草苁蓉多糖对氧化损伤致血管内皮细胞凋亡相关蛋白表达的影响

该研究探讨草苁蓉多糖（Boschniakia rossica polysaccharides,BRPS）对氧化损伤致人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）凋亡相关蛋白表达的影响。以叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide,t-BHP）损伤HUVEC建立体外凋亡模型,分为正常组、t-BHP组（损伤组）、BRPS组,分别应用细胞增殖毒性检测试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）法和流式细胞术检测细胞存活率和细胞凋亡率,用Western blotting技术检测凋亡相关蛋白胱天蛋白酶原（pro-cysteine aspastic acid-specific protease,Procaspase）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase,PARP]、Survivin、p53、核转录因子-кB（nuclear factor-кB,NF-кB）信号通路蛋白以及丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）信号通路蛋白活化水平。结果显示,与正常组比较,损伤组HUVEC细胞活力降低50.6%,细胞凋亡率升高41.0%;与损伤组比较,BRPS组HUVEC细胞活力升高16.4%,细胞凋亡率降低了22.2%。此外,t-BHP降低HUVEC细胞的Procaspase-3、Procaspase-8、Procaspase-9、PARP和Survivin蛋白水平,升高Cleaved-PARP、p53、NF-κB、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶（phosphorylated extracellular signalregulated kinase,p-ERK）、磷酸化 c-Jun N 末端激酶（phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK）、磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶（phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38）蛋白水平。而BRPS升高Procaspase-3、Procaspase-8、Procaspase-9、PARP 和 Survivin 蛋白水平,降低 Cleaved-PARP、p53、NF-кB、p-JNK、p-p38 蛋白水平。研究结果表明,BRPS对t-BHP引起HUVEC凋亡具有抑制作用,其机制可能与JNK、p38及NF-κB调控有关。     

草苁蓉多糖对HepG2细胞氧化应激的抑制作用

研究草苁蓉多糖(BRPS)对过氧化氢(H_2O_2)所致HepG2细胞氧化应激的抑制作用。以HepG2细胞为研究对象,通过H_2O_2诱导细胞氧化应激损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞存活率;比色法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性以及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平;蛋白印迹法测定细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)活化水平。结果表明,BRPS在质量浓度12.5 mg/L~50 mg/L范围内对HepG2细胞存活率无显著影响,对细胞安全。而H_2O_2诱导使HepG2细胞存活率和抗氧化能力下降,细胞内ERK和JNK磷酸化水平升高。与H_2O_2模型组相比,BRPS预处理可提高细胞存活率;降低培养液中LDH、AST和ALT活性;降低细胞内MDA含量,升高细胞中SOD活性和GSH含量,降低细胞内ERK和JNK磷酸化水平。提示,BRPS对H_2O_2所致HepG2细胞氧化应激具有抑制作用,减轻其细胞损伤。     

草苁蓉多糖研究进展

草苁蓉为传统中药,含多种活性成分.草苁蓉多糖有增强免疫力、抗衰老、抗癌、消炎等多种活性,而且无毒、无副作用,本文对草苁蓉多糖的来源、结构、药理作用及含量测定作一综述.     

草苁蓉多糖研究进展

草苁蓉为传统中药,含多种活性成分。草苁蓉多糖有增强免疫力、抗衰老、抗癌、消炎等多种活性,而且无毒、无副作用,本文对草苁蓉多糖的来源、结构、药理作用及含量测定作一综述。     

