NaCl、光和温度胁迫对龙眼胚性愈伤组织GPX酶活性的影响

以龙眼胚性细胞系LC2为材料,初步研究了在NaCl、光和温度胁迫下龙眼胚性愈伤组织GPX酶活性的变化规律.试验结果表明:与对照相比,在盐胁迫下短期内GPX酶活性增加,随胁迫时间的延长,低盐胁迫下GPX酶活性先上升后下降,而高盐胁迫下GPX酶活性则呈下降趋势;白光、绿光处理下,随光强的不断加强,GPX活性均呈先上升后下降趋势,且在同样光强下,白光处理的GPX活性均高于绿光;龙眼EC的GPX活性在低温(高温)处理下,与对照相比,随温度不断降低(升高),GPX活性呈先升高后降低趋势.以上结果均表明,在一定逆境胁迫下,细胞内GPX可以起到应答外界刺激的作用,且活性呈规律表达,是植物在逆境胁迫下防御ROS伤害的主要标志之一.     

龙眼胚性愈伤组织的高频率体细胞胚胎发生

比较了龙眼不同类型胚性愈合伤组织，品种，蔗糖质量浓度，有机附加物，生长调节剂，光照度等因素对龙眼胚性愈组织体胚诱导的影响，结果表明，在优经的体胚发生条件下，选择适宜的胚性愈伤组织类型，可获得龙眼胚性愈伤组织的高频率体细胞胚胎发生，在低质量浓度蔗糖（≤３０ｇ．Ｌ＾－１）和黑暗条件下，松散型胚性愈伤组织的体胚分化频率为１００％，并且发生数量可达每克１万个左右。     

不同光质对龙眼胚性愈伤组织生长和细胞膜保护酶活性的影响

试验以龙眼胚性愈伤组织为材料,研究不同的光质处理对龙眼胚性愈伤组织生长和过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果表明,不同光质对生长有不同效应,蓝光对愈伤组织生长有促进作用,而白光则有抑制作用;在光照和黑暗2种培养条件下,过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性均有明显的变化.     

荔枝、龙眼胚性愈伤组织的细胞组织学观察

通过石蜡切片观察荔枝、龙眼胚性愈伤组织的结构和胚性细胞分裂生长的方式 .结果表明 :荔枝胚性愈伤组织中具有旺盛分裂能力和再生能力的胚性细胞主要分布在外缘 ,胚性愈伤组织的增殖生长为单细胞外起源 ;而龙眼胚性愈伤组织的胚性细胞大多处于内部 ,胚性愈伤组织的增殖生长为内起源 .还对荔枝、龙眼胚性愈伤组织应用于遗传转化等问题进行了探讨     

51份龙眼种质的胚性愈伤组织诱导及其离体保存

对福建龙眼的主要栽培品种、地方品种及特异株系共51份种质的幼胚进行培养,诱导胚性愈伤组织作为种质资源离体保存的材料,并进行限制生长保存试验.结果表明:MS+2 mg.L-12,4-D培养基适用于绝大部分品种的不同直径的龙眼幼胚胚性愈伤组织的诱导,平均诱导率为48.3%;直径2-4 mm的幼胚最适宜于胚性愈伤组织诱导.在添加1 mg.L-1活性炭的培养基上进行为期7-10 d的过渡培养,能减少直径<2 mm和直径>6 mm的幼胚因褐变导致的死亡,从而提高愈伤组织诱导率.龙眼胚性愈伤组织在常规继代培养中的周期为20 d左右,且品种间的差异较大.在MS+1 mg.L-12,4-D培养基中附加20 g.L-1甘露醇,于16℃低温下进行限制生长保存,可以使龙眼继代培养周期由原来的20 d延长至60 d.     

