早实核桃体细胞胚发生和植株再生的影响因素研究

目的 建立2种早实核桃高效和稳定的体胚发生体系,为离体快繁技术及其基础研究提供技术和理论支撑,也为核桃遗传转化体系的构建奠定基础。 方法 分别以实生核桃‘林早香’和嫁接核桃‘中林6号’花后42~77 d的幼胚为试材进行离体培养,通过统计体胚诱导率,筛选体胚的最佳诱导时期;统计多次继代的体胚畸变率,并筛选最适ABA调节浓度;选取发育成熟的体胚进行饱和NH4NO3溶液脱水处理,分别处理0、24、48、72、96和120 h后统计失水量和转株率,探讨脱水程度对体胚植株再生的影响。 结果 外植体的发育时期对体胚发生至关重要,以‘林早香’和‘中林6号’幼胚为外植体进行体胚诱导,最佳诱导时期分别为花后约49 d和56 d,体胚诱导率分别为88.32%和86.67%。体胚经多次继代培养后产生较高畸变率,适量ABA处理不仅降低体胚畸变率,且提高体胚发生率,最佳ABA调节浓度为1.0 mg·L-1。随着体胚脱水时间的延长,体胚失水量逐渐增加,植株再生率先升高后降低,脱水72 h时,‘林早香’和‘中林6号’的体胚萌发率达到最高,分别为56.67%和53.33%,此时失水量分别为38.73%和40.56%。 结论 早实核桃幼果发育过程中,合子胚的体胚发生率随着发育时期变化,适宜发育时期是提高体胚诱导发生的关键;适量ABA在体胚多次继代培养过程中对畸形胚起重要调节作用;适度的脱水处理对核桃体胚再生具有良好的促进作用。     

雷公藤体细胞胚发生及其植株再生

雷公藤(Tripterygium wilfordii)系卫矛科(Celastmceae)雷公藤属植物,在我国很早以前就用于医学和害虫防治,是生产无公害农药的宝贵资源之一(李琰等,2008;夏焱等,2005;陈同素,1933).雷公藤的活性成分主要存在于根部(杨春欣等,2001),但其属多年生木质藤本,生长较慢,人工栽培极少,因而人们对野生资源大量盲目采挖,使资源遭到严重破坏.目前对雷公藤的研究主要集中在有效成分分离鉴定、开发利用等方面(Jun et al.,2007;Canter et al.,2006;周琳等,2006),未见到关于组培快繁及体细胞胚诱导方面的报道.     

黑松未成熟胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以未成熟合子胚为外植体,建立黑松体细胞胚胎发生和植株再生体系。研究基本培养基、2,4-D和6-BA对胚性愈伤组织诱导的影响,探讨ABA和PEG对体细胞胚成熟及植株再生的影响。结果表明:在添加4mg·L-12,4-D+2mg·L-16-BA的DCR培养基上胚性愈伤组织诱导率为3.33%;在添加30mg·L-1ABA+25g·L-1PEG的培养基DCR上,每克愈伤组织体细胞胚数量达72个,体细胞胚的萌发率为63.8%、植株转化率为43.5%,高质量的黑松体胚能提高体胚萌发率和植株转化率,再生植株1个月移栽成活率为50%。该研究可为抗病黑松的快速大规模繁殖提供一条新途径。     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

月季植株再生过程中的影响因素

对近20年月季植株再生过程中的影响因素进行了较为系统的总结,重点介绍了植物生长调节剂、外植体、培养基和培养环境等对月季再生的影响,为建立高效的月季再生体系奠定了理论基础。     

刺五加体细胞胚胎发生过程及解剖学观察

探讨不同外植体、植物生长调节物质种类及配比对刺五加培养物的影响,建立刺五加体胚发生及再生植株体系.结果表明:叶片最易形成愈伤组织.茎次之,根最差.外植体最佳取材时期为4-5月.刺五加愈伤组织最适诱导基质为MS 1.0 mg·L-12,4.D 0.5 mg·L-16-BA;体细胞胚的诱导、发育和分化的最佳培养基为不添加任何生长调节物质的MS培养基.解剖学观察表明刺五加离体胚胎发生过程与合子胚发育过程相同.     

