微流控芯片电泳在快速分离尿蛋白中的临床应用价值

目的:探讨并建立微流控芯片的电泳分离方法,用于快速分离尿蛋白。方法:利用照相平饭湿蚀刻法在5cm×5cm×0.1cm石英玻片上,刻制管道宽度为70μm、深度约40μm的十字形电泳泳道,以500V为进样电压、2000~2500V为分离电压、pH10.5的75mmol/L硼酸缓冲液为电泳液分离尿蛋白。结果:在2~3min完成电泳,纯牛白蛋白、人运铁蛋白、人IgG均可得到单一分离峰,其混合样品亦可得到较好分离。在38例尿蛋白阳性患者中,用该法检测发现溢出性蛋白尿3例、选择性蛋白尿9例、非选择性蛋白尿26例,8例健康对照未检出蛋白峰。结论:本法具有快速、简便、检测成本低的特点,依据电荷和分子量的不同,可将蛋白尿初步分为溢出性蛋白尿、选择性蛋白尿、非选择性蛋白尿,有利于临床的诊断和预后判断,有较好的应用前景。     

微流控芯片技术在生物学中的应用

分析装置的集成化、自动化及微型化现已成为物质分析和临床检测的研究热点。微流控芯片（microfluidic chip）作为一种新的微型分析平台建立于20世纪90年代,它通过微细加工技术在芯片上构建由储液池、微反应室、微管道等微功能元件构成的微流路系统,加载生物样品和反应液后,在压力泵或者电场作用下形成微流路,于芯片上进行一种或连续多种的反应,达到对样品的高通量快速分析的目的。微流控分析芯片由于具有高度集成性,可在一张芯片上完成采样、稀释、加试剂、反应、分离、检测等多种功能,     

尿蛋白琼脂糖电泳法的改进及其临床应用

本文对尿蛋白琼脂电泳法进行了改进,可以与LDH同二酶、脂蛋白同步电泳。该法能特尿蛋白区分为选择性蛋白尿(A、α_1、α_2、β)和非选择性蛋白尿(A、α_1、α_2、β、γ),且具有快速、敏感、分辨率强、重复性好等特点。本文同时报告了该法在肾脏病和正常人中的应用。     

毛细管电泳与微流控芯片电泳快速检测粪便中腺病毒的方法建立

目的 建立粪便中腺病毒的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光快速检测方法。方法 采用试剂盒法提取粪便中腺病毒DNA,选择腺病毒六邻体基因保守区域进行PCR扩增反应。PCR产物分别用高灵敏度的SYBR Gold和SYBR Orange核酸荧光染料进行标记,在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下分离,采用激光诱导荧光检测特异性PCR扩增产物。结果 腺病毒扩增产物在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下可分别于9 min和6 min内完成检测。将PCR扩增产物测序,并与NCBI基因库中核酸序列比对,结果表明所选用的扩增序列特异性良好。商品化DNA Marker毛细管电泳和微流控芯片电泳对目标DNA片段bp值求得的日内精密度分别为1.14%～1.34%和1.18%～1.48%,日间精密度分别为1.27%～2.76%和2.85%～4.06%。毛细管电泳-激光诱导荧光法和微流控芯片电泳-激光诱导荧光法检测腺病毒的灵敏度分别为2.33×10² copies/mL和2.33×10³ copies/mL。两种方法用于实际粪便样品测定,准确度高。结论 本研究建立的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光检测方法能够快速、灵敏、准确地检测出粪便中的腺病毒。     

尿蛋白电泳在蛋白尿中的临床应用

蛋白尿是肾脏病最常见的临床表现之一,而普通的尿蛋白定性或定量均难以区分尿蛋白的来源。采用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)技术对蛋白尿组成成分进行分类,从而判断尿蛋白的来源,以助于对病因的诊断及预后的判断。1资料与方法1.1对象2000年至2002年住院患者132例,其中男性79例,女性53例,年龄12岁83岁,平均45.7岁。1.2仪器与试剂仪器:HYDRASYS全自动电泳仪。试剂:配套试剂。表1 30例肾活检患者标本结果肾活检结果例数SDS-AGE轻度系膜增生性肾病9选择性肾小球蛋白尿中度系膜增生性肾病2选择性肾小球蛋白尿重度系膜增生性肾…     

尿蛋白电泳在肾脏疾病中的应用

蛋白尿是肾脏疾病的常见临床表现 ,尿蛋白的选择性在一定程度上反映肾脏病变的程度。为配合临床诊断 ,我们对我院2 2 2例住院病人尿蛋白定性和尿蛋白电泳结果进行了分析 ,旨在探讨尿蛋白选择性在肾脏疾病中的意义。1　材料和方法1 .1　病例选择　选择我院小儿内科和泌尿内科住院病人 2 2 2例。男 1 2 4例 ,女 98例 ,年龄 2～ 80岁。其中肾炎患者 6 5例 ,肾病综合征 (肾综 ) 1 2 6例 ,肾功能衰竭 (肾衰 ) 31例。所有病人均留取新鲜晨尿送检 ,同时以 30例正常人晨尿作对照。1 .2　检测方法　尿蛋白电泳方法均同于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳法 ,…     

