羊膜移植对急性碱烧伤角膜中MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的 :探讨羊膜移植对角膜碱烧伤后基质金属蛋白酶 (MMP 9)及其抑制剂 (TIMP 1)在小鼠角膜中的表达影响及意义。方法 :将 4 0只昆明小鼠随机分为实验组和对照组 ,采用 1mol·L-1氢氧化钠溶液烧伤小鼠角膜 ,建立炎症性角膜碱烧伤动物模型 ;对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术 ;对照组不行羊膜移植。然后在羊膜移植术后第 2 ,7,14 ,2 1d处死动物。用免疫组织化学染色方法和计算机图像分析系统检测小鼠角膜烧伤后基质金属蛋白酶在角膜中的分布及其平均光度值。结果 :在对照组 ,角膜中MMP 9在第 2d出现表达 ,第 7d达高峰 ,以后逐渐降低。TIMP 1开始表达不明显 ,第 7d出现表达 ,14d达高峰 ,以后逐渐降低。羊膜移植组各时间点MMP 9表达低于对照组 ,而TIMP 1表达高于对照组。结论 :羊膜移植术可通过调节基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达平衡 ,从而抑制和延迟碱烧伤后角膜融解的发生和发展。     

小鼠单疱病毒角膜炎行羊膜移植MMPS及TIMPS表达的变化

目的:探讨羊膜移植对BalB/c小鼠感染单纯疱疹病毒-1(HSV-1)后基质金属蛋白酶-2,-8,-9及组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-1,TIMP-2表达变化及其在单疱病毒角膜炎(HSK)病程中所起的作用。方法:将40只小鼠随机分为实验组和对照组,将5μl(105PFU)HSV-1感染小鼠单侧右眼角膜,建立单疱病毒角膜炎的动物模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术。分别在HSV-1感染后的第2,7,14 d处死小鼠,用免疫组化方法对小鼠感染HSV-1后MMP-2、MMP-9、MMP-8、TIMP-1、TIMP-2的表达变化进行研究,探讨它们在单疱病毒性角膜炎发展过程中所起的作用。结果:在对照组,角膜中MMP-2、MMP-8、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2在第2天出现表达且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中。感染后第14天可见坏死性角膜炎及角膜溃疡形成,同时角膜基质和浸润的炎性细胞中尤其溃疡处,可见MMP-2、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2表达显著增加。溃疡区域有大量MMP-8阳性染色的中性粒细胞。实验组各时间点MMP-2,-9,-8活性均低于对照组,TIMPS表达高于对照组。结论:行羊膜移植可抑制角膜细胞和浸润的炎性细胞分泌产生MMPs,促进TIMPS表达,可能对上皮性角膜炎与溃疡形成过程起重要的抑制作用。     

羊膜移植对单纯疱疹病毒性角膜基质炎中明胶酶活性表达的影响

目的:探讨羊膜移植对小鼠角膜1型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染后发生角膜基质炎(HSK)的角膜中明胶酶(Gelatinases)的活性表达变化的影响,探讨羊膜移植对HSK的治疗作用及其机制。方法:将50只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组各25只,105pfu/L HSV-1病毒(SM44株)感染小鼠角膜,制作HSK小鼠模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术,对照组角膜不行羊膜移植术。在羊膜移植术后第0,2,7,14,21天处死动物取角膜。应用明胶酶谱(Gelatin Zymography)方法和计算机图像分析系统检测小鼠角膜明胶酶的酶活性表达的变化。结果:角膜感染HSV-1后,明胶酶谱显示:实验组小鼠角膜中酶原形式的pro-MMP-9(92 kU)在AMT后第2,14,21天表达增强。活性形式的MMP-9(82 kU)在AMT后各时间点均有表达,但在第2,14及21天表达增强。pro-MMP-2(72 kU)条带在AMT后各时间点均有表达。而MMP-2活性条带(62 kU)则出现在AMT后第14天和21天。对照组小鼠角膜中明胶酶的表达变化情况跟实验组类似,但是,MMP-2活性各时间点均较实验组为强(P<0.05)。而MMP-9的活性在羊膜移植后第2天(P<0.01),第14及21天(均为P<0.05)均较实验组为强。结论:羊膜移植对HSV-1感染小鼠角膜后引起的坏死性角膜基质炎形成的角膜上皮缺损和角膜基质溃疡有明显的修复作用,这种作用的机制可能是通过抑制明胶酶的活性表达而实现的。     

