经皮脊柱内镜下手术治疗腰5-骶1椎间盘突出症

目的 探讨经皮脊柱内镜下手术治疗腰5-骶1椎间盘突出症的方法及效果。方法 回顾性分析2013年3月至2016年1月经皮脊柱内镜下手术治疗的38例腰5-骶1腰椎间盘突出症的临床资料,采用经椎间孔入路26例,经椎板间入路12例。手术前后采用疼痛视觉模拟量表（VAS）评分、MacNab量表评分、KPS评分和日本骨科协会（JOA）评分评估疗效。随访时间大于6个月。结果 38例中,34例（89.5%）疗效优良。术后VAS评分[（1.0±1.5）分]较术前[（7.9±1.1）分]明显降低（P<0.05）。术后腰椎JOA评分[（21±5.7）分]较术前[（7.4±4.6）分]明显提高（P<0.05）。经椎间孔入路和经椎板间入路的手术疗效无明显差异。结论 经皮脊柱内镜下选择椎间孔入路或椎板间入路均可有效、安全并且微创地治疗腰5-骶1腰椎间盘突出症。     

骨髓间充质干细胞移植联用氨基胍对大鼠脊髓损伤修复的影响*

背景：体内实验发现,骨髓间充质干细胞可在体内神经组织中分化为神经元样细胞,表达神经元抗原,并且骨髓间充质干细胞的存在对神经元的损伤有保护作用,这可能与骨髓间充质干细胞分泌的活性物质有关。目的：观察骨髓间充质干细胞移植联用诱导型一氧化氮合酶抑制剂-氨基胍对大鼠脊髓损伤修复的影响。设计、时间及地点： 随机对照动物实验,细胞学观察,于2006-07/2008-02在河北工程大学附属医院外科实验室和中心实验室完成。 材料：Wistar大鼠36只随机分成对照组、骨髓间充质干细胞组、联合移植组,每组12只。氨基胍由美国Sigma公司提供。方法：采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,以Brdu标记细胞核。对照组：制备脊髓半切损伤模型不做处理。骨髓间充质干细胞组：制备脊髓半切损伤模型后,损伤上下各 1 mm处移植骨髓间充质干细胞悬液共2 μL。联合移植组：制备脊髓半切损伤模型后,损伤上下各 1 mm处移植骨髓间充质干细胞悬液8 μL,同时局部给予氨基胍100 mg/kg。主要观察指标：术后采用斜板试验及改良Tarlov评分评价动物后肢运动功能恢复情况。术后2个月,显微镜下观察移植后脊髓形态结构变化及移植物存活情况。神经微丝和胶质原纤维酸性蛋白免疫组织化学评价移植对脊髓再生的影响。结果：下肢运动功能评价联合移植组优于骨髓间充质干细胞组,骨髓间充质干细胞组优于对照组。免疫组织化学检测发现,脊髓损伤区有新生束状轴突伸向断端,嗜银染色可见脊髓断端的再生轴突长入断端间组织中,部分连接两端面。损伤阶段脊髓内可见Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞存活,灰质分布较白质多,以注射部位向周围损伤组织迁移,联合应用氨基胍组Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞存活多。联合移植组术后2个月神经微丝和胶质原纤维酸性蛋白免疫阳性反应的面积比均高于其他各组。结论：骨髓间充质干细胞联合氨基胍移植促进大鼠半横断脊髓结构和功能恢复的效果明显优于单纯细胞移植组,两者联用具有协同效应。     