草苁蓉水萃取物对脂多糖与D-氨基半乳糖所致小鼠肝脏氧化应激和细胞凋亡的影响

研究草苁蓉水萃取物(BRAF)对脂多糖(LPS)与D-氨基半乳糖(GalN)联合诱发的小鼠急性肝损伤的保护作用。将小鼠按体质量随机分为5组,即正常组、模型组,BRAF高、低剂量组及水飞蓟素(SIL)组(阳性对照组)。每日给药1次,连续7 d。实验末期,除正常组外,其余组小鼠腹腔注射LPS和GalN建立急性肝损伤模型,苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理学变化,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),比色法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及肝脏过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,电泳法检测小鼠肝细胞DNA损伤情况。结果显示,BRAF明显降低GalN和LPS联合诱导的急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,减轻肝组织病理损伤,降低血清TNF-α水平,降低肝NO和MDA水平,升高肝组织CAT、GPx、GST活性和GSH水平,并降低肝细胞DNA损伤程度。提示:BRAF对GalN和LPS联合诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与其抗氧化活性和抗肝细胞凋亡作用有关。     

榛蘑多糖对乙醇所致大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用

探究榛蘑多糖对乙醇所致大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用。将40只SD大鼠随机分成4组（正常对照组、损伤组、榛蘑多糖低剂量组、榛蘑多糖高剂量组）。除正常对照组外的其余各组均按10 mL/kg mb灌胃体积分数40%乙醇诱导血管内皮细胞损伤。榛蘑多糖低、高剂量组分别以100、400 mg/kg mb灌胃榛蘑多糖,其余组以等体积生理盐水代替,实验共进行4周。使用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察颈动脉组织病理变化;检测血清甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,T-CHO）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、内皮型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、一氧化氮（NO）、内皮素1(endothelin 1,ET-1)、超氧化物歧化酶（superoxide dismuta...     

草苁蓉多糖抗氧化活性研究

研究草苁蓉多糖(BRPS)的抗脂质过氧化活性。以铁还原法检测BRPS的总抗氧化能力,以硫代巴比妥酸(TBA)法测定H2O2、Fe2+以及.OH所致肝匀浆丙二醛(MDA)生成量。结果表明,BRPS具有较强的总抗氧化能力,其总抗氧化能力随浓度增高而升高,回归方程为y=21.988x+1.1247,R2=0.9996;呈量效关系。同时,BRPS可浓度依赖性地抑制H2O2、Fe2+以及.OH诱导的肝匀浆和肝线粒体体系的脂质过氧化作用。提示,BRPS具有体外抗脂质过氧化活性。     

草苁蓉多糖对脂多糖诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症反应的抑制作用

该文探讨草苁蓉多糖(Boschnikia rossica polysaccharides,BRPS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症反应的抑制作用.将小鼠J774A.1巨噬细胞随机分为正常组、模型组、BRPS组(剂量分别为25、50、100 mg/L),用细胞...     

蓝莓花色苷对过氧化氢所致血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的:观察蓝莓花色苷对过氧化氢（H2O2）所致血管内皮细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:人静脉血管内皮细胞EVC-304经不同浓度蓝莓花色苷（10、20、40μg·m L-1）预培养24 h后,加入100μmol/L H2O2再进行培养12 h。MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测EVC-304细胞凋亡的变化,Western blot法检测细胞内激活型Caspase-3、细胞色素C（Cyto c）、Bax和Bcl-2蛋白表达变化。结果:同正常组相比,H2O2损伤组细胞存活率显著降低（p<0.01）,细胞凋亡率显著升高（p<0.01）,激活型Caspase-3、细胞质中Cyto c表达水平,Bax/Bcl-2比值升高（p<0.01）。与H2O2损伤组相比,20μg·m L-1和40μg·m L-1蓝莓花色苷处理组细胞存活率明显升高（p<0.01）,凋亡细胞率明显下降（p<0.01）,细胞内激活型Caspase-3,Cyto c表达,Bax/Bcl-2比值下降（p<0.01）。结论:蓝莓花色苷对H2O2所致血管内皮细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与保护线粒体功能相关。      

