金银花黄酮对过氧化氢诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用

探讨金银花黄酮对RAW264.7巨噬细胞抗氧化活性的影响。通过过氧化氢诱导RAW264.7细胞损伤,建立细胞氧化损伤模型,研究金银花黄酮低、中、高剂量组(62.5,125,250 mg/mL)对损伤细胞的保护作用。研究结果表明:质量浓度62.5～250 mg/mL范围的金银花黄酮可显著促进RAW264.7细胞的增殖(P0.05)。金银花黄酮各剂量组显著提高了细胞及细胞培养液中总抗氧化能力(P0.05),显著提高了SOD、GSH-Px、CAT活性及GSH含量(P0.05);显著降低了细胞及细胞培养液中MDA含量(P0.05);显著降低了细胞中LDH活性并提高了细胞培养液中LDH活性(P0.05)。金银花黄酮促进RAW264.7细胞的增殖,并且对过氧化氢诱导的RAW264.7细胞损伤有良好的保护作用,存在剂量依赖效应。本研究为金银花功能性食品及保健品的开发提供理论依据。     

牡丹花蕊黄酮对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用

目的：研究牡丹花蕊黄酮对H2O2诱导损伤的RAW264.7巨噬细胞的保护作用。方法：实验分为空白组、H2O2损伤组、VC对照组和牡丹花蕊黄酮低、中、高剂量组。应用H2O2建立RAW264.7巨噬细胞氧化损伤模型,噻唑蓝法测定细胞存活率,试剂盒法测定细胞和细胞培养液中谷胱甘肽和丙二醛含量及过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活力。结果：牡丹花蕊黄酮的质量浓度在10～30 μg/mL范围内时,可显著促进RAW264.7巨噬细胞的增殖（P＜0.05）。与H2O2损伤组相比,牡丹花蕊黄酮各剂量组能够提高细胞及细胞培养液中总抗氧化能力,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物酶、过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽含量,降低细胞及细胞培养液中丙二醛含量,提高细胞内乳酸脱氢酶的水平。结论：牡丹花蕊黄酮可以促进RAW264.7巨噬细胞的增殖,提高H2O2损伤的RAW264.7巨噬细胞的抗氧化能力,且存在剂量依赖效应。     

文冠果叶黄酮对巨噬细胞RAW264.7细胞因子及TLR2受体的影响

通过四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法分析文冠果叶黄酮(XLF)对巨噬细胞RAW 264.7增殖活力的影响,酶联免疫吸附测定法检测巨噬细胞RAW 264.7分泌的细胞因子含量;通过XLF处理Toll样受体2(TLR2)抗体作用的巨噬细胞,研究TLR2受体对该细胞因子的介导作用。结果表明：当XLF质量浓度为320μg/mL时,巨噬细胞RAW 264.7分泌的NO、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和肿瘤坏死因子-β(TNF-β)细胞因子最多,且与空白对照差异极显著,但都小于脂多糖(LPS);且与未加入TLR2抗体相比,加入了TLR2抗体的巨噬细胞减少了各细胞因子的分泌,且差异均极显著。XLF可促进巨噬细胞RAW 264.7的增殖及细胞因子的分泌,并且可能通过TLR2受体介导。     

仿刺参精、卵多肽体外抗氧化及对H2O2诱导巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的 为研究仿刺参精、卵多肽体外抗氧化及对H₂O₂诱导巨噬细胞氧化损伤的保护作用。方法 采用切向流超滤法对多肽进行分级制备,通过测定清除1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O_2^-.)的能力来评价体外抗氧化活性,并对多肽的相对分子质量(Mr)、氨基酸(AA)组成及氧化稳定性进行检测分析,通过构建氧化损伤细胞模型,考察多肽对H₂O₂诱导RAW 264.7巨噬细胞氧化损伤的保护作用。结果 仿刺参精、卵多肽均具有较强的清除DPPH.、.OH和O_2^-.能力,并且在一定范围内呈现量效关系,Mr<1×10^₃ Da的多肽AJS1和AJE1抗氧化活性表现更强,两者Mr 95.56%和91.89%在1×10^₃ Da以内,疏水性AA和酸性AA比例均较高,并具有极佳的耐盐性和热稳定性,但在贮存和加工过程中仍要注意过酸环境和金属离子对氧化稳定性的影响。所有多肽组对巨噬细胞不存在毒性影响,并且多肽质量浓度为200、400 μg/mL时均对H₂O₂损伤的RAW 264.7巨噬细胞体现出显著的保护作用(P<0.05)。结论 仿刺参精、卵多肽具有良好的体外抗氧化和对氧化损伤细胞的保护作用,具有开发为功能性食品、医药和化妆品等的潜力。     

