慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的观察

目的：观察慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的改变。方法：观察比较慢性乙型肝炎患者及正常健康人的外周血T淋巴细胞亚群差异;并比较慢性乙型肝炎转氨酶正常者与异常者外周血T淋巴细胞亚群差异。结果：慢性乙型肝炎患者CD4^＋、CD8^＋T细胞计数及CD4^＋/CD8^＋低于正常人;慢性乙型肝炎血清转氨酶异常者与转氨酶正常者比较,CD3^＋、CD8^＋T细胞计数升高,CD4^＋/CD8^＋比值降低。结论：慢性乙型肝炎患者存在细胞免疫功能的低下。     

慢性乙型重型肝炎患者肝组织中浸润淋巴细胞中免疫活性细胞的研究

目的 明确慢性乙型重型肝炎（简称慢重肝）患者肝内浸润的淋巴细胞（LILs）及外周血中免疫活性细胞的频率,并对其进行对比分析,以明确它们的异同以及在慢重肝发病机理中的作用。方法 通过毛玻璃研磨加自然沉降肝细胞的方法,对11例慢重肝接受肝移植患者的LILs进行提取、分离。通过流式细胞仪测定慢重肝患者LILs及外周血中免疫活性细胞的频率并行对比分析,同时与正常人LILs及外周血中免疫活性细胞的频率进行对比分析。结果 （1）慢重肝患者LILs中CD4^＋T淋巴细胞及B细胞的频率分别为17％±6％及3．0％±1．0％,明显低于外周血中各自的频率,分别为32％±8％及21．4％±12．2％（均P〈0．01）,而CD8^＋T淋巴细胞、NK及NKT细胞的频率分别为38％±13％、34％±18％及10％±4％,明显高于外周血中各自的频率,分别为26％±6％、15％±9％及6％±4％（均P〈0．05）;（2）与正常对照相比,LILs中CD3^＋及CD4^＋T淋巴细胞明显要高（P〈0、05或P〈0、01）,而NK细胞及NKT细胞要低些;（3）与正常对照相比,慢重肝患者uIJs与外周血淋巴细胞之比,CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞有更高的比值（CD4^＋T淋巴细胞P〈0、01）,B细胞及NKT细胞有更低的比值（P〈0．01或P〈0、05）。结论 肝脏内大量免疫活性细胞的浸润,尤其是CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞、NK细胞的大量浸润对于慢重肝的发病可能起重要的作用。     

乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群检测

目的　探讨乙型病毒性肝炎 (简称乙肝 )患者机体细胞免疫功能紊乱与HBV感染复制的关系。　方法　 4 8例乙肝患者 ,应用流式细胞分析技术检测外周血T淋巴细胞亚群 ,实时荧光定量聚合酶链反应检测HBVDNA载量。　结果　乙肝患者外周血淋巴细胞与正常对照组相比较CD3 + 、CD3 + CD4+ 百分比显著下降 (P <0 .0 5 ) ,而CD3 + CD8+ 百分比变化不明显 ,CD3 + CD4+ /CD3 + CD8+ 比值下降 (P <0 .0 1) ,乙肝HBVDNA阳性与HBVDNA阴性患者比较 ,CD3 + 、CD3 + CD4+ 、CD3 + CD8+ 、CD3 + CD4+ /CD3 + CD8+ 比值差异均无显著性意义 (P >0 .0 5 )。　结论　乙肝患者存在细胞免疫功能紊乱 ,提示细胞免疫参与乙肝发病和进展。     

乙型肝炎病毒感染者外周血各亚群淋巴细胞绝对值的特点及意义

目的探讨不同类型乙型肝炎病毒(HBV)感染者各亚群淋巴细胞绝对值的特点及临床意义。方法 235例HBV感染者按病情分为急性乙型肝炎28例、慢性乙型肝炎40例、乙肝肝硬化(LC)76例、原发性肝癌(HCC)55例、慢性重型乙型病毒性肝炎(以下简称慢重肝)36例。利用流式细胞术对患者的外周血各亚群淋巴细胞绝对值进行检测,并与健康对照组进行比较。结果急性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群除NK细胞外,与对照组差异无统计学意义(均>0.05)。慢性感染者外周血淋巴细胞亚群计数普遍低于对照组,并随病情的进展而显著减少。慢重肝患者较慢性乙型肝炎患者所有亚群细胞计数均明显下降(<0.05)。HCC患者CD3+、CD3-CD19+、CD4+、CD8+亚群细胞计数在所有疾病组中最低,且CD8+细胞较其他疾病组下降更为显著(<0.05)。不同类型HBV感染者NK细胞计数均较对照组明显下降(均<0.05)。结论 HBV感染者存在不同程度的细胞免疫功能低下及免疫调节紊乱,其外周血各亚群淋巴细胞绝对值发生改变,与疾病类型、病情密切相关。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群检测

