15种中药提取物对几种植物病原菌抑菌活性的初步研究

以15种中药丙酮提取物为材料,测定了其对杨树溃疡病菌(D.gregaria)、棉花枯萎病菌(F.oxys-porum f.sp.vasinfectum)、番茄早疫病菌(A.solani)、小麦纹枯病菌(R.solani)和小麦赤霉病菌(F.graminearum)等5种植物病原菌的生物活性。结果表明,在质量浓度为0.05 g/mL时,花椒提取物对所有供试菌菌丝生长抑制率均在80%以上,苍术、沉香、艾叶和草豆蔻提取物对其中至少2种供试菌菌丝生长抑制率均在60%以上;在质量浓度为0.1 g/mL时,花椒、沉香和艾叶提取物对棉花枯萎病菌孢子萌发抑制率均在90%以上;草豆蔻提取物对棉花枯萎病菌孢子萌发抑制率大于65%。花椒、沉香、艾叶、草豆蔻、苍术等5种中药作为植物源杀菌剂值得进一步研究。     

植物提取物对桃褐腐病菌的抑制作用

采用生长速率法测定8种植物提取物对桃褐腐病菌菌丝体生长的抑制作用;采用倍比稀释法测定花椒、大蒜和薄荷提取物的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC),并测定其在采后桃果实上对褐腐病的防治效果。结果表明,不同植物提取物对桃褐腐病的抑制作用存在一定的差异。在提取物浓度为0.5 mg/m L时,8种植物提取物中花椒提取物对桃褐腐病菌丝生长的抑制效果最好,抑制率达92.42%,其次是薄荷和大蒜。测得花椒、薄荷、大蒜提取物的MIC为0.313、0.625、1.25 mg/m L,MFC为0.625、2.5、5.0 mg/m L;测得花椒、薄荷、大蒜提取物对采后桃褐腐病具有较好的防治效果,花椒提取物浓度为2.5 mg/m L时,能完全抑制桃褐腐病的发生。说明花椒、薄荷和大蒜体内的有效成分对桃褐腐病菌具有较强的抗菌作用。     

20种中药提取物对3种植物病原菌的抑制作用

采用生长速率法和孢子萌发法测定了20种中药丙酮提取物对番茄灰霉病菌、小麦赤霉病菌、甜瓜枯萎病菌的抑制作用.结果表明,在生药质量浓度为0.01 g/mL时,石菖蒲提取物对番茄灰霉病菌和甜瓜枯萎病菌,小玫瑰提取物对番茄灰霉病菌菌丝生长抑制率均达到100%;白芷提取物能强烈抑制番茄灰霉病菌孢子萌发,抑制率达91.59%,川楝子、小玫瑰和蒲公英提取物对灰霉病菌孢子萌发的抑制率在70%以上.石菖蒲、白芷作为植物源杀菌剂值得进一步研究.     

苍耳提取物对番茄灰霉病菌抑制机理的研究

以番茄灰霉病菌为供试材料,对苍耳提取物的抑菌机理进行了研究.结果表明:苍耳提取物对番茄灰霉菌的菌丝生长、分生孢子的形成和萌发都具有较强的抑制作用,当处理浓度为30 mg/mL时,苍耳提取物对番茄灰霉菌菌丝生长的抑制率达78.1%,对分生孢子形成和萌发的抑制率分别为85.1%和77.4%.苍耳提取物能引起番茄灰霉菌菌丝细胞膜透性发生变化,造成菌丝体内含物的渗漏,从而导致液体培养基电导率增加.用苍耳提取物处理番茄灰霉病菌后,可使菌丝体可溶性蛋白含量下降.     

