哮喘小鼠气道血管生成及其机制的实验研究

目的观察急性、慢性哮喘小鼠气道血管生成的变化,探讨其机制.方法24只BALB/c小鼠随机分为3组,每组8只,即正常对照组、急性哮喘组和慢性哮喘组.通过卵白蛋白(OVA)多次腹腔注射致敏和反复滴鼻激发,建立急性、慢性哮喘小鼠模型.末次激发后24 h处死动物,右肺行灌洗留取支气管肺泡灌洗液(BALF),左肺和气管制备病理切片.病理切片行HE染色和抗Ⅷ因子免疫组织化学染色,显微镜下计数气管黏膜固有层、黏膜下层血管密度.ELISA法检测BALF中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF)及内皮抑素含量.结果(1)急性哮喘组气道血管密度无明显变化;慢性哮喘组气道血管密度明显高于正常对照组(P＜0.01).(2)急性、慢性哮喘组BALF中IL-4浓度均明显高于正常对照组(P值均＜0.01),慢性哮喘组低于急性哮喘组(P＜0.01);急性哮喘组IFN-γ浓度明显低于正常对照组(P＜0.01),慢性哮喘组与正常对照组无显著性差异;急性、慢性哮喘组IL-4/IFN-γ比值均明显高于正常对照组(P值均＜0.01),慢性哮喘组明显低于急性哮喘组(P＜0.05).(3)急性、慢性哮喘组BALF中VEGF和内皮抑素浓度均明显高于正常对照组(P值均＜0.01),急性、慢性哮喘组间无明显差异;慢性哮喘组VEGF/内皮抑素比值明显升高(P＜0.01),急性哮喘组无明显变化.结论(1)慢性哮喘小鼠气道内血管生成明显增加,急性哮喘小鼠气道内无明显气道血管生成.(2)慢性哮喘小鼠气道血管生成可能与气道内Th1/Th2型细胞因子失衡和血管生成促进因子、抑制因子比例失衡有关.     

银杏叶片联合布地奈德吸入治疗对哮喘儿童辅助性T细胞亚群的调节作用

目的: 观察银杏叶片联合布地奈德对哮喘儿童外周血辅助性T细胞(Th)亚群的影响.方法: 65例中、重度哮喘儿童随机分为两组:激素治疗组34例,单纯吸入布地奈德气雾剂治疗6个月;联合治疗组31例,吸入布地奈德气雾剂且同时口服银杏叶片6个月.测定治疗前后血浆中IL-4,IFN-γ水平,同时以20例健康儿童为正常对照组.结果: 两哮喘组治疗前、后血浆IFN-γ水平均低于正常对照组(P＜0.01),治疗后IFN-γ水平均高于治疗前(P＜0.01),两哮喘组治疗后IFN-γ水平无明显差异(P＞0.05);两哮喘组治疗前、后血浆IL-4和IL-4/IFN-γ均显著高于正常对照组(P＜0.01或P＜0.05);治疗后两组IL-4和IL-4/IFN-γ均下降(P＜0.01),且联合治疗组低于激素治疗组(P＜0.01).结论: 银杏叶片与布地奈德具有协同作用,联合应用更有利于纠正失衡的Th亚群.     

支气管哮喘缓解期患儿T辅助细胞功能状态评估

目的评估哮喘缓解期患儿TH亚群功能状态,探讨支气管哮喘容易复发的免疫学机制.方法采用ELISA检测20例哮喘缓解期患儿和11例健康儿童PBMC 培养24h后上清液中IL-4、IFN-γ、IL-10浓度以及血清IgE浓度,采用ELISPOT检测培养5h后PBMC内合成IL-4和IFN-γ的阳性细胞百分比,同时计数静脉血EOS. 结果哮喘缓解期患儿静脉血EOS和血清IgE水平均明显高于对照组(P<0.001和0.05);哮喘对照组PBMC培养上清中IL-4和IL-10水平明显高于正常对照组(t=2.684和3.794,P<0.05和<0.01),IFN-γ非常显著低于正常对照组(t=4.257,P<0.001);IL-4/IFN-γ比值明显高于正常对照组(t=3.729,P<0.01);哮喘对照组PBMC中IL-4阳性细胞百分率明显高于正常对照组(t=2.174,P<0.05),IFN-γ阳性细胞百分率较正常对照组显著降低(t=2.437,P<0.05);IL-4阳性细胞/IFN-γ阳性细胞比值明显高于正常对照组 (t=2.913,P<0.01). 结论哮喘缓解期患儿仍然存在TH2/TH1亚群失衡,主要表现为外周血EOS升高、血清IgE升高、PBMC生成IL-4和IL-10增加,而IFN-γ降低,PBMC中IL-4阳性细胞百分比增高,IFN-γ阳性细胞百分比降低,IL-4/IFN-γ和IL-4阳性细胞/IFN-γ阳性细胞比值增高,这可能是哮喘容易复发的原因之一,临床医生应重视和坚持哮喘缓解期的治疗.     

