马铃薯组培脱毒试管苗繁育技术

1　前　言马铃薯通过组织培养途径 ,从而建立无病毒生产体系是一种非常有效的高新生物技术实用化措施。发达国家早在上世纪 5 0年代就采用多种脱毒途径生产无病毒种薯 ,取得巨大成功。 70年代初吉林农业大学进行了马铃薯茎尖组织培养 ,以后黑龙江省农科院马铃薯研究所、中国科学院微生物研究所、植物研究所、内蒙古乌盟农科所也相继开展了这方面的研究工作。目前已有 2 0多个省、市、6 0多家单位成功利用此项技术 ,已获得近百个品种的脱毒种薯。我们从 2 0 0 1年开始马铃薯脱毒组培快繁研究 ,至今已得到“米拉”、“威芋 3号”的脱毒试管薯…     

《植物组织培养》课程开设综合性设计实验的教学实践

在介绍开设综合设计性实验的背景基础上,从创新教学内容组成与综合性自主设计实验等方面构建了贵阳医学院综合设计性实践教学模式,并对贵阳医学院综合设计性实验教学取得的效果与存在的不足进行了总结。     

马铃薯脱毒苗培养过程中内源激素变化规律研究

在马铃脱毒试管苗培养过程中 ,对其生长发育特性进行观察及对内源激素进行测定 ,结果表明 :在培养的 30d内 ,随着植株高度、数、根长、根数、茎叶干重及根干重的不断增加 ,内源激素也呈现有规律变化 ,ABA在培养至 2 0d达峰值 ,以后均保较高含量水平 ;CTK在培养前 2 0d含量基本不变 ,2 0～ 30d含量剧增 ;而IAA在培养的 30d内 ,含量是不断增加的     

固定物对马铃薯脱毒试管苗生长的影响

用食品工业三种凝胶 (琼脂、卡拉胶、魔芋粉 )为固定物 ,培养马铃薯脱毒试管苗 ,研究其对组培苗生长的影响。用魔芋粉培养的组培苗生长明显快于琼脂、卡拉胶培养基的组培苗 ,且苗粗壮 ,生产成本低。     

倍力凝在马铃薯脱毒试管苗生产中的应用研究

以倍力凝取代琼脂作培养基固化剂, 观察其对马铃薯脱毒试管苗茎节切段的影响。结果表明, 用倍力凝作固化剂, 试管苗生长发育明显较琼脂作固化剂的试管苗迅速、健壮, 植株鲜重较对照高８－７ ％ , 而生产成本降低２０％ 。     

马铃薯脱毒试管苗和扦插苗的微型薯生产比较实验

试验研究了在温室条件下 ,使用相同的无土栽培基质 (珍珠岩 :蛭石 =1∶1) ,脱毒试管苗和扦插试管苗生产微型薯的比较实验。实验结果表明 :扦插苗生产的微型薯 ,单粒重达到 4 0 2 g ,试管苗只有 2 95g。而试管苗生产的微型薯 ,单株结薯数、单位面积 ( 1m2 )结薯数分别高于扦插苗58 2 9%、 68 61% ,两者的单位面积 ( 1m2 )产量相近 ,试管苗略高于扦插苗的微型薯产量 ,>1g的微型薯比例扦插苗达 85 58% ,高于试管苗 5 67个百分点。     

转基因植物及其产品PCR检测引物的筛选研究

建立了一种转基因植物及其产品PCR检测引物筛选方法。以转基因大豆Roundup Ready为材料,设计了5对引物,通过荧光定量PCR方法对其扩增产物的Ct值、引物与模板的结合效率、PCR产物的溶解曲线方面进行分析,证明RRS2引物对是转基因大豆Roundup Ready最佳品系特异性检测引物。     

我国马铃薯病毒的种类及脱毒种薯生产过程中病毒的检测

对近年来我国各马铃薯产区病毒发生情况进行分析,详细列出马铃薯主产区病毒病种类及各主要马铃薯病毒的分布情况。分析表明,我国很多马铃薯产区尚缺少全面、系统的马铃薯病毒调查。同时比较了我国各地区马铃薯脱毒种薯生产过程中对病毒的检测规程,并分析了马铃薯A病毒(PVA)的检疫风险。     

