富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)在肿瘤中的研究进展

富亮氨酸α2糖蛋白1(Leucine-rich-alpha-2-glycoprotein1,LRG1)是富亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)家族蛋白成员之一。LRG1在人类多种肿瘤中表达异常,可以作为部分肿瘤早期诊断的潜在生物标记,而且这种异常表达可能提示患者预后不良。LRG1在肿瘤的发生、侵袭转移、上皮间质转化和血管生成中发挥重要作用。这些环节中,协同参与调控的辅助因子众多且有差异,因而经历的信号途径有所不同。本文综合目前的研究进展,旨在阐述LRG1与肿瘤的关系以及其调控肿瘤发生发展的分子机制。LRG1有望成为一种新的肿瘤分子标志物,将为恶性肿瘤的分子诊断及靶向治疗提供新的方向和手段。     

人LRG1基因的原核表达及生物信息学分析

为了探讨LRG1基因结构与功能,对该基因进行克隆并构建到原核表达载体上,并对其进行表达及生物信息学分析。用Trizol法提取人肝癌HepG2细胞总RNA后,PCR扩增得到LRG1片段,经鉴定后将目的基因与原核表达载体pET28a连接,经诱导表达获得His-LRG1蛋白。LRG1基因cDNA片段大小为1 044 bp,编码347个氨基酸;成功构建pET28a原核表达载体,经多次不同条件诱导后,得到大小约40 kD目的蛋白;利用软件对LRG1蛋白的一级、二级结构进行了预测,分析总结得LRG1基因编码的蛋白是一个不稳定且具有亲水性的蛋白,可与多种信号开关相互作用。LRG1属于高度保守的富亮氨酸重复家族成员,其原核表达载体不易诱导产生大量目的蛋白,克隆表达该基因有利于验证其结构与功能关系。     

TGF-beta1、HIF-1alpha、VEGF在胃癌组织及癌旁组织中的表达及临床意义

目的：研究TGF-beta1（转化生长因子-beta1）、HIF-1alpha（低氧诱导因子-1alpha）、VEGF（血管内皮生长因子）在胃癌组织及癌旁组织中 的表达及临床意义。方法：选取于我院就诊的160 例胃癌手术患者切除的组织,采用免疫组化技术检测手术切除的胃癌组织中的 TGF-beta 1、HIF-1alpha及VEGF的表达,分析其与患者临床病理参数的关系。结果：免疫组化结果显示：TGF-beta1、HIF-1alpha及VEGF 在胃 癌组织中的表达均高于癌旁组织,差异均有统计学意义（P<0.05）;TGF-beta1、HIF-1alpha及VEGF 的表达均与肿瘤分期、淋巴结转移及 浸润深度有关（P<0.05）;VEGF的表达分别与TGF-beta1、HIF-1alpgha的表达呈相关关系（P<0.05）。结论：TGF-beta1、HIF-1alpha及VEGF在胃 癌组织中的表达与胃癌的病理学特征有关,检测TGF-beta1、HIF-1alpha及VEGF的表达将有助于临床诊治胃癌患者。     

胰岛素增强子结合蛋白-1（ISL1）与肿瘤的发生与发展

在人类发育过程中,胰岛素增强子结合蛋白-1(ISL1)被认为是一个胚胎性基因。成年后,ISL1只在特定的组织或器官中表达,例如胰腺和大脑。近年来,在多种肿瘤中检测到ISL1的异常表达,不仅在胰腺内分泌肿瘤、神经肿瘤中高表达（与之相应的正常组织也表达ISL1）,而且在淋巴瘤、胃癌和膀胱癌等肿瘤组织中呈现表达（其正常组织不表达ISL1）。ISL1的异常表达可能与肿瘤的发生发展及预后相关。本文针对ISL1与肿瘤的相关性以及在肿瘤发生发展中的功能进行综述,为进一步的分子机制研究提供理论依据。     