5种植物粗提物对稻瘟病菌的抑菌活性

以稻瘟病菌为供试靶标,采用生长速率和孢子萌发测定法,对鱼腥草、夹竹桃、马尾松、姜和香樟的乙醇粗提物进行了抑菌活性测定。结果显示,5种植物粗提液对稻瘟病菌均有抑制作用,在浓度为40 mg/m L时,马尾松对该菌的菌丝生长及孢子萌发抑制率最高,分别为62.23%和65.54%,其EC_(50)为21.75 mg/m L和19.38 mg/m L,其次是姜和夹竹桃,其中鱼腥草和香樟的抑菌活性相对较弱。     

人参茎叶总皂苷对腐皮镰刀菌的抑制作用及抑菌机理初探

采用HPLC法确定人参茎叶总皂苷中五种单体皂苷的含量;生长速率法测定人参茎叶总皂苷对腐皮镰刀菌菌丝生长抑制作用;载玻片萌发法测定人参茎叶总皂苷水溶液对腐皮镰刀菌孢子萌发的抑制作用;测定人参茎叶总皂苷处理前后的腐皮镰刀菌电导率变化情况,进一步确定细胞膜透性变化情况;考马斯亮蓝G-250比色法测定腐皮镰刀菌可溶性蛋白质含量的影响;紫外吸收法测定吸光率的变化速度确定菌体过氧化氢酶的活力。结果:人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rd、Rb1的含量分别为1.62%,0.66%,0.10%,1.23%,0.36%;当人参茎叶总皂苷浓度为10mg/m L时,对腐皮镰刀菌菌丝生长抑制率为76.79%,EC50为3.5302mg/m L;对孢子萌发的抑制率达到81.65%,EC50为3.0377mg/m L;人参茎叶总皂苷能引起菌丝细胞膜透性的变化,导致液体培养基电导率增加;菌丝体可溶性蛋白含量升高和过氧化氢酶活性下降;菌丝变细且节间拉长,生长稀疏,菌丝体胞内物质外渗,内含物变少,阻碍腐皮镰刀菌菌丝的生长。     

问荆活性物质的提取及对番茄灰霉病菌的抑制作用

通过活性物质跟踪的方法,研究了问荆中的活性成分对番茄灰霉病菌的抑菌活性,结果表明:3种溶剂提取物中,氯仿提取物对番茄灰霉病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制率最高,EC50分别为0.52和0.21mg/mL;对氯仿提取物萃取分离得到的4种不同溶剂萃取物中,乙酸乙酯组分对灰霉病菌菌丝和孢子萌发的抑制效果最佳,EC50分别为0.37和0.28mg/mL;经柱层析分离得到的12个流分中,L9流分的抑制菌丝生长作用最强,EC50为0.22mg/mL,L9流分处理灰霉病菌后发现菌丝生长稀疏,菌体细胞膜渗透性增大,电镜图片显示菌丝变形,有瘤状突起。因此,问荆提取物对灰霉病菌具有很强的抑制效果,为新型植物源农药的开发提供了一定基础。     

放线菌19G-317菌株发酵产物抑菌活性初步研究

【目的】明确放线菌19G-317菌株发酵产物对植物病原菌的抑制活性,为该菌株在农业病害防治中的开发应用及后续研究奠定基础。【方法】采用生长速率法、孢子萌发法、活体组织法和盆栽试验,测定放线菌19G-317菌株发酵产物的抑菌效果。【结果】生长速率法试验表明,放线菌19G-317菌株发酵产物对供试22种植物病原菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用,发酵液对其中11种植物病原菌的抑制率大于60%,菌丝提取物对其中8种植物病原菌的抑制率大于90%;发酵液和菌丝提取物对油菜菌核病菌菌丝生长的EC50分别为84.30和18.80 mg/L。孢子萌发试验表明,发酵液和菌丝提取物对番茄灰霉病菌孢子的萌发均有较强的抑制作用,在0.5 mg/mL质量浓度下,其抑制率分别为94.26%和96.20%;组织法试验表明,在10 mg/mL质量浓度下,发酵液和菌丝提取物对番茄灰霉病的药效分别为72.17%和76.95%;盆栽试验表明,19G-317菌株发酵液和菌丝提取物对辣椒疫霉病均有一定的保护和治疗作用。【结论】放线菌19G-317菌株抑菌谱较广,对植物病菌的防治有很大的研究开发潜力。     