利用悬浮培养和培养基选择改善火炬松的体细胞胚胎发生和植株再生(英文)

三个基固型的火炬松成熟合子胚被培养在附加 8mg·L-12 ,4 D ,4mg·L-1BA ,4mg·L-1KT ,5 0 0mg·L-1水解酪蛋白和 5 0 0mg·L-1谷氨酰胺的愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织 .来自于子叶、胚轴和胚根的愈伤组织在附加 1 6mg·L-12 ,4 D ,0 8mg·L-1BA和 0 8mg·L-1KT的愈伤组织增殖培养基上培养 9周后 ,可获得 16 9%的胚性愈伤组织 .通过建立胚性细胞悬浮系和研究ABA、PEG和活性炭对体细胞胚成熟的促进作用 ,优化的体细胞胚胎发生体系被建立 .71棵再生小苗被用于移栽试验 ,2 3棵小苗在田间移栽成活     

花曲柳体胚发生和植株再生

以花曲柳合子胚的单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400mg·L-1水解酪蛋白、0.25mg·L-16-BA、1.5mg·L-1NAA、70g.L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可以成功诱导产生体胚,诱导率达到34.7%,每个外植体上体胚数量为2～9个。成熟合子胚的子叶在添加0.25mg·L-16-BA、2mg·L-1NAA的MS1/2培养基(其他成分同上)上可以成功诱导产生体胚,诱导率为10.0%。体胚在MS1/2培养基上经过成熟培养后可以正常萌发,萌发率87.6%。萌发的体胚植株在MS1/2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备实生幼苗的外观特征。经炼苗后的体胚苗移植到栽培基质(草炭土:蛭石:珍珠岩体积比为5:4:1)中可以正常生长,成活率为75.0%。     

七叶树胚的离体培养及植株再生

为给七叶树快繁体系的建立和大规模工厂化生产提供理论基础,以七叶树成熟胚为材料,研究不同激素配比条件下离体胚的生长、愈伤组织的诱导、再分化及植株再生.结果表明,适宜胚生长的培养基为不添加任何植物激素的1/2MS,适宜愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L;适宜愈伤组织分化的培养...     

湿地松成熟合子胚直接器官发生及植株再生

以湿地松成熟胚为外植体诱导不定芽发生,初步建立植株再生体系.先用含不同浓度6-BA的液体培养基处理湿地松成熟胚12～36 h,吸干后转移到无激素的培养基上培养.6周后,经60mg·L-1 6-BA液体培养基预处理12 h的胚不定芽诱导率最高达69%,预处理24 h平均每个外植体产芽数达到最高(9～12个),但芽体较小,在继代培养基中伸长较慢;经30 mg·L-1 6-BA液体培养基预处理的胚不定芽诱导频率较低,仅25%～38%,但芽体健壮,在继代培养基中伸长较快;6-BA浓度大于80 mg·L-1时不利于不定芽分化.不定根诱导的研究结果表明,NAA对不定芽生根具有促进作用,在改良1/2GD NAA0.05mg·L-1培养基中培养4周后,生根率达50%,移栽成活率为60%左右.     

油松成熟胚的不定芽诱导及植株再生

以油松成熟合子胚为外植体,通过器官直接发生途径获得再生植株。诱导油松不定芽的最佳基本培养基为DCR,最佳激素组合为TDZ0.1mg/L+NAA0.2mg/L,不定芽生长的最佳激素组合为TDZ0.05mg/L+NAA1.0mg/L;生根最佳培养基为1/2DCR+IBA2mg/L+6-BA0.05mg/L。生根苗移栽到草炭土∶沙=2∶1(体积比)的基质中,成活率为80%。     

香樟未成熟合子胚体胚发生及植株再生研究

以香樟的未成熟幼胚为外植体进行诱导体胚发生影响因素的研究.成功地从香樟幼胚中诱导出胚状体并获得再生植株,MS为基本培养基,蔗糖是最佳的碳源.经2年对初生胚的继代培养,获得胚性愈伤组织;胚性愈伤组织经体胚诱导、体胚成熟、体胚萌发3个过程的诱导后能够获得再生植株.     

