吗啡依赖小鼠脑组织cAMP系统的变化及腺苷酸环化酶磷酸化 …

观察吗啡依赖小鼠脑组织腺苷酸环化酶（ＡＣ）／ｃＡＭＰ信号系统的变化、ＡＣ活性的磷酸化调节及蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）抑制剂对吗啡依赖形成的影响。方法采用放射免疫和酶学方法。结果（１）吗啡依赖小鼠纹状体、海马及大脑皮质ＡＣ活性、ｃＡＭＰ含量及可溶相蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）活性明显增加,小脑未见此变化;每日给吗啡前１５ｍｉｎ脑室注射ＰＫＡ抑制剂的小鼠纹状体、海马及大脑皮质ＡＣ活性明显低于吗啡依赖小鼠。（２）纳洛     

艾灸关元对吗啡依赖小鼠脑组织单胺类递质的影响

目的：为临床针灸戒毒促进复提供实验依据。方法：观察艾灸关元穴对吗啡依赖小鼠脑组织单胺类递质含量及吞噬细胞活性等指标的影响,结果：艾灸组动物脾重增加,吞噬细胞活性提高,脑内单胺类递质含量呈降低趋势,其中ＤＡ低于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论：艾灸可调节吗啡依赖小鼠的吞噬细胞活性,阻抑停用吗啡后脑内ＤＡ,ＮＥ和５－ＨＴ的骤然释放,从而起到改善戒断症状,促进康复的作用。     

吗啡长时程作用对SH-SY5Y细胞cAMP系统及c-Fos磷酸化的影响

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ 及ｃＦｏｓ 的变化。结果　（１） １００μｍ ｏｌ／Ｌ吗啡作用２ ｍ ｉｎ～３６ ｈ 可使ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰ水平呈双相变化：短时作用下ｃＡＭＰ水平降低,随着吗啡作用时间的延长,ｃＡＭＰ水平逐渐回升,至３６ ｈ 时明显高于对照,这时加入１００ μｍ ｏｌ／Ｌ纳洛酮可诱发ｃＡＭＰ水平的反弹性超高现象。表明吗啡作用３６ ｈ 可使分化的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞产生类吗啡依赖样变化;（２） 吗啡长时作用下,胞质可溶相ＰＫＡ活性也呈双相变化,而膜相ＰＫＡ 活性未见明显变化;（３）吗啡作用３６ ｈ 时,细胞ｃＦｏｓ磷酸化水平显著降低,ＰＫＡ抑制剂可抑制此作用;（４）纳洛酮可抑制上述ＰＫＡ 活性及ｃＦｏｓ 磷酸化水平的改变。结论　ＳＨＳＹ５Ｙ 细胞ｃＡＭＰＰＫＡ 系统的上调可能与吗啡依赖的形成有关,而且在吗啡依赖样细胞中ＰＫＡ可能通过磷酸酶而使细胞ｃＦｏｓ 发生去磷酸化,从而激活某些基因的转录,这可能是吗啡依赖时细胞产生适应性变化的重要机     

舒必利对小鼠的吗啡所致奖赏及cAMP水平的影响

为了解多巴胺D2受体阻滞剂舒必利对吗啡奖赏特性及其与中枢cAMP水平的效应,采用条件性位置偏爱试验及放射免疫测定观察小鼠对吗啡所致奖赏的行为及中枢cAMP水平变化。结果显示：吗啡组小鼠在吗啡搭配箱体中停留时间及其中枢cAMP水平较盐水组及舒必利加吗啡组显著增加(P＜0.05),而盐水组与舒必利加吗啡组之间无差异(P＞0.05),说明舒必利对吗啡的奖赏特性有对抗作用,该作用是通过舒必利抑制中枢cAMP水平所致。     