黄柏提取物对番茄枯萎病的生物防治效果

通过测定菌丝干质量、菌丝生长速率、孢子萌发率等,研究黄柏的乙醇提取物对番茄枯萎病菌的室内抑菌作用,利用温室盆栽试验评估黄柏提取物对番茄枯萎病的防治效果。试验结果表明,黄柏提取物对番茄枯萎病菌的菌丝生长和孢子萌发均有显著抑制作用,且抑制率随提取物质量浓度的增大而升高,质量浓度为32 000 mg/L时对枯萎病菌菌丝生长的抑制作用达到80%以上,抑制中浓度(MIC)为7 530 mg/L。质量浓度为16 000 mg/L的处理对孢子萌发的抑制率高达100%。在盆栽试验中,质量浓度为16 000 mg/L的处理对番茄枯萎病的保护防治效果达73.53%,显著高于常规化学药剂。试验表明,黄柏提取物对番茄枯萎病菌具有较好的防治效果。     

花椒提取物对薏苡黑粉病菌的抑菌机理

从角质酶、果胶酶、纤维素酶以及细胞膜透性等方面研究花椒提取物对薏苡黑粉病菌的抑制机理。结果表明:花椒提取物处理后,黑粉病菌的果胶酶和纤维素酶的活性显著弱于对照,说明花椒提取物能够抑制病原物的致病相关酶活性的表达,进而减轻黑粉病菌的危害;花椒提取物处理后,孢子培养液的电导率及其变化率都随着时间的延长而变大,处理9 h后菌丝电导率变化率为9.52%,说明花椒提取物对菌丝的细胞膜有很强的破坏作用,导致细胞内电解质外渗,从而迅速增加菌丝培养液的电导率。黑粉病菌的果胶酶以及纤维素酶的活性都在6 h时达到峰值,之后活性开始降低,说明该病菌在6 h时能够冲破植物各种抵抗屏障,成功侵入寄主植物。黑粉病菌分泌的角质酶的量很低,这可能是薏苡黑粉病菌极少能从薏苡叶片侵入的关键因子之一。     

大葱提取物对黄瓜枯萎病菌抑菌活性研究

以黄瓜枯萎病菌为供试菌,采用孢子萌发率和菌丝生长速率法研究了大葱总提取物、蛋白成分、多糖成分等各成分及大葱挥发性物质的抑菌作用.结果表明:大葱总提取物和挥发性成分对供试菌孢子萌发及菌丝生长都有很好的抑制效果,大葱总提取物在浓度达500 mL·L-1时,对孢子萌发抑制率及菌丝生长抑制率分别为100%和38.6%;大葱挥发性成分在浓度达5g·dm3时,对孢子萌发抑制率为100%,对菌丝生长的抑制率为42%,大葱蛋白及多糖成分对供试菌均无抑制效果.     

壳寡糖对番茄灰霉病菌的抑制作用

研究了壳寡糖对番茄灰霉病菌的抑制作用,分别测定在不同浓度梯度下灰霉病菌的菌落直径、产孢量、孢子萌发率,观察了壳寡糖对菌丝生长形态的影响。结果表明,壳寡糖的浓度越大对灰霉病菌的抑制作用越明显,1 500 mg/L的壳寡糖对菌丝生长的抑制率1 d时为100%,2 d为86.32%,5 d为81.95%,菌丝形态发生显著变化,菌丝直径明显增粗,菌隔增多,该浓度下对灰霉病菌的产孢抑制率达到83.82%,抑制孢子萌发率达52.97%。壳寡糖对灰霉病菌菌丝生长2 d的EC50为346.96 mg/L,对灰霉病菌产孢的EC50为521.96 mg/L,对孢子萌发的EC50为1 451.59 mg/L。     

宁夏地区20种植物丙酮提取物抑菌活性研究

采用生长速率法和孢子萌发法测定了20种植物丙酮提取物对番茄早疫病菌(Alternaria solani)、玉米大斑病菌(Exserohilumturcicum)的抑制效应。研究结果表明,在供试质量浓度为0.01 g/mL时,老瓜头、蛇果黄堇、小蓝雪花、苦豆子、苍耳、针叶短枝芸香等6种植物提取物对番茄早疫病菌菌丝生长抑制率大于60%,对番茄早疫病菌、玉米大斑病菌孢子萌发的抑制作用较强,抑制率均在80%以上,其中小蓝雪花提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制率为100%,对2种供试菌孢子萌发的抑制率分别为92.1%和95.3%。     

