外周血单核细胞miRNA表达谱在肺结核中的诊断价值

目的分析活动性肺结核患者(TB)外周血CD14+单核细胞mi RNA表达谱,筛选一组用于结核诊断及鉴别诊断的分子标志物。方法选取健康对照(HD)、结核菌潜伏感染者(LTBI)、TB各6例,采集外周抗凝血并分离外周单个核细胞(PBMC),再用免疫磁珠技术分选CD14+单核细胞,提取总RNA,利用mi RNA芯片检测CD14+单核细胞中mi RNA表达谱。筛选差异表达的mi RNA分子,利用Taq Man探针q PCR技术在大样本人群中进行验证(HD、LTBI、TB各25例)。结果基因芯片结果显示mi R-487家族可以将三组人群进行有效区分,依据其在不同人群中表达趋势共分为4个基因簇。从每个基因簇中筛选具有代表性的4个mi RNA分子进行Taq Man q PCR验证,包括mi R-487b-3p、mi R-134-5p、mi R-487a-3p、mi R-539-3p,其表达趋势与芯片结果一致。其中TB人群mi R-487b-3p表达量显著低于HD、LTBI,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01);mi R-487a-3p在LTBI、TB人群中表达水平显著低于HD(P<0.01,P<0.05);TB人群mi R-539-3p表达水平显著高于HD、LTBI(P<0.05,P<0.05)。结论 mi R-487家族与结核菌感染、发病的关系密切,其中mi R-487b-3p联合mi R-539-3p可以作为活动性结核诊断标识,而mi R-487a-3p可以作为结核菌感染诊断标识。     

急性单核细胞白血病特异性miRNA分子标志物的鉴定

目的：鉴定急性单核细胞白血病中特异高表达的microRNA（miRNA）。方法：通过分析急性单核细胞白血病细胞系（THP-1）与慢性粒细胞白血病细胞系（K562）的miRNA-seq数据,筛选一批在THP-1细胞系中显著高表达的miRNA,通过实时荧光定量PCR技术对这些miRNA在THP-1和K562细胞系中进行验证,获得在THP-1细胞系中特异高表达的miRNA,再通过实时荧光定量PCR技术在急性单核细胞白血病患者骨髓样品中进行验证,鉴定有望应用于该类疾病临床诊断的分子标志物。结果：最终筛选得到了3个在急性单核细胞白血病中特异高表达的miRNA分子标志物：let-7d-5p、miR-222-3p、miR-221-3p。结论：通过结合组学数据,利用实时荧光定量PCR技术在细胞系及临床样本中的验证,最终鉴定了3个在急性单核细胞白血病中特异高表达的miRNA分子标志物。     

肺结核患者单核细胞趋化蛋白-1的表达及其意义

目的 :研究单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP - 1)在肺结核患者血清及体外培养中的表达 ,初步探讨其在结核发病中的作用。方法 :收集 32例肺结核患者血清标本 ,ELISA方法测定不同类型病例MCP - 1的表达水平 ;分离培养结核患者及正常个体外周血单个核细胞 ,LPS刺激 ,ELISA方法测定上清中MCP - 1的含量。结果 :与健康对照组相比 ,初治型与难治型肺结核患者血清中MCP - 1的浓度显著升高 (P <0 .0 5 ) ,两组间MCP - 1的浓度差异也具有显著性 (P <0 .0 5 ) ;细胞培养上清中患者与对照组的MCP - 1的浓度有明显差异(P <0 .0 5 )。结论 :PBMCs是血清中MCP - 1的来源之一 ,增高的MCP - 1水平可能涉及结核的发病机制以及常规化疗对结核的疗效。     

脊柱结核患者血清特异性循环miRNA表达水平及其临床意义

目的 探究脊柱结核患者血清特异性循环miRNA表达水平及其临床意义.方法 选择2016年6月至2018年9月深圳市第三人民医院收治的50例脊柱结核患者作为观察组,选择同期在上述医院进行体检的50例健康志愿者作为对照组.分别提取其外周血血清中RNA,经miRNA基因芯片检测筛选出差异表达的miRNA,采用实时荧光定量PC...     

