罗格列酮对糖基化终产物干预的人肾系膜细胞fractalkine表达的影响

观察罗格列酮和糖基化终产物对人肾系膜细胞fractalkine(FKN)表达的影响.结果 显示糖基化终产物能上调人肾系膜细胞的FKN表达,而罗格列酮能抑制糖基化终产物引起的FKN表达增加.     

糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1基因表达的影响

为探讨糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞表达单核细胞趋化蛋白 1基因的影响 ,体外分离培养大鼠主动脉平滑肌细胞 ,然后用不同浓度葡萄糖 (0、5、2 0、5 0和 80mmol L)制备的糖基化终产物 BSA(2 0 0mg L)干预 2 4h和用葡萄糖浓度为 5 0mmol L孵育的糖基化终产物 BSA干预 0、12、2 4和 36h ,逆转录聚合酶链反应检测细胞中单核细胞趋化蛋白 1mRNA表达水平。结果发现 ,葡萄糖浓度 2 0mmol L、5 0mmol L和 80mmol L孵育的糖基化终产物都增加单核细胞趋化蛋白 1mRNA的表达 ,其中 5 0mmol L组作用最明显 (P <0 .0 0 5 ) ,干预 12h、2 4h、36h后单核细胞趋化蛋白 1mRNA表达均较未干预组明显增加 (P <0 .0 0 1)。结果提示 ,糖基化终产物促进大鼠主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白 1基因的表达     

糖基化终产物通过其受体诱导小鼠足细胞表达单核细胞趋化因子1

目的了解糖基化终产物(AGE)能否在体外诱导小鼠足细胞表达单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)以及其受体RAGE在其中的作用。方法以RT-PCR和ELISA的方法检测AGE、羰甲基化白蛋白(CML)、S100蛋白和RAGE中和抗体对小鼠足细胞的MCP-1的基因和蛋白质表达的影响。结果(1)未分化和已分化的足细胞都能表达RAGE。(2)AGE和CML以剂量依赖的方式诱导足细胞表达MCP-1mRNA。AGE和CML孵育8h诱导足细胞产生MCP-1蛋白[分别为(7.44±1.01,8.06±0.96)ng/L],明显高于牛血清白蛋白(BSA)孵育的足细胞[(3.77±0.39)ng/L,均P<0.05],而孵育24hMCP-1的浓度分别为(87.78±9.32,85.35±9.83和17.95±0.76)ng/L(均P<0.01)。(3)RAGE的另外一个配体,S100蛋白,也能以剂量依赖的方式诱导足细胞表达MCP-1mRNA。RAGE中和抗体完全阻断了AGE、CML和S100的作用。结论AGE和CML通过RAGE使诱导分化的足细胞表达MCP-1。     

氨基胍对糖基化终产物干预后人肾系膜细胞MMP-2表达的影响

目的观察盐酸氨基胍（AG）对糖基化终产物（AGEs）干预后人肾系膜细胞（HRMC）基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达的影响。方法运用糖基化终产物-牛血清白蛋白（AGE-BSA）干预HRMC,以及不同浓度AG单独或与AGE-BSA共同干预HRMC24小时;RT-PCR和Western blot分别检测HRMC MMP-2mRNA和蛋白表达。结果AGE-BSA明显降低HRMC MMP-2mRNA和蛋白表达（P〈0.05）,AG以浓度依赖的方式恢复AGE-BSA下调的HRMC MMP-2mRNA和蛋白表达（P〈0.05）。结论AG可能通过拮抗AGEs对MMP-2表达的抑制效应而发挥其肾脏保护作用。     

