富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件优化

以富硒大豆为原料,采用液体发酵技术对富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件进行研究。富硒大豆经浸泡、磨浆、过滤、煮沸后接种灵芝菌种发酵,以水解度为指标,通过单因素和正交试验对温度、初始pH值、摇瓶转速及豆浆质量分数等发酵条件进行优化。结果表明：富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵最佳条件为发酵温度28℃、培养基初始pH5.8、摇瓶转速160r/min、豆浆质量分数5%、发酵时间132h。在最佳发酵条件下,大豆蛋白的水解度达27.8%、大豆多肽产量7.0178mg/L、多糖产量1.75mg/L、灵芝酸产量0.66mg/L。     

灵芝菌丝体硒多糖结构表征、抗氧化活性及对小鼠运动疲劳的影响

将灵芝菌丝体通过水提醇沉、分离纯化,分别得到硒多糖（Se-GLP）和普通多糖（GLP）,并对其结构表征、抗氧化活性和抗运动疲劳进行了研究。结果表明：Se-GLP具有C-O-Se、Se=O、Se-O-CH结构,硒含量为392.17 mg/g,而GLP中未检测到硒;Se-GLP和GLP均含有β型糖苷键,其重均分子量分别为19283 Da和17846 Da,均由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖组成,摩尔比分别为1.15∶1∶1.07∶1.48和1.22∶1∶0.95∶1.57。体外抗氧化结果显示,Se-GLP和GLP均具有较强抗氧化能力,抗氧化能力均与多糖剂量呈线性相关,而Se-GLP的抗氧化活性显著大于GLP。此外,Se-GLP和GLP均提高了小鼠的前肢抓力和力竭游泳时间,Se-GLP的抗疲劳效果显著大于GLP。结果表明,Se-GLP具有较好的抗氧化活性和抗运动疲劳作用,该研究可为硒多糖在运动功能食品中的开发利用提供参考。     

富硒灵芝液态深层发酵工艺研究

采用灵芝作为富硒的载体,进行富硒灵芝液态深层发酵实验,研究灵芝对无机硒的生物转化能力。利用正交实验设计,对富硒灵芝液态深层发酵条件如摇床转速、接种量、pH等进行了优化。结果表明,灵芝能在含有低浓度亚硒酸钠(50～200mg/kg)的培养基中生长,并在菌丝体内富集硒。在优化的发酵条件下,富硒灵芝菌丝体干质量为38.0g/L,菌丝体硒含量为1568μg/g,总富硒量为59584μg/L。     

纤维素酶法提取富硒灵芝菌丝体多糖的研究

采用纤维素酶法,研究了纤维素酶分离提取富硒灵芝菌丝体多糖的条件,以提高菌丝体多糖的得率.利用正交试验设计,确定了优化的提取条件,即浸提加水量50 mL/g菌丝体,酶解时间80 min,加酶量300 U/mL,pH 4.5,温度55℃.在优化的实验务件下,菌丝体多糖的得率33.6%.利用Q Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化菌丝体多糖,多糖的回收率达82.8%.     

樟芝菌液态发酵多糖富硒条件优化及其抗炎活性研究

为提高樟芝菌液态发酵硒多糖产量,探究樟芝菌多糖富硒后活性方面的变化。以生物量、多糖含量、硒含量和富硒率为评价指标,利用单因素试验和正交试验对发酵条件进行优化,综合得出最佳发酵条件。同时在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)建立炎症模型的基础上,评价樟芝菌硒多糖与无硒多糖的抗炎活性。通过发酵优化得到最佳发酵条件为Na₂SeO₃添加量2 mg/L、麦芽糖24 g/L、可溶性淀粉16 g/L、玉米浆干粉9 g/L,硫酸铵9 g/L,装液量75 mL/250 mL、初始pH值7,24℃、150 r/min发酵9 d。体外细胞实验结果表明,二者均能够显著降低促炎介质NO、TNF-α、IL-6和IL-1β的释放量,提高细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性,起到有效抑制炎症反应的作用。而且,硒多糖在提高SOD活性、抑制IL-1β释放方面效果要优于无硒多糖。综上,樟芝菌硒多糖在富硒的同时,能够具有高于无硒多糖的抗炎活性,具备一定的开发前景。     