尿蛋白电泳在临床上的应用

蛋白尿是肾脏疾病最常见的临床表现之一，传统的肾活检方法、尿蛋白定性或定量有其局限性，而尿蛋白电泳因其无创伤性、敏感性高的优点越来越广泛的应用于临床，其可以早期诊断。肾脏疾病并判断。肾脏疾病的受损部位及病变程度。     

集成毛细管电泳芯片分离尿蛋白条件的初步优化

目的:探讨集成毛细管电泳芯片快速分离尿蛋白条件的初步优化。方法:考察了分离电压(1200～2000V)、进样时间(10～30s)及乙胺浓度(0.5～2%(v/v))对尿蛋白分离的影响。结果:以75mmol/L pH10.3硼酸盐缓冲液含9.73μmol/L乳酸钙、1%(v/v)乙胺为电泳缓冲液,在以500V的进样电压进样15s、分离电压1500V条件下,电泳分离尿蛋白能分出更多蛋白峰。结论:通过优化可以有效地提高电泳芯片分离尿蛋白的效果。     

微流控芯片在肿瘤仿生模型构建中的应用

微流控芯片是一种在微米尺度下对流体进行精确操控的新技术,已被证明是对哺乳动物细胞及其微环境进行操控的理想平台.本文拟围绕肿瘤转移过程中的一些关键环节,对微流控芯片在肿瘤仿生模型构建中的应用作一综述.目前,基于微流控芯片技术构建的肿瘤仿生模型主要包括:肿瘤原发灶模型、肿瘤细胞诱导血管新生模型、肿瘤细胞内渗模型、肿瘤细胞外渗模型、肿瘤多器官转移模型等.相对于传统的体外研究方法,这些仿生模型很大程度上再现了体内的肿瘤微环境,逐渐成为肿瘤研究极重要的平台.     

微流控芯片电泳免疫法检测β_2微球蛋白

目的:建立一种基于微流控芯片电泳技术的快速微量蛋白检测方法。方法:用过量FITC-β2-MG抗体,与分析体系中β2-MG发生非竞争性免疫反应,FITC-β2-MG抗体和免疫反应形成的荧光免疫复合物通过微流控芯片电泳实现分离,激光诱导荧光检测荧光信号。结果:分别考察了电泳缓冲体系、pH值等对芯片电泳行为的影响,结果表明pH8.33、45mmol/LTBE缓冲液分离效果较好,在此基础上实现了β2-MG标准品的分析,建立了微流控芯片电泳免疫分析方法。结论:微流控芯片电泳免疫分析方法可在2min内完成一次样品的电泳分析,且试剂和样品消耗少,灵敏度高,改善了常规免疫分析的不足,显示出较好的应用前景。     

尿蛋白电泳在肾脏疾病评估中的作用

【目的】了解尿蛋白电泳对肾脏疾病的评估作用。【方法】应用十二烷基磺酸钠一琼脂糖凝胶电泳技术分析肾脏疾病患者非浓缩尿液样本。【结果】100例肾脏疾病非浓缩尿液标本中，通过电泳扫描结果如下：37例（37％）为。肾小球性蛋白尿，10例为肾小管性蛋白尿（10％），53例为混合性蛋白尿（53％）。尿蛋白电泳结果与临床病理诊断结果相符。【结论】非浓缩尿蛋白电泳能早期敏感检测尿蛋白的组分变化，协助临床诊断肾脏病变的严重程度。     

尿液采样器尿液载体临床应用的实验研究

目的:研究新型多功能定量尿液采样器的尿液载体对尿液中的有形成分有无物理吸附和过滤作用,对尿化学检验有无干扰.方法:用新型多功能定量尿液采样器采集的尿液标本与目前临床检验用的尿杯所采集的尿液标本进行尿液常规检验对比分析.结果:对比结果显示:两种采样的标本对尿液中的有形成检验结果比较无差异(P＞0.05);尿化学检验比较也无差异(P＞0.05). 尿液HCG对照检测也无差异(P＞0.05).结论:新型多功能尿液采样器完全可以取代尿杯应用于尿液常规、尿沉渣检验以及尿液HCG和尿淀粉酶的检测.由于新型尿液采样器能做到采样、送检和检验全程无污染,能有效防止院内交叉感染、保护检验人员、医护人员和病人的健康,完全杜绝使用尿杯采样易造成严重污染的途径,因此在临床推广十分必要.     

