樟芝菌液态发酵合成安卓奎诺尔的条件优化

安卓奎诺尔(Antroquinonol)是药食两用真菌樟芝子实体中的特征代谢产物之一,具有显著的生理活性。然而,在普通液态发酵条件下,樟芝菌丝体无法合成Antroquinonol,作者在添加前体物质和效应物促进樟芝液态发酵合成Antroquinonol的基础上,对其培养基以及发酵条件进行研究。结果表明,在复合添加大豆油和辅酶Q0的基础上,利用单因素实验分别对樟芝菌液态发酵培养基的碳氮源的种类和发酵条件进行了优化,最终确定发酵培养基的最佳碳源为米粉50 g/L,氮源为大豆粉6 g/L和玉米浆粉8 g/L。最适的发酵条件为初始p H 6,接种量为体积分数10%,发酵温度25℃,摇床转速150 r/min,在此条件下Antroquinonol的产量可以达到170.34 mg/L。     

樟芝发酵产物中安卓奎诺尔的提取纯化

对樟芝发酵产物中的生理活性物质安卓奎诺尔的提取纯化工艺技术进行了研究。结果表明,安卓奎诺尔的最佳的提取条件为:提取溶剂为95%乙醇,料液比1∶25(g/m L),提取温度为35℃,提取时间为85 min。提取液再经过二次柱层析进一步纯化。第一次硅胶柱层析最佳条件为:上样量1∶40(w样品∶w硅胶),径高比1∶30,洗脱流速2.0 BV/h,产物中安卓奎诺尔的纯度为70.2%;第二次硅胶柱层析最佳条件为:洗脱剂v苯∶v丙酮=7∶3,上样量w样品∶w硅胶=1∶30,径高比1∶10,洗脱流速1.0 BV/h,最终产品中安卓奎诺尔的纯度达到91.0%。     

响应面法优化樟芝真菌发酵培养条件研究

借助于SAS8.0软件,对樟芝真菌进行发酵工艺条件的优化研究。首先利用Plackett Burman试验设计筛选出影响樟芝真菌发酵的3个主要因素,即接种量、培养温度和葡萄糖添加量。在此基础上用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法进行回归分析。结果表明,接种量与樟芝菌体产量存在极显著的相关性,通过求解回归方程得到优化主要发酵条件,接种量15%、培养温度26.1℃、葡萄糖添加量3.9%。经培养验证,预测值与验证试验平均值接近,此优化条件下樟芝菌体产量可达到7.06 g/L。     

响应面法优化樟芝液态发酵产Antrodin C

分析樟芝液态发酵菌丝体中的活性代谢产物Antrodin C,并以此化合物为目标,采用Plackett-Burman设计和Box-Behnken中心组合响应面分析,对樟芝液态发酵产Antrotin C培养基进行统计学筛选和优化。结果表明：葡萄糖、黄豆粉和MgSO4对Antrodin C的合成影响最为显著。在葡萄糖 72.0g/L、黄豆粉 5.91g/L、MgSO4 0.614g/L时,樟芝液态发酵产Antrodin C最大预测值为178.59mg/L。验证实验Antrodin C实际产量达到(177.83±0.32)mg/L,表明实验建立的模型能较好地预测实际发酵产Antrodin C情况。通过对培养基的优化,樟芝液态发酵Antrodin C产量比优化前(95.72mg/L)提高了85.8%。     

响应面法优化樟芝胞外多糖的发酵条件

为提高樟芝液态发酵胞外多糖产量,本实验对发酵条件进行优化,首先对11种氮源和5种碳源进行初选,然后在单因素实验的基础上,设计了Plackett-Burman实验,筛选出显著影响胞外多糖产量的因素,最后采用四因素三水平的响应面法优化胞外多糖的产量。优化得到最佳发酵条件为:葡萄糖60 g/L、酵母浸粉16 g/L、维生素B₁ 1 g/L、KH₂PO₄ 0.75 g/L、MgSO₄·7H₂O 0.77 g/L、初始pH=5.0、装液量120 mL/500 mL、接种量18%、27 ℃、10 d、100 r/min。该条件下胞外多糖产量为1.23 g/L,较优化前提升了71%。优化后多糖产量有大幅提高,可为后续工业化应用提供参考。     

金属离子促进樟芝深层发酵无性产孢

樟芝(Antrodia cinnamomea)是一种珍稀药食两用蕈菌,其目前最主要的人工培养方式是基于无性孢子接种的深层发酵。为了提高樟芝深层发酵的产孢量及产孢速度,进而提高其种子制备效率及工业化生产效益,该文首先采用单因素法筛选出能显著促进樟芝无性产孢的金属离子,再采用响应面法优化金属离子组合的最佳添加浓度。结果表明,在培养基中单独添加1.0 mmol/L的Ca²⁺、0.1 mmol/L的Fe²⁺及0.1 mmol/L的Zn²⁺可使樟芝最大产孢量较对照组分别提高87.21%、72.39%及35.05%;同时添加0.149 mmol/L的Fe²⁺、2.01 mmol/L的Ca²⁺及0.135 mmol/L的Zn²⁺可使樟芝深层发酵最大产孢量达8.67×10⁷个/mL,较对照组提高133.62%,同时使樟芝无性孢子产量达到最大值的时间缩短24 h。该研究操作方便、成本低廉、效果显著,具有较好的开发价值及应用前景。     

