曲古抑菌素A对HL-60细胞分化的影响

目的 探讨曲古抑菌素A(TSA)在体外诱导急性早幼粒白血病细胞HL-60分化的作用.方法 采用溴化四甲基偶氮唑蓝法检测TSA对HL-60细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期;通过检测细胞分化特异性抗原CD11b的表达研究细胞分化作用;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测c-myc基因mRNA的表达.结果 经TSA作用后,细胞增殖受抑制,细胞周期阻滞在G0和G1期,P<0.01;TSA作用48 h后,细胞分化率达15.24%;c-myc表达随TSA作用时间延长而降低.结论 TSA对HL-60细胞具有抑制增殖和诱导分化作用.     

抗氧化剂对三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡作用的影响

目的 :探讨细胞内抗氧化剂与氧化砷 ( As2 O3 )诱导细胞凋亡的关系。方法 :采用 HL-60细胞为体外模型 ,采用流式细胞术观察不同抗氧化剂对氧化砷诱导细胞凋亡的影响。结果 :自由基清除剂超氧化物歧化酶( SOD)、过氧化氢酶 ( CAT)、维生素 C ( V-C)和巯基化合物乙酰半胱氨酸 ( CYS)可拮抗氧化砷诱导的细胞凋亡 ;砷制剂主要诱导 HL -60细胞 G2 -M期细胞凋亡 ;氧化砷对端粒酶有微弱抑制作用。结论 :砷制剂与细胞内巯基及自由基清除酶等抗氧化剂结合 ,致使酶活性下降 ,细胞抗氧化能力下降 ,可能是砷制剂诱导细胞凋亡的机理之一。     

曲古抑菌素A促进As2O3诱导HL-60细胞分化与分子机制的研究

目的：研究曲古抑菌素A能否促进小剂量三氧化二砷（As2O3）诱导HL-60细胞分化并对其机制进行初步探讨.方法：用MTT实验测定药物对细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞表面CD11b表达率观察药物对细胞的分化作用; RT-PCR方法检测p21和cyclin D3在mRNA水平的表达变化.结果：HL-60细胞经曲古抑菌素A和（或）小剂量As2O3作用24 h后,联合用药组较单用As2O3组能明显抑制细胞增殖,促进细胞分化,p21在mRNA水平表达增加,cyclin D3在mRNA水平表达降低.结论：曲古抑菌素A能促进小剂量As2O3诱导HL-60细胞的分化,其机制可能与细胞周期蛋白cyclin D3和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21的表达变化有关.     

曲古抑菌素A诱导HL-60细胞凋亡机制的研究

目的:探讨曲古抑菌素A(TSA)在体外诱导急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡的机制.方法:采用MTT方法检测TSA对HL-60细胞增殖的影响.流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达.结果:0.1μmol/L的TSA可明显抑制细胞增殖,P<0.01;0.05 μmol/L的TSA可使细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05),但0.1 μmol/L的TSA才能引起细胞凋亡(P<0.01);经0.1 μmol/L的TSA作用12 h后,Bax、Caspase-9和Caspase-3基因表达明显升高,P<0.01.结论:TSA诱导HL-60细胞凋亡的机制在于引起细胞周期阻滞,上调Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达.     

白杨素诱导白血病细胞HL-60凋亡及其机制

目的:检测白杨素诱导白血病细胞HL-60凋亡及其机制。方法:分别利用MTT实验和Annexin V-FITC/PI双染实验检测细胞增殖和凋亡。Western blot技术检测相关通路蛋白变化。结果:白杨素可以明显诱导白血病细胞HL-60凋亡。白杨素处理后细胞的p-AKT蛋白水平明显下降。结论:白杨素能够通过AKT通路诱导HL-60细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡作用机制研究进展

三氧化二砷治疗白血病和其他肿瘤的机制主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡。其诱导白血病细胞凋亡的途径主要有降解融合蛋白，线粒体途径，激活Caspase家族，抑制NF-κB、细胞增殖和端粒酶活性等。现就其诱导白血病细胞凋亡的作用机制作一综述。     