MicroRNA⁃145在上皮性卵巢癌及细胞株中表达及其临床意义

目的：研究microRNA?145（miRNA?145）在上皮性卵巢癌患者组织及血清中的表达情况,并探讨其作为肿瘤标记物在上皮性卵巢癌诊断和预后分析中的价值。方法：采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测45例上皮性卵巢癌患者和45例正常人血清标本中miR?145的表达,以及45例上皮性卵巢癌患者组织及8例正常卵巢组织中miR?145的表达。结果：miR?145在上皮性卵巢癌患者血清中相对表达量显著低于正常对照（P＜0.01）;miR?145在上皮性卵巢癌组织中的相对表达量明显低于正常卵巢组织（P < 0.01）;miR?145表达水平随上皮性卵巢癌临床分期的进展呈下降趋势（P＜0.05）,与年龄、组织分级、病理类型、淋巴结转移和CA125的升高无关（P＞0.05）;ROC曲线显示血清miR?145可作为上皮性卵巢癌的分子诊断靶点;Kaplan?Meier 生存曲线显示血清miR?145的表达水平与上皮性卵巢癌患者的无进展生存率及总生存率有关（P＜0.05）。结论：miR?145在上皮性卵巢癌的发生发展中发挥抑癌基因作用,可能成为诊断和预后评价的生物标志物。     

冠心病患者外周血单核细胞中miR-125a-5p、miR-193b的表达

目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease, CHD)患者外周血单核细胞中mi R-125a-5p、mi R-193b的表达水平。方法收集研究对象共102例,分为四组,其中对照组25例(A组),稳定型心绞痛组22例(B组),不稳定型心绞痛组26例(C组),急性心肌梗死组29例(D组)。抽取静脉血,进行单核细胞分离、提取总RNA,实时荧光定量(RT-q PCR),检测外周血单核细胞中mi R-125a-5p、mi R-193b表达水平。结果与A组比较,B组、C组、D组mi R-125a-5p、mi R-193b表达水平显著降低(P <0.01);与B组比较,C组、D组mi R-125a-5p、mi R-193b表达水平显著上调(P <0.01);而C组和D组之间mi R-125a-5p、mi R-193b表达水平差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 mi R-125a-5p、mi R-193b可能参与动脉粥样硬化的发生和进展,可能为动脉粥样硬化治疗的新靶点。     

肺结核患者外周血miRNA分子表达及临床意义研究

目的 探讨肺结核患者外周血微小RNAs(miRNA)分子表达水平及临床意义,为临床早期诊断提供参考依据。 方法 选择2012年1月—2014年12月收治的30例肺结核患者、30例潜伏结核感染患者及30例健康体检者作为研究对象,采用反转录-荧光定量PCR检测活动性肺结核患者(活动组)、潜伏结核感染患者(潜伏组)及健康体检者(对照组)血浆miR-29a、miR-21-5p和miR-155-5p的表达水平,对其进行统计学处理及ROC曲线分析。 结果 活动组血浆miR-29a、miR-21-5p和miR-155-5p表达水平分别为2.11±0.43、4.74±1.29、3.17±0.65,均显著高于对照组和潜伏组(P＜0.05);潜伏组血浆miR-155-5p表达水平为0.96±0.28,显著高于对照组(P＜0.05);潜伏组血浆miR-29a、miR-21-5p与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);miR-29a、miR-21-5p、miR-155-5p诊断活动性肺结核的ROC曲线图下面积分别为0.732、0.846和0.914,敏感度和特异度分别为80.0%和69.2%、73.3%和82.9%、86.7%和90.0%。 结论 在活动性肺结核及潜伏结核感染患者中血浆miR-29a、miR-21-5p和miR-155-5p表达水平均明显升高,可作为诊断活动性肺结核的重要指标,值得临床重视。      

新鲜与陈旧外周抗凝血中miRNA表达变化的研究

目的 比较新鲜与陈旧外周抗凝血中miRNA(microRNA)表达的变化.方法 取5份新鲜及6份陈旧外周抗凝血液样本,提取全血总RNA并测定其纯度与浓度,应用实时定量RT-PCR技术分析外周血中miRNA的表达变化.结果 经过核酸蛋白定量仪检测,新鲜与陈旧外周抗凝血液中总RNA A260/280值为1.8～2.0范围内.实时荧光定量RT-PCR的结果显示:新鲜与陈旧的外周抗凝血液中miRNA RNAU6-2的相对拷贝数差异无统计学意义.结论新鲜与陈旧外周抗凝血液中miRNA RNAU6-2均有表达且无差异.     