色素上皮衍生因子抑制糖基化终产物介导人肾小球系膜细胞糖基化终产物受体表达的研究

目的 观察色素上皮衍生因子（PEDF）、晚期糖基化终产物受体（RAGE）的表达及重组PEDF对RAGE表达的抑制作用,探讨PEDF与DN的关系及对DN的保护作用. 方法 采用糖化小牛血清白蛋白（AGE-BSA）体外诱导人肾小球系膜细胞（HRMCs）,Western blot及RT-PCR法分别检测RAGE、PEDF蛋白和mRNA表达. 结果 （1） AGE-BSA（100～400 mg/L）呈浓度梯度减少HRMCsPEDF表达（P＜0.01）,升高RAGE表达（P＜0.01）;（2）重组PEDF蛋白（5～40 nmol/L）呈浓度依赖性抑制AGE-BSA介导RAGE蛋白在HRMCs的表达（P＜0.05）. 结论 AGEs通过降低PEDF表达,增加RAGE表达参与DN的发生,PEDF可能通过抑制AGE-RAGE轴对DN发挥保护作用.     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响

目的 观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响.方法 SD大鼠30只,10只分至正常对照组,20只腹腔注射小剂量链脲佐菌素结合高能量饲料制备2型糖尿病大鼠模型,然后分至糖尿病组(n=10)及罗格列酮干预组(n=10).运用流动注射分析法测定血清糖基化终产物-肽(advanced glycosylation end products-peptide,AGE-P),应用半定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法分别检测肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达.选用单因素方差分析进行数据统计分析.结果 糖尿病组大鼠血清AGE-P[(2.87±0.21)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.41±0.03)及fractalkine蛋白表达(0.79±0.04)均明显高于对照组[分别为(0.90±0.13)U/ml、0.85±0.04及0.46±0.03,P<0.01];罗格列酮干预组大鼠血清AGE-P[(1.45±0.15)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.00±0.05)及fractalkine蛋白表达(0.67±0.03)则明显低于糖尿病组(P<0.01).结论 罗格列酮可能通过抑制肾皮质fractalkine表达发挥其肾脏保护作用.     

马来酸罗格列酮抑制糖基化终产物诱导的人肾系膜细胞RANTES高表达

目的探讨马来酸罗格列酮对糖基化终产物（AGEs）诱导的人肾系膜细胞（HRMC）趋化因子RANTES高表达的影响,及其对糖尿病大鼠血清糖基化终产物-肽（AGE-P）及肾脏RANTES表达的影响。方法运用糖基化修饰的牛血清白蛋白（AGE-BSA）与马来酸罗格列酮干预体外培养的HRMC,EusA法检测细胞培养上清中RANTEs蛋白水平,实时定量RT-PCR检测细胞中RANTES mRNA水平,Western blot检测RANTES蛋白表达。制备2型糖尿病大鼠模型,马来酸罗格列酮治疗10周。流动注射分析法测定血清AGEP,免疫组织化学检测肾皮质RANTES表达。结果马来酸罗格列酮干预组HRMC RANTES的mRNA和蛋白表达以及蛋白分泌明显低于AGE-BSA组;马来酸罗格列酮治疗组糖尿病大鼠血清AGE-P明显下降,肾皮质RANTES表达明显低于糖尿病非治疗组。结论马来酸罗格列酮可以抑制AGE-BSA诱导的HRMC RANTES的表达和分泌,还可降低糖尿病大鼠血清AGE-P及肾脏RANTES表达。     

格列喹酮对糖基化终产物诱导的人肾系膜细胞RANTES表达的影响

目的探讨格列喹酮对糖基化终产物（AGEs）诱导的人肾系膜细胞（HRMC）正常T细胞表达分泌的调节活化蛋白（RANTES）表达的影响。方法运用糖基化修饰的牛血清白蛋白（AGE-BSA）和格列喹酮干预体外培养的HRMC,用半定量RT-PCR检测细胞中RANTES mRNA水平,用ELISA法测定细胞培养上清中RANTES蛋白水平。结果格列喹酮干预组HRMC RANTES的mRNA表达和蛋白分泌低于AGE-BSA组（P〈0.05）,且降低水平呈浓度和时间依赖性。结论格列喹酮能抑制糖基化终产物诱导的HRMC RANTES的表达和分泌。     