采用Ｗｕ单克隆抗体致敏的红细胞花环法和ＥＬＩＳＡ方法，对６８例慢性乙型肝炎患者的外周血Ｔ淋巴细胞亚群和血清乙肝病毒标志物（ＨＢＶＭ）进行了检测，选择３０例正常人做对照，同时常规检测ＡＬＴ、ＡＳＴ，对照分析ＨＢＶＭ或ＡＬＴ、ＡＳＴ与Ｔ淋巴细胞亚群的关系。结果：慢性乙肝患者ＷｕＴ８高于正常人，ＷｕＴ４、ＷｕＴ４／ＷｕＴ８比值低于正常人（Ｐ＜０．０５～０．０１）；ＨＢｅＡｇ（＋）患者ＷｕＴ８高于ＨＢｅＡｇ（－）者，而ＷｕＴ４／ＷｕＴ８比值低于ＨＢｅＡｇ（－）者（Ｐ＜０．０５～０．０１）；血清ＡＬＴ和ＡＳＴ升高者ＷｕＴ３、ＷｕＴ８高于ＡＬＴ和ＡＳＴ正常者，而ＷｕＴ４／ＷｕＴ８比值低于正常者（Ｐ＜０．０１～０．００１）。提示：外周血Ｔ淋巴细胞亚群的检测对评估病毒复制、肝细胞损伤有一定参考价值，亦可用作慢性乙肝患者细胞免疫机能的初步监测。     

慢性乙型重型肝炎中医证型临床特点与预后分析

目的 探讨慢性乙型重型肝炎的中医证型分布特点与预后关系.方法 对我院参加国家"慢性重型肝炎证候规律及中西医结合治疗方案研究"项目(2008ZX10502)的慢性重型肝炎患者67例进行中医辨证分型,并对病死率进行相关分析.结果 慢性重型肝炎证型出现频率由高到低依次为:湿热发黄,气虚发黄,瘀热发黄,阳虚发黄.死亡率由高到低依次为:湿热发黄,气虚发黄型,瘀热发黄,阳虚发黄.结论 慢性乙型重型肝炎证候湿热发黄而且预后最差.     

慢性乙型重型肝炎黄疸证患者外周血树突状细胞功能的研究

目的比较慢性乙型重型肝炎阳黄和阴黄证患者的外周血树突状细胞功能。方法体外培养阳黄与阴黄患者外周血树突状细胞,流式细胞仪检测其表面分子CD80、CD86、CD40、HLA-DR、CD1a的表达,MLR中刺激T细胞的增殖和分泌IL-12、IFNα的能力。结果阴黄患者的DC表面分子CD86的表达较阳黄组下降明显(P<0.05)。其他表面分子,如CD40、HLA-DR、CD1a和CD80,阳黄与阴黄二者无明显差异;经TNFα刺激后,上述各表面分子的表达均有上调,但阴黄组CD80、CD86、HLA-DR上调的幅度低于阳黄组(P<0.05)。阴黄患者组自身T淋巴细胞增殖的能力较阳黄患者组为低,但差异无统计学意义(P>0.05);经DC刺激后,阴黄患者的T淋巴细胞的增殖效果明显低于阳黄组(P<0.05)。阳黄和阴黄患者的IL-12和IFNα水平未经TNTα刺激前无明显差异,经TNTα刺激后两组的IL-12和IFNα水平较同组未经TNTα刺激者明显升高(P<0.05)。但阴黄组上升的幅度低于阳黄组(P<0.05)。结论慢性乙型重型肝炎阳黄和阴黄患者均存在明显外周血DC功能障碍,运用TNFα激活可提高DC的部分功能,阴黄患者的外周血DC细胞功能低下较阳黄患者更为明显。     

T细胞亚群变化与慢性重型病毒性肝炎转归关系分析

目的探讨慢性重型乙型肝炎(CSHB)患者外周血T细胞亚群变化与预后的关系。方法采用流式细胞仪分别检测符合条件的CSHB、慢性乙型肝炎(CHB)、健康对照者的外周血T细胞亚群、血生化、凝血酶原活动度。治疗后,根据病情变化将CSHB分为好转组和无好转组。对治疗前、后各组检测结果进行数据分析和统计学处理。结果治疗前,CD3、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+/CD8+比值:CSHB组与CHB组、对照组比较均有明显下降,差异有统计学意义(P<0.01),CHB组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,CSHB无好转组CD3、CD4+T细胞、CD8+T细胞进一步下降、CD4+/CD8+比值上升,好转组CD3、CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值上升,CD8+T细胞下降。CD3、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+/CD8+比值:无好转组与好转组、CHB组、对照组之间比较差异有统计学意义(P<0.01);CHB组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CSHB患者外周血T细胞亚群变化趋势对CSHB的诊断及判断预后有重要的指导意义。     