哮喘Th1/Th2失衡及牛膝多糖和地塞米松的作用

目的:研究牛膝多糖对哮喘Th1/Th2失衡的免疫调节作用,以及其与地塞米松作用的异同之处.方法:清洁级雄性SD大鼠随机分为六组:正常对照组(C),哮喘组(A),牛膝多糖(ABPS)治疗组(T1、T2、T3),地塞米松治疗组(T4).采用卵清白蛋白复制大鼠哮喘模型;夹心酶联免疫吸附试验(sandwichELISA)法检测血及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IFN-γ水平.结果:A组大鼠血及BALF中IL-4水平均较C组高(P＜0.01),BALF中IFN-γ水平低于C组(P＜0.01).ABPS治疗各组血及BALF中IL-4水平均明显低于A组,血中IFN-γ水平高于A组,但BALF中IFN-γ水平与A组相比无明显差异.T4组IL-4水平最接近C组,而IFN-γ水平与ABPS治疗组相似.结论:ABPS纠正哮喘Th1/Th2失衡的作用与地塞米松有相似之处,在哮喘的治疗中至少可以替代地塞米松的一部分作用,同时减轻其副作用.     

氨茶碱对哮喘患儿TH2/TH1细胞因子的调节作用

目的探讨氨茶碱治疗哮喘的抗炎作用机理.方法采集20例缓解期过敏性哮喘患儿PBMCs与氨茶碱共同培养,按不同浓度(0、5、10、20mg/L)分为哮喘对照组(ACG)、处理组1(ATG1)、ATG2和ATG3,同时设立正常对照组(NCG).采用ELISA检测培养24h后各组PBMCs上清液中白细胞介素4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)浓度和血清IgE浓度,采用ELISPOT检测培养5h后PBMCs内合成IL-4和IFN-γ的阳性细胞百分比,同时作外周血EOS计数.结果哮喘缓解期患儿静脉血EOS和血清IgE水平均明显高于NCG(P<0.01和P<0.05);ACG PBMCs合成和分泌IL-4明显高于NCG,而合成和分泌IFN-γ明显低于NCG,IL-4/IFN-γ比值和IL-4阳性细胞/IFN-γ阳性细胞比值明显高于NCG;20mg/L氨茶碱能显著抑制PBMCs合成和分泌IL-4,促进IFN-γ的分泌,显著降低IL-4/IFN-γ比值和IL-4阳性细胞/IFN-γ阳性细胞比值.结论哮喘缓解期患儿仍然存在TH2/TH1亚群失衡,20mg/L氨茶碱能纠正TH1和TH2细胞因子的失衡状态,这可能是临床治疗浓度氨茶碱抗炎症作用的主要机制.     