胡椒碱对番茄灰霉病菌抑制作用及其机理研究

为证明胡椒碱对番茄灰霉病菌的抑制作用并揭示胡椒碱对番茄灰霉病菌抑菌机理,观察不同质量浓度胡椒碱处理下番茄灰霉病菌的菌落直径、产孢量和孢子萌发率以及胡椒碱处理后对番茄灰霉病菌菌丝形态变化、番茄灰霉病菌可溶性蛋白含量、酶活性和细胞膜通透性的变化规律。结果表明:胡椒碱对番茄灰霉病菌有明显的抑制作用,当胡椒碱质量浓度为200 mg/L时,抑菌率可达80.6%,对番茄灰霉病菌产孢率和孢子萌发抑制率分别达到88.5%和88.8%,对菌体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)的抑制率分别为82.7%、69.1%和70.4%,对琥珀酸脱氢酶(SDH)和NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)抑制率分别为89.5%和94.9%;胡椒碱处理后番茄灰霉病菌可溶性蛋白含量低于对照组,细胞膜透性增强,番茄灰霉病菌菌丝变细、节间拉长、干瘪并坍塌。综上,胡椒碱可以有效抑制番茄灰霉病菌的生长,研究结果为新型植物源农药开发及番茄灰霉病防治提供了理论基础。     

人参茎叶总皂苷对腐皮镰刀菌的抑制作用及抑菌机理

采用HPLC法确定人参茎叶总皂苷中5种单体皂苷的含量;生长速率法测定人参茎叶总皂苷(TGSL)对腐皮镰刀菌菌丝生长的抑制作用;载玻片萌发法测定人参茎叶总皂苷水溶液对腐皮镰刀菌孢子萌发的抑制作用;测定人参茎叶总皂苷处理前后的腐皮镰刀菌电导率变化情况,进一步确定细胞膜透性变化情况;考马斯亮蓝G-250比色法测定腐皮镰刀菌可溶性蛋白质含量的影响;紫外吸收法测定吸光率的变化速度,确定菌体过氧化氢酶的活力。结果表明:人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rd、Rb1的含量为1.62%,0.66%,0.10%,1.23%,0.36%;当人参茎叶总皂苷质量浓度为10 mg/m L时,对腐皮镰刀菌菌丝生长抑制率为76.79%,EC50为3.530 2 mg/m L;对孢子萌发的抑制率达81.65%,EC50为3.037 7 mg/m L;人参茎叶总皂苷能引起菌丝细胞膜透性的变化,导致液体培养基电导率增加,菌丝体可溶性蛋白含量降低,过氧化氢酶活性下降;菌丝变细且节间拉长,生长稀疏,菌丝体胞内物质外渗,内含物变少,阻碍腐皮镰刀菌菌丝的生长。     

黄芩提取物对鱼类水霉病病原菌的抑制机制

探讨黄芩提取物对鱼类水霉病病原菌的抑制机制,以促进水霉菌植物源抑菌剂产品的研发利用。以中药黄芩为试验试材,检测水霉菌孢子形成、孢子萌发、菌丝生长量、菌丝总糖含量、菌丝蛋白质含量、氨基酸含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及过氧化氢酶(CAT)活性等指标,初步确定黄芩提取物对鱼类水霉病病原菌的抑制机制。结果表明,黄芩提取物对水霉菌孢子具有较强的抑制作用,在质量浓度为300～500 mg/L时水霉菌孢子萌发抑制率高达90%以上;黄芩提取物对水霉菌的菌丝生长具有较好的抑制作用;当质量浓度在400～500 mg/L时抑制率达到了85%以上;黄芩提取物对水霉菌丝总糖含量、蛋白质含量、氨基酸的含量存在一定影响,随处理质量浓度增加,影响效果逐渐增强,当处理质量浓度达1 000 mg/L时,相对于对照组各指标减少量均达5%以上。黄芩提取物质量浓度在100～500 mg/L时,SOD、CAT活性明显下降,相对于对照组500 mg/L时分别下降57.75%、89.90%,说明提取物可破坏菌丝体内抗氧化酶的活性,从而加快菌体的衰老而死亡。通过研究黄芩提取物对鱼类水霉病病原菌的抑制机制,以期为相应渔药产品的开发提供方向。     

