赤子爱胜蚓质量控制及提取工艺研究

目的:应用薄层色谱法对赤子爱胜蚓进行了鉴别,确定其重金属检查方法,并规定重金属限度,摸索炮制方法及条件,建立质量控制方法。方法:以溶栓试验为指标,进行溶栓成分的提取、干燥,绘制提取物的冷冻干燥曲线。结果:赤子爱胜蚓鲜活体匀浆后离心处理,收集上清液后,残渣再加水搅拌、离心处理1次,即可使提取率达93％以上。结论:该方法可最大限度地保证溶栓成分的稳定提出。     

赤子爱胜蚓纤溶酶的药理性质探讨

用赤子爱胜蚓提取物给小鼠口服,观察其有无毒副作用及抗血栓作用,同时进行了血液凝血时间及纤溶活性的测定,结果表明:赤子爱胜蚓提取物小鼠口服后有极为明显的抗栓作用及增强纤溶活性的效应(P<0.01),优球蛋白溶解时间也有缩短。口服赤子爱胜蚓提取物具有毒副作用小,使用方便的特点,有进一步开展临床研究与应用的价值。     

赤子爱胜蚓纤溶酶的体外药理性质

用赤子爱胜蚓纤溶酶在体外分别测定对纤维蛋白平板试验和优球蛋白溶解试验的纤溶活性,发现它有促进纤维凝块的溶解作用。对血栓弹力图凝血和纤溶的动态观察,它主要的作用在于纤维蛋白溶解,而对凝血影响较小。对牛血管内皮细胞的实验初步结果表明,它有刺激血管内皮细胞释放t-PA的作用。用大剂量(25mg/kg体重)静脉注射进行小白鼠急性毒性试验,不引起出血和内脏损害。     

用赤子爱胜蚓酶治疗脑梗死的临床观察

对27例急性脑梗死患者随机分成口服赤子爱胜蚓酶治疗组和对照组,治疗一周后,白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)在治疗组均有明显延长;在纤溶系统的检查中,血纤维蛋白降解产物(FDP)、纤溶酶原活性(PLG:c)、组织型纤溶酶原激活物的含量(t-PA:Ag)均明显升高,而纤溶酶抑制物的活性(α_2-PI:c)显著降低,对照组无明显改变。在临床上,口服赤子爱胜蚓酶组的患者神经功能缺损的恢复比对照组快,并且未发现不良反应,表明口服赤子爱胜蚓酶具有明显的抗凝和纤溶作用,能加速脑梗死患者的神经功能缺损的恢复。     

赤子爱胜蚓纤维蛋白溶解酶的亲和层析纯化和生化特性

用慈菇蛋白酶抑制剂Sepharose 4B亲和层析方法从蚯蚓丙酮粉抽提液中得到较高纯度和活性的蚯蚓纤维蛋白溶解酶(纤溶酶)制剂。经快速蛋白质液相色谱(FPLC)分析,内含9个纤溶活性峰。对其中第九峰进行电泳测定,为单一条带,分子量为27000,还测定了其氨基酸组成,糖含量及酶的底物特异性。     

蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质

目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称EDNase)并研究其酶学性质.方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、SDS-PAGE电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法.结果:经证实这种纯化方案的纯化倍数是137,酶得率为45.6%.EDNase的相对分子质量约为63 000.Mg2+,Mn2+和ca2+对酶活性有较强的抑制作用,而Na+则轻微的提高酶的活性.在pH 4.4～5.2的范围内EDNase酶活性稳定,其最适pH值为4.8.该酶的最适温度为37℃,在40℃范围内酶具有较高的稳定性.EDNase的等电点为6.20.在以小牛胸腺DNA为底物的条件下,酶的Km为1.52 g/L,Vmax为4.89 mg/(mL·min).该酶可有效降解超螺旋质粒DNA,线状λ-噬菌体DNA和细菌染色体DNA,对RNA未见任何降解作用.结论:这种酶具有独特的酶学性质,不同于以往所知的脱氧核糖核酸酶.     