樟树胚萌发早期影响因素及植株再生

【目的】植物体细胞胚胎发生和植株再生受多重因素影响。为了完善樟树体细胞胚胎发生培养技术,提高其遗传转化效率,满足樟树用材的需要。【方法】本研究以樟树未成熟种子为试材,探讨了预处理、不同采种时间、活性炭、肌醇及激素浓度对樟树胚萌发早期的影响,并对不同种源樟树胚性愈伤组织诱导体细胞胚胎发生、分化、生根等进行研究。【结果】预处理对樟树幼胚萌发无显著性影响;不同的采种时间对胚萌发率和平均出芽数影响很大;随着活性炭浓度的升高,胚萌发率呈现先升高后下降的趋势;肌醇浓度对樟树幼胚萌发率和平均出芽数均无显著性影响;对6-BA、NAA、IBA和链霉素进行正交设计试验,其影响的主次顺序为:6-BA> NAA>链霉素> IBA;长沙和郴州种源樟树胚性愈伤组织诱导率最高,达66.67%,但生长情况最好的是长沙和岳阳种源胚性愈伤组织;岳阳、郴州、醴陵、长沙、怀化、娄底愈伤组织诱导体胚发生最大诱导率分别为56.41%、42.31%、48.96%、64.71%、63.25%、56.31%;各种源樟树生根率良好,长沙种源有最高生根率89.25%,郴州和醴陵种源樟树最佳生根激素配比为1 mg/L IBA+0.1 mg/L IAA,其余种源生根最适激素均为1 mg/L IBA+0.1 mg/LNAA。【结论】浸泡处理不利于幼胚后期生长发育;附加150 mg/L的活性炭,培养基褐化率较低;6-BA对幼胚早期萌发占主导作用;实验时选择7月未成熟合子胚的长沙种源樟树最佳。     

丽格海棠叶片培养胚状体发生与植株再生研究

将丽格海棠叶片接种于含有不同种类和浓度生长素的培养基上进行培养,结果表明:诱导叶片胚性愈伤组织发生的最适培养基为MS+6-BA0.5+2,4-D1.5,胚状体生长发育的最佳培养基为MS+6-BA0.5~1.0,生根培养基为1/2MS+NAA0.05。     

外植体和基因型对泡桐体外植株再生的影响

利用叶片和茎段为外植体,研究了毛泡桐和白花泡桐胚性愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生情况。结果表明,白花泡桐叶片和茎段胚性愈伤组织诱导的最适培养基分别为MS+0.3mg/L NAA+14mg/L BA和MS+0.3mg/L NAA+8mg/L BA,毛泡桐叶片和茎段胚性愈伤组织诱导的最适培养基皆为MS+0.3mg/LNAA+17mg/L BA。从体细胞胚胎发育所需时间来看,2种泡桐叶片的体细胞胚胎发育能力均高于茎段。     

离体条件下西黄松成熟合子胚不定芽的诱导及植株再生

以西黄松成熟胚为外植体诱导不定芽,在GD 9.85～19.70 μmol·L'-1 6-BA 0.0～14.42 μmol·L-1 NAA上不定芽诱导率最高达65.8%,平均增殖率为7,最大增殖率达10;不定芽形成有2种途径,即子叶直接形成不定芽和子叶组织再分化形成不定芽;NAA不利于外植体不定芽的诱导;不定芽的生长和扩繁采用不加生长调节剂的1/2 GD和1/2 SH培养基;培养基中加入适量的活性炭有利于不定芽和根的生长.不定嫩梢在1/2 GD和1/2 SH附加不同浓度NAA和GA,3的培养基上进行生根诱导,试验结果表明:NAA对不定根的形成起主要作用,在1/2 GD 28.84 μmol·L'-1 NAA 4.17 μmol·L'-1 GA,3培养基中不定梢的生根率为16.7%.在离体培养条件下,以西黄松成熟胚为外植体获得了再生植株.     

翠菊‘花束绯红’下胚轴体胚发生及植株再生

翠菊(Callistephus chinensis)是当今世界主要一、二年生花卉之一、又是我国原产草花中之佼佼者.自1728年由我国传至欧洲然后遍栽世界各地后,至今风靡不衰(陈俊愉,2001).然而,在翠菊的栽培过程中病虫害严重(穆红等,2004),不耐盐碱(刘淑贤,2002),鲜切花瓶插寿命短,不耐包装、运输、贮藏等问题一直影响着翠菊进一步的生产、应用和推广.     

水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料,在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明,附加了5.0 mg·L^-1 NAA和2.0 mg·L^-1 6-BA的激素配比的MS培养基,为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基;在5种不同的外植体中,成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体;在诱导胚性愈伤组织中,成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中,WPM为最佳基础培养基,附加0.1 mg·L^-1 6-BA和0.15 mg·L^-1 2,4-D的激素配比,胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中,MS培养基内添加1.0 mg·L^-1 ABA时,体胚的诱导率最高,达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^-1 IBA和1.0 mg·L^-1 IAA的激素配...