慢性乙型重型肝炎患者血清总胆汁酸测定的临床意义

血清总胆汁酸（total bile acid，TBA）是反映肝功能的一项重要指标，但在慢性重型肝炎中的变化及意义，目前研究不多。本研究测定84例慢性乙型重型肝炎的TBA水平，探讨其对慢性重型肝炎肝细胞损伤程度及预后判断的临床价值。     

阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞和淋巴细胞亚群的影响*

目的 观察慢性乙型肝炎（CHB）患者阿德福韦酯（ADV）抗病毒治疗前后外周血树突状细胞（DC）和淋巴细胞亚群动态变化,探讨ADV抗HBV的免疫效应机制。方法 对15例ADV抗病毒治疗有效的CHB患者动态观察1年,设健康对照组10例。在治疗前、治疗3个月、6个月和1年对外周血单核细胞源DC进行体外培养,流式细胞仪检测分析DC表面分子及淋巴细胞亚群水平。结果 15例CHB患者均治疗持续有效。与治疗前比较,治疗3个月时DC表面分子CD1a、CD83、CD86和MHC-DR的表达无明显变化;治疗6个月和1年时上调,但二时相比较差异无显著性,且均低于健康对照组。淋巴细胞亚群于抗病毒3个月时亦无明显变化;治疗6个月和1年时,CD4+T及CD4+/CD8+T比值显著提高;NK比例虽有上升趋势,但与治疗前比较无统计学意义;CD3+T、CD8+T和CD19+B细胞未见明显改变。结论 ADV治疗后CHB患者免疫增强,提示其可能通过调节DC和淋巴细胞亚群的功能而参与免疫应答,发挥间接抗病毒作用。     

慢性HBV感染者外周血T细胞亚群研究

目的分析健康人及慢性HBV感染者T细胞亚群特点,探讨宿主细胞免疫功能与慢性HBV感染临床转归的关系。方法使用流式细胞仪检测30名健康人及137例各型HBV感染者外周血T细胞亚群。结果1．对照组与各型HBV感染者的外周血T细胞亚群比较：从慢性HBV携带（CHBVC）组、慢性乙型肝炎（CHB）组到肝炎后肝硬化（PHBC）组,患者外周血CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T绝对值呈逐渐下降趋势,显著低于对照组（P〈0．05）。PHBC组CD4^＋T/CD8^＋T比值显著高于对照组和CHBVC组（尸〈0．05）。2．不同程度CHB组间外周血T细胞亚群比较：从CHB（轻度）组、CHB（重度）组到慢性重型乙型肝炎（CSUB）组,患者CD3^＋F、CD4^＋T、CD8^＋T绝对值和CD4^＋T／CD8^＋T比值逐渐下降。CSHB组CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T绝对值显著低于CHB（轻度）组（P〈0．05）。结论HBV慢性感染机制复杂,不同的临床转归患者T细胞亚群状态不同。慢性HBV感染后,肝脏损害程度严重的患者T细胞亚群功能低下及紊乱程度明显。     

不同HBV感染自然史状态及肝硬化患者抗-HBc水平及其临床意义

目的 研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染不同自然史状态及肝硬化患者血清乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)水平及其用于自然史状态区别诊断的临床价值.方法 纳入2015年3月至2016年6月就诊的慢性HBV感染患者160例,根据自然史状态分为免疫耐受组(n=43)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)组(n=37)、非活动携带组(n=39)及HBeAg阴性CHB组(n=41),同时纳入HBeAg阳性(n=44)及阴性肝硬化患者(n=46).收集患者一般情况,检测血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、HBeAg、抗-HBc、HBV DNA载量及HBV基因型.分析抗-HBc与临床指标的相关性及其用于自然史状态区别诊断的价值.结果 不同自然史状态抗-HBc由高至低为:HBeAg阳性CHB组(4.22±0.68)log10 IU/mL、HBeAg阴性CHB组(3.89±0.88)log10 IU/mL、非活动携带组(3.07±0.68)log10 IU/mL及免疫耐受组(2.88±0.82)log10 IU/mL.HBeAg阳性及阴性肝硬化患者抗-HBc分别为(3.04±0.82)、(3.15±0.86)log10 IU/mL.HBeAg阳性CHB组抗-HBc与ALT(r=0.353,P=0.032)及AST(r=0.421,P=0.009)呈正相关;HBeAg阴性CHB组抗-HBc与HBV DNA(r=0.343,P=0.028)、ALT(r=0.458,P=0.003)及AST(r=0.495,P=0.001)呈正相关.抗-HBc区别诊断免疫耐受状态及HBeAg阳性CHB的AUC为0.903,区别非活动携带状态及HBeAg阴性CHB的AUC为0.833.结论 不同慢性HBV感染自然史状态下血清抗-HBc水平存在明显差异,且抗-HBc可用于慢性HBV感染自然史状态的区别诊断,诊断价值高于HBsAg水平.     

慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒携带者外周血T细胞亚群的变化和意义

目的分析慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒携带者和正常人外周血T细胞亚群的差异,探讨乙型肝炎的发病机制与宿主细胞免疫功能的关系。方法收集2004年2月至7月在中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院肝炎门诊就诊的的慢性乙型肝炎患者29例、HBV携带者25例及健康献血员35例的外周血,使用流式细胞仪检测T细胞亚群,分析其差异及临床意义。结果慢性乙肝患者、HBV携带者和正常对照外周血CD4+T细胞计数分别为565±192、672±148和816±259;CD8+T细胞计数分别为491±225、445±157和609±177。与正常对照组比较,慢性乙肝患者和HBV携带者外周血白细胞、淋巴细胞、T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T细胞计数均减少,慢性乙肝患者NK细胞计数减少;与正常对照和HBV携带者相比,慢性乙肝患者CD8+CD38+T细胞和CD4+CD45RA-记忆/效应T细胞比例显著升高,CD4+CD45RA+62L+初始T细胞比例及计数均显著减少。结论慢性乙肝患者和HBV携带者体内存在T淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱,这可能与乙肝病毒感染后慢性化相关。     

慢性乙型肝炎患者血清抗Hp抗体检测及抗Hp抗体与HBV载量和HBV基因型的关系

目的：探讨幽门螺杆菌(Hp)在慢性乙型肝炎中的作用。方法：对376例慢性乙型肝炎患者 （分为肝炎组、乙型肝炎肝硬化组和并发肝癌组）的Hp感染状况与HBV DNA定量、HBV DNA分型进行检测,并与健康对照组和慢性胃炎组进行对比。 结果：慢性乙型肝炎组（56.2%）、乙型肝炎肝硬化组（69.9%）和乙型肝炎并发肝癌组（75.0%）Hp感染率明显高于健康对照组（43.4%）（P<0.01）,各组与慢性胃炎组（57.9％）比较差异无显著性（P>0.05）,其中肝硬化组和并发肝癌组Hp感染率均高于肝炎组（P<0.05）。不同病毒载量的慢性乙型肝炎患者的Hp感染率均明显高于健康对照组（P<0.01）,但不同病毒载量之间差异无显著性（P>0.05）。B、C和D基因型慢性乙型肝炎患者Hp感染率分别为61.3%、63.3%和50.0%,3组之间比较差异无显著性（P>0.05）。结论：慢性乙型肝炎患者Hp感染率明显增加,且Hp感染率随着肝脏病变程度的进展而增加。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 观察不同类型乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者外周血T淋巴细胞亚群变化特点.方法 对我院2013年6-11月门诊及住院的200例乙肝患者和50例健康对照者采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测外周血淋巴细胞（CD45＋）、T淋巴细胞（CD45＋CD3＋、CD45＋CD3＋CD4＋、CD45＋CD3＋CD8＋）、B淋巴细胞（CD45＋CD3-CD19＋）、NK淋巴细胞（CD45＋CD3-CD16＋56＋）百分比和细胞绝对计数.结果 急性乙型肝炎组T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数较健康对照组显著升高（P＜0.01）.慢性乙型肝炎组、肝硬化组和肝衰竭组：T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数、CD4＋/CD8＋比值均较健康对照组降低,其中肝衰竭组＜肝硬化组＜慢性乙型肝炎组.慢性乙型肝炎组CD4＋淋巴细胞百分比较健康对照组显著降低（P＜0.01）.肝硬化组CD4＋淋巴细胞百分比较慢性乙型肝炎组显著降低（P＜0.01）,CD8＋T淋巴细胞百分比显著升高（P＜0.01）.肝衰竭组T淋巴细胞和CD4＋T淋巴细胞百分比较肝硬化组显著降低（P＜0.01）.结论 乙型肝炎患者CD4＋T淋巴细胞持续降低,与疾病病程发展密切相关.     

