羊骨多肽酶法制备工艺优化及抗氧化活性研究

以羊骨粉为原料,用碱性蛋白酶进行酶解制备具有抗氧化活性的酶解多肽液。以水解度为指标,优化了羊骨多肽酶法制备工艺条件,并对酶解液的抗氧化能力进行了测定。结果表明,碱性蛋白酶制备羊骨多肽的最佳制备工艺条件为酶解时间5 h,酶解温度45 ℃,加酶量8 200 U/g,酶解pH值10,该条件下羊骨粉的水解度为(28.36±0.02)%。羊骨粉酶解液与对照组(未被碱性蛋白酶酶解的羊骨粉溶液)的抗氧化能力均随着溶液浓度的增加而上升,当酶解液浓度达到2.5 mg/mL时对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率和还原力均达最大值,分别为(65.42±0.11)%,(82.30±0.27)%,(79.83±0.22)%,0.484±0.007,显著高于对照组(P＜0.05)。说明碱性蛋白酶水解羊骨粉得到的酶解多肽液具有体外抗氧化活性。     

风味蛋白酶水解羊骨粉制备胶原多肽的工艺研究

利用风味蛋白酶水解羊骨粉,并对4个水解指标做相关性分析。各指标之间均显著相关,与水解度的相关性依次为短肽得率(0.926)多肽生成量(0.805)氨基酸态氮(0.680)。响应面优化羊骨粉水解工艺时,以水解度为指标,得出最优水解条件,即料水比为3∶25(W/V)、水解温度为55℃、水解时间为315 min、加酶量为3.48%(E/S)、p H为7.5,在此条件下水解度为20.38%,与预测值(20.72%)相比,相对误差较小,响应面法所得的优化工艺参数准确可靠,具有实用价值。     

Box-Behnken响应面优化冷榨花生粕酶解制备花生肽工艺

在单因素试验基础上应用Box-Behnken响应面优化技术对中性蛋白酶酶解冷榨花生粕蛋白质制备活性多肽工艺进行了响应面优化分析,建立了酶促水解二阶多项式非线性回归方程和数值模型并分析了酶解时间X_1、酶添加量X_2、酶解pHX_3以及底物浓度X_4对多肽制备的影响规律。响应面优化方案为酶解时间200 min,酶添加量0.081 g/mL,酶解pH 10.0和底物质量浓度0.083 g/mL。优化条件下验证试验结果为(0.135 6±0.001 4)%,与模型预测值0.137 7%接近,偏差为1.55%。研究表明,单因素试验与响应面优化联用可应用于冷榨花生粕酶促水解制备活性多肽工艺的优化分析。     

酶解法制备牦牛骨胶原多肽及其加工性能评价

以牦牛骨为原料,酶解法制备可溶性骨胶原多肽,考察蛋白酶种类、底物质量浓度、酶底比、酶解时间、pH、酶解温度对酶解液水解度和多肽得率的影响,在单因素试验基础上以多肽得率为指标进行响应面优化实验,最终确定碱性蛋白酶为试验最适用酶,最佳酶解条件为:底物质量浓度3.5 g/d L,酶底比4 000 U/g,pH 7.0,酶解时间4 h,此时多肽得率为22.06%。对酶解产物进行加工特性测定表明其具有良好的溶解性和稳定性。     

羊骨粉碱性蛋白酶水解各指标的相关性分析

水解可大幅提高羊骨的营养价值和生物活性,水解程度越高,生物利用度越高,其抗氧化、促免疫等活性亦越强。本研究以碱性蛋白酶水解羊骨粉,探讨反映水解程度的水解度、短肽得率、氨基态氮含量、多肽生成量4个指标间的相关性,为水解效果评价提供最优指标。结果表明,单因素试验过程中,除温度外,各指标达到最大值时均具有相同的底物浓度(8%)、酶添加量(4%)、酶解时间(4h)和起始pH值(9),4个指标中,多肽生成量受各因素影响最大。相关性分析结果表明各指标之间均呈显著相关(P0.01),与水解度的相关性(r值)依次为短肽得率(0.981)、氨基酸态氮(0.801)、多肽生成量(0.641),因此在优化羊骨酶解工艺时,水解度和短肽得率为优选指标,胶原肽经进一步分离纯化或直接干燥后,可广泛应用于饲料、食品、医药、化妆品等领域。     

