用TRAP PCR ELISA及TRAP PCR PAGE测定鼻咽癌端粒酶活性的比较

目的：比较ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ及ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＰＡＧＥ检测鼻咽癌端 酶的活性。方法：分别采用ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ及ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＰＡＧＥ检测了３８例鼻咽癌（ＮＰＣ）、１５例癌旁组织、１９例慢性鼻咽炎和鼻咽癌ＨＮＥ１细胞株、其它２种癌细胞株及３种正常细胞的端粒酶表达,并探讨了在不同数量的ＨＮＥ１细胞中端粒酶表达的灵敏度及ＨＮＥ１细胞株、５例ＮＰＣ活检组织经热灭活后端粒酶检测的     

鼻咽癌与EB病毒关系的研究

鼻咽癌 (ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ,ＮＰＣ)是鼻咽上皮来源的恶性肿瘤。它的病因是多方面的 ,目前仍不是非常清楚 ,但自从 1966年Ｏｌｄ等[1] 应用免疫扩散试验首次发现Ｅｐｓｔｅｉｎ -Ｂａｒｒ病毒 (ＥＢＶ)和ＮＰＣ有血清学关系以来 ,各国学者对此进行了大量研究 ,2 0世纪 70年代我国也开展了这方面的工作。现在各国的研究已从ＮＰＣ患者ＥＢＶ的血清学检查逐步进入分子生物学水平。有关ＮＰＣ与ＥＢＶ关系的研究现况主要有如下几方面。1　ＮＰＣ与ＥＢＶ的血清学研究ＮＰＣ在世界各地发病率差异很大 ,高发区为中…     

EB病毒BHRF1反义寡核苷酸片段诱导鼻咽癌SUNE—1细胞株的凋亡

观察ＥＢ病毒ＢＨＲＦ１反义寡核苷酸片段对鼻咽癌ＳＵＮＥ－１细胞侏增殖的影响。方法；ＰＣＲ，＾３Ｈ－ＴｄＲ的掺入法及电泳等。结果：ＰＣＲ从ＳＵＮＥ－１细胞ＤＮＡ中扩增了ＥＢ病毒的４种全基因片段；适当浓度ＢＨＲＦ１反义寡核苷酸片段能引起无血清培养的ＳＵＮＥ－１细胞株增殖受抑制；透射电镜及琼脂糖凝胶电泳检测结果发现与ＳＵＮＥ－１细胞发生凋亡有关。     

人鼻咽癌细胞株和组织中Kappa样蛋白的检测

目的：为进一步研究免疫球蛋白Ｋａｐｐａ基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞中的表达,对ＮＰＣ细胞株ＣＮＥ２,ＮＰＣ活检标本及石蜡切片中的Ｋａｐａ样蛋白进行了检测。方法：从ＮＰＣ细胞株、ＮＰＣ活检标本得到蛋白抽提物,用Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹法进行纱－抗生物素蛋白与生物素－辣根过氧物酶系统放大,然后再用ＥＣＬ化学发光试剂盒进行检测,ＮＰＣ石蜡切片用免疫组化进行检测。结果：ＮＰＣ株ＣＮＥ２中检测到和３１Ｋｄ的Ｋａ     

EB病毒原位杂交的表达与鼻咽癌组织学类型的关系

为探讨ＥＢ病毒原位杂交的表达与鼻咽癌各组织学类型的关系，用ＥＢ病毒原位杂交方法对ＮＰＣ６９例、ＮＰＣ淋巴结转移１１例、非ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１０例进行研究，结果：角化型鳞状细胞癌１２例全部阴性，非角化型鳞状细胞癌５４例全部阳性，腺癌３ 例阴性。     

人成纤维细胞转染HPV16型早期蛋白基因后端粒酶的活性表达

用已构建的含有ＨＰＶ１６的早期蛋白的质粒载体；pＭＥ６ＳＮ、pＭＩ７ＳＮ和pＭＥ６ Ｅ７ＳＮ和pＮＥ６Ｅ７ＳＮ经脂质体介导，转入正常的人成纤维细胞。经Ｇ４１８选择筛 选及监定后证实，Ｅ６、Ｅ７、Ｅ６Ｅ７转化的细胞细胞寿命延长；Ｅ６、Ｅ６Ｅ７表达的细胞中有端粒酶的表达，Ｅ７表达的细胞中未能检测到端粒酶的表达。提示端粒酶的表达是细胞转化后原一个后续事件。     