草苁蓉提取物对小鼠H22肝癌移植瘤血管生成的抑制作用

探讨富含环烯醚萜苷的草苁蓉提取物(IGBR)对H_(22)小鼠移植瘤血管生成的抑制作用。建立H_(22)肝癌皮下移植瘤模型,并用IGBR干预10 d。利用HE染色法观察肿瘤组织病理学改变,利用免疫组化法检测肿瘤组织内微血管密度(MVD),利用蛋白印迹法检测肿瘤组织缺氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)-2蛋白的表达。与模型组比较,IGBR组肿瘤细胞生长受抑,细胞数目较少,坏死程度较严重。与模型组比较,IGBR组肿瘤组织MVD显著降低;HIF-1α、VEGF和VEGFR-2蛋白的表达显著降低。提示IGBR对H_(22)小鼠移植瘤新生血管生成具有抑制作用,可能与下调肿瘤组织HIF-1α和VEGF的蛋白表达有关。     

草苁蓉提取物对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用

目的：研究草苁蓉乙醇提取物（Boschniakia rossica ethanol extract,BREE）对H2O2诱导的HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：用H2O2诱导HepG2细胞氧化应激损伤,采用噻唑蓝（methylthiazolyldiphenyltetrazoliumbromide,MTT）比色法检测BREE对HepG2细胞氧化损伤的保护作用;比色法测定培养液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartateaminotransferase,AST）的释放率,以及细胞中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）及丙二醛（malondialdelyde,MDA）水平;蛋白印迹法测定细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK）总蛋白及其磷酸化形式的表达水平以及核转录因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）的核内转移。结果：BREE单独处理时,在所测质量浓度范围内对HepG2细胞增殖无显著影响。与模型组相比,BREE能显著提高氧化损伤细胞的存活率;降低氧化损伤细胞培养液中LDH、ALT和AST的释放;降低细胞MDA水平,增高细胞SOD活性和GSH含量。氧化损伤发生的不同时期,ERK、JNK、p38 MAPK和NF-κB蛋白均有激活,而BREE在氧化损伤发生1 h时减少ERK激活和NF-κB核转移,氧化损伤发生12 h时减少JNK蛋白激活。结论：BREE对H2O2所致HepG2细胞氧化应激损伤具有保护作用,此作用可能与其抑制ERK、JNK的活化和NF-κB的核内转移有关。     

草苁蓉提取物抑制肺癌细胞增殖分子机制的研究

草苁蓉提取物可通过促进肿瘤细胞凋亡抑制A549肺癌细胞增殖。继续探讨草苁蓉提取物(BRE)抑制肺癌细胞增殖的分子机制。采用流式细胞术检测A549细胞周期分布和细胞凋亡,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bax、Bc1-2、P53和Fas蛋白的表达,ELISA法检测sFAS蛋白的表达。结果表明,BRE改变肺癌细胞周期分布,使多数细胞阻滞于G0/G1期。同时,BRE诱导肺癌细胞凋亡,明显增加Fas表达,增加Bax表达和降低Bc1-2表达,但不改变P53表达以及sFas蛋白水平。提示,BRE抗肺癌细胞增殖作用与其改变细胞周期分布、增高Fas表达和降低Bcl-2/Bax比值而诱导肺癌细胞凋亡相关。     

草苁蓉体外抗氧化活性研究

研究草苁蓉提取物(BRE)的体外抗氧化作用。用分光光度法测定BRE的总抗氧化能力、抗活性氧能力、丙二醛(MDA)以及过氧化脂质(LOOH)生成量。结果表明,BRE的体外总抗氧化能力和抗活性氧能力较强,可抑制血清和肝组织脂质过氧化反应。结论:BRE具有体外抗氧化活性。     

草苁蓉环烯醚萜苷含药血清诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡中PI3K/Akt通路的作用