羊肚菌菌丝体富硒条件优化及其硒多糖抗氧化活性研究

对羊肚菌菌丝体液体深层发酵富硒条件进行优化,考察培养基中硒浓度、温度、装液量和p H值对富硒率的影响。采用Fenton法、邻苯三酚自氧化法和DPPH(1,1-二苯基-2-苦基肼)还原法对羊肚菌菌丝体多糖的体外抗氧化活性进行了研究。羊肚菌菌丝体富硒的适宜培养条件为:亚硒酸钠质量浓度为10 mg/L,温度25℃,装液量100 m L/250 m L,初始p H值7。在此条件下,富硒率最大达9.10%。羊肚菌菌丝体多糖和羊肚菌菌丝体硒多糖清除羟自由基(·OH)IC50分别为:0.62 mg/m L和0.42 mg/m L;清除超氧阴离子(O2-·)IC50分别为:0.85mg/m L和0.59 mg/m L;清除DPPH自由基IC50分别为:0.66 mg/m L和0.49 mg/m L。羊肚菌菌丝体多糖具有较强的体外抗氧化活性,且随着多糖浓度的增大其抗氧化活性逐渐增强,羊肚菌菌丝体硒多糖抗氧化作用更强。     

富硒灵芝发酵培养工艺及产物抗氧化能力研究

本文以亚硒酸钠为硒源,以灵芝为富硒载体,采用液体发酵方式进行富硒灵芝培养;主要研究了培养基中亚硒酸钠浓度对富硒灵芝的生物量及总硒含量的影响,并通过正交试验对富硒灵芝液体发酵培养工艺进行优化,此外还对富硒灵芝中四类不同性质的蛋白的抗氧化能力进行了初步探讨。结果表明:为获得最佳的富硒效果,发酵液中亚硒酸钠浓度在1000 mg/L左右为宜。接种量为12%,pH 8.0,摇床转速200 r/min为富硒灵芝发酵培养的最适工艺条件。碱溶性蛋白为富硒灵芝中含量最高一类蛋白,含量达到了8.64%;其次是水溶性蛋白,含量为6.64%;接下来是盐溶性蛋白,含量为4.62%;醇溶性蛋白的含量最低,含量仅有0.30%。但比较四类蛋白粗提物的硒含量,发现醇溶性蛋白的硒含量最高,达510.0 mg/g;其次是水溶性蛋白和碱溶性蛋白,硒含量分别为278.55 mg/g和115.51 mg/g;盐溶性蛋白的硒含量最低,为49.68 mg/g。考察四类灵芝蛋白粗提物的抗氧化能力,发现其抗氧化能力与其硒含量呈一定的正相关,醇溶性蛋白具有最高的抗氧化能力,其次是碱溶性蛋白和水溶性蛋白,盐溶性蛋白的抗氧化能力最低,且富硒样的抗氧化能力均高于相应的对照样。     

硒在富硒灵芝中的分布

为深化富硒灵芝的基础研究,指导富硒灵芝的生产与应用,以不同含硒量的富硒灵芝子实体为试样,系统地研究了硒在富硒灵芝中的分布,结果表明:富硒灵芝子实体中81.71%～87.92%的硒是以有机硒形式存在,并主要与子实体中的蛋白结合(蛋白硒占总硒的56.0%～61.2%);水溶性蛋白和碱溶性蛋白是灵芝结合硒的主要蛋白,总结合硒量占蛋白硒的75.2%～79.2%。按照结合硒量的多少,硒在蛋白中的分布依次为:水溶性蛋白>碱溶性蛋白>醇溶性蛋白>盐溶性蛋白。此外,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离富硒灵芝子实体中的含硒蛋白组分,并采用氢化物原子荧光法(HGAFS)对蛋白或多肽条带按分子质量段切割进行硒含量测定,结果表明:在分辨出的13条蛋白条带中,分子质量在8.709～142.53kDa的蛋白或多肽均结合了不同程度的硒,但硒主要分布在分子质量不超过16kDa的蛋白或多肽中。     

响应面法优化酵母富硒发酵条件

利用响应面法对酵母富硒的发酵条件进行优化.首先通过Plackett-Burman法分析出4个重要因素,然后经最陡爬坡试验及响应面法(RSM)中的Box-Behnken法设计优化试验,确定主要因素的最佳值,即接种量24.9%(V:V)、Se添加量18.7 mg/L、培养时间29.4 h、装液量68.8 mL/250 mL三角瓶,此时,酵母生物量和硒含量分别达到12.861 4,2.659 3 mg/g,与有关报道[1]相比分别增加了19.54%,5.99%.     