清热解毒制剂宫颈用药对HPV感染者局部免疫因子变化的影响

目的:观察清热解毒制剂宫颈用药对人乳头状瘤病毒(HPV)感染者的临床疗效及对局部免疫因子的影响。方法:将高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)持续感染而无宫颈组织学病变患者100例随机分为治疗组和对照组,治疗组以中药清热解毒制剂宫颈局部上药处理,对照组仅随访观察。采用酶联免疫法(ELISA)测定入组时及随访6、12个月时两组患者宫颈局部环境中γ-干扰素(IFN-γ)及白介素-4(IL-4)的水平;随访6、12个月复查HR-HPV及宫颈液基细胞(TCT),以HPV清除率为指标评价临床疗效。结果:与入组时比较,随访期间两组患者宫颈局部环境中IFN-γ水平均明显升高,IL-4水平均明显下降,IFN-γ/IL-4均明显升高(P0.01),其中治疗组各指标与对照组同期比较均有显著性差异(P0.05或P0.01);在随访期间,治疗组6个月时的HPV转阴率明显高于对照组(P0.01),随访12个月时治疗组仍优于对照组(P0.05)。在随访6和12个月时,HPV清除者的IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4均明显高于未清除者(P0.01),而IL-4的水平明显低于未清除者(P0.01);所有患者在治疗过程中均无严重不良反应。结论:清热解毒制剂宫颈局部上药可清除HPV感染,且安全有效;其作用可能与上调IFN-γ表达、下调IL-4表达,扭转IFN-γ/IL-4比值有关。     

IL-4、IFN-γ及LTE4浓度在婴幼儿喘息性疾病中的变化及其意义

目的 探讨患喘息性疾病的婴幼儿血清白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及尿白三烯E4(LTE4)浓度的变化及其意义.方法 采用竞争性酶联免疫吸附法( ELISA)检测22例急性期、恢复期喘息性疾病患儿(喘息组),20例急性期非喘息的下呼吸道感染患儿(非喘息组),20例健康体检儿(正常对照组)血清IL-4、IFN-γ及尿LTE4水平,分析IL-4与IFN-γ的比值,分析IL-4、IFN-γ与尿LTE4的相关性.结果 喘息组急性期血清IL-4水平较非喘息组急性期及正常对照组均明显升高(P ＜0.05,0.01);血清IFN-γ水平明显降低(P＜0.01);尿LTE4水平较正常对照组明显升高(P＜0.01),但与非喘息组急性期比较差异无统计学意义(P＞0.05);喘息组恢复期血清IL-4水平较急性期明显下降(P＜0.01),但仍高于正常对照组(P＜0.01);血清IFN-γ水平明显升高(P＜0.01),但仍低于正常对照组(P＜0.01);尿LTE4水平明显降低(P＜0.01),但仍高于正常对照组(P＜0.01).喘息组急性期血清IL-4/IFN-γ比值较非喘息组急性期及正常对照组均明显升高(F=15.86,P＜0.01);恢复期血清IL4/IFN-γ比值较急性期明显下降(t=4.14,P＜0.01),但仍高于正常对照组,且有统计学差异(t =5.94,P＜0.01).喘息组急性期尿LTE4水平与血清IL-4水平呈正相关(r=0.82,P＜0.01),与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.81,P＜0.01).结论 IL-4、IFN-γ及LTE4可能共同参与婴幼儿喘息性疾病的气道炎症反应,喘息患儿存在Th1/Th2免疫失衡.     

CD8mAb对呼吸道合胞病毒诱导的哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察CD8mAb对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导哮喘小鼠气道炎症的影响. 方法:Balb/c小鼠50只,随机分成5组(n=10):磷酸盐缓冲液(PBS)对照组;卵白蛋白(OVA)组;OVA/RSV模型组;CD8mAb治疗组;IgG2αmAb治疗对照组. 应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发复制小鼠哮喘模型,观察实验动物气道炎症和气道反应性变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)作细胞分类计数,测定BALF上清中白细胞介素(IL)-4, IL-5, 干扰素(IFN)-γ含量并采用三色光流式细胞分析法检测气管旁淋巴结(PBLN)中CD4 , CD8 T细胞及细胞内细胞因子IFN-γ, IL-4, IL-5表达. 结果:与模型组相比,CD8mAb可明显减轻小鼠气道炎症和气道高反应. CD8mAb治疗后BALF中嗜酸性粒细胞及上清中细胞因子IFN-γ, IL-4, IL-5含量明显减少(P均<0.01),CD8 (IFN-γ , IL-4 , IL-5 )T细胞百分比及Tc2/Tc1比值明显下降(P均<0.01). PBLN中CD8 (IFN-γ , IL-4 , IL-5 )T细胞百分比与BALF中IFN-γ, IL-4, IL-5含量呈显著正相关(分别rs=0.765, P<0.01; rs=0.825, P<0.01; rs=0.893, P<0.01). 结论:CD8mAb对RSV诱导的哮喘小鼠气道炎症和气道高反应具有抑制作用,其部分机制可能与致敏条件下病毒感染引起CD8 T细胞功能发生转化,即由产生IFN-γ为特征的细胞毒CD8 T细胞转化为产生IL-4, IL-5为特征的非细胞毒CD8 T细胞有关.     