樟芝菌固态发酵生产三萜类化合物

通过单因素实验,考察了固态发酵基质、外加氮源、初始含水量、装料量,接种量及培养温度对樟芝菌(Antrodia cinnamomea)固态发酵生产三萜系化合物的影响。单因素实验结果显示,NH4Cl加量、初始含水量、装料量和接种量对樟芝三萜系化合物含量的影响较显著,以上述显著因素作为随机因子,进行均匀设计实验,采用逐步回归方法对实验结果进行分析。实验结果表明:以小米为固态发酵基质,添加NH4Cl0.2%,初始含水量65%(g水/g干基),1L三角瓶装料量为120g,接种量55%(v/w),培养温度为28℃的条件下,樟芝三萜系化合物含量达到87.62mg/g(干基),比未优化前提高1.56倍;固态发酵产物中三萜系化合物的含量是樟芝液态发酵产物中的5倍。      

樟芝菌固态发酵生产三萜类化合物

通过单因素实验,考察了固态发酵基质、外加氮源、初始含水量、装料量,接种量及培养温度对樟芝菌(Antrodia cinnamomea)固态发酵生产三萜系化合物的影响。单因素实验结果显示,NH4Cl加量、初始含水量、装料量和接种量对樟芝三萜系化合物含量的影响较显著,以上述显著因素作为随机因子,进行均匀设计实验,采用逐步回归方法对实验结果进行分析。实验结果表明:以小米为固态发酵基质,添加NH4Cl0.2%,初始含水量65%(g水/g干基),1L三角瓶装料量为120g,接种量55%(v/w),培养温度为28℃的条件下,樟芝三萜系化合物含量达到87.62mg/g(干基),比未优化前提高1.56倍;固态发酵产物中三萜系化合物的含量是樟芝液态发酵产物中的5倍。     

樟芝真菌发酵培养基优化研究

以麸皮、蛋白胨、MgSO4·7H2O、VB1、葡萄糖、酵母膏、KH2PO4。7种为影响樟芝真菌液体培养的影响因素,分别以菌丝体和胞外多糖为目的产物进行L18（3^7）正交试验,综合以胞外多糖和菌丝体为目的产物进行樟芝真菌液体培养的正交试验分析后得出,樟芝真菌液体培养时的适宜培养基为：麸皮40g／L、葡萄糖25g／L、蛋白胨4g／L、MgSO4·7H2O 0．4g／L、酵母膏2．0g／L、KH2PO4 0．6g／L、VB10．01g／L。     

樟芝固态发酵生产Antroquinonol及萃取Antroquinonl的研究

安卓奎诺尔(Antroquinonol)具有很好的抗癌效果.为了提高樟芝固态发酵中Antroquinonol的产量及其萃取效率,为其工业化生产提供理论参考,本文考察了谷物种类、装料量、初始含水量、外加碳源、氮源含量对樟芝固态发酵产Antroquinonl的影响,并进行了多级逆流浸提方法萃取樟芝固态发酵产品中Antroquinonol的实验.结果表明:优化后的条件为:在1L三角瓶中,大米装料量为110g,初始含水量为50％,外加碳源为2.0g葡萄糖,氮源添加量为0.3g大豆粉.固态发酵中Antroquinonol产量提高了14.44％;用体积分数为95％的乙醇作萃取剂(乙醇与萃取物料比例为10∶1,v/w),以50℃水浴振荡萃取lh为浸提条件进行三级逆流浸提,浸提萃取后残渣中的Antroquinonol残留率小于1％.该法具有溶剂使用量少,萃取效率高的优点.     

响应面法优化牛樟芝高产总三萜发酵培养基

为提高牛樟芝(Antrodia camphorata)菌丝体产三萜类化合物的能力,采用筛选试验(Plackett-Burman,PB)试验和中心组合设计(central composite design,CCD)试验对发酵培养基进行优化。首先通过PB试验对影响菌丝体产三萜类化合物的8个组分进行筛选,确定玉米粉、牛肉膏、黄豆粉为3个主要影响因素,然后依次用最陡爬坡试验、CCD和响应面分析,确定主要因素的最佳浓度。由此得到最佳培养基配方:20 g/L葡萄糖,10 g/L大豆粉,16.07 g/L玉米粉,4.5 g/L牛肉膏,31.93 g/L黄豆粉,1 g/L MgSO4,2 g/L KH2PO4,50 mg/L VB1。采用基本发酵培养基培养牛樟芝其菌丝体中总三萜含量为(12.29±0.43)mg/g,经培养基优化处理后三萜类含量为(15.40±0.15)mg/g,相比初始其产量提高了25.3%。     