MMP-2,9在羊膜移植治疗小鼠单疱病毒性角膜炎中的表达

目的:观察保存人羊膜移植(AMT)对单疱病毒性角膜基质炎(HSK)中基质金属蛋白酶(MMPs)在小鼠角膜中表达的影响,从而探讨羊膜移植对MMP-2,9的调节作用及对HSK治疗的潜在作用。方法:雌性BALB/c小鼠眼角膜接种Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1,SM44毒株)以诱发单纯疱疹性角膜炎。选取右眼感染2 d后出现典型树枝状上皮病变的小鼠40只,随机分为实验组和对照组,实验组小鼠右眼角膜行AMT,对照组仅缝合睑裂不行AMT。术后第0,2,7,14天处死动物取出角膜,应用Western blot方法对结果进行分析,增强化学发光法(ECL)检测小鼠角膜中MMP-2,9的表达。结果:在对照组,角膜中MMP-2,9在第2天表达增加,第7天表达暂时减弱,第14天时达高峰。实验组羊膜移植2 d后角膜炎症反应明显消退且上皮缺损较快愈合,MMP-2,9阳性表达减弱,各时间点MMP-2,9的表达均低于对照组,其差异均有显著性意义(P<0.01)。结论:羊膜移植术可通过抑制角膜细胞及浸润的炎症细胞产生的MMP-2,9,促进快速上皮化并减轻角膜基质炎症反应,抑制角膜新生血管化和溃疡的形成。     

羊膜移植治疗急性碱烧伤TGF-β 1表达的实验研究

目的 探讨角膜碱烧伤后羊膜移植的可行性,并分析TGF-β1在碱烧伤中的作用机制.方法 45只健康家兔,以1 mol/L的氢氧化钠烧伤右眼制成眼前段碱烧伤模型.随机分为3组,每组15只.Ⅰ组行新鲜羊膜的移植术、Ⅱ组行保存羊膜的移植术、Ⅲ组未行手术作为对照.各组于术后1、2和4周分别处死动物,收集角膜标本做TGF-β1免疫组化检查.结果 ①在裂隙灯显微镜下观察:羊膜移植组新生血管范围、炎症反应、疤痕化在术后7、14和28 d明显低于对照组,新鲜组比保存组好.②碱烧伤后TGF-β1在3组角膜基质均显著表达.羊膜组在各个时间点表达低于对照组(P<0.05),新鲜组比保存组低.在同一组内各个时间点TGF-β1表达无明显差异(P>0.05).结论 羊膜移植可以明显减少碱烧伤角膜TGF-β1的表达及可以有效的减少疤痕的形成;TGF-β1的表达与疤痕增生程度成正相关性,其在疤痕的形成中可能起了重要作用;新鲜羊膜在抑制疤痕的生成方面优于保存羊膜.     

实验性单纯疱疹性角膜炎中基质金属蛋白酶mRNA的表达

目的 :探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒 (HSV 1)所致的角膜炎中基质金属蛋白酶 (MMPs)mRNA的表达。方法 :雌性BalB/c小鼠眼角膜接种HSV 1(KOS株 )以诱发单纯疱疹性角膜炎 (HSK)。收集正常角膜及感染后第 2 ,7,14d的感染角膜 ,应用RT PCR技术检测基质金属蛋白酶 2 ,基质金属蛋白酶 9(MMP 2 ,MMP 9)的mRNA表达。结果 :除正常角膜MMP 9mRNA为阴性表达其他各组均获得阳性目的片断。感染后第 2dMMP 2mRNA表达较正常组差异没有显著性 (P >0 .0 5 ) ,感染后第 7dMMP 9mRNA表达与第 2d的表达差异没有显著性 (P >0 .0 5 ) ,其他各组差异均有显著性意义 (P <0 .0 1)且大体上呈随感染天数增加表达增高的趋势。结论 :在实验性HSK中存在基质金属蛋白酶mRNA的表达且MMP 2 ,MMP \|9的mRNA高表达参与了角膜溃疡、角膜新生血管的形成等病变的发生。     

生物羊膜移植治疗眼化学烧伤的临床观察

目的：：评价生物羊膜移植治疗眼部化学烧伤的临床疗效。方法：我院眼科2010年1月-2013年4月眼部化学烧伤患者11例(13眼),其中碱烧伤10例11眼、酸烧伤1例2眼。所有患者行生物羊膜移植术治疗,术后随访半年-一年,观察羊膜植片情况、角膜\结膜情况、视力及并发症。结果：10眼行1次羊膜移植术后2-3周愈合,其中6眼角膜透明、4眼形成角膜云翳;2眼经2次羊膜移植痊愈,形成角膜白斑;1眼经3次羊膜移植术后疤痕愈合,角膜缘新生血管形成,无睑球粘连。所有患者治疗后形成了稳定的眼球表面,视力均有不同程度提高。结论：生物羊膜移植术是治疗眼部化学烧伤的有效方法。     

