5-氮杂胞苷对苦瓜果实成熟及转录表达谱的影响

【目的】研究5-氮杂胞苷（5-azaC）对苦瓜果实成熟和基因表达模式的影响,为解析苦瓜果实成熟的分子调控机制提供理论依据。【方法】以苦瓜（Momordica charantia L.）高世代自交系E12201-e1为材料,利用50 mmol/L 5-azaC处理绿熟期（授粉后18 d）苦瓜果实,以ddH₂O处理为对照,观察处理组（TR）和对照组（CK）果实的表型变化,并利用RNA-seq技术比较TR和CK苦瓜果肉组织中的转录水平差异。【结果】50 mmol/L 5-azaC处理能明显延迟苦瓜果实成熟。RNA-seq获得的数据质量较高,可满足后续分析需求。通过筛选共获得1 773个差异表达基因（DEGs）,其中1 007个上调基因,766个下调基因。GO和KEGG分析结果表明,DEGs主要富集在细胞组分和分子功能模块,217个DEGs共富集到93条代谢通路中,其中30个DEGs显著富集到光合作用和苯丙烷类生物合成通路。8个DEGs参与细胞壁代谢过程,其中6个基因在5-azaC处理中下调表达。共获得681个差异表达转录因子（TFs）,分属于220个TF家族。12个DEGs的qRT-PCR结果与RNA-seq结果变化趋势一致。【结论】5-azaC处理抑制苦瓜果实成熟,并影响果实成熟相关基因的表达模式。     

5-氮胞苷与2,4-D处理对龙眼早期体胚发生及DlAGOs表达的影响

表观遗传过程,如DNA甲基化,在调控植物的生长发育和体细胞胚胎(SE)的正常发生中起着关键作用.植物体细胞胚胎发生是一个细胞分化与器官形态建成的过程,植物体细胞胚胎发生体系可作为研究胚胎发育特别是早期胚胎发育的良好替代体系.本研究利用植物体细胞胚胎发生体系分析了DNA甲基化水平对龙眼球形胚发生的影响,并采用实时荧光定量...     

5-氮胞苷对玉米生长发育及其生理指标的影响

以玉米自交系B73为试验材料,用不同浓度的5-氮胞苷处理玉米种子后,对苗期、拔节期、抽雄期形态变化以及生理指标的影响进行了研究。结果表明:一定浓度(5~10μmol/L)的5-氮胞苷对玉米生长、发育起到促进作用。SOD、POD、CAT的活力随着处理浓度的增大呈先升高后降低的趋势;可溶性蛋白含量随着处理浓度的增大呈先升高后降低的趋势;可溶性糖含量在苗期和拔节期随着处理浓度的增大呈先降低后升高的趋势,而在抽雄期随着处理浓度的增大呈现升高后降低的趋势。相关性分析表明:玉米自交系B73经过5-氮胞苷处理后其生长发育及生理指标的相关性达到显著水平。     

5-氮胞苷(5-azac)和赤霉素(GA3)对白菜开花的影响

低浓度5－zazC和GA3的促进白菜开花，两者的最适作用浓度分别为100umol/L和300mg/L，浓度高时开花授抑。5－azaC与低温结合处理，促进开花的效果优于各自单独处理，说明5－azaC与低温处理促进白菜开花的作用具有加成性。     

DNA甲基化抑制剂5-azaC对花椰菜生长发育的影响

研究了不同浓度DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-azaC)处理不同熟性花椰菜(青花和白花)的幼苗对现蕾时间等田间生长发育指标的影响。结果表明:一定浓度的5-azaC不仅能促进花椰菜提前现蕾和开花,而且对株高、株幅、花球直径、单球质量等生长指标均有影响,影响大小与浓度密切相关。同一材料在不同浓度5-azaC条件下花椰菜现蕾时间存在显著差异,各处理的现蕾时间均比对照明显提前,现蕾时间可提前3⁸ d,适宜的5-azaC浓度为108 d,适宜的5-azaC浓度为10²0 mg/L。不同材料对5-azaC处理的敏感反应程度不同,低浓度5-azaC(520 mg/L。不同材料对5-azaC处理的敏感反应程度不同,低浓度5-azaC(5²0 mg/L)处理表现为促进作用,高浓度5-azaC(2020 mg/L)处理表现为促进作用,高浓度5-azaC(20⁴0 mg/L)处理表现为抑制作用。     