马铃薯脱毒试管苗二次结薯量的试验研究

马铃薯脱毒试管苗在防虫温室生产一季微型薯,生产期间通过加强肥水管理和病虫害防治获得健壮的苗,收获微型薯后,再进行大田移栽,测定其二次结薯情况。结果表明,抗疫白产量为26808kg·hm-2,润者为19715kg·hm-2。其产品可作为原种一代,既解决了马铃薯脱毒试管苗的综合利用问题,又缩短了育种年限。     

转基因植物中标记基因定性PCR检测方法研究

为了建立以标记基因为检测靶标的高效定性检测方法,本研究系统地分析了目前中请商业化的转基因植物中标记基因的应用频率,选取了应用频率高或在未来应用潜力大的标记基因neomycin phosphotransferasell (NPTII)、phosphinothricin acetyltransferase(PAT)、5- ...     

茶尺蠖核型多角体病毒荧光定量PCR检测方法的建立

根据茶尺蠖核型多角体病毒（Ectropis oblique nucleopolyhedrovirus, EoNPV）基因序列设计一对引物,并从感染该病毒的虫体中提取EoNPV基因组DNA,进行PCR扩增,将该基因片段与载体pMD18-T连接,转化入大肠杆菌TG1中,经单克隆菌落筛选及测序鉴定后得到重组质粒,以该质粒为荧光定量PCR标准品模板稀释后建立标准曲线。构建的标准曲线线性关系良好,相关系数为0.989,检测范围为10³~10⁸拷贝/µL,特异性和重复性较好。该方法可以准确地判断出病毒拷贝数,为茶尺蠖核型多角体病毒在虫体内增殖动态的研究和病毒制剂的质量检测提供了方法依据。     

植物组织培养中污染控制技术的研究现状

分析了植物组织培养过程中的污染原因,结合外植体消毒技术的研究现状,提出如何控制由外植体引发污染的方法。选择合适的外植体和消毒剂,采用联合消毒方法,对外植体初代培养中内源污染的控制效果比较明显。另外,对于难消毒的外植体,配合使用抗生素能有效地控制污染。     

槟榔隐症病毒1型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

为了建立一种快速、精准且能定量分析槟榔隐症病毒1型（Areca palm velarivirus 1, APV1）的检测方法。本研究参照GenBank中已登录的APV1全基因组序列,在p21蛋白基因保守区域和p60蛋白基因保守区域之间设计1对特异性RT-PCR引物,并构建阳性重组质粒;在p60蛋白基因保守区域部分设计荧光定量PCR特异性引物和TaqMan-MGB探针,利用阳性重组质粒,构建标准曲线,并对该检测方法的敏感性、特异性、稳定性及其应用效果进行验证。结果显示：该方法对阳性质粒标准品检测的敏感性达3.0×10¹ copies/μL级别,是常规RT-PCR敏感性的100倍;标准曲线显示,C_t值与拷贝数的对数呈线性关系,其标准曲线方程为y=-3.2748x+42.957,扩增效率为102%,相关系数R²为0.9992;该方法对APV1的检测具有较好的特异性,其他槟榔病原物及内生菌不会对本方法产生非特异性干扰;批内与批间重复性试验结果显示,该方法对APV1的检测具有较好的重复性和稳定性;利用该方法对海南万宁、琼海、定安、文昌等4个市（县）采集的181份疑似样品进行检测,阳性率分别为91.95%、86.95%、89.65%、73.68%,其阳性的病毒拷贝数最高达1.59×10⁷copies/μL,表明海南部分地区APV1病毒载量较高、流行情况比较严重。     