尖孢镰刀菌LD105产抑菌多糖固态发酵条件优化

以云南昆明玛卡根际土壤中分离到的尖孢镰刀菌LD105作为发酵菌种,以多糖产量和抑菌率为评价指标,用响应面法优化尖孢镰刀菌产抑菌多糖固态发酵工艺。通过单因素试验,筛选出发酵时间、初始含水量、蔗糖和KH2PO4添加量4?个显著影响因素,研究其交互作用,优化得出最佳发酵工艺条件：发酵时间5?d、初始含水量54%、发酵温度28?℃、初始pH?6、蔗糖添加量3%、KH2PO4添加量0.3%、接种量10%、蛋白胨添加量1.5%、装料量10?g（250?mL锥形瓶为发酵容器）。在此优化条件下,尖孢镰刀菌固态发酵产多糖抑菌率和多糖产量分别为37.6%和30.2?mg/g,抑菌率和多糖产量比优化前分别提高了1.8?倍及1.5?倍。     

利用废弃烟梗发酵生产白僵菌的响应面优化

为实现废弃烟梗资源化利用,以废弃烟梗为主要发酵底料,白僵菌产孢量为响应值,采用响应面法（Response Surface Methodology,RSM）对烟梗发酵生产白僵菌的条件进行了优化。通过Plackett-Burman（PB）试验筛选出影响废弃烟梗发酵生产白僵菌最显著的因素,设计最陡爬坡试验逼近最佳条件区域,进一步设计Box-Behnken Design（BBD）响应面优化,分析并确定最佳条件。结果表明,当培养时间为9.40 d,蛋白胨含量1.21%,酵母粉含量1.03%时,白僵菌孢子产量预测最优值为1.17×10¹⁰个/g,实际孢子产量为1.13×10¹⁰个/g,拟合度达到96.58%,白僵菌产孢量显著提高。因此,采用该方法优化得到的最佳发酵条件合理而有效,对烟草生物防治以及烟梗废料的综合利用具有实际应用价值。     

混菌固态发酵生产菜籽肽工艺条件优化

以肽得率、氮溶解指数和硫苷降解率为指标,通过单因素试验初步得到枯草芽孢杆菌与雅致放射毛霉混菌固态发酵生产菜籽肽的发酵条件,再根据Box-Behnken中心组合试验设计,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法进一步优化混菌发酵条件,确定最佳工艺条件为：枯草芽孢杆菌与雅致放射毛霉同时接种,两菌接种体积比4:1、发酵温度32.1℃、发酵时间4.64d,此条件下菜籽肽得率为9.85%,硫苷降解率为67.83%。     

响应面法优化产赤藓糖醇菌株RH-UV-L4-F9的发酵条件

为进一步提高糖蜜玉米浆发酵生产赤藓糖醇的产量,以高产赤藓糖醇耐高渗酵母RH-UV-L4-F9为出发菌株,采用响应面法优化发酵工艺参数。根据Box-Benhnken设计原理,在单因素试验基础上,采用三因素三水平响应面分析,确定最佳发酵工艺参数为：温度32.3℃、pH5.1、摇床转速176r/min。在此优化条件下赤藓糖醇产量达到166.89mg/mL,是初始条件下的1.2倍。     

响应面法优化莲子黄酒的发酵工艺条件

以大米和莲子为原料,采用响应面试验设计优化莲子黄酒的发酵条件,探索其发酵规律。在单因素试验基础上确定以发酵时间、接种量、发酵温度为影响因素,以酒精体积分数为响应值,根据Box-Behnken中心组合方法采用三因素三水平响应值试验设计优化。结果表明,莲子黄酒最佳发酵工艺条件为:发酵时间14 d、接种量1.0%、发酵温度30℃,酒精体积分数14.2%,与预测值14.54%基本一致。说明该模型能较好地预测莲子黄酒发酵过程中的酒精体积分数。     

响应面法优化Aspergillus niger X-6发酵生产菊粉酶工艺的研究

为提高Aspergillus niger X-6 发酵生产菊粉酶的产率,运用Plackett-Burmen 方法对麸皮、菊粉、蛋白胨、酵母膏添加量和发酵时间、温度、pH 值、接种量8 个影响因素进行考察,筛选出麸皮添加量、发酵时间和pH值为3 个显著影响因素,然后采用Box-Behnken 中心组合和响应面法对上述3 个因素进行产酶条件的进一步优化,建立菊粉酶产率的二次多项式数学模型,并分析模型的有效性与因子间的交互作用。结果表明：黑曲霉发酵产菊粉酶的优化工艺参数为：麸皮添加量4.64%、发酵时间81.5h、pH6.0。在此条件下,产酶活力达20.42U/mL,与优化前相比提高了30.81%。