紫薯花青素体外抗氧化及对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究紫薯花青素的体外抗氧化作用,建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,初步评价紫薯花青素的抗氧化应激作用。方法：紫薯干粉经过提取、纯化制得紫薯花青素干粉,分别测定紫薯花青素的总还原力、对羟自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2－•）的清除能力以及对大鼠红细胞溶血的保护作用。建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法检测不同质量浓度紫薯花青素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果：紫薯花青素的还原力和VC基本相当;紫薯花青素对·OH有很好的清除效果,在实验浓度范围内有明显的剂量-效应关系;随紫薯花青素浓度的升高,对O2－•的清除作用增强,呈现良好的量-效关系,单位浓度的紫薯花青素对O2－•的清除作用比2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（butylated hydroxytoluene,BHT）效果好。不同质量浓度的紫薯花青素均可抑制H2O2诱导的大鼠红细胞溶血,且随着紫薯花青素质量浓度的升高,大鼠红细胞的溶血度降低,呈现良好的量-效关系。H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤模型中,50～1 600 μg/mL的紫薯花青素均能够抑制H2O2引起的HepG2细胞凋亡,当紫薯花青素质量浓度达到800 μg/mL时,HepG2细胞存活率为（88.03±7.48）%。结论：紫薯花青素具有良好的体外抗氧化作用,并对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤具有明显的保护作用,研究初步揭示了紫薯花青素具有体外抗氧化作用。     

绿豆寡肽对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用

目的:将绿豆寡肽(MBPs)用于脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7的炎症反应中,观察其对炎症是否有抑制作用。方法:用LPS构建细胞炎症模型,采用WST-1法检测细胞增殖能力,中性红法检测细胞吞噬能力,试剂盒法检测巨噬细胞髓过氧化物酶(MPO)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)含量,ELISA法检测巨噬细胞细胞因子TNF-α、白介素-1α(IL-1α)、白介素-6(IL-6)的分泌量。结果:MBPs能显著缓解LPS对巨噬细胞增殖的抑制作用并下调其吞噬能力(P0.05);MBPs能显著改善LPS诱导巨噬细胞MPO、LDH、GSH的水平(P0.05);MBPs能显著抑制促炎性细胞因子TNF-αIL-1α、IL-6水平的上升。结论:MBPs通过调节巨噬细胞趋化吞噬能力、胞内酶解消化和降低促炎性细胞因子的水平达到缓解LPS诱导巨噬细胞炎症的作用,且呈现量效关系,具有一定的抗炎活性。     

体外评估乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响

该研究以商业菌株鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）LGG为阳性对照菌,体外评估实验室保藏的5株乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7细胞活性、吞噬活性及免疫活性分子NO、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与白细胞介素-10（IL-10）分泌水平的影响,以期从中筛选出具良好免疫调节作用的菌株。结果表明,鼠李糖乳杆菌260具有更优的免疫调节作用,在特定乳杆菌活菌浓度时,能显著提高巨噬细胞RAW264.7的细胞活性、吞噬活性及NO、TNF-α和IL-10的分泌水平（P＜0.05）。最高细胞增殖率为196.62%;最低乳酸脱氢酶（LDH）释放量为554.36 U/100 mL;最高吞噬活性为136.86%;最高NO分泌量为5.70 μmol/L;最高IL-10分泌量为15.56 pg/mL,最高TNF-α分泌量为50.98 pg/mL。     

鹿胎肽对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用

本实验从鹿胎中提取鹿胎肽（DFP）,通过体外实验研究其对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。采用噻唑蓝（MTT）实验检测超滤组分各肽段的增殖活性,筛选增殖活性高的组分。选用中性红吞噬实验、酶联免疫吸附检测法测定DFP对RAW264.7细胞吞噬指数、一氧化氮（NO）浓度及细胞因子如白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6和肿瘤坏死因子子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的分泌能力,同时还研究了DFP对巨噬细胞各周期分布的影响。结果表明,分子质量小于1 kDa的DFP-5对巨噬细胞RAW264.7作用后,可显著（P<0.05）提高巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、NO释放量以及细胞因子的分泌水平,并且在DFP-5质量浓度为25 μg/mL时效果最好。细胞周期结果表明,DFP-5能够促进RAW264.7细胞的生长,且主要作用在G0/G1期。以上结果表明,鹿胎肽具有增强免疫能力的潜在作用。     

混合乳杆菌对脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞的抗炎作用

利用细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞形成炎症模型,评价混合乳杆菌对RAW264.7细胞的抗炎效果.在LPS刺激的RAW264.7细胞培养基中,添加混合乳杆菌,分析一氧化氮(Nitric oxide,NO)、前列腺素E2(PGE2)、白介素(Interleukin,I...     