PLK1 与妇科肿瘤的研究进展

人类肿瘤生成过程由很多复杂环节组成,其主要现象表现为细胞分裂增殖的失调控生长。细胞分裂都必须按照正常细胞程序的每一个步骤进行才能保证机体的正常运转,细胞周期依赖分子PLK1是调节正常细胞有丝分裂、胞质分裂,以及对DNA受损伤后进行一系列反应调节的重要因子。它在细胞周期中的作用已有多位学者共同认识,当细胞失调控时检测到PLK1存在过量的表达,同时大量研究表明,人类PLK1基因不仅在多种已发现的恶性肿瘤中有此现象,而且在一些肿瘤中,它关系到这些肿瘤的发生发展及预后,被认为其可能成为一种新的肿瘤标志物,还可作为肿瘤定向分子靶向治疗中的一个有效目的基因的靶点,并且近年来对PLK1在肿瘤基因蛋白靶向治疗方面的药物研究开发已经成为学者研究的一个热点方向,该文对近年来PLK1在肿瘤生成中的作用,特别是其与妇科肿瘤关系方面的一些研究进展予以以下阐述。     

Dkk-1在肿瘤中的研究进展

DKK-1是一种分泌型糖蛋白,通过结合细胞表面受体LRP5/6、Kremen1/2在Wnt通路中起负调控作用。Dkk-1的表达受p53、MYCN、β-catenin等基因调控。Dkk-1在细胞内的异位表达能抑制多种肿瘤细胞的增殖,但有时能在促凋亡因子存在时诱发凋亡。Dkk-1在一些肿瘤中低表达,而在另一些肿瘤中高表达。Dkk-1在不同肿瘤的发生、发展以及转移这几个阶段中的表达和功能表现出复杂多重的差异。该文就Dkk-1在肿瘤中表达和功能的研究进展作一综述。     

CHL1基因在肿瘤中的研究进展

CHL1(close homologue of L1)基因是神经细胞粘附分子(cell adhesion molecule,CAM)L1基因家族中的一员,既往的研究认为,CHL1基因作为神经识别分子,主要参与调节神经前体细胞的增殖和神经元亚型的特异性分化。近期的研究发现,CHL1基因参与了对细胞生长和迁移的调节,影响了多种人类肿瘤的发生和发展过程。本文拟对CHL1基因在肿瘤中的最新研究进展进行综述。     

VEGF受体Flt—1在大肠杆菌中的高效融合表达

鉴于Ｆｌｔ－１有肿瘤及其他由于病理血管生成而导致的多种疾病中的核心作用,本文通过ＰＣＲ扩增出的ＶＥＧＦ受体Ｆｌｔ－１Ｎ端１－３个ＩｇＧ样ｌｏｏｐ基因,经过基因重组实现了Ｆｌｔ－１在原核表达体系５Ｘ－１的融合表达。     

CIAPIN1基因与肿瘤

细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(cytokine induced apoptosis inhibitor1,CIAPIN1)是最新发现的一个细胞因子依赖性抗凋亡分子,并已经被证实是独立于Bcl家族、胱天蛋白酶(caspase)家族等之外的Ras信号转导通路中的另一个调节分子。CIAPIN1广泛分布于胎儿和成人的正常组织中,特别在分化型组织和活性代谢组织中具有很高的表达水平,但是在某些癌症发生时表达受到抑制。通过基因转染、RNA干扰等技术手段研究CIAPIN1与肿瘤发生、发展的关联,揭示了CIAPIN1表达水平的改变与肿瘤进展具有相关性,CIAPIN1有望成为一个新的肿瘤治疗靶分子。     