鼻咽癌细胞凋亡与细胞增殖的原位观察

应用原位末端标记（ＩＳＥＬ）ＤＮＡ 片断技术和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 免疫组化染色方法,观察鼻咽癌（ＮＰＣ） 及其癌旁粘膜上皮的细胞凋亡和细胞增殖。结果显示：①ＮＰＣ 中可见片状分布的ＩＳＥＬ 阳性细胞,其形态不表现凋亡特征,以泡状核细胞癌更常见。②ＮＰＣ 的ＩＳＥＬ 阳性率及ＩＳＥＬ 染色强度指数（ＳＩＩ） 高于癌旁粘膜（ Ｐ ＜ ０ ．０５） ;ＮＰＣ 的ＩＳＥＬ ＳＩＩ 与ＰＣＮＡ ＳＩＩ 呈正相关（ ｒ ＝ ０ ．３４１ , Ｐ ＜ ０ ．０５） ,但其ＩＳＥＬ 阳性率及ＳＩＩ均低于ＰＣＮＡ（ Ｐ ＜ ０ ．０１） 。③泡状核细胞癌ＩＳＥＬＳＩＩ和ＰＣＮＡＳＩＩ均高于低分化鳞癌（ 分别为Ｐ ＜ ０ ．０１ , Ｐ ＜ ０ ．０５） ,前者５ 年生存率相对较高。提示ＮＰＣ 细胞增殖与细胞凋亡有关。     

协同刺激分子及其抗体在实验性变态反应性神经炎中的作用

实验性变态反应神经炎(ＥＡＮ)是格林巴利综合征(ＧＢＳ)的动物模型。Ｔ细胞的活化和克隆扩增导致细胞和体液免疫异常在ＥＡＮ及ＧＢＳ中起重要作用[1]。Ｔ细胞活化需要的两个信号为:(1)由Ｔ细胞表面的ＴＣＲ/ＣＤ3复合物与抗原提呈细胞(ＡＰＣ)上的组织相容性抗原(ＭＨＣ)ＩＩ类抗原相互作用,赋予免疫应答的特异性;(2)由Ｔ细胞上的协同刺激分子与ＡＰＣ表面的配体结合所提供[2]。已发现,阻断ＣＤ28/ＣＴＬＡ4:Ｂ7的结合后可预防实验性变态反应性脑脊髓炎(ＥＡＥ)的发生或减轻其发病程度[3]。本研究中我们观察了ＣＤ28/ＣＴＬＡ4:Ｂ7及ＣＴ…     

从“治未病”探讨2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化的防治

[目的]从中医“治未病”思想方面综述了糖尿病患者颈动脉粥样硬化的防治,强调早期防治的重要性。[方法]检索近年来2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化危险因素的相关研究,全面总结传统危险因素以及最新发现的危险因素。贯彻中医“治未病”思想,从“未病先防”和“既病防变”两大方面探讨糖尿病患者颈动脉粥样硬化的防治。[结果]对尚未发现颈动脉粥样硬化的糖尿病患者,早期对危险因素的控制,并及时给予干预,能预防糖尿病血管病变的发生与发展;对已有颈动脉粥样硬化的糖尿病患者,进行积极治疗,能降低脑卒中、心肌梗死等危重病的发生率。[结论]对2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化的危险因素进行早期控制及干预,贯彻“未病先防”和“既病防变”的思想,能有效的减少糖尿病血管病变的发生与发展,提高患者的生活质量,但早期诊断的技术及指标有待更进一步的研究。     

鼻咽癌中抗凋亡基因bcl-2的表达及其与EB病毒的关系

为了探讨鼻咽癌（ＮＰＣ）中抗凋亡基因ｂｃｌ－２的表达及其与ＥＢ病毒的关系。用免疫组化方法对曾用ＥＢ病毒探针进行原位杂交的ＮＰＣ标本再进行ｂｃｌ－２检测。结果：非角化型鳞状细胞癌５４例，阳性５１例，阴性３例；角化型鳞状细胞癌１２例，阳性３例，阴性９例；腺癌３例，阳性１例，阴性２例；ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１１例，阳性９例，阴性２例；非ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１０例，阳性２例，阴性８例。ＮＰＣ各组织学类型中ｂｃｌ－２的表达与ＥＢ病毒原位杂交表达的结果相似。提示ｂｃｌ－２基因表达与ＮＰＣ组织学类型关系密切，非角化型大部分为阳性表达，角化型大部分为阴性表达，并提示ＥＢ病毒在ＮＰＣ的发生机制上可能与抑制细胞凋亡的基因有协同作用。     