抗坏血酸、β-甘油磷酸钠和地塞米松联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化*

背景：成骨细胞来源于骨髓中的间质干细胞,但骨髓间充质干细胞经过高度扩增后,细胞群会出现生长速率减慢等变化,并出现没有分裂倾向的扁平状细胞。目的：进一步验证在一定诱导条件下,体外分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞的定向分化情况。设计、时间及地点：细胞学体外对照观察,于2007-03/10在南方医科大学解剖实验室完成。材料：4周龄SD大鼠3只,由南方医科大学实验动物中心提供。成骨诱导过程所使用的抗坏血酸、地塞米松、β-甘油磷酸钠为美国 Sigma公司产品。方法：采用密度梯度离心+贴壁筛选法体外分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,融合后用EDTA及胰蛋白酶消化,按1∶3传代培养。取生长良好的第2代骨髓间充质干细胞,调整细胞数量为1×107 L-1,分为2组：对照组加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM-LG培养基,诱导组加入成骨诱导液进行培养,成骨诱导液为含50 mg/L抗坏血酸、0.1 μmmol/L地塞米松、0.5 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、体积分数为0.1胎牛血清的DMEM-LG培养基。主要观察指标：骨髓间充质干细胞的生物学特性,成骨诱导前后细胞碱性磷酸酶活性,诱导后矿化结节的形成。结果：刚接种的骨髓间充质干细胞呈圆形;原代培养24 h后大部分细胞贴壁生长,呈短梭形、三角形、多边形;72 h时贴壁细胞分裂增殖,逐渐呈长梭形;至第5天可见明显细胞集落形成;第9~10天细胞达80%以上融合;传代后细胞贴壁和增殖速度加快,呈有规则的方向性排列。与诱导前比较,骨髓间充质干细胞成骨诱导7 d后碱性磷酸酶活性明显提高（P < 0.05）。连续成骨诱导20 d后,诱导组可见多个散在分布的圆形不透明钙化结节,对照组未见矿化结节沉积。结论：在抗坏血酸、β-甘油磷酸钠和地塞米松联合诱导下,大鼠骨髓间充质干细胞可定向分化为成骨细胞。     

白细胞介素3与白细胞介素6对人脐血单个核细胞体外扩增及黏附分子和趋化因子受体4表达的影响**

背景：体外扩增脐血造血细胞对增加脐血造血细胞数量及植入能力至关重要,合适的细胞因子组合介导的体外扩增不仅能使造血细胞数量增加,而且能够上调和归巢有关的黏附分子和趋化因子受体4的表达。目的：实验拟观察白细胞介素3和白细胞介素6在人脐血单个核细胞体外扩增中的作用及对扩增后黏附分子和趋化因子受体4表达的影响。设计、时间及地点：随机区组开放性实验,于2007-03/12在广西壮族自治区人民医院及广州医学院附属广州市第一人民医院血液实验室完成。材料：10份足月顺产健康新生儿脐血标本。方法：将自新鲜脐血标本分离的单个核细胞接种于含有不同细胞因子组合的无血清无基质培养体系中培养7 d,根据不同细胞因子组合实验分组为: 对照组（无细胞因子组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子组(A组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子+白细胞介素6组(B组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子+白细胞介素3 (C组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子+白细胞介素6组+白细胞介素3 (D组) 。 主要观察指标：在0,7 d检测有核细胞数, CD34+细胞数及CD34+CXCR4+,CD34+CD62L+,CD34+CD49d+的细胞数和集落形成单位数。结果：与对照组相比, A,B,C,D组均可有效的扩增脐血造血细胞(P < 0.05), C,D两组扩增效果均优于A,B组,差异显著（P < 0.05）,但A,B两组之间无明显区别（P > 0.05）, D组能有效的扩增脐血细胞,并优于C组（P < 0.05）。A,B,C,D组细胞因子组合均可提高脐血CD34+细胞上CD49d, CD62L和趋化因子受体4的表达, A,B两组之间差异不显著（P > 0.05）,但均优于C组（P < 0.05）,D组CD34+CXCR4+,CD34+CD62L+和CD34+CD49d+的细胞数扩增倍数优于A,B,C组（P < 0.05）。结论：白细胞介素6组+白细胞介素3可协同扩增脐血细胞,并能促进和归巢有关的CD49d,CD62L及趋化因子受体4表达。     