内皮素-3基因在乳腺癌患者中的表达及意义

目的：检测内皮素－3（ EDN－3）基因在乳腺癌患者外周血中的表达情况,并分析其临床意义。方法采用实时定量PCR方法检测54例乳腺癌患者（观察组）及60例体检健康女性（对照组）外周血中EDN－3 mRNA的表达情况,并分析其与各临床参数之间的关系。结果 EDN－3 mRNA在外周血中的表达观察组较对照组显著降低,差异有统计学意义（t＝1.467,P＜0.001）,但这种降低在患者不同年龄、不同肿瘤组织类型和大小、有否区域淋巴结转移及远处转移之间差异均无统计学意义（ P＞0.05）。结论 EDN－3基因与乳腺癌密切相关,其相关性只与乳腺癌的发生有关而与其发展无关,实时定量PCR能特异地检测乳腺癌患者外周血中EDN－3 mRNA的表达,能为乳腺癌的筛查与诊断提供有效的检测方法。     

结肠癌患者血清miRNA表达谱分析

目的：探讨结肠癌患者血清中miRNA分子的表达差异,寻找潜在的结肠癌诊断分子标记物。方法以12例正常人血清样本为对照组,采用miRNA芯片技术对12例结肠癌患者血清样本的miRNA表达谱进行分析;随后,扩大患者样本量至40例,扩大对照组样本量至45例,采用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)技术对差异表达的miRNA分子进行验证分析。结果芯片结果显示,与对照组比较,结肠癌患者血清miRNA表达谱发生了显著的变化,其中3条miRNA表达水平上调,21条miRNA表达水平下调;Real-time PCR验证实验结果表明,与对照组比较,结肠癌患者血清中miR-508和miR-502-5p的表达水平明显下调。结论 miR-508和miR-502-5p可作为结肠癌诊断的潜在分子标记物进行开发。     

前列腺癌患者血清miRNA 194和miRNA 206表达水平及临床意义

【摘要】 目的 探讨前列腺癌（PCa）患者血清miRNA 194和miRNA 206表达水平及临床意义。方法 选取2008年5月～2014年12月我院收治的108例PCa患者为PCa组,以及同期就诊的60例良性前列腺增生（BPH）患者为BPH组、前列腺正常者60例为正常组,分析所有纳入研究者的临床及随访资料,记录年龄等一般临床资料和血清miRNA 194和miRNA 206等指标水平及PCa患者肿瘤及预后情况,并比较不同PCa患者间上述资料的差异性。结果 BPH组和PCa组患者血清miRNA 206水平较正常组低（P＜005）,而血清PSA水平和miRNA 194较正常组高(P＜005);且PCa患者其血清miRN A 206水平较BHP患者更低,而血清PSA和miRNA 194水平则更高（P＜005）;Gleason 评分大于7分、临床分期T3~T4期以及出现淋巴结转移和术后复发的PCa患者其血清miRNA 206水平均显著降低,而血清miRNA 194显著升高（P＜005）;死亡患者血清miRNA 206水平均显著低于生存者,而血清miRNA 194水平显著高于生存者（P＜005）;经 Log rank检验,Gleason 评分大于7分、临床分期T3~T4期、出现淋巴结转移、术后复发以及血清miR NA 194水平升高和miRNA 206水平降低的PCa患者其生存时间均较短（P＜005）;经多因素Cox 比例风险回归模型分析,淋巴结转移、术后复发以及血清miRNA 194升高和miRNA 206水平降低均为影响PCa患者预后的独立影响因素（P＜005）。结论 血清miRNA 194在PCa患者中显著上升,而血清miRNA 206水平显著下降,且血清miRNA 194的上升和miRNA 206的下降均为影响PCa患者预后的独立影响因素,因此临床上可将其作为评估PCa患者病情及预后的有效指标。     