慢性阻塞性肺疾病患者TH17细胞的表达及功能研究

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者TH17细胞的表达及功能。方法:选取COPD稳定期患者30例作为COPD稳定期组,门诊不吸烟的健康体检者30名为正常对照组。通过流式细胞术检测外周血TH17细胞的表达,ELISA检测血浆中白介素(IL)-17、IL-4、干扰素(IFN)-γ水平。结果:外周血中TH17细胞比例COPD稳定期组要高于正常对照组(P0.01),ELISA检测表明,COPD稳定期组血浆中IL-17和IFN-γ水平均明显高于正常对照组(P0.01),2组血浆中IL-4水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:TH17细胞在COPD中的表达增加,参与了COPD慢性炎症过程。     

复方甘草酸苷对哮喘大鼠的免疫调节作用

目的探讨复方甘草酸苷对哮喘大鼠的免疫调节作用。方法Wistar大鼠随机分成健康对照组（Ⅰ组）、哮喘模型组（Ⅱ组）、复方甘草酸苷哮喘治疗组（Ⅲ组）、地塞米松哮喘治疗组（Ⅳ组）,采用卵清蛋白（ovalbumin,OVA）氢氧化铝混合液腹腔注射致敏和OVA超声雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型。所有大鼠在末次激发后6h取中心静脉血及左肺支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）,行细胞计数与分类,并测定细胞因子IL-4和IFN-γ含量。结果Ⅱ组静脉血及BALF中中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞计数和IL-4含量显著高于Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组（P〈0.01）,IFN-γ含量显著低于Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组（P〈0.01）;②Ⅲ组与Ⅰ组相比,静脉血及BALF中中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞计数和IL-4含量升高,IFN-γ含量降低,但均无统计学意义（P〉0.05）;③Ⅲ组与Ⅳ组相比,静脉血及BALF中中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞计数和IL-4含量升高（P〉0.05）,IFN-γ含量显著升高（P〈0.01）。结论复方甘草酸苷能明显促进Th1细胞因子IFN-γ的产生,减少Th2细胞因子IL-4的产生,减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与调节Th1／Th2细胞免疫平衡有关。     

红霉素对支气管哮喘儿童外周血单个核细胞IL-2、IFN-γ的影响

目的 研究红霉素对支气管哮喘儿童白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)的影响.方法 应用ELISA法检测80例哮喘儿童(哮喘组),激素吸入后(激素吸入组)40例及激素吸入+红霉素口服后(红霉素组)40例,健康儿童40例(对照组)的外周血单个核细胞(PBMC)IL-2、IFN-γ水平.结果 支气管哮喘儿童IL-2、IFN-γ明显低于对照组(P<0.01),激素吸入组及红霉素组IL-2、IFN-γ明显升高(P<0.01),红霉素组为著(P<0.01),但均低于对照组(P<0.05或0.01).结论 支气管哮喘儿童IL-2、IFN-γ水平低下,红霉素可以升高IL-2、IFN-γ,从而减轻TH细胞的失衡.     