晚期糖基化终产物对人内皮细胞表达MCP-1和VCAM-1的影响及阿托伐他汀的干预

目的观察晚期糖基化终产物对体外培养人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1和血管细胞黏附分子1的影响及阿托伐他汀的干预作用,探讨晚期糖基化终产物诱发动脉粥样硬化形成的机制和阿托伐他汀治疗的机制。方法胶原酶消化法分离获取人脐静脉内皮细胞;倒置相差显微镜形态观察法及免疫细胞化学染色法鉴定人脐静脉内皮细胞;逆转录聚合酶链反应法对单核细胞趋化蛋白1、血管细胞黏附分子1及晚期糖基化终产物受体基因表达进行分析;活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧产生量,倒置荧光显微镜下观察细胞内活性氧荧光强度。结果倒置相差显微镜下可见培养的细胞呈卵圆形或多角形,典型的铺路石样排列,经CD31、CD34染色,细胞浆内有棕黄色颗粒沉着(CD31、CD34阳性)。与空白对照组相比,晚期糖基化终产物(10-4~10-1g/L)呈浓度依赖性增强人内皮细胞单核细胞趋化蛋白1和血管细胞黏附分子1基因表达,10-4g/L晚期糖基化终产物组人内皮细胞单核细胞趋化蛋1和血管细胞黏附分子1基因表达水平开始显著增高(0.26±0.02比0.17±0.04;0.22±0.02比0.08±0.01,P<0.01);与晚期糖基化终产物组相比,阿托伐他汀(0.1、1、10μ...     

伊贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾皮质fractalkine表达的影响

目的研究血管紧张素受体Ⅱ（ATⅡ）的AT1受体阻滞剂伊贝沙坦对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响。方法制备T2DM大鼠模型,随机分为正常对照组、糖尿病组及伊贝沙坦治疗组。分别用半定量RT-PCR和免疫组化法检测肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达。结果糖尿病组血清糖基化终产物-肽、尿素氮（BUN）、24h尿总蛋白（24hUPro）、肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达均明显高于对照组;伊贝沙坦治疗组血清BUN、24hUPro、肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达则明显低于糖尿病组。结论伊贝沙坦可能通过抑制肾皮质fractalkine表达发挥其肾保护作用。     

单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病

糖尿病肾病(DN)是终末肾功能衰竭的主要原因,主要的病理改变是肾小球肥大、细胞外基质积聚以及肾小球硬化.多种机制参与了DN的发生、发展,其中肾脏被炎性反应细胞如单核/巨噬细胞浸润是DN的标志之一.单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是一种对单核细胞具有特异趋化功能的细胞因子,参与单核/巨噬细胞的浸润,在DN的发生、发展中起重要作用.     

单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病

单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是一种对单核细胞具有特异趋化功能的细胞因子,参与单核/巨噬细胞的浸润,在糖尿病肾病(DN)的发生发展中起重要作用。而螺内酯、血管紧张素转换酶抑制剂或血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂、噻唑烷二酮类、免疫调节剂麦考酚酸莫酯(MMF)、维生素E及他汀类均能使MCP-1水平下降,延缓DN的发生发展。     

血清单核细胞趋化蛋白-1水平与新诊断2型糖尿病和糖耐量减低的相关性研究

目的 探讨血清单核细胞趋化蛋白-1 （MCP-1）水平与T2DM、IGT及其危险因素的相关性.方法 检测新诊断T2DM患者32例、IGT患者46例和健康（NC）者111名血清MCP-1水平及其他生化指标,分析血清MCP-1与T2DM、IGT及其危险因素的相关性.结果 T2DM、IGT组血清MCP-1水平高于NC组（P＜0.01）.MCP-1与WHR、TC、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈正相关,与年龄、BMI、血压、FPG、2hPG和HbA1c无相关性.结论 血浆MCP-1水平与T2DM、IGT均有相关性,与WHR、TC和HOMA-IR均独立相关.MCP-1可能对T2DM和IGT发病有影响.     