生姜油树脂对过氧化氢引起RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用

目的:研究生姜油树脂对过氧化氢引起的RAW264.7巨噬细胞损伤的影响。方法:以生姜油树脂为研究对象,建立RAW264.7细胞的过氧化氢损伤模型,测定质量浓度分别为1、3、5μg/mL的生姜油树脂联合过氧化氢对RAW264.7细胞和细胞培养液中丙二醛、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶以及谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化指标的影响。结果:生姜油树脂各剂量组均能显著缓解过氧化氢引起的RAW264.7细胞的损伤,降低细胞及细胞培养液内的丙二醛含量,提高谷胱甘肽含量以及超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,其中5μg/mL生姜油树脂对过氧化氢引起的细胞损伤的保护作用效果最好。结论:生姜油树脂对过氧化氢引起的RAW264.7细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能是生姜油树脂通过调节细胞氧化还原系统,提高抗氧化能力,有效清除自由基的产生,从而对细胞的氧化性损伤起保护作用。     

响应面试验优化超声辅助提取金银花叶黄酮工艺及其抗氧化活性

为提高金银花叶中黄酮类化合物的提取率,在乙醇体积分数、提取温度、液料比和超声功率4 个单因素试验的基础上,通过二次通用旋转组合设计试验优化金银花叶黄酮的超声辅助提取工艺条件,并对其体外抗氧化活性进行研究。结果表明,在乙醇体积分数60%、液料比65∶1（mL/g）、提取温度46 ℃、超声功率250 W的条件下金银花叶黄酮提取率最高,可达15.67%,与模型预测值相符。抗氧化实验结果表明,金银花叶黄酮具有较强的抗氧化能力,其清除超氧阴离子自由基的能力与作用时间呈反比,与提取液质量浓度呈正比;清除羟自由基的IC50值为0.11 mg/mL,是对照品的34 倍。     

金银花叶提取物的抑菌效果研究

对金银花叶提取物的抗菌作用进行了初步研究,结果表明:金银花叶提取液对供试的几种主要危害食品卫生、安全和对临床医学等具有重要影响的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、青霉、黑曲霉、黄曲霉和酿酒酵母等均有一定抑制作用,金银花叶中的黄酮类提取物对各敏感供试菌的最低抑菌浓度分别是125、62.5、250、1000、250、62.5、250和250μg/g;金银花叶中的绿原酸类提取物对各敏感供试菌的最低抑菌浓度分别是250、250、500、2000、500、125、500和500μg/g。     

减压-超声辅助醇法提取薇菜黄酮及其对抗氧化活性的影响

为确定减压-超声波辅助醇提法提取薇菜黄酮的最佳工艺条件,以黄酮提取量为指标,采用响应面法对主要工艺参数进行优化。方差分析结果表明:回归模型较好地反应了薇菜黄酮提取量与料液比、乙醇体积分数和超声温度的关系;最佳工艺条件为:料液比1:60,乙醇体积分数49.97%,超声温度70.19℃,超声时间70 min,超声功率300 W,提取压力0.08~-0.1 MPa。此条件下薇菜黄酮提取量为(118.924±1.950)mg/g。回归模型的失拟值不显著,说明该回归模型模拟较好。通过体外抗氧化试验表明:减压-超声法和常压超声法提取黄酮类物质对DPPH自由基的IC_(50)分别为0.117 mg/mL和0.119 mg/mL;对ABTS自由基的IC_(50)分别为0.072mg/mL和0.076 mg/mL;总还原能力由强到弱为:减压-超声法常压超声法水溶Vc。结论:相同提取条件下减压-超声提取法的黄酮提取量比常压超声提取法黄酮提取量增加(20.01±1.64)mg/g,且不破坏黄酮类化合物抗氧化活性。     