EB病毒BHRF1反义寡核苷酸片段诱导鼻咽癌SUNE-1细胞株的凋亡

目的：观察ＥＢ病毒ＢＨＲＦ１反义寡核苷酸片段对鼻咽癌ＳＵＮＥ１细胞株增殖的影响。方法：ＰＣＲ、３ＨＴｄＲ的掺入法及电泳等。结果：ＰＣＲ从ＳＵＮＥ１细胞ＤＮＡ中扩增出ＥＢ病毒的４种（ＢＨＲＦ１、ＤＮＡ酶、胸苷激酶及核抗原１）全基因片段；适当浓度ＢＨＲＦ１反义寡核苷酸片段能引起无血清培养的ＳＵＮＥ１细胞株增殖受抑制；透射电镜及琼脂糖凝胶电泳检测结果发现与ＳＵＮＥ１细胞发生凋亡有关。结论：适当浓度ＢＨＲＦ１反义寡核苷酸片段能抑制无血清培养的ＳＵＮＥ１细胞株的增殖。     

放射性脑病45例临床有关问题探讨

鼻咽癌 (ＮＰＣ)是一种恶性肿瘤 ,我国广东省为高发区 ,发病率达 8/ 10万～ 10 / 10万 ,素有“广东瘤”之称。放射治疗是鼻咽癌的首选治疗方法 ,以放疗为主的综合治疗使鼻咽癌患者的五年生存率 (4 9.5 % )明显提高 ,但随着患者寿命的延长及ＣＴ、ＭＲＩ等影像技术的进步 ,ＮＰＣ放疗后放射性脑病 (ＲＥＰ)的发病率 (1.2 5 %～ 10 % )也随之提高。 1997年 4月～ 2 0 0 0年 4月我院收治 45例ＮＰＣ放疗后ＲＥＰ患者 ,笔者就其临床资料进行分析与探讨 ,以进一步加深对该病的认识。临床资料　　 1.一般资料　本组 45例 ,男 38例 ,女 7例 ;年龄 3…     

鼻咽癌肿瘤细胞增殖与凋亡关系

目的 了解鼻咽癌肿瘤细胞增殖与产凋亡的关系及ｂｃｌ－２表达在此过程中的作用。方法 ６５例鼻咽癌活检组织及１５例癌旁组织用免疫组化技术检测ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ;ＨＥ染色中作核分裂计数,并将后两者合并为增殖指数;用原位末端标记法（ＩＳＥＬ法）显示４４例鼻咽及１５例癌旁组织中的细胞凋亡。结果 ①鼻咽癌ＰＣＮＡ、核分裂像数、凋亡细胞数均高于癌旁上皮组织,但与组织分型无关;增殖指数与凋亡细胞数呈正相关。②ｂ     

鼻咽癌中抗凋亡基因hcl—2的表达及其与EB病毒的关系

为了探讨鼻咽癌中抗凋亡基因ｂｃｌ－２的表达及其与ＥＢ病毒的关系。用免疫组化方法对曾用ＥＢ病毒探针进行了原位杂交的ＮＰＣ标本再进行ｂｃｌ－２检测。结果：非角化型鳞状细胞癌５４例，阳性５１例，阴性３例；角化型鳞状细胞癌１２例，阳性３例，阴性９例；腺癌３例，阳性１例，阴性２例；ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１１例，阳性９例，阴性２例，非ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１０例，阳性２例，阴性８例。     

鼻咽癌患者SCE与G带定位关系分析

采用在染色体标本上同时显示姊妹染色单体互换（ＳＣＥ）及Ｇ带带型的方法，对２０例鼻咽癌（ＮＰＣ）患者ＳＣＥ频率、细胞动力学、ＳＣＥ交换点的扮布以及高发交换点与脆性部位、原癌基因的关系进行了分析。结果表明：ＮＰＣ患者的ＳＣＥ频率显著高于对照组（Ｐ〈０．０１），而细胞增殖率指数在患者和健康人间无明显差异（Ｐ〉０．０５）。ＮＰＣ患者中的１，２，３，４，５，７，８，１２，１３，１４，１６，１７号染色体的交换     

