长链非编码RNA LINP1对肝癌细胞增殖、侵袭转移的影响

目的探究长链非编码RNA LINP1在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖及侵袭转移能力的影响。方法使用qRT-PCR方法检测60例肝癌组织以及癌旁组织、肝癌细胞株及正常肝细胞中LINP1的表达情况。si-LINP1转染肝癌细胞敲低LINP1表达;CCK-8实验检测si-LINP1对肝癌细胞增殖影响;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和cyclinD1表达。结果 LINP1在肝癌组织中的表达水平高于癌旁组织,肝癌细胞高于正常肝细胞系Lo2(P0.05);敲低LINP1抑制肝癌细胞增殖及侵袭转移,抑制Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和cyclinD1表达(P0.05)。结论敲低LINP1抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移与抑制Wnt/β-catenin信号通路相关。     

长链非编码RNA亚细胞定位和功能的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)的亚细胞定位和其功能息息相关,定位于细胞核时,lncRNA可以维持染色质结构,调控基因转录,参与mRNA的可变剪接;定位于细胞质时参与信号传导、转录后调控、翻译和翻译后修饰;定位于细胞器时协助完成细胞器的功能。lncRNA的亚细胞定位机制与其自身序列、结合蛋白等密切相关。此外通过构建核滞溜载体Snovector、添加胞质定位元件等强制改变lncRNA的亚细胞定位,以及利用APEX2等技术研究lncRNA亚细胞定位和其功能之间的关系,有利于lncRNA疗法的开发。     

长链非编码RNA-AP000344.3对人膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及机制

目的探讨特异性长链非编码RNA-AP000344. 3对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法采用qRT-PCR检测膀胱癌细胞和正常膀胱上皮细胞中AP000344. 3的表达,选取表达量最低的癌细胞株进行后续实验。采用Lipofectamine2000转染试剂将AP000344. 3质粒或阴性对照质粒转入膀胱癌细胞中,qRT-PCR检测AP000344. 3的转染效率。MTT法检测细胞的增殖活性,Transwell实验检测细胞的侵袭能力。生物信息学预测AP000344. 3的下游miRNA和下游基因。qRT-PCR和Western blot法检测下游基因的表达。结果膀胱癌细胞中AP000344. 3的表达显著低于正常膀胱上皮细胞(P 0. 01),BIU87细胞中表达最低(P 0. 01)。AP000344. 3转染48 h后BIU87细胞AP000344. 3表达上调(P 0. 01)。BIU87细胞增殖活性降低(P 0. 05),细胞侵袭能力降低(P 0. 05)。AP000344. 3可靶向结合miR-135a-5p,miR-135a-5p可靶向结合CMTM3。AP000344. 3表达上调后,miR-135a-5p表达下调(P 0. 01),CMTM3 mRNA和蛋白表达上调(P 0. 01)。结论AP000344. 3在膀胱癌细胞中明显低表达,AP000344. 3上调可抑制膀胱癌细胞增殖和侵袭,其作用机制可能是抑制miR-135a-5p的表达进而上调CMTM3蛋白的表达,为寻找膀胱癌新的治疗靶点提供理论依据。     

长链非编码RNA TTTY15在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞活力和侵袭的影响

目的:观察长链非编码RNA TTTY15在骨肉瘤组织及细胞株中的表达,并探讨其对骨肉瘤细胞活力和侵袭的影响。方法:应用qPCR法检测11例骨肉瘤组织及其瘤旁组织中TTTY15的水平,同时检测TTTY15在骨肉瘤细胞株(143B、Saos2、MG-63、U2OS和HOS)和人成骨细胞株hFOB1.19中的表达。在表达量最高的细胞株(MG-63)中通过转染小干扰RNA敲减TTTY15的表达,CCK-8法检测TTTY15低表达对细胞活力的影响,流式细胞术检测其对细胞周期的影响,Transwell检测其对细胞侵袭能力的影响,qPCR检测miR-216b-5p和FOXM1 mRNA的表达,Western blot法检测相关蛋白的变化。结果 :与瘤旁正常组织相比,TTTY15在骨肉瘤组织中表达升高(P0.01);与人成骨细胞相比,TTTY15在骨肉瘤细胞株中表达升高(P0.05),其中在MG-63细胞中表达水平最高(P0.01)。敲减TTTY15在MG-63细胞的表达后,细胞活力降低(P0.05),细胞周期被抑制在G_0/G_1期(P0.01),细胞的侵袭能力降低(P0.01),miR-216b-5p mRNA表达水平升高(P0.01),FOXM1的mRNA表达降低(P0.01),同时FOXM1、CDK4、cyclin D1、MMP-2和N-cadherin的蛋白表达降低,而E-cadherin的蛋白表达升高(P0.05)。结论:TTTY15在骨肉瘤组织和细胞株中表达增高,敲减TTTY15的表达可抑制骨肉瘤细胞的活力和侵袭能力,其机制可能与TTTY15低表达导致miR-216b-5p的表达升高,引起FOXM1基因表达下调有关。     