辣木叶水提物对H2O2致HepG2细胞氧化损伤的保护作用

该研究从细胞水平对辣木叶水提物的抗氧化活性进行研究。以过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）诱导氧化损伤的人体肝癌细胞（Human hepatoma cell,HepG2 cell）为模型,加入不同浓度的辣木叶水提物进行保护干预,利用MTT法测定细胞存活率,同时测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）等抗氧化活性指标,探究辣木叶水提物对H2O2诱导氧化损伤细胞的保护作用。结果表明,辣木叶水提物可明显提高经H2O2诱导损伤的HepG2细胞存活率（p<0.05）,其中高浓度辣木叶水提物（500和600 μg/mL）可使细胞存活率恢复到将近100%。此外,与模型组相比,不同剂量辣木叶水提物可明显提高HepG2细胞的GSH-Px、SOD活性水平（p<0.05）和降低细胞的MDA含量（p<0.05）,其中GSH-Px含量提高了20.77%~151.74%,SOD活力提高了22.24%~139.07%,MDA含量下降了12.51%~34.04%,且其变化程度具有剂量依赖效应。综上所述,辣木叶水提物在细胞水平具有一定的抗氧化活性,研究结果可为辣木叶抗氧化功能产品的开发提供参考依据。     

乌饭叶多酚提取物抗氧化能力初探

通过对乌饭叶多酚粗提物清除DPPH自由基能力与还原力的测定,初步研究乌饭叶多酚的抗氧化能力。结果表明,乌饭叶多酚粗提取物具有一定的清除自由基能力与还原力,但是清除自由基的能力略低于VE,还原力较VC弱。     

体外仿生消化对金银花醇提物成分及抗氧化活性的影响

为探究金银花醇提物在体外仿生消化中成分含量及抗氧化活性变化规律,通过测定模拟胃肠消化前后金银花醇提物中12种成分含量、总体抗氧化能力、羟自由基(·OH)清除率和DPPH自由基清除率,并进行成分含量和抗氧化活性变化相关性分析。结果显示,酚酸类成分含量随模拟胃消化时间延长而降低,而在模拟肠消化过程中无显著性变化(P>0.05)。黄酮类成分含量整体呈先上升后下降趋势,而在模拟肠消化过程中无显著性变化(P>0.05)。仿生消化过程中环烯醚萜类成分含量无显著性变化(P>0.05)。经模拟胃肠消化后,消化产物总体抗氧化能力及对·OH和DPPH自由基清除率均显著降低(P<0.05),并与酚酸和黄酮含量呈显著正相关(P<0.05)。胃肠道环境均能促进金银花中酚酸和黄酮类成分降解,并显著降低其抗氧化活性,为进一步研究金银花体内胃肠消化提供一定的理论参考。     

金银花提取液抗氧化酶活性与清除自由基能力的研究

为研究金银花不同采收期和不同部位提取液膜保护酶的活性与清除自由基的能力,采用生物化学分析法测定了不同采集期金银花花蕾、叶片和枝条膜保护酶活性,结果显示,SOD、POD和CAT活性从4月开始平稳上升,6月上旬前后达到最高值。叶片的上述指标最高,枝条最低。对自由基的清除能力也呈平稳上升趋势。金银花花蕾对超氧自由基和羟自由基的清除效应最高,花蕾和叶片对过氧化氢清除效应相当,枝条的最低。几种膜保护酶活性之间均呈较显著的正相关,当膜保护酶活性增强时,清除自由基的能力也随之提高,可能是它们的协调作用使金银花有较强的清除自由基的能力。     

4 种迷迭香化合物对脂多糖诱导的RAW264.7细胞氧化应激和炎症的抑制作用

目的：研究4 种迷迭香化合物（鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香酚和迷迭香酸）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的RAW264.7细胞氧化应激和炎症反应的抑制作用。方法：以LPS诱导RAW264.7细胞构建炎症模型,通过比色法、实时荧光定量聚合酶链式反应、Western blot等方法表征迷迭香化合物对活性氧（reactive oxygen species,ROS）、炎症因子以及相关酶类的影响。结果：上述4 种迷迭香化合物对LPS诱导的细胞内ROS相对含量、丙二醛（malonic dialdehyde,MDA）含量、NO释放量和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、白细胞介素1β（interleukin 1β,IL-1β）、IL-6 mRNA相对表达量,以及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和环氧合酶2（cyclooxygenase 2,COX-2）蛋白相对表达量的升高有显著抑制作用,对超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）活力有显著保护作用,且具有浓度依赖效应。质量浓度10 μg/mL的鼠尾草酸对LPS诱导的ROS相对含量、NO释放量、TNF-α mRNA相对表达量、MDA含量升高的抑制作用和对SOD和CAT活力的保护作用更好,质量浓度10 μg/mL的迷迭香酚对LPS诱导的IL-1β、IL-6 mRNA相对表达量、iNOS和COX-2蛋白相对表达量升高的抑制作用更好。结论：4 种迷迭香化合物均具有一定的抗氧化和抗炎作用,能缓解炎症反应,其中水溶性迷迭香酸有效质量浓度高于其他3 种。