DNA甲基化抑制剂5-azaC对花椰菜生长发育的影响

研究了不同浓度DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-azaC)处理不同熟性花椰菜(青花和白花)的幼苗对现蕾时间等田间生长发育指标的影响。结果表明:一定浓度的5-azaC不仅能促进花椰菜提前现蕾和开花,而且对株高、株幅、花球直径、单球质量等生长指标均有影响,影响大小与浓度密切相关。同一材料在不同浓度5-azaC条件下花椰菜现蕾时间存在显著差异,各处理的现蕾时间均比对照明显提前,现蕾时间可提前3~8 d,适宜的5-azaC浓度为10~20 mg/L。不同材料对5-azaC处理的敏感反应程度不同,低浓度5-azaC(5~20 mg/L)处理表现为促进作用,高浓度5-azaC(20~40 mg/L)处理表现为抑制作用。     

5-氮杂胞苷促进白菜开花的效应分析

用5-氮杂胞苷(5-azaC)处理白菜种子,并测定处理后子叶期幼苗的DNA甲基化水平和赤霉素(GA)含量,以分析5- azaC促进白菜开花的效应.结果表明,低浓度5-azaC促进白菜开花,且与低温促进开花的作用具有加成性;但高浓度时却抑制开花,以250 μmol/L促进开花的效果最好.5-azaC降低白菜DNA甲基化水平和GA含量,表明5-azaC具有代替低温促进植物开花的作用.     

DNA去甲基化对马立克氏病病毒(MDV)基因表达的影响

以鸡马立克氏病脾脏淋巴瘤继代细胞系MDCC-MBI(MSB1)为研究对象，用southern和northern斑点分子杂交放射自显影等方法，证明了5-氮胞苷可以阻断MSB1细胞DNA的甲基化，且去甲基化的DNA转录区和部分非转录区有特异增幅的转录产物mRNA，说明这些区基因转录活性上升。用5-氮胞苷处理MSB1细胞使其去甲基化后，该细胞DNA的内切酶Barn HⅠ区域对DNaseⅠ敏感性增高，该片段区的基因表达活性也增高。以上结果提示．DNA的去甲基化可以提高MDV的基因表达，进一步说明MDV DNA的甲基化在抑制MDV基因表达，维持MDV在淋巴瘤细胞株中潜伏感染状态可能起着重要作用。     

5-氮胞苷对水曲柳合子胚外植体状态及体胚发生的影响

通过在培养基中添加5-氮胞苷,研究了其对水曲柳合子胚外植体状态和体胚发生的影响.在培养开始时加入不同浓度的5-氮胞苷会抑制水曲柳愈伤组织发生和水曲柳体胚发生.各浓度处理的愈伤组织诱导率均低于未添加5-氮胞苷的对照,且差异显著.除了50.0和100.0 μmol/L处理的体胚发生率与未添加5-氮胞苷的对照差异不显著外,其...     

茉莉酸甲酯对药用植物石斛生物活性成分的影响

研究利用茉莉酸甲酯持续处理石斛组培幼苗,分析石斛苗生长发育和生物活性物质含量变化。与对照相比,茉莉酸甲酯处理的石斛苗生物量和生物活性物质,如石斛多糖、石斛碱和胡萝卜素,含量明显升高,证实茉莉酸甲酯处理对石斛苗生长发育和次生代谢生物合成具有重要调控作用。     