地塞米松对急性过敏性哮喘小鼠肺AQP5表达的影响

目的 观察水通道蛋白5(AQP5)在急性过敏性哮喘小鼠肺组织的改变,以及地塞米松对其的影响,初步探讨AQP5在哮喘发病机制中的作用.方法 建立急性过敏性哮喘小鼠模型,并随机分为急性哮喘组、对照组和地塞米松治疗组,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中自细胞总数及分类计数、ELISA法测定IL-5和IFN-γ水平,RT-PCR和免疫组化法检测AQP5在肺组织的表达以及观察肺组织形态学的改变.结果 (1)哮喘组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均高于对照组(P＜0.01),IFN-γ水平低于对照组(P＜0.01),治疗后白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均明显下降(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),IFN-γ水平明显上升(P＜0.01);(2)哮喘组AQP5 mRNA水平明显高于对照组(P＜0.01),治疗后表达明显下降(P＜0.01);(3)哮喘组肺组织可见较弥漫的炎性改变,黏液分泌增多,血管壁水肿明显,血管周围有大量的炎症细胞渗出物,治疗组形态学改变明显减轻:AQP5表达于正常对照组的肺泡上皮细胞、呼吸道的表层柱状上皮细胞和黏膜下腺腺泡细胞的顶膜,哮喘组表达呈强阳性,地塞米松治疗后表达明显减弱.结论 AQP5在急性哮喘小鼠肺组织内过度表达,可能与黏液高分泌有关,地塞米松可以下调AQP5的表达,可明显减轻小鼠肺部的炎性、水肿和黏液高分泌的病理生理表现.     

CC16及转录因子T-bet、GATA-3对支气管哮喘患者气道炎症的调控作用

目的探讨Clara细胞分泌蛋白(CC16)及转录因子T-bet、GATA-3在支气管哮喘患者气道炎症中的价值。方法采取病例对照研究,收集25例哮喘急性发作期患者和33例健康对照组。采外周静脉血分离血浆,提取外周血单个核细胞(PBMC),用ELISA测定血浆中CC16、IFN-γ、IL-4的水平;用RT-PCR法检测PBMC转录因子T-bet mRNA和Gata-3 mRNA表达水平。结果哮喘组CC16及IFN-γ分别为(21.96±7.31)ng/mL和(118.73±22.59)pg/mL,明显低于对照组[(64.88±25.27)ng/mL和(145.53±29.50)pg/mL,P均0.01],哮喘组IL-4高于对照组[(425.22±4.37)pg/mL比(69.72±10.15)pg/mL,P0.01]。哮喘组T-bet mRNA、T-bet/GATA-3表达水平(0.12±0.01,0.25±0.04)显著低于对照组(0.48±0.12,1.89±0.65)(P均0.01),GATA-3 mRNA表达(0.45±0.05)较对照组(0.30±0.08)明显升高(P0.01)。CC16与T-bet mRNA表达水平、T-bet/GATA-3呈正相关(r值分别为0.792和0.761,P均0.01);与GATA-3 mRNA无明显相关性(r=-0.146,P=0.551)。结论哮喘患者CC16水平降低,对气道炎症的保护性削弱,可能与T-bet/GATA-3和IFN-γ/IL-4的失衡有关。     

肺炎链球菌3型多糖对支气管哮喘小鼠气道炎症及Treg/Th17细胞的影响

目的观察肺炎链球菌3型多糖(T3P)对支气管哮喘小鼠气道炎症以及Treg/Th17细胞的影响,探讨T3P对哮喘小鼠的免疫调节作用。方法 BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和T3P组,每组8只。哮喘组以卵清蛋白(OVA)致敏、气道激发建立哮喘模型,对照组以PBS代替,T3P组在OVA致敏前皮下注射T3P进行干预。观察小鼠肺组织病理改变,对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,ELISA法检测血清OVA特异性IgE(OVA-IgE)以及BALF中白介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-10、IL-17浓度,实时荧光定量PCR法检测肺组织中转录因子Foxp3和RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测Treg和Th17细胞占CD4~+细胞百分比。结果 T3P组小鼠肺组织炎症反应程度弱于哮喘组,血清OVA-IgE,BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞比例以及IL-4、IL-17浓度均低于哮喘组(P<0.05),IFN-γ、IL-10浓度高于哮喘组(P<0.05),小鼠肺组织Foxp3 mRNA表达水平及Treg占CD4~+细胞百分比均高于哮喘组(P<0.05),RORγt mRNA表达水平和Th17细胞占CD4~+细胞百分比均低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和T3P组小鼠肺组织Foxp3-mRNA/RORγt-mRNA比值及Treg/Th17细胞比例与BALF中嗜酸粒细胞数量呈负相关。结论 T3P可以通过抑制过敏原特异性IgE表达调节Th1/Th2、Treg/Th17细胞平衡,抑制气道炎症。     