钙离子调控蛋白在肿瘤血管形成及肿瘤发展中的研究进展

[目的]探讨钙离子调控蛋白在肿瘤血管生成及肿瘤发展中的作用。[内容]Ca2+作为第二信使参与生命活动中多种途径的调控,钙离子调控蛋白作为Ca2+的生物信息传递载体在此过程中起着重要作用。肿瘤组织中血管内皮细胞及平滑肌细胞的激活是肿瘤新生的第一步,新生血管的形成能促进实体瘤生长、侵袭和转移。该文综述了参与钙离子浓度调控的钙调控蛋白S100蛋白、膜联蛋白(Annexin)、钙网蛋白(CRT)、钙调蛋白Ca M及其他非直接钙离子结合的钙调控蛋白,这些蛋白在肿瘤细胞中的表达水平,及如何通过调控血管内皮细胞及平滑肌细胞的功能进而影响肿瘤血管生成与肿瘤转移,该综述聚焦重点是肺癌的研究,也对其他常见癌症有涉及。[结论]钙离子调控蛋白是一种重要的调节血管形成和肿瘤发展的一类蛋白,是肿瘤发展的标志物及肿瘤治疗的潜在靶点。     

VEGF 家族及其在肿瘤生长中作用的研究

血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)家族是一类多功能的细胞因子,在血管生成和淋巴管生成中具有直接和间接的调控作用,可促进内皮细胞增殖、促进血管生成以及增加血管的通透性。VEGF/VEGFR轴由多重配基和受体质量叠加交错组成,并且受体与配基结合具有专一性,在不同的细胞中具有不同的细胞类型表达和功能.启动VEGF信号通路,触发了一个网状的信号过程,从而促进血管内皮细胞生长、转移和存活。进来研究发现,VEGF的一个重要作用表现为可动员内皮祖细胞从骨髓向远处转移从而形成新生血管,因而有必要设计和发展针对这一途径的抑制因子。随着研究的深入,VEGF促进肿瘤血管生成的作用和与人类癌症的发病机制的关系是确定的,因此,抑制VEGF途径被确认为是一种重要的有效的抗癌模式     

小鼠DLL1真核表达载体的构建及其在肿瘤细胞中的表达

目的：构建带绿色荧光蛋白的小鼠DLL1全长基因真核表达载体,并在肿瘤细胞中表达。方法：利用PCR特异性引物扩增出DLL1基因全长,将克隆的基因片段插入带绿色荧光蛋白的真核表达载体pIRES2-EGFP质粒中。然后利用脂质体将重组质粒pIRES2-EGFP-DLL1转染进小鼠B16黑色素瘤细胞中,并通过G418筛选后选取生长良好、荧光强度高的三株单克隆进行mRNA水平DLL1表达的鉴定。结果：成功扩增小鼠DLL1的全长基因。克隆入质粒载体后,通过DNA序列测定证实其序列正确。将构建的pIRES2-EGFP-DLL1质粒转染小鼠B16黑色素瘤细胞,经过G418筛选和荧光显微镜观察后,挑选得到GFP阳性率90%以上的稳定转染细胞株。RT-PCR检测稳定转染细胞的mDLL1的表达显著增加,进一步证实了pIRES2-EGFP-DLL1的表达效能。结论：成功构建了小鼠DLL1基因的真核表达质粒,证实其在真核细胞B16中可以表达。     

microRNA-378 与肿瘤血管生成的研究进展

微小RNA(MicroRNAs,mi RNAs)是真核生物中一类长度约为21到23个核苷酸的非编码小分子单链RNA。mi RNA通过与靶m RNA 3′UTR(3′-untranslated region,3′非编码区)完全或不完全结合,抑制翻译或直接诱导其降解,发挥转录后负调控作用。mi RNA参与机体多种生理和病理过程,且可通过调控其靶标基因参与各种信号通路,影响血管生成。mi R-378属于诸多mi RNAs中的一种。目前已知mi R-378的研究主要集中在肿瘤发生及血管生成、心血管疾病和脑缺血等病理过程,其中与肿瘤发生及血管生成相关研究居多。mi R-378在不同肿瘤中的发挥的作用也不一样,在脑胶质瘤,肺癌,横纹肌肉瘤等肿瘤中发挥促癌基因的作用,在卵巢癌,胃癌,大肠癌等肿瘤中发挥抑癌基因的作用。但是,mi R-378调节肿瘤血管生成的作用机制还有待于深入研究。本文主要对mi R-378在四种肿瘤(脑胶质瘤、肺腺癌、卵巢癌和横纹肌肉瘤)中调控血管生成的相关性研究进展进行综述,以期为这些疾病的治疗和预防提供一种新的思路。     