采收期对药用植物生物活性成分影响的研究进展

综述了近年来有关药用植物(根及根茎类、茎及叶类、花及果实类、种子类、全草类)采收期对其生物活性成分影响的研究进展。     

5 Aza dC对奶牛乳腺上皮细胞PPARγ表达的影响

为阐明DNA甲基化对奶牛乳腺泌乳功能调控的机制,研究了甲基化抑制剂5氮杂2′脱氧胞苷（5 Aza dC）对奶牛乳腺上皮细胞中PPARγ基因启动子甲基化状态及其表达的影响,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,采用0.1、0.5、1.0、5.0μmol／L的5 Aza dC对奶牛乳腺上皮细胞进行处理,用EpiQuikTM DNA methyltransferase assay试剂盒进行甲基转移酶活性检测,采用CASY细胞分析仪检测细胞活力和增殖能力,利用亚硫酸氢盐测序（BSP ）技术检测了PPARγ启动子的甲基化特征,qRT PCR法检测PPARγmRNA表达的变化,Western blot检测PPARγ蛋白表达的变化。结果显示：与空白对照组相比,0.1μmol／L的5 Aza dC对奶牛乳腺细胞生长无毒性,处理96 h甲基转移酶活性极显著降低,奶牛乳腺细胞的PPARγ基因启动子甲基化程度降低,PPARγ表达升高。表明5 Aza dC可降低奶牛乳腺细胞中PPARγ启动子区域的甲基化程度,促进PPARγ表达。     

萝卜-芥蓝异源四倍体F4和F10世代DNA甲基化变异的MSAP分析

以人工合成的萝卜-芥蓝异源四倍体的F4和F10世代为材料,用MSAP法检测2种材料DNA甲基化变异情况,以期为远缘杂交后不同世代间基因组DNA甲基化遗传和变异规律提供实验依据。结果表明:F4代和F10代甲基化程度分别为30.61%和33.10%,共检测12种甲基化变异模式,可以分为5种类型,甲基化变异位点占所有甲基化位点的41.71%。用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理F4代,F10代材料,检测到甲基化程度分别为20.67%和25.75%,F代比F代受到了更大冲击,说明不稳定世代对环境的影响更加敏感。     

5-Aza诱导BMSC分化为心肌细胞的分子生物学检测

 【目的】利用分子生物学方法探讨5-氮杂胞苷（5-azacytidine,5-Aza）体外诱导牛骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSC）向心肌细胞的分化,为转基因良种肉牛培育提供种子细胞,提高转基因效率。【方法】利用获取的纯化稳定的P4、P8、P12代BMSC各经5、10、15μmol?L-1的5-Aza进行体外诱导分化,统计并计算心肌细胞的转化率,对诱导出现的心肌样细胞进行形态学观察和RT-PCR 鉴定。【结果】诱导后细胞大多呈现梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成。相同代数的BMSC在10μmol?L-1的5-Aza作用下诱导效果最佳;在相同浓度的5-Aza作用下,BMSC向心肌细胞的转化率随着传代次数的增加逐渐降低。RT-PCR显示诱导分化后的细胞明显表达心肌细胞的4种特异性基因,分别是α-心脏肌动蛋白(378bp)、结蛋白（601 bp）、心脏肌钙蛋白T (331 bp)、β-肌球蛋白重链（β-MHC）(273 bp)。【结论】5-Aza体外可诱导牛骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞;利用P4代BMSC在10μmol?L-1的5-Aza的作用,诱导效果明显。     

化学诱变剂对同源四倍体毛泡桐体外植株再生的影响

在建立同源四倍体毛泡桐体外植株再生系统的同时,研究了甲基磺酸甲酯(MMS,DNA甲基剂)和5-氮胞苷(5-Aze,DNA去甲基荆)对以叶片为外植体的体外植株再生系统的影响.结果表明,同源四倍体毛泡桐幼苗叶片在无MMS和5-Aza的MS培养基上,愈伤组织最高诱导率皆可达到100%,而幼苗叶柄和茎段则只能在NAA 0.7,0.9,1.1 mg·L-1,BA 2和4 mg·L-1组合的MS培养基上达到100%.叶片愈伤组织芽诱导率达到100%的培养基为MS+NAA 0.9 mg·L-1+BA 16 mg·L-1.MMS和5-Aza对同源四倍体毛泡桐叶片体外植株再生有抑制作用,并且随着MMS和5-Aza质量浓度的升高,抑制作用越明显,此外,5-Aza对叶片芽和根诱导的抑制作用皆大于MMS.     