羟基喜树碱诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的 :探讨国产羟基喜树碱 (HCPT)对 HL - 6 0细胞的作用机制和规律。方法 :应用细胞形态学检查 ,DNA凝胶电泳及流式细胞仪分析检测。结果 :HCPT 1mg/ L和 5 mg/ L作为 HL - 6 0细胞 4h细胞凋亡率分别为 5 0 .6 %和 6 8.6 %。光镜检查见细胞核固缩、碎裂 ;电镜检查见染色质向核周边凝集。 DNA电泳显示典型的梯状条带。当 HCPT浓度超过 5 mg/ L或作用超过 4h,细胞凋亡率无明显增加 ,出现饱和现象。HL - 6 0细胞经 HCPT作用后 ,S期细胞显著减少 ,G0 / G1 期细胞增加。结论 :HCPT诱导 HL - 6 0细胞出现凋亡并具有饱和效应 ,HCPT为 S期特异性药物。临床上 HCPT应与细胞周期非特异性药物联合用药。     

白藜芦醇诱导HL-60细胞凋亡机制的实验研究

背景与目的:探讨白藜芦醇(resveratml,Res)诱导人早幼粒白血病HL60细胞凋亡的机制.材料与方法:用不同浓度Res作用HL-60细胞,倒置显微镜观察细胞的形态学变化,MTY法检测Res对HL-60细胞增殖的抑制作用,确定Res作用于HL-60细胞的半数抑制浓度(IC50).Western blot法检测Res作用HL-60后Caspase-3活性的变化及GADD45a、Annexin A1、Bcl-2/Bax、Cleaved-Caspase 3表达的变化.结果:Res处理后,HL-60细胞体积变小,细胞的折光性减弱,细胞内出现颗粒样物质,且随着Res浓度的增加上述形态变化增强.12.5～200 μmol/L浓度的Res可明显抑制HL-60细胞的增殖,具有时间和剂量依赖性(P<0.05),24 h的IC50为75.64 μmol/L.Res处理后,HL-60细胞Caspase-3活性增强,12 h达高峰,24 h开始下降;细胞的Annexin A1、GADD45α、Bax、Cleaved-Caspase 3蛋白表达量升高,Bcl-2蛋白表达量下降,Bcl-2/Bax比值下降.结论:Res抑制HL-60细胞增殖,并通过依赖Caspase-3途径诱导HL-60细胞凋亡,GADD45α、Annexin A1参与了凋亡过程.     

苦参碱诱导HL-60细胞株凋亡作用的实验研究

 目的　研究苦参碱（MAT）诱导HL-60细胞株凋亡的作用及其机制。方法　采用 CCK-8法检测不同浓度MAT对HL-60细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡以及线粒体跨膜电位的变化;分光光度法检测Caspase-9活性。结果　0.25～2.0 mg／ml MAT对HL-60细胞有生长抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（F＝67.83,P＜0.05）;MAT处理48 h后,细胞凋亡率明显增高,并呈剂量依赖性（t值分别为4.685、6.300、9.641、6.786,均P＜0.05）;1.0 mg／ml MAT处理后48 h内,细胞线粒体跨膜电位逐渐降低（F＝54.83,P＜0.05）,Caspase-9活性逐渐升高,呈时间依赖性（F＝72.31,P＜0.05）。结论　MAT可能通过降低细胞线粒体跨膜电位、激活Caspase-9而诱导HL-60细胞凋亡。     

小剂量As2O3体外诱导HL-60细胞发生非终末分化分子机制的研究

目的探讨增强子结合蛋白C／EBPs在小剂量三氧化二砷（As2O3）诱导HL-60细胞发生非终末分化中的作用。方法采用瑞式染色观察细胞形态，WSTl实验测定细胞增殖变化，测定和分析细胞周期，NBT还原实验测定细胞分化状态，RT-PCR方法检测C／EBPct和C／EBPε的mRNA表达。结果HL-60细胞经全反式维甲酸（ATRA）作用24h后，随着细胞分化的发生，C／EBPε mRNA的表达明显增加，C／EBPα mRNA的表达降低。HL-60细胞经As2O3作用24h后，C／EBPα mRNA的表达降低，C／EBPε mRNA的表达轻微增加。结论经As2O3和ATRA诱导后不同分化状态HL-60细胞，C／EBPα mRNA的表达降低，二者差异无显著意义；C／EBPε的表达差异较大（P〈0．05），二者差异有显著意义。小剂量As2O3诱导HL-60细胞发生非终末分化可能是由于C／EBPε不能持续表达升高引起的。     

