除结核分枝杆菌（Mtb）的能力。缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）通过影响巨噬细胞内的能量代谢途径来调控细胞对Mtb的免疫应答,在巨噬细胞抗结核免疫中起着重要作用。该文对Mtb感染中HIF-1α对巨噬细胞能量代谢的调控作用研究进展作一综述。     

复苏因子促进临床标本结核分枝杆菌生长的作用分析

目的探讨结核杆菌复苏因子在分枝杆菌快速培养中的实用性。方法收集41份抗酸杆菌涂片阳性的患者痰标本;经过NALC-NaOH法处理;接种到Bact/Alert mp快速培养瓶中;放入Bact/Alert 3d快速培养仪中;记录培养物阳性时间,统计分析。结果实验组阳性率均为90.2%,对照组阳性率为87.8%;实验组平均培养时间为14.8 d,对照组平均培养时间为14.9 d,两组比较有差异,但不明显(P>0.05);实验组有4份标本未生长,对照组有5份标本未生长且4份未生长标本与实验组相同,实验组有17份标本早于对照组生长,最多的提前2.67 d,20份标本晚于对照组生长,最多晚了2.61 d。结论结核分枝杆菌复苏因子对肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌的生长有一定促进作用,但没有明显差异。     

120例矽肺结核患者结核分枝杆菌L型致病情况研究

目的探讨研究120例矽肺结核患者结核分枝杆菌L型致病情况的价值。方法对矽肺结核组和矽肺患者,分别进行痰结核分枝杆菌和痰结核分枝杆菌L型培养,并对结果进行对照观察。结果矽肺结核120例痰结核分枝杆菌培养阳性14例,阳性率11．6％,同时出现结核分枝杆菌L型培养阳性10例,占71．4％;痰结核分枝杆菌L型培养阳性58例,阳性率48％（P〈0．01）。结论结核分枝杆菌L型培养方法方便快速,能提高结核分枝杆菌的检出率,对矽肺结核的早期诊断及减少矽肺结核复发的漏、误诊有肯定的价值。     

结核分枝杆菌复苏因子E的真核表达及鉴定

目的 构建结核分枝杆菌复苏因子E基因的真核表达质粒.方法 PCR扩增结核分枝杆菌复苏因子E基因片段.将片段克隆至PcDNA 3.1(一)载体,重组质粒测序正确后,转染至CHO细胞中,表达复苏因子E蛋白质.RT-PCR检测克隆基因mRNA在真核细胞中的表达,收集并纯化表达的蛋白质,SDS-PAGE分析和Western blot分析检测目的 蛋白的表达,淋巴细胞增殖实验(CCK-8)鉴定表达蛋白的免疫原性.结果 成功构建了结核分枝杆菌复苏因子E基因的真核表达质粒.RT-PCR证实克隆基因mRNA在真核细胞中表达,SDS-PAGE分析和Western blot分析均证实目的 蛋白在真核细胞中成功表达,淋巴细胞增殖实验(CCK-8)进一步证实了表达蛋白具有免疫原性.结论 我们成功构建了复苏因子E真核表达系统.     

非结核分枝杆菌的毒力因子及免疫机制研究进展

非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)的病例有逐年呈上升的趋势,尤其是合并HIV感染的发病率。由于NTM菌种多样,毒力因子多样,且不同菌种毒力与耐药性不同,分为致病性和非致病性两类。致病性分枝杆菌只要寄生于巨噬细胞内,因此目前研究宿主对NTM的免疫反应以及NTM如何能够在宿主巨噬细胞防御机制中生存对未来寻找有效治疗NTM的新型疗法至关重要。本文将对NTM毒力因子及免疫机制做一综述。     

肿瘤坏死因子-α拮抗剂可降低巨噬细胞对结核分枝杆菌的免疫反应能力

爱尔兰学者Harris等研究显示,自身免疫性疾病患者在应用肿瘤坏死因子(TNF)-α拮抗剂治疗后,具体内巨噬细胞对结核分枝杆菌的免疫反应能力降低(J Infect Dis,2008,198:1842-1850).     

结核分枝杆菌sigma因子的功能和调节机制

肺结核病目前仍是威胁人类健康甚至是生命的重要传染病,其致病病原体——结核分枝杆菌的毒力,以及与宿主细胞的共存,依赖于多种基因的复杂的表达调控.而在这些表达调控过程中,sigma因子起了重要作用.本文就sigma因子在结核分枝杆菌中调控作用、功能的最新研究,及其在结核病防治中的重要意义作一综述.     

结核分枝杆菌复苏因子基因克隆及其蛋白质的表达

结核病仍然是严重危害人类健康的重大公共卫生问题。如何提高临床标本结核杆菌培养阳性率、缩短培养时间是提高结核病诊疗和控制水平的关键。