长链非编码RNA FENDRR对前列腺癌DU-145细胞生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA FENDRR对前列腺癌DU-145细胞生物学行为的影响。方法 realtime PCR方法检测前列腺癌细胞株DU-145和正常前列腺上皮细胞RWPE-1中FENDRR的表达水平。构建FENDRR基因表达载体pcDNA-FENDRR并转染DU-145细胞,real-time PCR方法验证转染效率。FENDRR基因过表达后,平板克隆实验实验检测DU-145细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测DU-145细胞的凋亡率;划痕实验与Transwell实验检测DU-145细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 FENDRR在前列腺癌细胞株DU-145中的表达明显低于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P0.01)。pcDNA-FENDRR转染显著上调DU-145细胞中FENDRR mRNA的表达。FENDRR基因过表达后,DU-145细胞的增殖、迁移与侵袭能力明显降低,细胞凋亡率明显升高(P0.01)。结论过表达lncRNA FENDRR能够抑制前列腺癌DU-145细胞增殖、迁移与侵袭,并促进凋亡,在前列腺癌中发挥肿瘤抑制基因的作用。     

沉默长链非编码RNA CCAT2对人骨肉瘤细胞MG-63增殖与凋亡的影响

目的探讨靶向沉默长链非编码RNA肠癌相关转录子2(lncRNA CCAT2)对人骨肉瘤细胞MG-63增殖与凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测骨肉瘤MG63细胞与人成骨hFOB1.19细胞中lncRNA CCAT2表达水平;转染小干扰RNA沉默MG63细胞中lncRNA CCAT2的表达,qPCR方法验证沉默效率。沉默MG63细胞中lncRNA CCAT2表达后,MTT方法检测MG63细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测MG63细胞的凋亡率,Western blot方法检测MG63细胞p53及Bcl-2蛋白的表达变化。结果lncRNA CCAT2在骨肉瘤MG63细胞中的表达显著高于人成骨hFOB1.19细胞(P<0.01);转染小干扰RNA能够显著降低MG63细胞中lncRNA CCAT2的表达水平(P<0.01)。沉默lncRNA CCAT2后,MG63细胞的增殖能力显著降低,凋亡率显著上升,Bcl-2蛋白表达显著降低p53蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论靶向沉默lncRNA CCAT2能够抑制人骨肉瘤细胞MG-63的增殖并诱导凋亡。     

长链非编码RNA与结直肠癌

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200 nt的非蛋白编码RNA分子,能同时与DNA、RNA和蛋白质分子相互作用,通过转录和转录后调控等多种作用机制在结直肠癌中发挥促癌或抑癌的双重作用。lncRNA表达异常或突变在结直肠癌的发生、发展、侵袭和转移过程中扮演着重要角色,且与患者预后密切相关。lncRNA有望为成为结直肠癌新的诊断和治疗靶点。     

长链非编码RNA H19对鼻咽癌HNE-1细胞增殖和侵袭的影响及可能机制

目的探讨长链非编码RNA H19(lncRNAH19)对鼻咽癌HNE-1细胞增殖和侵袭的影响以及可能机制。方法 qPCR检测鼻咽癌HNE-1细胞与正常鼻咽上皮细胞NP-69中lncRNA H19与miR-107的表达。CCK-8法检测HNE-1细胞增殖能力的变化,Transwell实验检测HNE-1细胞侵袭能力的变化;采用双荧光素酶报告分析验证lncRNA H19与miR-107的靶向关系。结果与正常鼻咽上皮细胞NP-69相比,lncRNA H19在鼻咽癌HNE-1细胞中的表达水平显著升高,miR-107表达水平显著降低。lncRNA H19-siRNA转染后,HNE-1细胞中lncRNA H19的表达水平降低,miR-107表达水平显著升高,HNE-1细胞的增殖与侵袭能力显著降低。双荧光素酶报告分析结果证实,miR-107是lncRNA H19的下游靶点。结论 lncRNA H19通过靶向调控miR-107调控鼻咽癌HNE-1细胞的增殖与侵袭能力。     