地卓西平对吗啡依赖大鼠部分脑区腺苷酸环化酶基因表达的影响

目的研究谷氨酸受体拮抗剂地卓西平对吗啡依赖大鼠某些脑区腺苷酸环化酶Ⅷ(AC-Ⅷ)基因转录水平的影响.方法24只雄性SD大鼠随机等分为吗啡组及干预组.末次注射后3h及72h各随机处死6只,取脑并冰冻切片,留取中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)、中脑导水管灰质(PAG)、杏仁核(AMG)、海马CA1区(HIPCA1)等脑区的切片.利用原位杂交及图像分析技术检测各脑区AC-ⅧmRNA吸光度(A)值并作同期平行比较.结果末次注射后3h及72h,干预组大鼠5个被检脑区AC-ⅧmRNA吸光度(A)值均明显低于吗啡组.结论合并使用谷氨酸受体拮抗剂地卓西平可明显降低吗啡依赖大鼠多个脑区AC-Ⅷ基因转录水平,这可能是谷氨酸受体拮抗剂抑制吗啡耐受及依赖的分子机制之一.     

多巴胺自身受体通过抑制依赖cAMP的磷酸化调控TH活性

应用ＨＰＬＣ－ＥＣＤ法测定大鼠纹状体突触体ＴＨ的活性，研究ＤＡ自身受体介导的ＤＡ生物合成负反馈调控的机理。研究发现，ＡＣ激活剂ＦＳＫ和ＰＫＡ激活剂ｄｂｃＡＭＰ均以浓度依赖的方式激活突触体ＴＨ的活性，增加ｌ－ｄｐｏａ的生成。ＤＡ自身受体激动剂ＬＹ１７１５５５能抑制ＦＳＫ对ＴＨ的激活效应，但不影响ｄｂｃＡＭＰ对ＴＨ的激活。实验结果表明，ＤＡ自身受体介导的负反馈调控的机理是通过抑制依赖ｃＡＭＰ的ＰＫＡ对ＴＨ的磷酸化激活，其作用环节在于抑制ＡＣ，而不是对ＰＫＡ的直接抑制。     

地卓西平对吗啡依赖大鼠部分脑区腺苷酸环化酶基因表达的影响

目的研究谷氨酸受体拮抗剂地卓西平对吗啡依赖大鼠某些脑区腺苷酸环化酶Ⅷ (AC Ⅷ )基因转录水平的影响。方法 2 4只雄性SD大鼠随机等分为吗啡组及干预组。末次注射后 3h及 72h各随机处死 6只 ,取脑并冰冻切片 ,留取中脑腹侧被盖区 (VTA)、伏隔核 (NAc)、中脑导水管灰质 (PAG )、杏仁核(AMG)、海马CA1区 (HIPCA1)等脑区的切片。利用原位杂交及图像分析技术检测各脑区AC ⅧmRNA吸光度 (A)值并作同期平行比较。结果末次注射后 3h及 72h ,干预组大鼠 5个被检脑区AC ⅧmRNA吸光度(A)值均明显低于吗啡组。结论合并使用谷氨酸受体拮抗剂地卓西平可明显降低吗啡依赖大鼠多个脑区AC Ⅷ基因转录水平 ,这可能是谷氨酸受体拮抗剂抑制吗啡耐受及依赖的分子机制之一。     

吗啡依赖大鼠镇痛及生殖功能变化的研究

目的：观察吗啡依赖大鼠镇痛及生殖功能的变化。方法：采用大鼠戒断模型，观察吗啡依赖大鼠下丘脑和血浆β－内啡肽（β－EP），结状神经节和孤束核P物质（SP）以及血清内分泌激素的变化。结果：（1）吗啡依赖大鼠下丘脑β－EP的含均较正常大鼠降低，而结状神经节和孤束核SP的含量升高；（2）吗啡依赖雌性大鼠血清FSH，E2，PRL均低于正常对照组，吗啡依赖雄性睾丸酮（T）含量显著降低（P＜0．01）。结论：吗啡依赖大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴可能发生变化。     