苗期PCR检测玉米丝黑穗病的取样时期及部位研究

以2份抗病及2份感病玉米自交系为试验材料,模拟玉米丝黑穗病适宜的侵染及田间发病条件,采用室内菌土接种方法培养玉米幼苗,通过PCR检测病原菌侵染率,研究苗期PCR检测抗、感玉米自交系的最佳取样时期和检测部位.结果表明,SSR标记SR3可用于玉米丝黑穗病室内接种鉴定;同一自交系不同的取样时期叶鞘侵染率均显著高于叶片侵染率;感病自交系与抗病自交系三叶期第3叶叶鞘的PCR侵染率差值极显著高于其他取样时期和取样部位,且该期4份自交系的侵染率与田间接种条件下的发病率呈显著正相关,为鉴别抗感自交系最佳的取样时期和部位.     

马铃薯主要病毒保毒植物试管保存技术及其效果的研究

本文报道了１９８７～１９９０年对马铃薯主要病毒毒源试管封闭保存的研究结果．保毒植物为普通烟草、心叶烟、德伯尼烟、番茄、千日红，洋酸浆等．在无菌条件下，温度为２０～２５℃，２０００～３０００ｍ烛光照，取其０．５～１ｃｍ大茎尖消毒后扦插在试管培养基上培养，因保毒植物种类不同，其成活率为５７．６％～１００％，平均为８７．１％，进管２０～２６天生根发育正常．在试管内发育成株时，可进行单节切段更新繁殖，其生长发育比大茎尖初次进管时速度快，一般６～１２天生根发育正常，并保持试管毒源纯度和含毒量．     

SYBR Green实时荧光定量PCR检测利玛原甲藻的研究

建立应用SYBR Green实时荧光定量PCR技术快速定量检测利玛原甲藻的方法。结果表明,理论上,该方法对于4个利玛原甲藻细胞便可检测出,灵敏度较高;实际应用时检测出的细胞数为(505±14.72)cells/L(镜检为600 cells/L,误差为15.83%,符合海洋调查规范中浮游生物调查误差在20%以内的要求)。本检测方法具有快速、特异、准确等优点,可作为海洋环境监测中定性定量检测利玛原甲藻的方法。     

NCM-ELISA检测马铃薯Y病毒(PVY)技术的研究及应用

血清学方法是病毒检测的主要手段。本试验通过对马铃薯Y病毒(PVY)的提纯,免疫家兔制备PVY抗血清,并提取PYV免疫球蛋白IgG作为NCM-ELISA反应为一抗,以市售羊抗兔抗血清为二抗,在硝酸纤维素膜(NCM)上进行NCM-ELISA反应检测PVY,建立PVY NCM-ELISA检测反应体系。试验结果显示,NCM-ELISA具有反应特异性强,灵敏度高的优点,检测植物叶片样品的最高稀释度可达到1:250。通过对田间40份样品的NCM-ELISA和DAS-ELISA检测比较,其检测结果吻合率达到100%。由于NCM-ELISA方法可以将样品点在硝酸纤维素膜上,并且可贮存几个星期或将膜送到其他实验室进行检测,因此具有操作简单,使用方便,检测成本低等优点。     

《建筑摄影》课程教改研究中对茶文化的思考

近些年高校都相继增设了摄影专业,在摄影专业中《建筑摄影》是摄影专业的必修课,对于提高学生的摄影水平有着重要的作用。《建筑摄影》课程对于学生的摄影基础理论知识和专业技术知识有较高的要求。传统的教学方法比较死板,不利于提高学生的摄影水平和学习兴趣,需要对课程进行改革,而将茶文化融入到《建筑摄影》课堂教学中是课程教改的重要内容之一,教师需要在对茶文化进行深入了解的基础上将茶文化应用到课堂教学之中,建立以学生为主导的教学机制。     

茶文化视角下《出纳实务》课程思政的教学设计研究

茶文化视角下《出纳实务》课程思政教学设计工作的推进,主要任务需明确茶文化在现代人才教育中的价值体现,以及充分了解该项工作推进的现实意义.教育工作者既要提出《出纳实务》课程思政的教学设计新思路,还要设计切实可行的教学设计实施方案.