长链非编码RNA AGAP2-AS1对肾细胞癌侵袭转移能力的影响

目的观察长链非编码RNAAGAP2-AS1(lnc RNAAGAP2-AS1)对肾细胞癌(renalcell carcinoma, RCC)细胞侵袭转移能力的影响,及其可能机制。方法采用实时荧光聚合酶链反应法(RT-PCR)检测近端肾小管上皮细胞(HK-2)和RCC细胞(A498、ACHN)中lnc RNA AGAP2-AS1和EZH2的表达水平,在肾癌细胞A498中敲除AGAP2-AS1后,通过RT-PCR检测EZH2的表达水平。在肾癌细胞A498中敲降AGAP2-AS1后,再过表达EZH2,应用划痕实验与Transwell实验检测肾癌细胞侵袭转移能力的改变。结果与肾小管上皮细胞相比,RCC细胞中EZH2和lnc RNA AGAP2-AS1的表达水平均明显升高(P0.05);抑制AGAP2-AS1表达后肾癌细胞中EZH2表达下调;肾癌A498细胞敲降AGAP2-AS1后细胞侵袭转移能力明显减弱(P0.05),而过表达EZH2后侵袭与转移能力明显恢复(P0.05)。结论 lnc RNA AGAP2-AS1促进RCC细胞的侵袭和转移,与上调EZH2的表达水平相关。     

长链非编码RNA SNHG7对膀胱尿路上皮癌细胞侵袭能力的影响

目的研究膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)中长链非编码RNA (long noncoding RNA,lncRNA)Small Nucleolar RNA Host Gene 7(SNHG7)的表达及其对BUC细胞侵袭能力的影响。方法实时定量PCR法检测SNHG7在BUC组织标本(78例)和细胞系(T24)中的表达,并分析其表达在BUC中的临床意义。RNA干扰技术沉默T24细胞中SNHG7的表达后,应用Transwell小室法检测T24细胞的侵袭能力。结果 SNHG7在BUC组织和T24细胞系中的表达水平显著高于癌旁正常尿路上皮和人膀胱上皮永生化细胞系SV-HUC-1,且SNHG7基因的高表达与BUC的高病理分级、侵袭肌层以及淋巴结转移密切相关。转染si-SNHG7能够沉默T24细胞中SNHG7的表达,SNHG7沉默的T24细胞的侵袭能力显著降低。结论 SNHG7参与膀胱尿路上皮癌的发病机制,与BUC的侵袭转移相关。     

长链非编码RNA与病毒和微小非编码RNA关系的研究进展

非编码RNA,包括以miRNA、siRNA和piRNA等为代表的短小RNA和长链非编码RNA.长链非编码RNA,有别于其他小分子非编码RNA,是目前非编码RNA研究的热点.随着研究的不断推进,人们发现lncRNA与物种进化、胚胎发育、物质代谢以及肿瘤发生等都有着密切的联系.microRNA是一类长度为19～ 23个核苷酸的内源性非编码RNA,可以在转录水平或转录后水平调节基因的表达.     

长链非编码 RNA SNHG11 对结直肠癌增殖的影响

目的 探讨长链非编码 RNA 小核仁 RNA 宿主基因 11 ( small nucleolar RNA host gene 11, SNHG11) 对结直肠癌增殖的影响及分子机制。 方法 人结肠癌细胞 LOVO、 SW480 构建 SNHG11 过表达或 者 SNHG11 干扰细胞株, 检测在结直肠癌细胞株中过表达及干扰 SNHG11 后, 结直肠癌细胞增殖能力、 P50 和 P65 蛋白和 NF-κB 信号通路下游基因的表达情况。 结果 过表达 SNHG11 能促进结直肠癌细胞的增殖, 而抑制 SNHG11 的表达则能明显抑制结直肠癌细胞的增殖。 过表达 SNHG11 后 P65、 P50 的表达及 NF-κB 信号 通路下游与细胞增殖相关基因 c-Myc、 COX2、 CCND1、 VEGFA 水平明显上调; 而敲除 SNHG11 后则显著降低。 SNHG11 通过与 NF-κB 复合体中的 P50 结合, 进而上调 NF-κB 复合体, 激活 NF-κB 信号通路。 结论 长链非 编码 RNA SNHG11 通过激活 NF-κB 信号通路促进结直肠癌细胞的增殖。     