灵芝多糖提取工艺优化及抗氧化活性的研究

目的研究灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)的最优提取工艺,并研究其抗氧化活性。方法通过单因素和响应面法优化提取工艺参数,获得GLP;将GLP进行乙醇分级得到GLP30、GLP60和GLP80 3个组分;采用还原力、DPPH自由基清除试验和羟自由基清除试验评估GLP及3个组分的抗氧化活性。结果灵芝多糖最优提取条件为:温度86°C,液料比50:1(mL/g),时间142min,实际提取得率为1.71%;抗氧化活性试验结果表明:GLP及GLP30、GLP60和GLP80均具有一定的抗氧化活性,均呈现浓度-活性依赖性,其中GLP80还原力最强,GLP清除DPPH自由基和羟自由基的能力最强。结论响应面法有效优化了GLP的提取,灵芝多糖具有较好的抗氧化活性,值得进一步研究及开发利用。     

富硒灵芝培养基组分优化

首先运用快速登高法确定富硒灵芝培养基成分（葡萄糖、麸皮汁、KH2PO4和MgSO4.7H2O）的步长和梯度方向。在此基础上确定最佳响应区域,随后运用Box-Benhnken实验设计和响应面分析,对富硒灵芝培养基的主要成分进行优化,并以回归方程对实验结果拟合。得出的最佳培养基配方:葡萄糖量为2.13%、麸皮汁为3.96%、KH2PO4为0.3%和MgSO4.7H2O为0.09%时,富硒率达到最大,为55.86%。      

富硒香菇多糖发酵工艺的优化及其抗氧化活性

本试验利用香菇作为载体,Na₂SeO₃为添加的硒源,优化富硒香菇多糖的发酵条件并研究其抗氧化活性。采用单因素试验考察了培养基pH、硒灭菌方式、硒添加时间、硒添加量和发酵时间对富硒香菇多糖的影响,并通过 Box-Benhnken实验设计和响应面分析法确定最优发酵条件。在优化条件下得到富硒香菇多糖,并利用DPPH自由基清除能力研究其抗氧活性。结果表明:当培养基pH调至4.16,发酵至第162 h时,向发酵液中添加7.97 mg/L过滤除菌的Na₂SeO₃溶液,发酵11 d,富硒香菇胞内多糖提取量可达到71.54 mg/100 mL;当培养基pH调至4.01,发酵至第191.5 h时,向培养基中添加6.68 mg/L过滤除菌的Na₂SeO₃溶液,发酵11 d,富硒香菇胞外多糖提取量可达到853.96 mg/100 mL。DPPH自由基清除实验结果表明,抗氧化活性大小依次为富硒香菇胞内多糖 > 香菇胞内多糖 > 富硒香菇胞外多糖 > 香菇胞外多糖。硒的添加不仅促进香菇菌丝的生长及多糖的累积,同时也提高了其抗氧化活性,对DPPH有较好的清除作用。     

不同硒源对灵芝生物富硒的比较研究

利用亚硒酸钠和活化硒矿为硒源对灵芝的生物富硒进行了研究,结果表明,两种硒源对灵芝生物富硒的效果有较大差异,灵芝对亚硒酸钠溶液和活化硒矿水溶液的耐受浓度分别是1000μg/g和30μg/g。利用亚硒酸钠和活化硒矿为硒源的灵芝菌丝体最高总硒含量分别为2639.1μg/g和302.2μg/g,最高富硒率分别是25.4%和60.0%。由此可知,与活化硒矿相比,以亚硒酸钠为硒源的灵芝总硒含量较高,但是以活化的硒矿水溶液为硒源成本低,且可以充分利用我国硒都恩施州的硒矿资源,有重要的实际意义。     