丁香等3种中草药提取物抑制植物病原真菌的研究

以丁香、虎杖和百部的丙酮提取物为材料,测定了其对8种植物病原真菌的抑制活性。结果表明:在供试浓度为0.05 g/ml时,丁香提取物对所有供试菌的病原真菌菌丝生长抑制作用效果最好,抑制率均为100%;虎杖提取物抑菌活性次之,对6种供试菌抑制率均在70%以上,其中对苹果褐腐病菌表现出强烈的抑制作用,抑制率为100%,对小麦赤霉病菌和小麦纹枯病菌抑制率均在80%以上;百部提取物仅对小麦纹枯病菌表现出较好的抑制作用。在供试浓度为0.1 g/ml时,丁香提取物对杨树溃疡病菌孢子萌发抑制作用效果最好,抑制率为100%;虎杖提取物对孢子萌发抑制活性次之,抑制率为94%。丁香和虎杖提取物可作为植物源抗真菌剂进一步深入研究。     

细辛对番茄早疫病菌的抑制作用及其活性成分的分离

以番茄早疫病菌为供试植物病原菌,采用生物活性追踪法和活体盆栽试验法评价了细辛提取物的抑菌活性,并探索了细辛的杀菌活性成分。结果表明:细辛氯仿粗提取物在96和48 h对供试菌的菌丝生长和孢子萌发都有较强的抑制作用。其中对菌丝生长和孢子萌发的半效应浓度EC50分别为1.69和0.41 mg/mL。细辛氯仿粗提取物经萃取分离得到的石油醚、氯仿和甲醇组分中,石油醚组分对供试菌孢子萌发具有强抑制作用,处理48 h后抑制率达到100%;但处理96 h后对菌丝生长的抑制率仅有40%。氯仿组分对供试菌的菌丝生长和孢子萌发均具有较好的抑制作用,分别为72.27%和83.42%。对氯仿组分进行硅胶柱层析分离,得到4个高活性流分,在96 h对供试菌菌丝生长的抑制率达到85%以上。在盆栽试验中,4 mg/mL细辛氯仿提取物对番茄早疫病的保护和治疗作用达70%以上,与化学农药处理无显著差异。试验显示细辛对番茄早疫病菌具有较好的防治效果。     

17种植物提取物对荔枝霜疫霉菌的抑制作用

为寻找果树病害防治的植物源抑菌物质,以乙醇为溶剂,采用超声波辅助提取法获得17种植物的提取物,并用提取物对荔枝霜疫霉菌(Peronophythora litchii Chen ex Ko et al.)进行抑菌试验,结果显示,丁香(Syringa aramaticum)、黄连(Coptischinensis Franch)、细辛(Asarum sieboldii)提取物5 mg/mL浓度处理药后7 d抑菌率均为100%,1 mg/mL浓度处理抑菌率则分别为60.68%、51.88%、15.64%,黄柏(Cortex Phellodendri)、苦参(Sophora flavescens)、花椒(Pricklyash Peel)提取物5 mg/mL浓度处理药后7 d抑菌率均达60%以上;5 mg/mL浓度处理花椒、黄连、黄柏、细辛提取物对荔枝霜疫霉菌孢子囊萌发抑制率都在60%以上,而花椒的抑制率最高,达73.08%。不同植物提取物抑菌效果受温度和pH的影响明显。     

木醋液对玉米大斑病菌的抑制作用

为探索玉米大斑病的生物防治方法,分析了不同质量浓度木醋液对玉米大斑病菌菌丝生长、菌丝形态和分生孢子萌发的抑制作用。结果发现,当木醋液质量浓度为25. 25 mg/m L时,对玉米大斑病菌菌株11-07D菌丝生长的抑制率为100%,菌丝表现为无生长。质量浓度高于15. 15 mg/m L的木醋液处理后,菌丝分枝数和细胞内空洞数明显增加,少数菌丝出现畸形。木醋液质量浓度为10. 10 mg/m L时,病菌在液体培养基内的生长受到显著抑制,木醋液质量浓度超过15. 15 mg/m L时,液体培养生物量降低了93%以上。另外,试验还发现木醋液对玉米大斑病菌孢子萌发具有明显抑制作用,25. 25 mg/m L木醋液处理对分生孢子萌发的抑制率可达90. 4%。以上研究结果表明,木醋液有可能成为防治玉米大斑病的一种新型高效抑菌剂。