长链非编码RNA CRNDE调控胶质瘤细胞凋亡

目的 探讨长链非编码RNA CRNDE在胶质瘤细胞凋亡中发挥的功能和可能的作用机制.方法 将CRNDE基因干扰siRNA转染人胶质瘤U87细胞系,利用PE Annexin-V/7-AAD双染,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并利用Western方法检测细胞凋亡关键蛋白的表达变化.结果 siRNA干扰CRNDE表达的胶质瘤细胞中,细胞凋亡程度增加,凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase7、Caspase9、PARP表达量明显升高.结论 CRNDE可能通过降低凋亡相关蛋白活性及表达水平,抑制胶质瘤细胞凋亡能力.     

长链非编码RNA调控肿瘤细胞凋亡的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度>200个核苷酸、通常不编码蛋白质的RNA。近年研究表明,lncRNA在肿瘤的的发展过程中发挥抑癌或促癌作用,参与细胞增殖、凋亡等过程。本综述简要介绍lncRNA的生物学功能及其调控细胞凋亡的研究进展。     

长链非编码RNA在卵巢癌中的研究进展

长链非编码RNA (lncRNA)是指长度超过200个核苷酸、具有调控基因表达作用的非编码RNA,近年来,因其具有复杂的生物学功能而引起了研究者的广泛关注.目前研究证实,lncRNA与多种肿瘤的发生发展有着密切的关系,可能参与促进或抑制肿瘤的生长和与肿瘤的转移有关.在卵巢癌中,某些lncRNA也被证实可能参与其致病过程.     

长链非编码RNA与口腔癌研究进展

口腔癌(oral cancer)是口腔外科常见的恶性肿瘤,易发生转移且预后不容乐观,长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是一类内源性的长度大于200个核苷酸、缺少特异完整的开放阅读框,不具有蛋白质编码功能的转录本,最初认为并没有生物学功能,但随着生物学技术的发展,发现其能够在表观遗传水平、转录水平和转录后水平等多个层面上调控基因的表达,从而影响机体生长、发育、衰老和死亡等重要的生命活动以及疾病的发生和发展。近年来的研究显示口腔癌的发生、发展、侵袭、转移和预后与lncRNA的表达水平密切相关。因此本文对lncRNA在口腔癌中的研究进展进行论述,并探讨lncRNA与口腔癌发生、发展之间的关系,旨在进一步阐述lncRNA与OSCC的关系并为寻找口腔癌肿瘤标志物提供新的方向,为口腔癌患者提供新的治疗策略。     

肝细胞癌相关长链非编码RNA差异表达的研究

目的分析肝细胞癌与正常肝组织中差异表达的长链非编码RNA(lncRNA),发现可能与肝细胞癌发生发展相关的特异lncRNA。方法采用lncRNA表达谱芯片技术检测5例肝细胞癌和其配对癌旁正常组织中的lncRNA,筛选出差异表达的lncRNA。运用分层聚类分析,对所有的lncRNA进行分类。最后从中选择10个lncRNA用RT-PCR进行定量验证。结果有1359个lncRNA表达水平出现显著性差异,差异倍数〉2倍。其中629个显著上调,占46.2%,其中125个表达5倍以上;730个显著下调,占53.7%,其中110个表达5倍以上。聚类分析(1)基因间lncRNA有11706条,其中与已知编码基因相距300 kb的lncRNA共有352条。(2)增强子型lncRNA共有1802条,其中与已知编码基因相距300 kb的lncRNA共有42条。(3)HOX基因簇共有101条。RT-PCR结果有8条lncRNA表达趋势与基因芯片结果一致。对癌组和癌旁组进行检验,有6条差异有统计学意义(P0.05)。结论与癌旁组织比较,lncRNA肝细胞癌组织中的表达水平明显改变,可能与肝细胞癌的发生发展有关。