赤子爱胜蚓降血压成分的研究

赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)组织匀浆抽提液,经过Sephadex G-25凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换、Sephadex G-10凝胶过滤及透析,得到具有强烈而持久的降血压组分B-I-b,经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,B-I-b有二个分子量分别为23 000和25 000的组分组成,其降血压作用的机理还需进一步探讨。     

赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究

将赤子爱胜蚓整体组织匀浆的抽提液,经Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换及在FPLC仪上用Mono Q柱分离,可以纯化到多种组分的纤维素酶,研究了它们的酶学性质,证明均为C_X酶。     

EB 病毒 DNA 酶基因特异性结合蛋白的检测

ＰＣＲ法扩增出ＥＢ病毒ＤＮＡ酶全基因之后，用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ进行５’末端标记，然后利用凝胶迁移分析法（ｇｅｌｍｏｂｉｌｉｔｙｓｈｉｆｔａｓｓａｙ）来检测与该基因结合的蛋白质。结果表明在Ｒａｊｉ细胞核和细胞浆中均有ＥＢ病毒ＤＮＡ酶基因非特异性和特异性结合蛋白，在人乳清中也有与该基因结合的蛋白质。     

热变性和有机溶剂沉淀联合法提纯超氧化物歧化酶

以抗凝马血为原料，分三组分别采用热变性法、有机溶剂沉淀法及热变性与有机溶剂沉淀联合法对超氧化物歧化酶进行分离提纯，对三组方法所得的粗酶和经ＤＥＡＥ－３２层析后的纯酶分别进行蛋白浓度、酶活力等检测，综合结果与分析表明，热变性与有机溶剂沉淀联合法是提纯ＳＯＤ的优选方法。     

Measurement of mouse liver glutathione S-transferase activity by the integrated method

Objective: The integrated method was investigated to measure Vm/Km of mouse liver glutathione S-transfer-ase (GST) activity on GSH and 7-Cl-4-nitrobenzofurazozan. Methods: Presetting concentration of one substrate twenty-fold above the other's and taking maximum product absorbance Am as parameter while Km as constant, Vm/Km was obtained by nonlinear fitting of GST reaction curve to the integrated Michaelis-Menten equation In [Am/(Am -Ai)] + Ai/ ( ξ× Km ) = ( Vm/Km )×ti (1). Results: Vm/Km for GST showed slight dependence on initial substrate concentration and data range, but it was resistant to background absorbance, error in reaction origin and small deviation in presetting Km. Vm/Km was proportional to the amount of GST with upper limit higher than that by initial rate. There was close correlation between Vm/Km and initial rate of the same GST. Consistent results were obtained by this integrated method and classical initial rate method for the measurement of mouse liver GST. Conclusion: With the co     

经新生儿肘部静脉置入中心静脉导管体表测量方法的研究

目的探讨经新生儿肘部静脉置入中心静脉导管的体表测量方法。方法采用随机对照研究方法,将72例需PICC置管并签署知情同意书的新生儿随机分为A、B两组,A组以预穿刺点→胸骨上切迹→第三肋间隙的长度为导管置入长度,B组以预穿刺点至右侧胸锁关节的长度为导管置入长度,比较两组导管末端的上腔静脉到位情况。结果 A组导管异位发生率为72.22%,B组导管异位发生率为30.56%,两组导管末端的上腔静脉到位率差异有统计学意义（χ2=12.51,P〈0.01）。结论从预穿刺点量至右侧胸锁关节的体表测量方法可以显著提高PICC一次置管成功率,降低导管异位的发生率。     

银染的端粒重复序列扩增法检测人细胞端粒酶活性的研究

目的：探讨应用简便，快速及无害化的非核素银染端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）检测人细胞端粒酶活性。方法：与枝素ＴＲＡＰ相比较，采用非核素银染ＴＲＡＰ检测了２９３细胞，并检测了经ＲＮａｓｅ和加热处理的阴性对照标本和ＱＧＹ７７０１、ＳＭＭＣ－７７２１ ２株人肝癌细胞。     