小剂量As_2O_3体外诱导HL-60细胞发生非终末分化分子机制的研究

目的探讨增强子结合蛋白C／EBPs在小剂量三氧化二砷(As_2O_3)诱导HL-60细胞发生非终末分化中的作用。方法采用瑞式染色观察细胞形态,WST1实验测定细胞增殖变化,测定和分析细胞周期,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测C／EBPα和C／EBPε的 mRNA表达。结果HL-60细胞经全反式维甲酸(ATRA)作用24 h后,随着细胞分化的发生, C／EBPε mRNA的表达明显增加,C／EBPα mRNA的表达降低。HL-60细胞经As_2O_3作用24 h后, C／EBPα mRNA的表达降低,C／EBPε mRNA的表达轻微增加。结论经As_2O_2和ATRA诱导后不同分化状态HL-60细胞,C／EBPα mRNA的表达降低,二者差异无显著意义;C／EBPε的表达差异较大(P<0．05),二者差异有显著意义。小剂量As_2O_3诱导HL-60细胞发生非终末分化可能是由于C／EBPε不能持续表达升高引起的。     

甲异靛诱导白血病细胞HL-60凋亡及机制探讨

背景与目的:甲异靛可有效治疗慢性粒细胞白血病,但其抗白血病的机制尚不清楚。本研究拟观察甲异靛诱导急性白血病细胞株HL-60细胞凋亡的作用及促凋亡机制。方法:用台盼蓝拒染实验观察甲异靛对HL-60细胞增殖抑制作用;琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带;荧光显微镜观察细胞形态学的变化;流式细胞术检测细胞凋亡率和Fas蛋白的表达;免疫蛋白印迹法分析caspase-9、caspase-8、caspase-3、PARP、bcl-2、bax和胞浆细胞色素c的含量。结果:甲异靛可抑制HL-60细胞增殖和诱导其凋亡。20μmol/L甲异靛处理HL-60细胞12～48h可明显抑制HL-60细胞增殖;20μmol/L甲异靛作用于HL-60细胞1h,凋亡百分比为(3.70±0.56)%,当延长至3h、6h和12h凋亡细胞比例分别上升至(19.80±1.13)%、(29.20±2.69)%和(47.05±7.70)%,较阴性对照组[(2.65±0.78)%]明显增高(P<0.05)。HL-60细胞经甲异靛处理3h后出现细胞核染色质浓集和DNA梯形条带。甲异靛处理HL-60细胞1h后死亡受体Fas阳性率由(9.35±0.21)%升高到(21.30±1.27)%(P<0.05)。甲异靛可活化HL-60细胞的caspase-8、caspase-9、caspase-3和PARP,降低抗凋亡蛋白bcl-2的表达和上调促凋亡蛋白bax,并升高细胞浆中细胞色素c的浓度。caspase-3抑制剂(z-DEVD-fmk)可以减少甲异靛对HL-60细胞的增殖抑制,降低细胞凋亡率。100μmol/Lz-DEVD-fmk预处理HL-60细胞后再加入20μmol/L甲异靛,5h后凋亡率为(16.5±5.5)%,甲异靛组为(29.8±5.4)%(P<0.05);12h后计数,抑制剂加甲异靛组活细胞高达(3.57±0.18)×105/ml,甲异靛组活细胞仅为(1.80±0.14)×105/ml(P<0.05)。结论:甲异靛可诱导HL-60细胞凋亡,其机制与caspases和bcl-2家族蛋白的调节有关。     

三氧化二砷对HL-60细胞凋亡及Survivin和Caspase-3表达的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导HL-60细胞凋亡过程中Survivin基因表达以及Caspase-3蛋白变化情况。方法:采用7.5μmol/L As2O3和20μmol/LAc-devd-cho单独或联合作用于HL-60细胞,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Survivin mRNA、免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的变化,流式细胞术检测HL-60细胞的凋亡率。结果:7.5μmol/LAs2O3作用HL-60细胞24h和48h后,其凋亡率分别为(31.93±0.34)%和(55.91±0.52)%,Survivin mRNA比值分别为51.42%和22.37%,Caspase-3蛋白激活逐渐增加;20μmol/L Ac-devd-cho对HL-60细胞凋亡和Survivin mRNA表达均无影响;20μmol/L Ac-devd-cho和7.5μmol/L As2O3共同作用HL-60细胞24h和48h,细胞凋亡率分别为(9.61±0.21)%和(13.05±0.35)%,分别与As2O3单独作用组相比有显著性差异(P<0.05),Survivin mRNA比值分别为52.14%和21.08%,分别与As2O3单独作用组相比无显著性差异(P>0.05),Caspase-3蛋白激活被阻断。结论:As2O3诱导HL-60细胞凋亡与抑制Survivin基因表达、激活Caspase-3蛋白的活性有关。     