研究草苁蓉环烯醚萜苷(IGBR)含药血清对人肝癌SMMC-7721细胞活力与凋亡的影响并探讨其可能作用机制。MTT法检测IGBR含药血清对人肝癌SMMC-7721细胞活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白。结果表明,IGBR含药血清可降低人肝癌SMMC-7721细胞活力,诱导细胞凋亡。与对照组比较,5-FU组与IGBR组人肝癌SMMC-7721细胞中Bax蛋白表达增多,而p-Akt和Bcl-2蛋白的表达减少(p<0.05),两组间无明显差异(p>0.05);而总Akt没有明显改变。IGBR含药血清可通过PI3K/Akt信号通路,调节Bcl-2家族成员(Bax和Bcl-2),诱发人肝癌SMMC-7721细胞凋亡。     

白毛藤多糖诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

白毛藤多糖以不同浓度作用于胰腺癌细胞,采用Hoechst33258染色测定凋亡情况,RT-PCR检测caspase-3蛋白的表达。结果表明,白毛藤多糖的抗肿瘤作用可能与细胞凋亡有关。     

枸杞多糖诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的形态学研究

采用热水法提取药材枸杞子中的枸杞多糖。本研究通过MTT 实验发现3.125～200mg/L 质量浓度范围内的枸杞多糖能显著抑制宫颈癌Hela 细胞的增殖;采用荧光显微镜、透射电镜和激光共聚焦扫描显微镜观察发现经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现出典型的凋亡特征;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法进一步证实经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现凋亡特征。结果提示枸杞多糖是一种潜在的抗癌复合物,其关键作用机制是诱导癌细胞凋亡。     

辅酶Q9对人类血管内皮细胞氧化损伤的影响

目的:研究辅酶Q9对人类血管内皮细胞氧化损伤的影响。方法:采用MTT法构建H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC氧化损伤模型,研究辅酶Q9对HUVEC细胞氧化损伤的预防、修复作用及其作用机理。结果:质量浓度为100μg/mL的辅酶Q9对由H2O2诱导的HUVEC细胞的氧化损伤有预防和修复功能。抑制HUVEC细胞中ROS、MDA的增加是作用机制之一;同时,辅酶Q9预处理可有效减少H2O2对SOD酶的损伤,但对已损伤的SOD酶无修复作用。结论:辅酶Q9对H2O2造成的血管内皮细胞氧化损伤具有保护和修复功能。     

黄芪多糖对COLO205人结肠癌细胞株抑制作用研究

目的：研究黄芪多糖对COLO205人结肠癌细胞株增殖及凋亡的影响。方法：黄芪多糖（25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL）与结肠癌细胞共同培养24、48、72h,利用MTT法检测细胞增殖抑制率、免疫组化法检测细胞增殖核抗原（PCNA）表达情况、TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果：50μg/mL以上浓度的黄芪多糖对体外培养的COLO205人结肠癌细胞株生长具有抑制作用（抑制率〉30.0%,P〈0.01）,并呈量效和时效关系;与对照组相比,黄芪多糖处理组（50μg/mL、100μg/mL）PCNA表达降低,细胞凋亡增加（凋亡指数〉31.47%,P〈0.01）。结论：黄芪多糖使COLO205人结肠癌细胞增殖减慢,凋亡增加,PCNA表达降低,可能是黄芪多糖抗肿瘤机制之一。     

不同诱导物对内皮细胞氧化损伤作用的研究进展

高血压、动脉粥样硬化等心脑血管疾病的发病率逐年增加,这是严重危害人类健康生活的一类疾病,而内皮细胞氧化损伤往往是这些疾病早期的共同反应。不仅如此,一些治疗如物理治疗、心脏手术等会遗留一些影响内皮细胞功能的问题。因此,该领域研究者们对内皮细胞氧化损伤的机制研究越来越重视,并以此寻找合适的效应物如食品中的活性成分来抑制内皮细胞的氧化,减少和防治相关疾病的发生。本文综述了内皮细胞氧化损伤研究中几种常用诱导物如过氧化氢、氧化低密度脂蛋白、高糖、辐射等对内皮细胞氧化损伤的作用和特点,供研究人员根据研究方向选择合适的诱导物来建立内皮细胞氧化损伤模型,以此更有针对性地进行效应物的筛选及作用机制的研究。