单核细胞趋化蛋白-1在BXSB狼疮小鼠肾组织中表达及药物干预效应

目的研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在BXSB狼疮小鼠肾组织中的表达情况并探讨甲泼尼龙(MPS)是否可抑制MCP-1表达而缓解狼疮肾炎(LN)。方法应用双缩脲法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学法及医学图像分析系统检测各组小鼠(BXSB狼疮小鼠MPS治疗组和对照组、BALB/C正常对照组小鼠)24h尿蛋白、肾组织MCP-1的表达,并分析其与24h尿蛋白之间的相关性。结果BXSB狼疮小鼠肾组织MCP-1表达较正常BALB/C小鼠增高,以肾小管更为明显,且肾小管MCP-1的表达与24h尿蛋白呈正相关(P<0.01);甲泼尼龙干预后,MCP-1表达明显减弱(P<0.01),且肾小管MCP-1表达的下降与24h尿蛋白降低呈正相关(P<0.01)。结论MCP-1可能参与介导BXSB狼疮小鼠LN的发生发展;甲泼尼龙可通过抑制肾组织MCP-1的表达,减轻蛋白尿,可能是缓解LN作用机制之一。     

氯沙坦对急性期2肾1夹高血压大鼠主动脉单核细胞趋化因子-1表达的影响

目的:探讨急性期2肾1夹(2K1C)高血压主动脉单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达以及氯沙坦 (losartan)干预对其影响。方法:采用银夹法复制2K1C高血压模型,用放免法测定血浆和主动脉壁血管紧张素ⅡAngⅡ)浓度,用原位杂交和RT-PCR方法检测2K1C高血压大鼠在血压升高不同时间以及氯沙坦干预28 d后主动脉MCP-1 mRNA的表达。结果:正常血压大鼠主动脉无MCF-1的表达;在2K1C大鼠高血压形成1周,主动脉MCP-1即有表达,并随时间延长,其表达持续增加;氯沙坦干预28 d后,2K1C高血压大鼠主动脉MCP-1的表达明显减少,差异有统计学意义;2K1C高血压大鼠血浆和主动脉壁AngⅡ浓度增加,但只有主动脉壁局部的 AngⅡ浓度同MCP-1表达的吸收度值呈正相关。结论:急性期2K1C高血压大鼠主动脉即有MCP-1的表达并随时间延长而增加,氯沙坦干预可明显减少其表达。     

单核细胞趋化蛋白-1在系统性硬化症患者中的表达

目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在系统性硬化症（SSc）的相关性。方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测27例SSc患者血浆MCP-1水平，并与21名年龄和性别相匹配的健康志愿者血浆中浓度对照，同时采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学染色方法检测MCP-1mRNA和蛋白质在5例SSc患者和3名健康志愿者皮肤成纤维细胞中的表达。结果 血浆MCP-1水平SSc组为（787±393）pg／ml，明显高于健康志愿者组的（426±266）pg/ml（P〈0．05）。对SSc组的进一步分析显示，11例弥漫型SSc患者血浆MCP-1水平为（896±347）pg／ml，高于16例局限型SSc患者的（714±332）pg/ml（P〈0．05）；18例并发有肺间质纤维化的SSc患者血浆MCP-1水平（844±327）pg／ml，也高于9例无肺间质纤维化的SSc患者的（676±314）pg／ml（P〈0．05）。RT-PCR和免疫组织化学染色的结果显示，5例分离于SSc病变皮肤、在体外培养的成纤维细胞有MCP-1的mRNA和蛋白质分子表达，而3名取自健康志愿者皮肤的成纤维细胞则无表达。结论 SSc患者血浆MCP-1水平显著升高，而且与皮肤受累程度和肺间质纤维化有一定的关系。RT-PCR和免疫组织化学染色结果表明，SSc患者病变皮肤组织表达MCP-1增高，提示MCP-1在SSc的病程中起重要作用。     