吗啡依赖和戒断小鼠海马MT1、MT2基因表达的变化

【目的】探讨吗啡依赖和戒断小鼠海马金属硫蛋白（metallothionein，MT）MT1、MT2 mRNA表达的变化。【方法】剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型，腹腔注射盐酸纳络酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应的强度。采用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法，观察实验小鼠海马MT1、MT2 mRNA的变化情况。【结果】吗啡依赖组MT1、MT2 mRNA表达水平高于对照组和吗啡戒断组（P〈0．05），吗啡戒断组MT1、MT2 mRNA表达水平高于对照组（P〈0．05）。【结论】吗啡依赖小鼠海马MT1、MT2 mRNA表达增加，纳络酮戒断能够抑制吗啡依赖引起的MT1、MT2表达增加，表明海马MT的表达变化参与了吗啡依赖和戒断过程。     

DFMO对吗啡依赖NG108-15细胞内cAMP含量的影响

目的　观察二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)对NG10 8 15细胞内cAMP含量的影响。方法　建立NG10 8 15细胞吗啡依赖模型 ,观察吗啡依赖细胞内cAMP含量的变化以及DFMO的作用。结果　吗啡 0 .1mmol/L处理 4 8h的细胞 ,纳洛酮 0 .1mmol/L催促后 ,与未催促组相比 ,细胞内cAMP的含量明显升高 ,由 (15 .3± 2 .4 ) pmol/(mg·pro)增至 (38.8± 5 .1)pmol/(mg·pro) (n =5 ,P <0 .0 5 ) ,称为cAMP超射现象。DFMO(0 .1mmol/L)能够浓度依赖性地抑制吗啡依赖的NG10 8 15细胞戒断时的cAMP超射现象 ,cAMP含量降至 (19.4± 2 .11) pmol/(mg·pro) (P <0 .0 5 )。 结论　DFMO可以抑制吗啡依赖的NG10 8 15细胞戒断时的cAMP超射现象 ,提示DFMO对吗啡依赖的抑制作用可能与降低cAMP有关     

硫化氢调控cAMP信号通路与干预吗啡依赖形成关系的研究进展

<正>吗啡是目前临床治疗中、重度疼痛最常用和有效的阿片类药物。然而,患者长期、反复使用吗啡容易产生药物依赖性,并且停药后可出现严重的戒断症状。这不仅给患者增加了痛苦,而且也在很大程度上限制了吗啡的临床应用。硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)是近年来备受生物医学关注的一种新型气体分子,具有分子量小、不通过受体发挥作用、可以自由通过细胞膜及生成受内源性关键酶的调节 更多还原     

吗啡依赖对小鼠肺表面活性物质分泌的影响

目的探讨吗啡依赖对小鼠肺表面活性物质分泌的影响.方法以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,纳洛酮诱发戒断症状.根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应强度.采用毛细管上升现象测定吗啡依赖和戒断小鼠离体肺灌洗液表面张力的变化.结果吗啡依赖组和纳洛酮催促戒断组离体肺灌洗液表面相对张力和表面张力均明显大于对照组(P<0.01),而且吗啡戒断组离体肺灌洗液表面相对张力和表面张力又明显大于吗啡依赖组(P<0.01).结论吗啡依赖和纳洛酮催促戒断小鼠肺表面活性物质含量下降,尤其是戒断期.这些变化可能是吗啡依赖造成肺功能损害的原因之一.     

二陈汤对吗啡依赖小鼠位置偏爱效应的影响

目的：探讨二陈汤对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱（CPP）的影响。方法：连续给予小鼠吗啡（9 mg/kg,sc,7 d）,使小鼠产生显著的条件性位置偏爱效应。将小鼠随机分为正常对照组、吗啡组、二陈汤低剂量、中剂量、高剂量五组,正常对照组注射等体积生理盐水,吗啡组注射吗啡,二陈汤组注射吗啡,同时给予三种不同剂量的二陈汤灌胃,并且检测对小鼠的奖赏效应或厌恶效应。结果：吗啡组小鼠在伴药箱中停留的时间明显延长,二陈汤可抑制吗啡引起的小鼠位置偏爱的形成。结论：二陈汤能在一定程度上抑制吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱效应。     