异种角膜缘上皮移植治疗碱烧伤动物的实验研究

[目的]观察异种角膜缘上皮早期移植对兔角膜碱烧伤的治疗效果。[方法]用鲤鱼角膜作异种角膜缘上皮移植的角膜来源，对角膜缘碱烧伤的兔动物模型进行异种角膜缘干细胞上皮移植术，观察术后新生血管长入角膜的情况以及基质中的炎症反应。[结果]异种角膜缘上皮移植术后，植片与植床粘附良好，基质中细胞浸润减轻，新生血管长入减少，实验组与对照组之间存在显著差异。[结论]异种角膜缘干细胞上皮移植术治疗角膜碱烧伤可减少角膜新生血管的形成，维持角膜缘的细胞屏障功能。     

兔角膜碱烧伤后LYVE-1的表达及意义

目的：研究探讨新西兰大白兔角膜碱烧伤后LYVE-1（淋巴管内皮透明质酸盐受体1）的表达及意义,进一步证实角膜新生淋巴管的存在,揭示其与角膜碱烧伤损伤修复的关系。方法：饲养24只健康新西兰大白兔,左眼制作角膜碱烧伤模型作为实验组,右眼不做手术作为对照组。术后1天、3天、7天、14天分别处死6只兔,免疫组化测定两眼LYVE-1的表达情况。结果：实验组于术后第3天出现表达,第7天、第14天表达增加;实验组术后3天、7天和14天LYVE-1表达均高于对照组。结论：角膜新生淋巴管在角膜碱烧伤中扮演重要角色。     

维生素B2局部用药治疗兔角膜碱烧伤

目的 探讨VitB2在兔角膜碱烧伤中的保护作用及其机制。方法 复制兔右眼角膜碱烧伤模型,设实验组和烧伤组。实验组于烧伤后每日以VitB20.2ml/kg球结膜下注射。烧伤组每日以等量生理盐水注射。分别于第1,4,8,16,32天实验组MDA含量显著低于烧伤组,而SOD活性1-64天明显高于烧伤组,尤其是第4天至第16天的差异具有统计学意义。结论：VitB2对角膜碱烧伤后角膜组织的恢复有明显的促进作用,其机理之一可能与其抗脂质过氧化损伤有关。     

MMP-2、TIMP-2与碱烧伤后角膜新生血管形成的实验研究

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-2组织型抑制剂(TIMP-2)在碱烧伤大鼠角膜新生血管(CNV)形成中的表达和意义。方法:采用碱烧伤大鼠角膜建立CNV模型,摘除角膜作病理切片,多形核白细胞(PMN)记数;免疫组化法检测MMP-2、TIMP-2的表达。结果:烧伤后1d角膜缘PMN开始增多,到CNV7d组PMN增加最明显,此后逐渐减少;免疫组化显示:MMP-2在CNV中阳性表达逐渐增加,于7d表达最明显,此后随炎性细胞的减少而减弱,21d后几乎无表达;TIMP-2则于早期变化不明显,7d表达开始升高,14d达高峰。结论:烧伤后CNV形成早期,MMP-2活性增高,继而TIMP-2表达增加,使MMP-2活性受抑,基底膜降解受阻,新生血管延伸停滞;CNV形成中,MMP-2的表达增加,并与角膜的炎性反应程度一致,PMN浸润可能是CNV形成的关键因素。     

奥美昔芬对子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成及ERK-VEGF/MMP-9通路的影响

目的 观察奥美昔芬对子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成及ERK-VEGF/MMP-9通路的影响。方法 构建子宫内膜异位症模型(EM)大鼠,将其随机分为模型组、奥美昔芬组,通过皮下注射等量的0.9%生理盐水、奥美昔芬100 mg/(kg·d),连续注射42 d,测量术后14 d和48 d各组大鼠异位病灶体积,光镜下观察各组大鼠异位内膜组织形态变化,Western blot法检测大鼠子宫内膜促血管生成素1(Ang-1)、促血管生成素2(Ang-2)、细胞外信号调节激酶(ERK)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白水平情况。结果 术后14 d,与空白组相比,模型组、奥美昔芬组大鼠体内异位病灶体积显著升高(P＜0.05),在术后48 d,与空白组相比,模型组、奥美昔芬组异位病灶体积显著升高(P＜0.05),异位膜上皮细胞、血管增多,与模型组相比,奥美昔芬组异位病灶体积显著降低(P＜0.05),异位膜上皮细胞萎缩、血管减少,大鼠体内Ang-1、Ang-2、ERK、VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P＜0.05)。结论 奥美昔芬可能通过调控ERK-VEGF/MMP-9,降低Ang-1、Ang-2蛋白表达,抑制内膜血管生成。     