玻璃化法超低温保存龙眼胚性愈伤组织的初步探讨

采用玻璃化法对不同基因型的龙眼胚性愈伤组织超低温保存进行了初步探讨.将保存一定时间的胚性愈伤组织于常温下用60%玻璃化溶液(2PVS2)装载30 m in,再于0℃下用PVS2溶液平衡60 m in;换新鲜的PVS2溶液,迅速投入液氮中保存;48 h后化冻.结果表明,具有原胚分化的胚性愈伤组织保存后的存活率明显高于普通胚性愈伤组织;40℃温水浴、25℃左右室温和自来水冲洗等3种不同的化冻方式对龙眼胚性愈伤组织玻璃化超低温保存后的存活率具有同样的效果.     

限制生长保存龙眼胚性愈伤组织体胚发生过程的RAPD分析

以红核子龙眼不同保存时间(5个月、3 a、13 a)的不同发育阶段体胚为材料,对限制生长保存后的胚性愈伤组织(EC)的体胚发生过程进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析;筛选10条随机引物,对EC不同发育阶段体胚的基因组DNA进行扩增.结果表明:龙眼EC不同发育阶段体胚的RAPD谱带存在一定的差异,但不同保存时间的EC在体胚发生过程中的相对变异率都保持在比较小的变异范围内,小于5.1%.     

渗透胁迫对龙眼胚性愈伤组织SOD活性的影响

以龙眼胚性愈伤组织LC2细胞系为材料,研究聚乙二醇（PEG）、甘露醇和蔗糖等渗透胁迫对龙眼胚性愈伤组织SOD酶活性的影响．结果表明：与对照相比,随着PEG胁迫强度的增加,SOD活性在轻度（10g·L-1聚乙二醇）、中度（20g·L-1聚乙二醇）胁迫下上升,严重（30g·L-1聚乙二醇）胁迫下呈快速下降趋势;随着甘露醇浓度的提高,SOD活性不断升高,且一直维持在一个较高的水平上,直到浓度达到100g·L-1时才开始呈现缓慢下降的趋势;随着蔗糖浓度的升高,SOD活性不断升高,直到蔗糖浓度为70g·L-1时开始下降,70—90g·L-1之间的SOD活性下降缓慢．甘露醇和蔗糖处理比聚乙二醇处理的SOD活性高,下降的速度也较缓慢,说明适当高浓度的甘露醇和蔗糖,可以有效提高植物细胞活力,延缓细胞衰老．     

龙眼胚性愈伤组织长期继代培养及其染色体数目变异

从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织，在继代培养基上已培养6a以上，所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胸胚胎发生能力，经细胞学检查，其中个别愈伤组织系的部分愈伤才发现有2n=3x=45或2n=4x=60，等染色体数目的变异细胞，这对于离体筛选龙眼细胞突变体很有价值。     

龙眼胚性愈伤组织继代过程中的衰老与死亡规律初步研究

在常规离体培养中，龙眼胚性愈伤组织继代周期短，需每隔20d继代一次。这样短的周期对离体种质保存来说过于频繁，为避免增加愈伤组织被污染的机会及快速生长分裂带来的高变异率，本研究试图通过对龙眼胚性愈伤组织生长规律和继代过程中生理活性变化的研究，找出能够延缓龙眼胚性愈伤组织生长并且能够延长继代周期，保持愈伤组织遗传稳定性的方法，以达到能够长期保存龙眼胚性愈伤组织的目的。     

龙眼胚性愈伤组织长期继代培养及其染色体数目变异

从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织 ,在继代培养基上已培养 6 a以上 ,所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胞胚胎发生能力 .经细胞学检查 ,其中个别愈伤组织系的部分愈伤组织团发现有2 n=3x=4 5,或 2 n=4 x=6 0等染色体数目的变异细胞 ,这对于离体筛选龙眼细胞突变体很有价值     

黄秋葵愈伤组织的产生及其切片观察

以黄秋葵(Abelmoschus manihot)植株的叶片、顶芽及无菌苗的子叶、胚轴和胚根为外植体进行离体培养,诱导产生了2种不同形态结构的愈伤组织:非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织。通过观察,2种不同愈伤组织在细胞结构上有明显的差异。非胚性愈伤组织结构松软、灰褐色,生长缓慢且容易死亡;组织切片观察细胞大、排列无规律且间隔大。胚性愈伤组织结构紧密、呈黄白色或者淡绿色;组织切片观察细胞小且排列紧密;容易形成胚状体,从而进一步发展成为完整植株。     