高压脉冲电场技术对食品中生物活性成分的影响

高压脉冲电场(简称PEF)是一种重要的非热加工技术,具有传递均匀、作用时间短、产热少、能耗低等优点,已广泛应用于食品研究,并且最大限度保持食品风味和质量。总结归纳了近年来PEF技术对食品中生物活性成分的影响,以期为PEF技术在食品领域广泛应用提供参考。     

干旱胁迫对铁皮石斛生理及不同部位活性成分的影响

为了探究干旱胁迫对铁皮石斛生理及品质的影响,为铁皮石斛栽培提供理论基础。试验采用盆栽控水模拟干旱条件,设置4个水分处理,分别为湿润水分处理(CK)、轻度干旱胁迫(H)、中度干旱胁迫(M)、重度干旱胁迫(L),研究不同水分处理下铁皮石斛生理生化指标及活性成分的变化。结果表明,干旱胁迫对茎粗、叶片含水量、丙二醛含量无显著影响,而生物量积累减少;铁皮石斛在干旱胁迫下以叶绿素含量、过氧化氢酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量增加来抵御胁迫,且茎叶不同部位的多糖、总黄酮、总酚、总氨基酸含量均增加,证明胁迫可促进铁皮石斛品质的提升。对指标进行主成分分析可知,株高、茎粗、根鲜质量、叶绿体色素含量、抗氧化酶活性、渗透调节物质、多糖含量、总黄酮含量、总氨基酸含量等可作为铁皮石斛耐旱性的评价指标。研究表明,轻度干旱对铁皮石斛各指标无明显影响,而活性成分含量在重度干旱胁迫下达到峰值,且对生长不造成影响,证明铁皮石斛对干旱有较强的忍耐力,可在采收前进行适度的干旱胁迫从而提高品质。     

不同附生基质对铁皮石斛生长与代谢成分含量的影响

为明确不同附生基质对铁皮石斛生长及代谢成分的影响,以自然生长的木棉、毛果杜英、幌伞枫和干燥木板为附生基质仿造铁皮石斛自然生长环境,对铁皮石斛生长形态指标进行观测,并对多糖和生物碱等代谢成分含量进行测定与分析。结果表明,木棉、幌伞枫、毛果杜英、干燥木板这4种基质均可作为铁皮石斛的附生基质,但不同附生基质对铁皮石斛的生长有显著性影响,对其代谢成分也有一定的影响。其中,生长状况表现为木棉>幌伞枫>毛果杜英>干燥木板,代谢成分含量表现为木棉>毛果杜英>干燥木板>幌伞枫。综合排序,适合铁皮石斛附生生长的基质依次为木棉>幌伞枫>毛果杜英>干燥木板。在自然生长的木棉林下种植铁皮石斛可获得较高的经济效益,是一种较好的林下经济发展模式。     

5-氮杂胞苷和丁酸钠对大麦苗期耐湿性的影响

以耐湿性具有差异的大麦泰兴9425和Naso Nijo为材料,采用盆栽方式研究外源5-氮杂胞苷和丁酸钠对湿害下大麦不定根、干重、叶片脯氨酸和丙二醛(MDA)含量的影响。湿害指数分析表明泰兴9425湿害受害指数较低,耐湿能力更强。外源5-氮杂胞苷处理使湿害胁迫后泰兴9425和Naso Nijo湿害指数分别降低4.90%和15.22%,MDA含量分别降低12.83%和34.68%;显著降低了Naso Nijo脯氨酸的累积,而泰兴9425脯氨酸积累增加,但并不显著。外源丁酸钠对两个供试品种湿害指数没有显著影响,与淹水组相比,显著增加了两个品种叶片MDA和脯氨酸的累积。研究结果表明5-氮杂胞苷在一定程度上能减轻大麦苗期湿害,并对其具有一定生理调节作用,而丁酸钠则不适用于大麦湿害缓解体系。     

苹果属植物DNA去甲基化基因MdIDM1参与低温促进花色素苷的积累

[目的]为探明DNA去甲基化基因与苹果属植物低温诱导花色素苷积累的关系.[方法]以苹果'嘎啦'和观赏海棠'王族'与观赏海棠'火焰'组培苗叶片为试材,16℃低温连续处理7d,通过RNA提取和反转录cDNA,克隆得到苹果属植物DNA去甲基化关键基因MdIDM1,通过荧光定量PCR和高效液相色谱分别检测叶片中花色素苷合成基因和花色素苷含量,对去甲基化基因MdIDM1表达量进行相关性分析.[结果]低温胁迫促进苹果属植物着色,同时随着低温处理时间的增加MdIDM1的表达逐渐升高,且与花色素苷生物合成基因表达和花色素苷积累呈正相关.[结论]低温条件下,DNA去甲基化基因MdIDM1可能参与苹果属植物花色素苷积累.