软脉煎对血管内皮细胞动脉硬化模型MCP-1的影响

目的探讨具有补肾益气作用的中药复方软脉煎干预动脉粥样硬化(AS)的机制,主要是对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)造成血管内皮细胞(VEC)AS模型单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemoatractantprotein-1,MCP-1)的影响。方法采用人脐静脉内皮细胞原代培养,加ox-LDL共同孵育造成血管内皮细胞损伤模型,用中药血清药理学方法将药物血清作用于细胞模型,用ELISA法测MCP-1,并设舒降之(辛伐他汀)组进行对照。结果模型组MCP-1显著升高(P<0.01);软脉煎组和舒降之组均能显著地降低升高的MCP-1水平(P<0.01);2组差异无显著性(P>0.05)。结论软脉煎能显著降低血管内皮细胞MCP-1水平,从而达到抗AS的作用。     

P38信号通路对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 探讨P38信号通路(P38MAPK)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的关系，以及P38MAPK在糖尿病(DM)动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法 分别以高葡萄糖(HG)、糖基化终产物(AGEs)、高胰岛素(HIns)和过氧化氢(H2O2)孵育人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，观察HUVECs P38MAPK的蛋白表达和MCP-1 mRNA表达；以P38MAPK特异抑制剂SB203580预处理，再用以上4种刺激因素孵育HUVECs，观察MCP-1 mRNA在HUVECs的表达。结果 HG、AGEs、HIns和H2O2均可独立激活P38MAPK，使磷酸化P38MAPK蛋白表达量及MCP-1 mRNA表达量增加；SB203580预处理后，MCP-1 mRNA表达被明显抑制。结论 P38MAPK调控MCP-1的表达，表明P38MAPK可能是DM致AS发生的始动信号之一。     

2型糖尿病肾病患者尿单核细胞趋化蛋白1和血细胞间黏附分子1与炎症反应的关系

目的 探讨糖尿病患者尿单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）和血细胞间黏附分子1（ICAM-1）水平与糖尿病肾病的发生发展及炎症反应的关系。方法将90例糖尿病患者按尿白蛋白排泄率（UAER）分为正常白蛋白尿（NA）组、微量白蛋白尿（MA）组、临床白蛋白尿（CA）组,分别测定血、尿MCP-1与血sICAM-1和高敏C反应蛋白（hsC-RP）,并与30名健康对照组（NC）比较。结果NC、NA、MA、CA组间的血MCP-1水平差异无统计学意义（P〉0．05）,尿MCP-1及血sICAM-1水平逐渐升高,差异有统计学意义（P〈O．05或P〈0．01）;尿MCP-1及血sICAM-1水平与UAER均呈正相关（r=0．891,P〈0．01;r=0．583,P〈0．01）;尿MCp-1及血sICAM-1水平与血hsC-RP均呈正相关（r=0．723,P〈0．01;r=0．625,P〈0．01）。结论尿MCP-1及血slCAM-1水平与糖尿病肾病炎症反应程度有一定关系,可作为肾脏损害程度及其发生发展的判断指标。     

葛根素降低糖尿病大鼠血清糖基化终产物水平和单核细胞趋化蛋白1含量

目的　研究葛根素对糖尿病大鼠糖基化终产物 (AGEs)水平和单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)表达的影响。方法　将大鼠随机分为正常对照组 (CON)、糖尿病组 (DM )、糖尿病氨基胍治疗组 (AG )和糖尿病葛根素治疗组 (PU )。腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型 ,检测血清中AGEs(荧光法 )和MCP 1(ELISA)水平 ;病理切片PAS染色及电镜观察肾组织的病理改变。免疫组化检测肾皮质MCP 1的蛋白表达水平。结果　DM组血清AGEs和MCP 1水平较PU组和AG组明显增高 (均P <0 .0 5 ) ;电镜发现两个治疗组的肾小球基底膜和心肌细胞病理改变程度比糖尿病组轻 ;肾小球内皮细胞和系膜区MCP 1免疫组化染色阳性细胞数明显比糖尿病组少。结论　葛根素能降低糖尿病大鼠血清AGEs和MCP 1水平 ,减少肾皮质中MCP 1的表达 ,减轻肾脏和心肌的病变程度