小鼠DLL1真核表达载体的构建及其在肿瘤细胞中的表达

目的:构建带绿色荧光蛋白的小鼠DLL1全长基因真核表达载体,并在肿瘤细胞中表达。方法:利用PCR特异性引物扩增出DLL1基因全长,将克隆的基因片段插入带绿色荧光蛋白的真核表达载体pIRES2-EGFP质粒中。然后利用脂质体将重组质粒pIRES2-EGFP-DLL1转染进小鼠B16黑色素瘤细胞中,并通过G418筛选后选取生长良好、荧光强度高的三株单克隆进行mRNA水平DLL1表达的鉴定。结果:成功扩增小鼠DLL1的全长基因。克隆入质粒载体后,通过DNA序列测定证实其序列正确。将构建的pIRES2-EGFP-DLL1质粒转染小鼠B16黑色素瘤细胞,经过G418筛选和荧光显微镜观察后,挑选得到GFP阳性率90%以上的稳定转染细胞株。RT-PCR检测稳定转染细胞的mDLL1的表达显著增加,进一步证实了pIRES2-EGFP-DLL1的表达效能。结论:成功构建了小鼠DLL1基因的真核表达质粒,证实其在真核细胞B16中可以表达。     

EB 病毒LMP1 在肿瘤研究中的进展

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是具有致瘤潜能的疱疹病毒,与多种恶性肿瘤的发生相关。EB病毒编码的潜伏性膜蛋白1(Latent membrane protein-1,LMP1)作为其主要的致瘤蛋白,能通过细胞内多种信号传导通路,调节和控制细胞的生长、增殖、分化、迁移与凋亡,从而在癌变的发生和发展过程中发挥重要的作用。本文主要就LMP1的结构、生物学功能、介导的信号通路及其与肿瘤关系的相关进展做一阐述。     

The Role of Respiratory Microbiota in Lung Cancer

Recently, the impact of microorganisms on tumor growth and metastasis has attracted great attention. The pathogenesis and progression of lung cancer are related to an increase in respiratory bacterial load as well as changes in the bacterial community because the microbiota affects tumors in many ways, including canceration, metastasis, angiogenesis, and treatment. The microbiota may increase tumor susceptibility by altering metabolism and immune responses, promoting inflammation, and increasing toxic effects. The microbiota can regulate tumor metastasis by altering multiple cell signaling pathways and participate in tumor angiogenesis through vascular endothelial growth factors (VEGF), endothelial cells (ECs), inflammatory factors and inflammatory cells. Tumor angiogenesis not only maintains tumor growth at the primary site but also promotes tumor metastasis and invasion. Therefore, angiogenesis is an important mediator of the interaction between microorganisms and tumors. The microbiota also plays a part in antitumor therapy. Alteration of the microbiota caused by antibiotics can regulate tumor growth and metastasis. Moreover, the microbiota also influences the efficacy and toxicity of tumor immunotherapy and chemotherapy. Finally, the effects of air pollution, a risk factor for lung cancer, on microorganisms and the possible role of respiratory microorganisms in the effects of air pollution on lung cancer are discussed.     

Dual blockade of VEGFR1 and VEGFR2 by a novel peptide abrogates VEGF-driven angiogenesis,tumor growth,and metastasis through PI3K/AKT and MAPK/ERK1/2 pathway

Background

Neutralization of vascular endothelial growth factor receptor 1 (VEGFR1) and/or VEGFR2 is a widely used means of inhibiting tumor angiogenesis.