龙眼胚性愈伤组织微管蛋白基因β-tubulin克隆及序列分析

以龙眼松散型胚性愈伤组织为材料,利用RT．PCR法首次克隆2条含有完整开放阅读框的β-tubulin基因的cDNA序列,命名为dl-β-tubu／in3和dl-β-tubulin6,长度分别为1350和1351bp,均编码含有446个氨基酸残基的蛋白质．生物信息学分析表明,该蛋白属于亲水性蛋白,无跨膜结构域;与毛果杨、大豆、水稻、玉米和拟南芥具有较高的同源性;含有微管蛋白所特有的2个保守结构域NNWAKGH和RKAFLHWYTGEGMDEMEnE,以及1个GTP结合位点GGGTGSG．推测β-tubulin通过不同的磷酸化方式改变酶活性及蛋白构象,参与龙眼体胚发生过程的调控．     

2,4-D对石刁柏愈伤组织诱导的影响

以石刁柏嫩茎为材料,研究了2,4-D对其初始愈伤组织诱导和胚性愈伤组织发生的影响。结果表明:仅仅只有2,4-D不能诱导石刁柏初始愈伤组织的发生;胚性愈伤组织的诱导需要高浓度的2,4-D,其最佳激素组合为2,4-D 10 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

磁处理对大蒜胚性愈伤组织生长和体胚发生的影响

以大蒜为试材，研究了磁处理对其胚性愈伤组织生长和发生的效应。结果表明：在0．23T磁感应强度下，0－20min之间的磁处理对大蒜胚性愈伤组织的生长和增殖影响不明显，磁处理时间超过20min后，明显对愈伤组织的生长和增殖产生抑制或破坏作用。5min磁处理能显著地促进大蒜体胚的发生和发育，在10－80min内，随磁处理时间延长，平均每克鲜物质体胚数呈缓慢递增趋势，5－10min磁处理的体胚发育状态更趋成熟。     

芦苇胚性愈伤组织生长研究

以MS为基本培养基,添加不同量的蔗糖、琼脂、2,4-D、维生素B、肌醇、酵母粉等,对芦苇胚性愈伤组织的生长条件进行了研究。结果表明,要使芦苇愈伤组织生长良好,培养基中必须含有维生素B类和肌醇。此外,培养基还应具有40 g/L的蔗糖和较低的pH值。而1 mg/L的2,4-D对初始诱导愈伤组织的效果为最佳。     

油茶胚性愈伤组织诱导研究

该研究使用正交设计法,以油茶幼胚作为外植体,研究不同品种、不同基本培养基、不同激素种类及浓度、不同培养条件等因素的组合对油茶愈伤组织诱导的影响。结果表明,油茶胚性愈伤组织诱导最佳配方为：MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L TDZ,诱导率达到100%;单因素对于愈伤组织诱导率具有显著影响为品种>培养基>NAA>TDZ,其他因素对愈伤组织的诱导无显著性影响。     

真菌诱导子对黄芪愈伤组织生长和代谢的影响

以黄芪愈伤组织为试验材料,研究了不同种类真菌及同种真菌的不同浓度、不同添加时间和作用时间对黄芪愈伤组织生长和皂苷含量的影响.用真菌提取物对黄芪愈伤组织进行诱导处理后,检测黄芪愈伤组织的生长量和皂苷含量以及代谢过程中POD、PAL、PPO、CAT的酶活性和NO、MDA、H2O2的含量.结果表明:80μg/mL的散子囊菌作...     

小麦胚性愈伤组织诱导研究

研究了不同基因型、低温处理时间、激素和蔗糖浓度及生根条件等对小麦幼胚培养再分化能力的影响。结果表明:在该体系优化的条件下,诱导胚性愈伤组织的频率为80.88 %,胚性愈伤组织分化的频率为97.30 %,分化芽的生根率为90.00 % 以上;筛选出栽培品种(系)6-90可以作为遗传转化的良好受体。