NGF参与支气管哮喘大鼠气道炎症的发生及作用机制

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor, NGF)对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响及作用机制.方法 24只雄性SD大鼠分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)和抗NGF组(C组),每组8只.测定各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总细胞及细胞分类计数;HE染色观察气道病理改变;RT-PCR和ELISA法检测各组大鼠白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、NGF mRNA和蛋白表达水平.结果 B组与A组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数增多(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达增加(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达减少(P＜0.01).C组与B组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数减少(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达减弱(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达水平无显著差异.B组BALF中NGF含量与细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞呈正相关(r=0.833、0.944、0.949,P＜0.05);与IL-4含量呈正相关(r=0.944,P＜0.01),与IFN-γ含量不相关(r=0.122,P＞0.05);与肺组织中IL-4 mRNA表达水平呈正相关(r=0.848,P＜0.05),与IFN-γ mRNA表达不相关(r=0.611,P＞0.05).结论 NGF与哮喘大鼠气道炎症密切相关,它可以通过使Th2型细胞因子分泌亢进参与哮喘的发生.     

Ⅰ型NKT细胞在哮喘小鼠气道炎症形成中的作用

目的:观察Ⅰ型NKT细胞在哮喘小鼠气道炎症形成中作用。方法:24只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和过继转移组,每组8只;随机选取8只CD1d-/--BALB/c小鼠为CD1d-/-组。对照组和哮喘组、CD1d-/-组分别采用PBS和卵清白蛋白(OVA)致敏和激发,过继转移组采用OVA致敏,在第1次激发前24h给予Ⅰ型NKT细胞尾静脉注射。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和气道杯状细胞;姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)各细胞分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平;流式细胞仪检测肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅰ型NKT细胞的数量。结果:哮喘组小鼠肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅰ型NKT细胞的数量明显高于对照组(均P<0.05);过继转移组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞增多,过继转移组小鼠BALF中嗜酸细胞数量、血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显高于哮喘组(均P<0.05);CD1d-/-组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞增多,CD1d-/-组小鼠BALF中嗜酸细胞数量、血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显低于哮喘组,但明显高于对照组(均P<0.05)。结论:Ⅰ型NKT细胞可以增强哮喘小鼠气道炎症,但并不是哮喘小鼠气道炎症形成的必需因素。     

黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘模型大鼠白细胞介素4和γ干扰素的影响

目的通过测定与分析各组大鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)含量,观察黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘(CVA)模型大鼠免疫功能的影响,进而探讨黄龙止咳口服液调节CVA免疫功能紊乱的作用机制。方法利用卵蛋白(OA)和氢氧化铝共同激发致敏建立CVA大鼠模型,将大鼠分为正常组、模型组、黄龙高剂量组、黄龙中剂量组、黄龙低剂量组、先声咳喘宁组、布地奈德组,记录引喘诱咳时2 min内大鼠咳嗽次数及血清和支气管BALF中IL-4、IFN-γ含量。结果与正常组比较,模型组咳嗽次数明显增多(P<0.01),血清和支气管BALF中IL-4含量显著升高(P<0.01),IFN-γ含量降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组咳嗽次数均明显减少(P<0.01),血清及BALF中IL-4含量明显降低,IFN-γ含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);黄龙高剂量组与黄龙低、中剂量组比较,咳嗽次数明显减少,血清及BALF中IL-4含量明显降低,IFN-γ含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与先声咳喘宁组比较,黄龙高剂量组血清IFN-γ值相对升高,BALF中IL-4值相对降低,IFN-γ值相对升高,差异有高度统计学意义(P<0.01);与布地奈德组比较,黄龙高剂量组血清IFN-γ值相对升高,BALF中IL-4值相对降低,IFN-γ值相对升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄龙止咳口服液通过降低机体的IL-4含量、升高IFN-γ含量发挥治疗CVA的作用。     