冻存羊膜移植并糖皮质激素治疗眼表重度碱烧伤效果

目的 探讨冻存羊膜移植联合应用糖皮质激素对早期重度眼表碱烧伤的疗效。方法 将重度眼表碱烧伤病人34例（38只眼）分为两组，手术组28眼在早期应用糖皮质激素的基础上行冻存羊膜移植术，对照组10眼早期应用糖皮质激素。结果 随访3～12个月，手术组所有病眼术后视力均有不同程度提高，20眼角膜水肿减轻，21眼角膜遗留不同程度的斑翳，4眼角膜恢复透明，1眼持续混浊、水肿并发生角膜溃疡，2眼发生睑球粘连。对照组3眼角膜溃疡，6眼角膜白斑伴角膜血管化，4眼发生不同程度睑球粘连。结论 早期羊膜移植并糖皮质激素治疗严重眼表碱烧伤具有较好的效果。     

细菌性角膜溃疡角膜组织中MMP-2、MMP-9表达的研究

目的:研究细菌性角膜溃疡患者角膜组织中的基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、-9)的表达与分布,探讨其含量的变化与角膜病变的相关性.方法:收集细菌性角膜溃疡患者的病变角膜和正常角膜,应用免疫组化染色方法检测MMP-2、MMP-9在角膜分布和表达,应用图像分析系统分析.结果:细菌性角膜溃疡角膜组织中,MMP-2的阳性表达主要分布于角膜基质层;MMP-9的阳性表达主要分布于角膜上皮层和基底膜附近.病变角膜组织中两种酶的阳性表达均具有统计学意义.结论:MMP-2、MMP-9对细菌性角膜溃疡的发展可能起重要作用.MMP-2参与角膜基质层的损害,MMP-9参与角膜上皮层和基底膜的损害.     

阳和平喘颗粒对慢性哮喘大鼠气道炎症及血清基质金属蛋白酶2和9水平的影响

目的观察阳和平喘颗粒对慢性哮喘大鼠血清中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)、MMP-9及气道炎症的影响。方法取50只清洁级SD大鼠,随机分为正常组,模型组,阳和平喘颗粒低剂量、高剂量组,地塞米松组。采用卵清蛋白致敏激发哮喘。采用苏木精-伊红染色观察哮喘大鼠肺组织病理形态变化,光镜下计数支气管肺泡灌洗液中各炎性细胞,采用ELISA法检测血清MMP-2,MMP-9水平。结果光镜下发现,阳和平喘颗粒低、高剂量组及地塞米松组大鼠气道壁黏膜及周围肺组织炎性细胞浸润较模型组减少,气道上皮细胞增生较模型组明显减轻。与模型组比较,阳和平喘颗粒高剂量组和地塞米松组肺泡灌洗液中细胞总数、各炎性细胞数量及血清MMP-2和MMP-9水平明显降低(P<0.05),而阳和平喘颗粒低剂量组肺泡灌洗液中细胞总数、各炎性细胞数量以及血清MMP-2均无显著变化(P>0.05)。结论阳和平喘颗粒抑制哮喘气道炎性反应与降低血清MMP-2、MMP-9水平有关。     

Change profiles in matrix metalloproteinase-2 and -9 in induced endometriosis in mice

To examine the changes in matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） and -9 （MMP-9） in the development and progression of endometriosis, real time quantitative polymerase chain reaction, enzyme-linked immunoabsorbent assay and gelatin zymography were employed to determine the mRNA and protein levels and activities of MMP-2 and MMP-9 from the first day to the 21^st day after the induction in mice with induced endometriosis （experimental group） and sham-operated animals （controls）. The results showed that the mRNA and protein levels and activities of the MMP-2 and MMP-9 were significantly increased on the first day after the induction and the level of MMP-2 stayed at a level higher than that in the control group. MMP-9 had two or three peaks during the 21 days, taking place at day 1, 4 and 15. It is concluded that the changes in the MMP-2 and MMP-9 might be involved in pathogenesis of endometriosis.