鱼骨多肽钙粉的研究与开发

利用鲢鱼骨开发了一种综合性蛋白补钙制剂─鱼骨多肽钙粉,并研究了制备鱼骨多肽钙粉的最佳酶解工艺和钙活化工艺。结果表明,合适的酶解条件为温度65℃,木瓜蛋白酶用量5000U/g(原料),水解时间5h,pH为7,料液比(W/V)=1∶5,多肽产品得率为9.31%。合适的钙活化工艺条件为在室温35℃的条件下,乳酸浓度为20%,骨粉质量与乳酸体积之比m粉:V乳酸=10g∶70mL,活化时间约6h,活性钙产品得率为25.00%。     

金枪鱼骨抗氧化酶解物的工艺优化

为获得高抗氧化活性的金枪鱼骨粉酶解液。用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶4种蛋白酶对鱼骨粉进行酶解,以酶解液的DPPH自由基清除活性为主要指标,水解度为辅助指标进行分析,筛选出试验最适水解酶为中性蛋白酶。采用响应面设计方法对鱼骨粉酶解工艺进行优化。结果表明,骨粉最佳酶解工艺参数为:酶解温度56.22℃,酶解时间1.88 h,p H 6.15,液料比20.19∶1(m L∶g)。该条件下的鱼骨粉酶解液蛋白质浓度为9.30 mg/m L,水解度为12.34%,DPPH清除率为94.97%,羟基(·OH)自由基清除率为97.89%。骨粉酶解液显示出较强的抗氧化活性,且优于同浓度条件下的VC液抗氧化活性。     

响应面法优化油茶籽多肽制备的工艺研究

针对油茶籽加工副产物利用率低,油茶籽多肽制备得率和纯度不高等问题,本研究利用中性蛋白酶对油茶籽蛋白进行水解,研究了酶解pH、酶解温度、底物浓度、加酶量和酶解时间5个单因素对油茶籽多肽制备的影响,在单因素试验的基础上,选取了底物浓度、酶解温度和加酶量3个因素,采用综合平衡法,以酶解后油茶籽蛋白的水解度、游离氨基酸浓度和多肽浓度隶属度的综合分为指标,进行三因素二次旋转试验设计,并进行响应面分析,以优化油茶籽多肽的制备条件,优化结果底物浓度3.00%、酶解温度47.0℃、加酶量6 440 u/g底物,在该优化条件下的试验显示,油茶籽蛋白水解度19.25%、游离氨基酸浓度76.60μmol/mL、油茶籽多肽浓度61.35 mg/mL,综合分0.985,优化结果理想,说明该工艺可生产质量较好的小分子多肽,为油茶籽多肽的开发应用奠定了一定的理论基础。     

酶解脱脂虾粉制备多肽最佳工艺条件的研究

对酶法水解脱脂虾粉制备多肽的工艺进行了研究,试验以水解度(DH/%)和酸溶性肽得率(YASP/%)为指标,确定了用胰蛋白酶-木瓜蛋白酶混合酶法水解脱脂虾粉制取多肽的最佳酶解工艺条件为:胰蛋白酶-木瓜蛋白酶的酶量比为 1:2(W/W),总酶量为6000U,脱脂虾粉底物浓度为 4%,pH7.0,温度 60℃,反应时间 6h 的条件下,可使水解度和酸溶性肽得率分别达到 25.91%和 38.46%。     

木瓜蛋白酶水解豌豆蛋白的工艺研究

研究木瓜蛋白酶对豌豆蛋白的水解作用,分析了酶量、底物浓度、温度、pH、水解时间因素对水解度的影响,确定木瓜蛋白酶水解豌豆蛋白制备豌豆多肽的最佳水解条件为:酶浓度8%(E/S质量比),底物浓度7%(固液比).反应温度65℃,反应时间3.5 h,pH6.5,并利用高效液相色谱法测定豌豆多肽分子量.试验结果表明,当水解度为30%时,豌豆多肽混合物分子量80%集中在500u左右.     