精神分裂症患者服药依从性的测量方法

大多数精神分裂症患者需要长期维持治疗,服药依从性是影响精神分裂症患者预后及转归非常重要的因素。笔者采用关键词检索中英文数据库,对检索到的文献进行初筛,然后回顾已检索文献的参考文献,综合专家建议,纳入样本人群为精神分裂症患者并且报告了信度和效度的参考文献,共11篇。将这11篇文献中服药依从性的测量方法进行归类,可分为主观和客观两类,主观方法包括药物态度问卷、服药影响因素评定量表、服药影响因素和信念的简易评价、简明依从性评定量表、药物依从性评定量表和Morisky量表;客观方法包括血(尿)药浓度的检测、药片计数、药房记录和电子药瓶计数。精神分裂症患者服药依从性的测量方法都有其局限性,研究者在进行服药依从性的测量时,推荐选择两种或者两种以上的测量方法。     

血清高密度脂蛋白胆固醇测定方法的评价

目的：为了探讨血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）各种测定方法的优劣性，选择更加符合临床要求的方法：方法：磷钨酸镁沉淀法（PTA－Mg^2 )法，改良磷钨酸镁沉淀法（简称改良法），聚乙二醇沉淀法（PEG法），选择性遮蔽法（直接测定法）结果：各种方法的批内精密度除PEG法外均小于5％，其中直接法小于2％，批间精密度除直接法小于2％外，余均大于5％，直接法，改良法与PTA－Mg^2 法测定结果一致性好，其相关系数r分别为0．988和0．990，在HDL－C浓度为2．85mmol/L范围内各种方法的线性均良好。结论：PTA－Mg^2 法准确性基本符合临床要求，成本低，适合于手工分析，直接法简便快捷，易操作，适于自动化分析。     

基于胸阻抗的人体肺功能参数测量方法

目的研制一种基于人体胸阻抗变化的测量,获取人体肺功能参数的新方法。方法基于生物阻抗法研究用力呼吸过程中胸阻抗的变化与肺功能参数值的关系,研制了胸阻抗测量仪实验样机,分别采用所研制的实验样机和基于传统流量计进行肺功能测量的MIR公司的spirolabⅢ肺功能仪,对10例健康人进行对比实验,所测肺功能参数包括:用力肺活量、一秒率和峰值流量。结果所测数据均落于其均值的正负两倍标准差范围之内因为两种方法具有较好的一致性。结论基于生物阻抗法研制的实验样机所测肺功能参数与市售肺功能仪(基于流量计测量方法)的测量结果有较好的一致性。     

气腹机性能检测试验装置的研究

本文分析了行业标准中对气腹机气压和耗气量测定的要求,并按照要求设计了患者腹腔模拟系统以及耗气量测定容器,并应用两种装置对两款气腹机的性能进行了测试,结果表明设计的两种装置能够应用于气腹机性能检测。     

URIT-12快速血红蛋白分析仪与Coulter LH-750的对比研究

目的 探讨URIT-12血红蛋白分析仪快速测定血红蛋白的可行性研究.方法 应用Coulter LH-750全自动血细胞仪和URIT-12血红蛋白分析仪分别测定100份本院住院患者血样本的血红蛋白浓度.结果 URIT-12快速血红蛋白分析仪与Coulter LH-750全自动血细胞分析仪测定结果 相比,差异无统计学意义(P>0.05),两者结果 高度相关(r=0.994);URIT-12测定结果 的线性范围为(46-240)g/L;取低、中、高3份样本重复测定20次,URIT-12批内变异CV值分别为2.13%、2.17%、2.33%,均小于3%;取高脂肪血清、高黄疸血清、高球蛋白血清、高白细胞血做干扰实验,结果 前三者对两仪器测定干扰率均小于4%,而高白细胞血对URIT-12测定结果 的干扰率为10%,LH-750为7%.结论 URIT-12血红蛋白分析仪测定结果 准确性好、精密度高,是一种操作简单、检测快速的便携式血红蛋白测定仪.