外周血Th1/Th2、Treg/Th17细胞因子对重症脓毒症病人近期预后的预测价值

目的探讨外周血Th1/Th2、Treg/Th17细胞因子对重症脓毒症病人近期预后的预测价值。方法将120例重症脓毒症病人作为观察组,另选取同期健康体检者103名作为对照组,均行外周血Th1/Th2细胞因子[γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4]、Treg/Th17细胞因子[转化生长因子β(TGF-β)、IL-17]水平检测并对比。所有病人均随访观察28 d,根据观察组病人存活情况将其分为死亡组与生存组,对比2组外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17、IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17水平,采用多因素logistic回归性分析法分析各细胞因子水平与重症脓毒症病人近期死亡的关系,另采用ROC曲线分析各指标对重症脓毒症病人近期死亡的预测价值。结果观察组外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平均高于对照组(P < 0.01),IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17均低于对照组(P < 0.01);病人28 d病死率为25.00%;死亡组外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平均高于存活组(P < 0.01),IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17均低于存活组(P < 0.01);年龄增大,APACHE-Ⅱ评分和SOFA评分高,血肌酐、IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平升高是影响病人近期死亡的危险因素,IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17比值降低是病人近期死亡的保护因素(P < 0.05~P < 0.01);外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平联合预测重症脓毒症病人住院28 d内死亡的灵敏度高于单独预测,AUC高于单独预测(P < 0.01);IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17联合预测重症脓毒症病人近期死亡的灵敏度高于单独预测,AUC高于单独预测(P < 0.01)。结论重症脓毒症病人外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平均异常升高,IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17均降低,且其水平变化情况与病人近期预后有关,均是病人住院28 d内死亡的影响因素,且均对病人28 d内死亡具有一定的预测价值,但各指标联合预测的价值更高。     

哮喘和过敏性肺炎患者肺泡巨噬细胞释放白细胞介素-12的差异及意义

目的:观察哮喘和过敏性肺炎(HP)患者肺泡巨噬细胞(AM)释放白细胞介素-12(IL-12)能力的差异并探讨其意义.方法:对哮喘及PH患者各10例进行支气管肺泡灌洗(BAL)获取AM,经脂多糖刺激培养后取上清液用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测量IL-12含量,并与10例健康者作对照.结果:哮喘组IL-12水平不但低于HP组也低于对照组(P均<0.01);HP组IL-12水平不但高于哮喘组也高于对照组(P<0.01).结论:IL-12水平的改变在哮喘及HP二者的病理过程中起着重要作用.     

白细胞介素-4、干扰素-γ及核因子-κB p65在解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠哮喘模型中的表达

目的探讨白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)与核因子-κB(NF-κB)p65在解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠哮喘模型中的表达及意义。方法 15只无特定病原体级BALB/c小鼠随机分为对照组、卵蛋白(OVA)组、解淀粉芽孢杆菌组(细菌组),每组5只。对照组小鼠以生理盐水致敏/激发;OVA组小鼠以0.2 g·L~(-1)OVA混合液致敏,并以25.0 g·L~(-1)OVA激发;细菌组小鼠以1013cfu·L~(-1)解淀粉芽孢杆菌致敏/激发。酶联免疫吸附试验测定各组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平;免疫组织化学法检测小鼠肺组织中NF-κB p65表达。结果 OVA组和细菌组小鼠肺组织中NF-κB p65表达显著高于对照组(P<0.01),细菌组和OVA组小鼠肺组织中NF-κB p65表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。3组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比较差异有统计学意义(F=90.59、435.09、117.37,P<0.01);OVA组和细菌组小鼠血清IFN-γ水平显著低于对照组(P<0.01),IL-4水平和IL-4/IFN-γ显著高于对照组(P<0.01);细菌组与OVA组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比较差异均无统计学意义(P>0.05)。直线相关分析显示,OVA组小鼠血清IL-4水平与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.87,P<0.01);肺组织中NF-κB p65蛋白表达与血清IL-4水平呈正相关(r=0.91,P<0.01),与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.93,P<0.01)。细菌组小鼠血清IL-4水平与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.92,P<0.01);肺组织中NF-κB p65蛋白表达与血清IL-4水平呈正相关(r=0.97,P<0.01),与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.81,P<0.01)。结论 IL-4、IFN-γ在哮喘发病中起作用,而NF-κB p65表达变化可影响IL-4、IFN-γ水平,NF-κB p65在哮喘炎症调控中发挥重要作用。