慢性活动性乙型肝炎外周血T细胞亚群上活化抗原的表达

目的探讨慢性活动性乙型肝炎(CAHB)患者外周血活化抗原CD69、HLA-DR分子在T细胞表达的变化及其意义。方法以31例正常人作为对照,采用免疫荧光三色标记流式细胞术,检测30例CAHB患者外周血T细胞亚群及其CD69、HLA-DR抗原表达;同时用荧光定量PCR检测患者的病毒DNA载量。结果CAHB患者外周血CD3+T细胞的百分率(63.78%±9.70%)与正常对照组比较差异有显著性(P<0.01),CD4+T细胞的百分率(45.88%±8.51%)明显低于正常对照组(P<0.001),CD8+T细胞的百分率(44.64%±7.10%)明显高于正常对照组(P<0.001);CD3+T细胞CD69的表达(6.85%±2.83%)与正常人对照组比较差异也有显著性(P<0.01),其中CD4+T细胞CD69的表达(2.31%±0.94%)与正常对照组比较差异无显著(P>0.05),CD8+T细胞表达CD69水平(3.87%±1.81%)明显高于对照组(P<0.01);CD3+T细胞上HLA-DR的表达(17.09%±4.23%)与正常对照组之间差异有显著性(P<0.001),其中CD4+T细胞中HLA-DR+细胞(7.97%±2.43%)和CD8+T细胞中HLA-DR+细胞(5.52%±1.48%)均比正常对照组显著增高(P<0.01)(P<0.001);CD8+CD69+、CD8+HLA-DR+细胞的数量与病毒DNA载量之间呈正相关。结论CAHB患者存在细胞免疫功能紊乱和淋巴细胞异常激活现象,T淋巴细胞的激活以CD8+T细胞为主,其在抗病毒感染中起着重要作用。     

慢性乙肝患者Th1/Th2应答与乙肝病毒感染单个核细胞的关系

目的探讨乙肝病毒侵犯淋巴细胞对慢性乙肝患者免疫功能状态的影响.方法采用双抗体夹心法检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中细胞因子的水平, PCR方法扩增乙肝病毒DNA片段.血清中HBV DNA检测采用斑点杂交法.结果与正常对照组比较,慢性乙型肝炎患者的IFN-γ水平降低,但无显著差异性;而IL-4水平明显增高(F=17.4,P<0.01).血清中HBV DNA 水平与PBMC培养上清液中的IFN-γ水平呈负相关(rs= 0.53, P<0.01).62.9%(35/56)的慢性乙肝患者外周血PBMC中检出HBV DNA,HBV DNA 阳性组和阴性组的IFN-γ水平具有显著差异(F=15.2,P<0.01).结论 (1)慢性乙肝患者的外周血以Th2类细胞因子占优势.(2)乙肝病毒侵犯淋巴细胞可能影响其免疫功能的发挥.     

乙型肝炎病毒感染相关疾病中病毒基因型和亚型的分布及其与临床指标的关系

目的:明确乙型肝炎病毒(HBV)基因型及亚型在上海及周边地区HBV感染相关的肝细胞癌、慢性乙型肝炎和HBV携带者中的分布,探讨不同基因型及亚型在HBV相关疾病发展进程中的作用.方法:通过多重PCR对462例肝细胞癌患者(HCC组)、234例慢性乙型肝炎患者(CHB组)和110例HBV病毒携带者(ASC组)进行HBV基因型及亚型的鉴定.结果:与CHB组相比,HCC组C型比例增高(P=0.009),B型比例下降(P=0.045),可见少量A、D型;基因型B均为B2亚型;基因型C以C2亚型为主(98.5%),可见少量C1亚型(1.5%).B2和C2型患者中,HCC组比CHB组HBeAg阳性率低(P=0.005,P=0.008),而抗HBe阳性率高(P=0.003,P=0.001).HCC组内混合型HBeAg阳性率最高,明显高于B2型(P=0.016).在40～60岁的HCC患者中,HBV DNA载量B2型＜C2型＜混合型(B2型vs C2型,P=0.029;B2型vs混合型,P=0.021;C2型vs混合型,P=0.041).结论:上海及周边地区HBV基因亚型以C2型为主,B2型次之,HCC、CHB及ASC人群中的基因型构成不同;混合型感染比单一基因型引起的病毒载量和HBeAg阳性率高,更容易导致HCC的形成.