双酶法提取甜瓜籽多肽的工艺研究

以甜瓜籽为原料,水解度为考察指标,采用胰蛋白酶和碱性蛋白酶双酶协同酶解法制备甜瓜籽多肽。通过单因素试验和响应面设计试验对酶解条件进行优化,结果表明:酶解的最佳工艺条件为底物浓度为3%、加酶量为4%、酶解时间为180 min、酶解温度为50℃、pH值为8、双酶质量比为6∶4,水解度达到最大值13.85%。     

葵花籽多肽的制备及其降压活性研究

试验以低温脱脂葵花籽粕为原料,进行脱脂和脱绿原酸处理后,用碱性蛋白酶制备葵花籽多肽。以水解度和ACE抑制率为评价指标,对底物浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间和pH值进行单因素试验,在此基础上采用响应面试验优化碱性蛋白酶制备葵花籽多肽的最佳水解工艺。结果表明:底物浓度为15g/mL、加酶量为3 700U/g、酶解温度为56℃和pH值为8.2的条件下水解3h,ACE抑制率可达63.74%。     

碱性蛋白酶对蛹虫草蛋白质水解的工艺技术优化研究

以蛹虫草蛋白粉为原料,利用碱性蛋白酶进行酶解处理,并对其酶解工艺进行优化研究。以水解度和酶解得率为评价指标,采用正交试验结果对蛹虫草水解工艺进行优化。当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.3%、酶解时间10 h、酶解温度为53 ℃时的水解度最高,为15.01%;当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.9%,酶解时间8 h、酶解温度为56 ℃时的酶解得率最高,为75.27%。经碱性蛋白酶酶解、过滤、干燥等工艺处理后,酶解产物的分子质量小,酶解剩余物少,酶解得率高,可以进行产业化推广应用。     

基于响应面法优化氢氧化钠预处理甘蔗渣的酶解条件

为确定氢氧化钠预处理甘蔗渣的最佳酶解条件,该研究选择经2% NaOH于121 ℃下处理1 h后的甘蔗渣为酶解对象,以预处理甘蔗渣的总可发酵糖得率为评价指标,采用单因素试验和响应面法优化酶解条件,建立了总可发酵糖得率与纤维素酶量、酶解时间和酶解转速之间的数学模型。结果表明,对结果影响的3个因素主次顺序为酶解时间＞纤维素酶添加量＞酶解转速,其中纤维素酶添加量分别与酶解时间和酶解转速存在显著的交互作用（P＜0.05）。最佳酶解条件为纤维素酶添加量31 FPU/g底物,酶解时间96 h,酶解转速180 r/min。此优化条件下,甘蔗渣总可发酵糖得率为55.37%。     

[鱼回]鱼骨胶原多肽的制备工艺研究

鱼骨中胶原蛋白含量丰富,本研究采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶对鲴鱼骨进行分步酶解制备骨胶原多肽。通过单因素和正交优化实验,确定碱性蛋白酶水解鲴鱼骨胶原蛋白的最佳工艺条件为：料液比（w／v）4：50,酶解温度45％,加酶量4％,pH值8,酶解时间3h,在此条件下,水解度达到39．49％。风味蛋白酶分步酶解的最佳工艺条件为酶解温度50％,加酶量4％,pH值7．5,酶解时间3h,在此条件下,水解度达到47．2％,水解产物的风味在一定程度上也得到了改善。     

Protex-6L碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白的工艺研究

选用Protex-6L蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解生成肽和氨基酸。以水解度为考察指标,对其酶解工艺进行优化。基于单因素实验,考察了酶解参数:pH、酶解温度、底物浓度、加酶量、酶解时间等对酶解的影响,利用designexpert软件设计响应面对酶解条件进行优化分析,并在最优条件下通过SephadexG-75分析水解产物的分子量分布。结果表明:pH8.85、酶解温度57.34℃、底物质量分数7.00%、加酶量6884.36U/g、酶解时间4.19h,此条件下的绿豆分离蛋白的水解度(DH)为36.60%。水解得到的小肽分子量大部分都小于4000u。     