尿微量白蛋白定性试纸条的临床应用

【目的】为探讨尿微量白蛋白(mALB)定性试纸条检测及临床应用。【方法】将同一份标本作尿mALB试纸定性法和定量(ELISA)测定。【结果】ELISA法测定的-x±s均落在定性等级结果(半定量)范围内,尿mALB定性试纸条检测法灵敏,快速,方便。【结论】尿定性试纸条能反映各种病因引起的早期肾损害,可作为早期肾损害检测的常规筛选手段。     

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳在大鼠海马组织蛋白分离中的应用

目的：探索应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离大鼠海马组织蛋白的最佳条件。方法：选用不同pH的正极缓冲液和样品蛋白上样量，应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离大鼠海马组织蛋白质。结果：在其它条件不变的情况下，pH9.0的正极电泳缓冲液以及40～60μg／孔样品蛋白上样量时，可得到分辨率高、条带多而清晰的电泳图谱。结论：应用pH9．0的正极电泳缓冲液和样品上样量为40～60μg／孔时，进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，可成功地分离大鼠海马组织蛋白。     

“微助教”平台在生理学教学中的应用

目的探讨“微助教”平台在生理学教学中的应用效果。方法选取湖北医药学院2016级康复专科1班（55人）和2班（57人）共计112名学生为研究对象。1班为对照组,2班为实验组,对照组采取传统讲授法进行教学,实验组用“微助教”平台来辅助生理学教学。课程结束时,通过期末考试和问卷调查来评价“微助教”平台在生理学教学中的应用效果,用SPSS17.0对数据进行分析和t检验。结果实验组和对照组期末考试成绩差异具有统计学意义[(81.46 ± 7.63) vs. (68.21 ± 10.27), t = -7.769 , P = 0.000],其中第四章内容得分[(15.76 ± 1.) vs. (289.34 ± 1.96), t = -20.595, P = 0.000],第八章内容得分[(8.31 ± 0.86) vs. (6.28 ± 1.22), t = -10.207, P = 0.000]及第十章内容得分[(15.99 ± 1.14) vs. (11.19 ± 1.81), t = -16.856, P = 0.000]差异具有统计学差异。实验班问卷调查回收率为100%,结果显示,56人（98.24%）认为“微助教”有助于互动交流,51人（89.47%）认为“微助教”有助于组织课堂纪律,43人（75.43%）认为“微助教”有助于提高学习兴趣,55人（95.26%）认为“微助教”有助于精准解决各重难点知识点。结论“微助教”平台在生理学教学中的应用有助于提高教学效果,值得推广。     

非浓缩尿蛋白SDS-琼脂糖凝胶电泳技术及临床应用

目的对尿液中各种蛋白质进行分离,用于区分尿蛋白的类型。方法应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)法进行非浓缩尿蛋白电泳,对40例已被临床确诊的肾脏疾病患者的尿液样本进行电泳分析,使尿蛋白按分子量大小进行分离。结果根据尿蛋白分子量大小可以将其区分为肾小球性、肾小管性、混合性、溢出性及生理性蛋白尿。其中肾小球性蛋白尿13例、肾小管性蛋白尿9例、混合性蛋白尿11例、溢出性蛋白尿2例、生理性蛋白尿5例。结论本法具有分离效果好,检测灵敏度和诊断符合率高,操作简便,速度快,胶片易于保存等优点。可以将尿蛋白按分子量大小进行区分,经EDC扫描后可获半定量结果,对肾脏疾病的受损部位和受损程度的判断具有较高的价值。     

表面等离子体免疫传感器同步定量尿液中多种微量蛋白的研究

目的探讨并建立表面等离子体免疫传感器芯片同步定量尿液中多种微量蛋白的方法。方法采用EDC/NHS方法将微量白蛋白(MA)、α-1微球蛋白(A1M)、β-2微球蛋白(B2M)、尿IgG的单克隆抗体固定于免疫传感器芯片之上,并用表面等离子体共振传感器(surface plasmon resonance,SPR)检测样本中微量蛋白的含量。利用4种微量蛋白的标准血清建立标准曲线,然后对其进行灵敏度、特异性等指标的方法学评价。以免疫散射比浊方法为参考方法,检测125例临床患者24 h尿液样本的微量蛋白浓度,比较2种方法检测相同样本时的结果差异。结果该表面等离子体共振免疫传感器芯片具有良好的操作性能和检测特异性。其标准曲线的R2均在0.98以上。其检测灵敏度分别是A1M为5μg/L,B2M为7.3μg/L,MA为11.5μg/L,IgG为22μg/L。所有4项指标可在20 min之内同步完成。与微量蛋白检测的经典方法免疫散射比浊法相比,两者的相关性和一致性较高。结论表面等离子体免疫传感器芯片可实现尿液中多种微量蛋白的快速、准确、同步定量。     

P53表达在口腔癌颈部淋巴结微转移的临床应用价值

目的：探讨1753在检测口腔癌淋巴结微转移的临床应用价值。方法：应用SP免疫组织化学法检测P53蛋白在32例口腔癌患者中的表达。结果：P53在淋巴结Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区与Ⅳ区、Ⅴ区比较有明显差异。采用P53蛋白表达对口腔癌淋巴结微转移检出率比常规病理检出率高。结论：1753表达对识别早期口腔癌颈部淋巴结微转移有重要意义。     

医学高校图书馆微视频资源应用策略

分析医学高校图书馆微视频资源建设现状,提出抓帧、切片及批注在医学高校图书馆微视频资源建设中的应用策略,并从应用策略定位和应用场景角度进行深入分析,为进一步完善图书馆资源建设和提升图书馆服务质量提供参考。