慢性阻塞性肺疾病患者和吸烟者CD14+单核细胞Toll样受体的表达及意义

目的 探讨稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者和肺功能正常的吸烟者外周血CD14+单核细胞Toll样受体(TLR)表达的变化及意义.方法 选择COPD稳定期患者30例(COPD组)、健康吸烟者21例(吸烟组)及健康不吸烟者25例(不吸烟组),用肺功能仪测定第一秒用力呼气容积(FEV1)占预计值的百分比(FEV1占预计值%)和FEV1/用力肺活量(FVC);应用流式细胞仪全血双色免疫荧光直标法检测外周血CD14+单核细胞的TLR2、TLR4表达水平,结果 以CD14+细胞TLR相对平均荧光强度(rmfi)和TLR相对阳性细胞百分率(rpcp)表示,并进行TLR2、TLR4表达与肺功能指标相关性分析.结果 COPD组CD14+单核细胞TLR2表达的rmfi(6.3±1.4)和rpcp(52.9%±20.5%)均明显低于吸烟组(分别为8.2±2.2和73.5%±19.O%,均P<0.01)和不吸烟组(分别为11.0±2.4和82.8%±17.9%,均P<0.01);TLR4表达的nnfi(2.2±0.9)明显低于不吸烟者组(3.0±0.5,P<0.01),与吸烟组(2.5±0.6)差异无统计学意义(P>0.05),而rpcp(M=1.3%,Q1～Q3为0.7%～2.4%)则明显低于吸烟组(M=4.7%,Q1～Q3为2.7%～9.4%,P<0.01)和不吸烟组(M:5.3%,Q1～Q3为2.6%～8.4%,P<0.01).吸烟组CD14+单核细胞中TLR2、TLR4表达的rmfi均明显低于不吸烟组(P<0.01,P<0.05);而rpcp与不吸烟组差异无统计学意义(P0.05).CD14+单核细胞TLR2和TLR4的表达与FEV1占预计值%、FEV1/FVC呈显著正相关(均P<0.01).结论 稳定期COPD患者和吸烟者外周血CD14+单核细胞TLR2及TLR4表达显著下调,固有免疫可能受到抑制,TLR表达下调与肺功能下降有关.     

含氧氟沙星和丁胺卡那霉素方案治疗复治肺结核疗效观察

目的 :评价氧氟沙星 (Oflx)和丁胺卡那霉素 (Am K)对复治肺结核疗效。方法 :以 Oflx和 Am K为基础 ,联合其他 2种～ 3种抗结核药物治疗 78例复治涂阳肺结核病人。结果 :3个月痰菌阴转率 86 .5 % ,6个月痰菌阴转率 97.3% ,病灶吸收好转率94.7% ,空洞闭合率 6 6 .7%。结论 :含氧氟沙星和丁胺卡那霉素方案治疗复治肺结核疗效显著 ,是目前治疗复治肺结核较佳方案     

乌体林斯治疗肺结核前后免疫功能的改变及临床意义

目的　研究乌体林斯治疗肺结核对免疫功能的影响。　方法　检测乌体林斯治疗肺结核前后T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞及免疫球蛋白的变化。　结果　在抗结核药治疗的基础上加用乌体林斯可使肺结核病人CD3与CD4/CD8比例明显的提高 (P <0 .0 1) ,自然杀伤细胞稍有改善 (P <0 .0 5 ) ,血清免疫球蛋白水平无明显变化。　结论　乌体林斯可以改善肺结核病人的细胞免疫功能     

洛美沙星联合治疗耐多药肺结核近期疗效观察

目的：探讨洛美沙星对耐多药肺结核治疗效果。方法：对多耐药肺结核采用洛美沙星联合抗结核治疗。结果：治疗组32例取得痰菌阴围率84.38%，病灶总吸收好转率93.8％,空洞缩小和闭合率78.1%。明显高于对照组26例的57.7%（P＜0.05）、53.8%（P＜0.005）和50％（P＜0.05）。结论：洛美沙星对多耐药肺结核治疗效果良好，副作用少。     