猪骨呈味物质提取的研究(I)——酶解猪骨最佳工艺条件

本实验对猪骨酶解前的热处理和超声波预处理等前处理方法及木瓜蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解猪骨工艺进行了研究。结果表明:猪骨热处理的最佳条件为温度90℃,时间10min;猪骨超声波预处理最佳反应条件是:总超声时间为10min、超声波功率为400W。猪骨酶解前经热处理后,水解度和氮收率分别提高了30.84%、10.99%;经超声波预处理后,水解度和氮收率分别提高了84.57%、66.45%;因此,超声波预处理要明显比热水预处理好。试验确定最佳的双酶水解工艺条件为底物浓度15%、E/S6000U/g、酶解时间4h、酶解温度50℃、酶解pH值7.5、木瓜蛋白酶量:胰蛋白酶量1:1。在确定的最佳条件下对猪骨进行超声波预处理和双酶水解,水解度为25.99%、氮收率为66.35%。     

响应面法优化酥李果汁的酶法提取工艺

目的:研究酶解提取酥李果汁的最佳工艺条件,为李深加工利用提供理论参考。方法:以酥李出汁率为指标,在单因素实验基础上采用响应面试验优化,对单一果胶酶、单一纤维素酶、复合酶（果胶酶和纤维素酶）提取酥李果汁的工艺条件分别进行优化。结果:不同加酶方式中对酥李出汁率的影响因素顺序均为酶解温度>加酶量>酶解pH>酶解时间;果胶酶酶解提取酥李果汁的最佳工艺条件为:加酶量0.45 g/L、酶解温度38 ℃、酶解pH3.8、酶解时间72 min,出汁率提高27.13%;维素酶酶解提取酥李果汁的最佳工艺条件为:加酶量0.55 g/L、酶解温度41 ℃、酶解pH4.2、酶解时间105 min,出汁率提高20.18%;复合酶酶解提取酥李果汁的最佳工艺条件为:果胶酶添加量0.45 g/L、纤维素酶添加量0.55 g/L、酶解温度41 ℃、酶解pH4.0、酶解时间87 min,出汁率提高31.79%。三种加酶方式中,回归模型均能较好地反应相应酶制备酥李果浆的出汁率,所得工艺合理可靠。结论:在酶法提取酥李果汁过程中,果胶酶和纤维素酶的不同添加方式均能有效提高酥李出汁率,其中采用复合酶提取酥李果汁效果最佳。本研究成果为贵州李产品开发提供了一定的技术参考。     

响应面法优化油菜花粉谷蛋白酶解条件

本研究在底物浓度、酶底比、pH值、酶解时间和温度五个单因素试验的基础上,利用响应面分析法对油菜花粉谷蛋白最佳酶解条件进行了研究。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解花粉谷蛋白的最佳水解条件为底物浓度6%,pH值9.0,水解温度50℃,酶底比1460U/g蛋白,水解时间2h。     

酶解条件对火龙果甜菜红素含量和出汁率的影响

为提高酶解制备红肉火龙果果汁甜菜红素保留率和出汁率,探讨了酶添加量、酶解时间、酶解温度和底物pH等工艺因素对红肉火龙果果汁甜菜红素稳定性、出汁率和透光率的影响。在单因素试验结果基础上,采用Box-Behnken试验设计和响应面分析,以红肉火龙果果汁甜菜红素保留率为重要指标,结合考虑火龙果的出汁率和透光率响应值,运用期望函数同时优化多目标途径,优化了酶法制备红肉火龙果汁的工艺条件。结果表明:当果胶酶添加量为285 U/g,酶解温度46℃,底物pH为3.7,酶解时间2 h时,火龙果中的甜菜红素保留率可达到80.8%,出汁率可达到64.4%,透光率可达到89.5%,获得的酶解工艺参数在满足红肉火龙果果汁甜菜红素保留率高的同时,又有的高出汁率和透光率。经实验验证,实验值与预测相符。