吗啡依赖对小鼠肺表面活性物质分泌的影响

目的：探讨吗啡依赖对小鼠肺表面活性物质分泌的影响。方法：以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型，纳洛酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应强度。采用毛细管上升现象测定吗啡依赖和戒断小鼠离体肺灌洗液表面张力的变化。结果：吗啡依赖组和纳洛酮催促戒断组离体肺灌洗液表面相对张力和表面张力均明显大于对照组（P＜0．01），而且吗啡戒断组离体肺灌洗液表面相对张力和表面张力又明显大于吗啡依赖组（P＜0．01）。结论：吗啡依赖和纳洛酮催促戒断小鼠肺表面活性物质含量下降，尤其是戒断期。这些变化可能是吗啡依赖造成肺功能损害的原因之一。     

复方戒毒胶囊对吗啡依赖小鼠的实验研究

探讨复方戒毒胶囊对吗啡依赖小鼠的作用。小鼠每日注射吗啡，共连续给药１０ｄ，纳络酮催瘾后，小鼠出现典型的戒断综合征，表现为活动增加、频繁眺跃、体重减轻。将模型动物分为４组，２组服复方戒毒胶囊，另２组分别继续注射吗啡和生物盐水，观察戒断综合征变化。结果，戒毒胶囊明显促进动物体重逐渐恢复正常，减少动物自主活动与跳跃次数。     

吗啡依赖对小鼠海马神经元核酸代谢的影响

目的探讨吗啡依赖对小鼠海马神经元结构和功能损害的分子机制。方法以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,采用吖啶橙荧光探针技术,显示吗啡依赖组、纳洛酮催促戒断组和正常对照组小鼠海马神经元DNA和RNA的变化。结果与对照组相比,吗啡依赖组和纳洛酮催促戒断组海马神经元DNA和RNA荧光反应强度均明显减弱,纳洛酮催促戒断组荧光反应强度更弱。结论吗啡依赖和纳洛酮催促戒断损伤海马神经元核酸代谢,后者的损伤程度更为严重,这些变化可能是吗啡依赖造成脑功能损坏尤其是学习记忆功能下降的原因之一。     

吗啡依赖对小鼠海马神经元核酸代谢的影响

目的：探讨吗啡依赖对小鼠海马神经元结构和功能损害的分子机制。方法：以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,采用吖啶橙荧光探讨技术,显示吗啡领带组、纳洛酮催促戒断组和正常对照组小鼠海马神经元DNA和RNA的变化。结果：与对照组相比,吗啡依赖组和纳洛酮催促戒断组海马神经元DNA和RNA荧光反应强度均明显减弱,纳洛酮催促戒断组荧光反应强度更弱。结论：吗啡依赖和纳洛酮催促戒断损伤海马神经元核代谢,后者的损伤程度更为严重,这些变化可能是吗啡依赖造成脑功能损坏尤其是学习记忆功能下降的原因之一。     

LH受体减量调节中受体mRNA及cAMP的变化研究

目的研究鼠Leydig细胞膜LH受体减量调节中受体mRNA及cAMP水平的变化及二者之间的关系。方法应用RT－PCR法，以β-actin为内参照，测定激素刺激后鼠Leydig细胞膜LH受体（LHR）减量调节中LHRmRNA水平的变化，同时应用放射免疫法，分析同一时间细胞内cAMP水平的变化。结果LHRmRNA水平早期有20％的升高，然后逐渐下降50％，与此趋势相同，cAMP水平亦呈现出升高-降低的动态过程，二者在变化上呈“正相关”，并且前者总是“滞后”于后者一段时间。结论LHR减量调节过程中，细胞内cAMP水平可能以“正相关”的方式影响着LHR基因的转录速率。