不同硒源对灵芝生物富硒的比较研究

利用亚硒酸钠和活化硒矿为硒源对灵芝的生物富硒进行了研究,结果表明,两种硒源对灵芝生物富硒的效果有较大差异,灵芝对亚硒酸钠溶液和活化硒矿水溶液的耐受浓度分别是1000μg/g和30μg/g。利用亚硒酸钠和活化硒矿为硒源的灵芝菌丝体最高总硒含量分别为2639.1μg/g和302.2μg/g,最高富硒率分别是25.4%和60.0%。由此可知,与活化硒矿相比,以亚硒酸钠为硒源的灵芝总硒含量较高,但是以活化的硒矿水溶液为硒源成本低,且可以充分利用我国硒都恩施州的硒矿资源,有重要的实际意义。      

黔产黑灵芝多糖提取工艺优化及抗氧化活性的研究

为探究黔产黑灵芝多糖(Ganoderma atrum polysaccharides, GAP)的最佳提取工艺、结构及体外抗氧化活性,采用响应面法优化黑灵芝多糖的提取工艺,采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography, HPLC)、高效凝胶排阻色谱法(High performance gel exclusion chromatography,HEPLC)和傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy, FTIR)对GAP的结构进行表征,并通过测定GPA对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基、2,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基以及羟自由基的清除率,评价GAP的体外抗氧化活性。响应面结果表明,GAP的最佳提取条件为提取时间131 min、提取温度81℃、液料比31:1(...     

野生灵芝的分子鉴定及富硒特性研究

从烟台昆嵛山分离到-株野生灵芝G1-01,根据rDNA ITS序列的系统发育分析,将其鉴定为赤芝(Ganoderraa lucidum (Fr.)Karst).通过对这株野生灵芝在液体培养基中的耐硒能力测定以及小吲培养时间的富硒特性考察,表明该野生灵芝菌株具有较强的富硒能力,其菌丝硒含量达到5.14mg/g,富硒率达到4.05%,分别为对照菌株SK5的2.4倍和1.5倍.     

富硒灵芝不同提取物清除自由基活性的ESR研究

以不同提取方法制备的富硒灵芝提取物为试样,采用ESR技术比较了富硒灵芝不同提取物清除羟自由基(·OH)和超氧自由基(O-2·)的抗氧化活性及提取物之间抗氧化活性的相互作用,结果表明:富硒灵芝的水提物、醇提物和酶提物均具有清除·OH和O2-·的能力,呈明显的剂量-效应关系,清除率与提取物浓度之间可用对数曲线拟合。3种提取物对·OH的清除能力由强到弱依次为水提物﹥酶提物﹥醇提物;对O-2·的清除能力则依次为醇提物﹥水提物﹥酶提物。所有提取物对O-2·的清除活性均高于对·OH的清除活性。此外,3种提取物之间不存在清除O2-·的协同作用,但可以彼此增强其清除O2-·的活性。在清除·OH作用方面,醇提物与酶提物之间相互抑制,醇提物与水提物之间彼此增强,水提物与酶提物之间则几近相互协同。     

短小芽孢杆菌CD52富硒条件优化

为了得到能够将无机硒转化为有机硒的菌株,本研究经过多轮筛选,得到一株目的菌株CD52,经多种形式鉴定,最终确定为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）。对此菌株转化有机硒的发酵条件进行优化,确定在接种量为3.9%、亚硒酸钠浓度为39 mg/L、初始pH为5.6时有机硒转化率最高,可达到96.0%。本研究可以为芽孢杆菌转化无机硒生产有机硒的研究提供参考依据,也为在实际生产中的应用研究提供了参考数据。     

富硒灵芝培养基组分优化

首先运用快速登高法确定富硒灵芝培养基成分(葡萄糖、麸皮汁、KH2PO4和MgSO4·7H2O)的步长和梯度方向.在此基础上确定最佳响应区域,随后运用Box-Benhnken实验设计和响应面分析,对富硒灵芝培养基的主要成分进行优化,并以回归方程对实验结果拟合.得出的最佳培养基配方:葡萄糖量为2.13%、麸皮汁为3.96%、KH2PO4为0.3%和MgSO4·7H2O为0.09%时,富硒率达到最大,为55.86%.     

灵芝菌的深层培养及富硒特性

本研究通过发酵工程手段将硒和灵芝有机地结合在一起，即以灵芝为载体进行富硒深层培养，制成具增效作用的真菌类制品，并对其摇瓶生产工艺进行初步研究，放瓶生物量为１．１％，富硒灵芝制品的有机硒含量在２７９～５６００ｐｐｍ之间，最高硒回收率为３１．３％。