鼻咽癌VEGF表达与癌生物学行为相关性的研究

目的：探讨鼻咽癌（ＮＰＣ）ＶＥＧＦ表达与癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学ＳＰ法检测了６５例ＮＰＣ,１５例鼻咽良性肿瘤、１５例无瘤鼻咽部石蜡标本组织血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）表达,鼻咽癌中转移组４１例,非转移组２４例。结果：ＮＰＣ组织ＶＥＧＦ表达显著高于鼻咽良性肿瘤组织中的表达,转移组又较非转移组的表达高,差不有显著性;ＶＥＧＦ表达与临床分期的关．结论：ＮＰＣ组织中ＶＥＧＦ表达与癌生     

鼻咽癌细胞中MDM2基因扩增与表达的研究

应用斑点杂交和半定量逆转录－多聚酶链反应技术对３２例鼻咽癌（ＮＰＣ）标本,１０例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）标本,ＮＰＣ细胞株进行ＭＤＭ２基因扩增与表达的检测。结果显示;１例ＮＰＣ有ＭＤＭ２基因的扩增,ＮＰＣ细胞株ＨＯＮＥ１和１０例ＮＰＣ有ＭＤＭ２ ｍＲＮＡ高表达,ＣＩＮＥ无ＭＤＭ２基因的扩增及ｍＲＮＡ的高表达。     

鼻咽癌患者血清肿瘤坏死因子的初步探讨

采用双抗夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测鼻咽癌患者（ＮＰＣ）６２例及正常对照组３０例的血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）水平。同时用免疫酶法测定ＮＰＣ患者血清ＥＢＶＣＡ－ＩｇＡ抗体几何平均滴度。结果发现ＮＰＣ患者血清ＴＮＦ水平明显降低;愈近晚期,下降愈显著;且与ＥＢＶＣＡ－ＩｇＡ滴度呈负相关。分析表明：鼻咽癌的发生发展可能与机体的抗肿瘤免疫功能降低有关。测定血清ＴＮＦ水平,对鼻咽癌的辅助诊断和预后估计有参考意义。     

鼻咽癌肿瘤细胞增殖与凋亡关系及其分子机制的研究

目的了解鼻咽癌肿瘤细胞增殖与凋亡的关系及ｂｃｌ２表达在发病机制中的作用。方法１５例癌旁组织,６５例鼻咽癌用免疫组化技术标记ｂｃｌ２、ＰＣＮＡ,ＨＥ染色中作核分裂像计数,并将后两者合并为增殖指数;用ＩＳＥＬ法显示４４例鼻咽癌及１５例癌旁组织中的细胞凋亡。结果①鼻咽癌ＰＣＮＡ、核分裂像、凋亡细胞数均显著高于癌旁组织,但均与组织分型无关。增殖指数与凋亡细胞数呈正相关。②ｂｃｌ２在鼻咽癌中高表达,与组织分型有关,与凋亡细胞数呈负相关。结论①鼻咽癌肿瘤细胞具有高水平增殖的同时也具有高水平的凋亡,其肿瘤本身是高水平基础上增殖与凋亡失衡的结果。②ｂｃｌ２不是调控肿瘤细胞凋亡的唯一因素,但其抑制细胞凋亡的功能在鼻咽癌发病机制中有重要作用。     

鼻咽癌端粒酶活性研究进展

多年以来,许多学者一直认为,癌症是在细胞凋亡调节机制的控制之下。但近年研究发现有可能改变这一观点,即细胞凋亡主要是受到细胞染色体两端的重复序列端粒长度的控制,而这个端粒是由端粒酶调控的。因此,端粒、端粒酶与肿瘤有密切相关性,并有学者[1]提出利用抑制端粒酶治疗肿瘤,端粒酶已成为当今肿瘤防治领域最受重视的新靶点之一。 本文将就端粒、端粒酶的结构、功能、活性调节以及影响鼻咽癌端粒酶活性调节因素作一简要综述。