番荔枝内酯化合物squamocin诱导白血病HL-60细胞凋亡

目的：研究番荔枝内酯化合物ｓｑｕａｍｏｃｉｎ诱导白血病ＨＬ－６０细胞凋亡作用。方法：采用ＭＴＴ法检测番荔枝内酯单体化合物ｓｑｕａｍｏｃｉｎ对白血病细胞株ＩＬ－６０细胞增殖的抑制作用;ＤＮＡ凝胶电泳检测细胞凋亡;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测ｂｃｌ－２,ｂａｘ,ｐ２１＾ＷＡＦ１,磷酸化ｐ４４／４２ ＭＡＰＫ的蛋白水平变化。结果：ｓｑｕａｍｏｃｉｎ处理ＨＬ－６０细胞５天后,细胞生长受到明显的抑制,ＩＣ５０为０．１７μｇ／ｍｌ。ＤＮＡ凝胶电泳可见典型的ＤＮＡ梯形带。ｓｑｕａｍｏｃｉｎ处理ＨＬ－６０细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测结果呈现ｂｃｌ－２,ｂａｘ,ｐ２１＾ＷＡＦ１蛋白表达无明显变化,而磷酸化的ＭＡＰＫ量显著减少。结论：ｓｑｕａｍｏｃｉｎ能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡,且与ｂｃｌ－２、ｂａｘ、ｐ２１＾ＷＡＦ１蛋白     

Fas／FasL信号通路在千金子甾醇诱导HL-60细胞凋亡中的作用与机制研究

目的：在明确千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡的基础上,从Fas/FasL信号通路的角度探讨其诱导凋亡的分子机制。方法 HL-60细胞培养体系中分别以千金子甾醇终浓度2．5、10、40μg/ml作用24 h后CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用,光学及荧光显微镜下观察细胞形态学变化,Annexin Ⅴ/PI 流式细胞术检测细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应法检测Fas/FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平,比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性。结果千金子甾醇可明显抑制HL-60细胞的增殖,增殖抑制率分别为（34．9±3．7）％、（54．6±5．2）％、（61．3±4．3）％,细胞呈典型凋亡形态学改变,细胞早期凋亡率分别为（23．4±3．1）％、（35．7±4．3）％、（53．2±3．9）％。Fas、FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平明显上调（P＜0．01）,caspase-8和caspase-3活性显著增高（P＜0．01）。结论千金子甾醇可以诱导HL-60细胞发生剂量依赖性细胞凋亡,其机制与上调Fas/FasL凋亡信号通路有关。     

Bax和Fas在真菌多糖体外诱导HL-60细胞凋亡中的变化与作用

目的 研究真菌Polyporus sp.M05多糖APS-1(一种多孔菌多糖SP.M05-1)和APS-2对白血病细胞HL-60增殖抑制及诱导凋亡作用,并探讨其分子机制.方法 运用活细胞计数法检测多糖的增殖抑制作用并选择药物浓度;碘化啶(PI)染色后利用流式细胞术检测细胞凋亡作用;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因表达.结果 多糖对HL-60细胞有增殖抑制作用,并随着浓度的增大和作用时间延长作用增强;APS-1作用48 h后凋亡率达47.9%,APS-2作用细胞48 h后凋亡率为26.8%,与阴性对照相比差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR检测到APS-1作用后细胞中Bax、Fas及半胱天冬酶(Caspase)-3基因上调,APS-2作用后细胞中Bax和Caspase-3基因上调,而Fas基因表达无变化.结论 Polyporus sp.M05中提取的多糖APS-1和APS-2对自血病细胞HL-60具有增殖抑制和诱导凋亡作用,APS-1可同时通过线粒体途径和死亡受体途径诱导HL-60细胞凋亡,而APS-2通过线粒体途径诱导HL-60细胞凋亡.     

Arsenic trioxide downregulates telomerase activity in HL-60 cells

Telomeres are the specialized nucleoproteincomplexes at the physical ends of eukaryoticchromosomes[1]. Telomere length decreases along with increasing cycles of cell divisions. Telomere shortening has therefore been proposed to play a role in cellular senescence. Telomerase is a protein-RNA enzyme complex that adds a six-base DNA sequence (TTAGGG) to the ends of chromosomes and thereby prevents their shortening. This enzyme is specifically activated in most malignant tumors but is usuall…