利多卡因对肿瘤坏死因子α诱导中性粒细胞凋亡的影响

背景：利多卡因被认为有抗炎作用,而其作用机制不清。核转录因子κB是炎症反应的关键环节。目的：观察利多卡因对人体中性粒细胞核转录因子κB激活和中性粒细胞凋亡的影响。设计、时间及地点：对比观察,于2006-10/2007-02在江苏省麻醉学重点实验室完成。材料：肿瘤坏死因子α(O127:B8)购于Sigma公司;外周血标本健康者,受试者知情同意。方法：人体中性粒细胞分为5组：生理盐水对照组、肿瘤坏死因子α组、肿瘤坏死因子α+ 利多卡因 1.0 mmol/L组、肿瘤坏死因子α+ 利多卡因2.0 mmol/L组、肿瘤坏死因子α+ 利多卡因 4.0 mmol/L组,共同孵育3 h。 主要观察指标：以反转录聚合酶链反应及免疫印迹法检测利多卡因对核转录因子κB mRNA和I-κB mRNA表达及蛋白含量的影响。孵育12h 和24h,以流式细胞术分析对中性粒细胞凋亡的影响。结果：利多卡因组核转录因子κB mRNA表达显著降低,而I-κB mRNA表达显著增加。并且利多卡因2.0 mmol/L组和4.0 mmol/L组显著优于1.0 mmol/L组(P < 0.05),而 2.0 mmol/L组和4.0 mmol/L组之间差异不显著(P > 0.05)。利多卡因在12 h和24 h都可以显著抑制肿瘤坏死因子α诱导的外周血中性粒细胞凋亡(P < 0.05),而4.0 mmol/L组显著优于1.0 mmol/L组(P < 0.05)。结论：利多卡因1.0,2.0,4.0 mmol/L都可以显著下调肿瘤坏死因子α诱导的外周血中性粒细胞P65 mRNA的表达,并且在12和24 h可以部分逆转肿瘤坏死因子α诱导的中性粒细胞凋亡。     

国产与进口粒细胞集落刺激因子动员外周血造血干细胞的效果对照

为评估国产重组人粒细胞集落刺激因子在动员外周造血干细胞的效果,选择2001/2005收治的20例自体外周血造血干细胞移植患者,男11例,女9例,其中急性髓细胞白血病11例,急性淋巴细胞白血病5例,恶性淋巴瘤3例,多发性骨髓瘤1例。根据患者对药价承受能力分为2组：国产重组人粒细胞集落刺激因子动员组、进口重组人粒细胞集落刺激因子动员组,每组各10例,除急性髓细胞白血病采用大剂量阿糖胞苷动员外,其他均应用大剂量环磷酰胺动员,当白细胞降至低谷开始回升时加国产与进口重组人粒细胞集落刺激因子,白细胞升至5×109 L-1以上开始采集外周血造血干细胞。所有患者均移植成功,两者在给药剂量、用药天数,采集干细胞质量、造血功能重建及药物毒副反应等方面差异均无显著性意义。     

粒细胞集落刺激因子与异基因造血干细胞移植中移植物抗宿主病及移植物抗白血病的免疫调节效应

文章从细胞水平、动物模型、临床应用等方面对粒细胞集落刺激因子在移植物抗宿主病和移植物抗白血病中的免疫调节作用作进一步的研究。得出结论：粒细胞集落刺激因子可从T细胞、抗原递呈细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞等途径发挥其免疫调节作用,诱导移植物中的T细胞产生免疫耐受,使得移植物抗宿主病和移植物抗白血病效应产生分离,从而改善异基因造血干细胞移植患者的预后,因此,输注经粒细胞集落刺激因子动员的供者淋巴细胞是其中值得关注的、有前途的一种方法。但其作用的途径机制、输注的时机、输注的细胞数等仍有待进一步的实验室和临床研究。     

乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球的制备、性能及应用

用于制备乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球的方法很多,可根据聚合物和药物的性质进行选择,其中乳化-固化法是目前制备乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球中最常用的方法,适用于在连续相中不溶或难溶的药物,缺点在于使用有机溶剂,不利于保持药物的活性,复乳化时工艺也比较复杂,不适宜进行工业化生产;喷雾干燥技术是一种快速的一步微囊化过程,其条件温和,制得的微球具有粒度分布窄、包封率高等特点,其用于不稳定药物微囊化的大规模生产极具潜力。由于给药初期的突释有可能导致血药浓度接近或超过中毒水平,产生明显的毒副作用。乳酸-羟基乙酸共聚物的分子质量、乳酸-羟基乙酸共聚物的纯度、主药理化性质、微球制备方法及制备参数、微球载药量等均是影响突释程度的具体因素。目前防止突释或降低突释程度的方法主要有改变载体材料结构、适当的微球制备以及萃取、洗涤或加入附加剂等。乳酸-羟基乙酸共聚物微球控释系统具有延长药物释放时间、靶向释放、降低药物毒性和刺激性等特点,存在多种给药途径可肌肉注射、皮下注射、玻璃体内注射、关节腔内给药、植入给药、黏膜给药等。     

自体及人工食管替代物的研究进展

许多食管疾病需行食管替代。文章通过查阅国内外文献,分析总结近50多年食管替代物研究及临床应用的发展状况。从人工合成材料、生物材料、生物复合材料、生物组织工程以及自体肺组织瓣的实验与临床研究方面,综述各种材料的特性及应用情况,但尚未找到完全理想的替代物。理想的替代物应具有易获取、无毒性、无排斥反应、无致癌性以及可吸收等特点。     

两种磷酸钙骨水泥浆料固化过程对成骨细胞的影响

背景：国内外关于骨水泥浆料固化过程中对细胞影响及解决方案的研究报道甚少。目的：观察β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥浆料固化过程对成骨细胞的影响。 设计、时间及地点：对比观察,于2006-08/12在北京大学医学部细胞与生物研究室完成。材料：自制2种可注射磷酸钙骨水泥：β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥;小鼠成骨前体细胞株MC3T3-E1由日本RIKEN细胞库提供。方法：将小鼠成骨前体细胞株MC3T3-E1分别接种于β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥的固化块及浆料上,以细胞接种于24孔板作空白对照,用吖啶橙染色后在荧光显微镜下观察,对细胞进行计数分析。 主要观察指标：①细胞形态。②细胞计数。结果：①荧光显微镜下可见黏附于材料块上活细胞的核呈亮绿色荧光,细胞形态完整,未见裂解。材料也吸收部分荧光,呈深绿色的背景。而在磷酸钙骨水泥浆料上仅有少数活细胞存留,明显少于β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥固化块组和空白对照组。②β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥固化块与空白对照组相比,对MC3T3-E1细胞数无影响。两种材料浆料上的细胞数显著低于相应骨水泥固化块组和空白对照组(P < 0.01)。 结论：β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥材料的浆料固化过程对MC3T3-E1细胞有不利影响,致使细胞数降低。     

国产通用型脊柱内固定系统置入治疗腰椎滑脱55例随访

回顾性分析2002-01/2007-12海南省人民医院骨病外科收治的腰椎滑脱患者64例,男19例,女45例。年龄26~73岁病程1~15年。所有患者均有反复腰痛伴下肢放射痛、间歇性跛行(50~300 m)。腰椎椎弓峡部裂并滑脱59例,其中L3Ⅰ度滑脱3例;L4Ⅰ度滑脱31例,Ⅱ度滑脱13例;L5Ⅰ度滑脱9例,Ⅱ度滑脱3例。腰椎退行性变L4假性滑脱5例。全部患者均采用保留棘突的全椎板切除减压或椎管开窗减压、国产通用型脊柱内固定系统置入固定、复位、椎间植骨融合。本组55例获得随访,失访9例。随访时间平均3.1年,按Steffee临床疗效分级标准进行疗效评估,优28例,良19例,优良率85.5%。置入后1周内摄X射线平片复查,28例获完全复位,36例部分复位,椎体间植骨融合率为100%。表明国产通用型脊柱内固定系统结构简单,操作方便,固定坚固,能使滑脱的椎体复位,明显提高脊柱植骨融合率。