肺结核病患者颗粒溶素在外周血中表达水平降低

目的研究肺结核病患者外周血颗粒溶素的表达及其意义。方法收集肺结核患者112例（分为痰菌阳性57例,阴性55例）,分离外周血单个核细胞,抽提总RNA,荧光定量PCR方法检测其颗粒溶素mRNA的表达水平。分析抗结核治疗前后颗粒溶素表达水平的变化。结果治疗前菌阳组PBMC颗粒溶素表达水平显著低于菌阴组（P〈0.05）;治疗前后菌阳组PBMC颗粒溶素表达水平有统计学意义（P〈0.05）。结论肺结核患者外周血颗粒溶素表达水平降低。     

肺结核合并肺真菌病48例

目的探讨减少肺结核合并肺真菌病的发生和误诊。方法以肺结核病情好转或稳定中出现新的症状,x线、CT片显示新病灶或原病灶扩大,痰真菌培养连续3次生长同种真菌且抗真菌治疗后病情改善,痰真菌培养无原真菌生长为标准。48例患者被确诊合并肺真菌病并做回顾性分析。结果本组患者肺结核病灶范围较广泛,空洞多,痰菌阳性率高（32／48）,多有高热、血白细胞[（15～35）×10^9／L]和中性粒细胞计数较高,及广谱抗生素和糖皮质激素使用史,多误诊。结论本病易误诊,临床应予重视,规则使用广谱抗生素和激素可减少其发生率。     

涂阳肺结核患者家庭密切接触儿童感染发病及预防的研究

目的观察涂阳肺结核患者家庭密切接触儿童感染发病情况,探讨儿童感染者预防性治疗方法。方法将涂阳肺结核患者家庭密切接触儿童与非涂阳肺结核患者密切接触儿童感染发病情况进行比较,对儿童感染者分组给予6H、12H、3HR、2HRZ等4种不同的方案进行预防性治疗,随访观察10年发病情况。结果涂阳肺结核患者家庭密切接触儿童感染率为63.6%,非涂阳肺结核患者家庭密切接触儿童感染率为10.4%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。儿童结核感染者预防性治疗组完成治疗率达85%以上,经10年随访患病率为2.2%(4/182),4种方案平均药物不良反应发生率为8.6%。儿童结核感染者非预防性治疗组患病率达45.2%(47/104),两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论涂阳肺结核患者家庭密切接触儿童属于结核病高危人群。早期发现涂阳肺结核患者并给予正规的抗结核治疗,积极动员其家庭成员尤其是儿童及时进行结核病筛查,是结核病管理的一个重要环节。儿童感染者预防性治疗可减少95.1%的结核病发病,是一种可靠预防结核感染的方法,在总体减轻结核病的影响可起到关键性作用。     

肺结核患者生存质量影响因素的研究

目的：为探讨结核患者生存质量（QOL）及其影响因素。方法：采用SF－36、QL－index,KPS等量表,对228例患者和正常对照进行QOL多终点平行测量,通过t检验、方差分析和多元逐频回归分析探讨影响因素。结果：肺结核患者各终点QOL绵显著低于对照组（P＜0．01）;其影响因素是病灶大小、白细胞数、并发症、转氨酶和病程,结论：加强全程导化疗、合理营养、功能康复、心理关怀、社会支持,以提高肺结核患者的QOL。     

肺结核患者心理状态影响因素及干预研究进展

以系统的文献回顾方法,了解肺结核患者心理状态及心理干预研究的现状,结果均显示结核分枝杆菌能够对中枢神经系统产生作用,结核病复发、耐药、痰菌不同都对病人心理状态产生影响。此外,不同年龄、性别、受教育程度等的患者心理状态存在差异。目前肺结核患者心理状态影响因素研究多关注于疾病与宿主方面,还应关注结核病不同阶段以及社会环境因素对其的影响,有侧重的开展心理支持,提高患者治疗依从性。