人脐血单个核细胞移植前后自闭症患儿脑脊液中细胞生长因子的表达

背景:研究发现脐血单个核细胞治疗自闭症具有一定的效果。目的:观察人脐血单个核细胞移植治疗自闭症患儿脑脊液中神经生长因子、血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子水平的变化。方法:经腰穿蛛网膜下腔途径,以2×106/kg异体人脐血单个核细胞移植治疗30例儿童自闭症患者,1次/周,共治疗3次。结果与结论:第2次移植1周后患儿脑脊液中神经生长因子较移植前、第1次移植1周后水平增高(P<0.05),血管内皮细胞生长因子及碱性成纤维细胞生长因子水平均较移植前、第1次移植1周后水平增高,但差异无显著性意义(P>0.05)。说明人脐血单个核细胞移植治疗自闭症患儿脑脊液中神经生长因子水平明显增高,血管内皮细胞生长因子及碱性成纤维细胞生长因子变化不明显。     

人脐血单个核细胞体外定向诱导向神经干细胞分化

背景：有文献报道应用不同的诱导剂如细胞生长因子和神经营养因子等，可将人脐血单个核细胞体外诱导为神经干细胞和／或成熟神经细胞，但诱导剂的使用方法以及剂量却各不相同。目的：联合应用不同的诱导剂将人脐血单个核细胞体外诱导分化为神经干细胞，并进行形态学观察和鉴定，以确定最佳诱导剂组合及最佳浓度。设计、时间及地点：观察对比实验，于2007-05／2008-09在辽宁省血液中心输血医学研究所细胞研究中心完成。材料：新鲜脐血来源于足月分娩的健康孕妇。方法体外分离培养人脐血单个核细胞，在无血清DMEM／F12培养液中添加不同组合的诱导因子进行单个核细胞的诱导，以确定最佳诱导因子组合：①10ug／L神经生长因子（nerve growth factor，NGF）＋体积分数为0．01神经营养因子N2＋体积分数为0．02神经营养因子B27。②10ug/L NGF＋10ug/L碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）＋体积分数为0．01神经营养因子N2＋体积分数为0．02神经营养因子B27。③10ug／L bFGF＋10ug/L表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）＋体积分数为0．01神经营养因子N2＋体积分数为0．02神经营养因子B27。④10ug／L bFGF＋10ug／L EGF。同时在无血清DMEM／F12培养液中添加不同浓度的bFGF和EGF进行单个核细胞的诱导，以确定最仕诱导浓度：①5ug／L bFGF＋5ug／L EGF组。②10ug/L bFGF和10ug／LEGF组。③20ug/L bFGF和20ug／L EGF组。主要观察指标：①倒置荧光照微镜下观察脐血单个核细胞及各诱导剂组诱导分化为神经干细胞的形态特征。②免疫荧光检测10ug／L bFGF和10ug／L EGF组神经干细胞巢蛋白nestin的表达情况。③流式细胞仪检测10ug／L bFGF和10ug／L EGF组诱导第7天和第15天的细胞nesfin表达情况。结果：①分离培养的脐血单个核细胞呈散在的圆形生长。②至诱导第7天，分化细胞出现突触样结构和生长端样结构，并可见多个细胞之间形成网络，符合神经干细胞样形态特征。③不同的细胞因子组合诱导的神经干细胞增殖和分化情况不同，含NGF实验组细胞长势相对最差，含bFGF和EGF实验组的细胞长势最旺盛，胞体较大而圆，细胞突起也粗大，呈三角形或锥形，突触样结构和生长端样结构明显可见，为最佳诱导因子组合。④10ug／LbFGF＋10p-g，LEGF组的细胞密度适中，伸出突起明显，神经细胞形态最特异，培养周期最短，为最适实验浓度。⑤细胞免疫荧光检测10ug／L bFGF＋10ug／L EGF组诱导第7天细胞nestin阳性。⑥流式细胞仪分别检测对照组和10ug／L bFGF＋10ug／L EGF组诱导第7天、第15天nestin阳性细胞数，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：联合应用10ug／L bFGF和10ug/L EGF可较短时间内定向将人脐血单个核细胞体外诱导分化为神经干细胞。     

人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭

背景：多项基础研究证实人脐血干细胞治疗急性心肌梗死合并心力衰竭安全有效,但目前尚未有该方法用于临床治疗的报道。目的：观察人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭患者的远期疗效。方法：入选2009年1月至2011年6月辽宁中医药大学心血管内科收治的心肌梗死合并心力衰竭患者共25例,其中12例患者冠脉造影后通过微导管将脐血单个核细胞悬液注入到冠状动脉远端,13例患者进行常规治疗。所有患者均规范应用药物治疗,急性期均行冠脉造影及经皮冠状动脉介入治疗。治疗前,治疗后12,24个月观察两组患者心功能改善情况,评价指标为左室射血分数、左室收缩末期容积及左室舒张末期容积。结果与结论：与治疗前比较,移植组治疗后12,24个月左室射血分数显著增高,左室收缩末期容积、左室舒张末期容积显著降低（P〈0.05）。与治疗前比较,对照组治疗后12,24个月左室射血分数、左室收缩末期容积、左室舒张末期容积差异均无显著性意义（P〉0.05）。与对照组相比较,移植组各个时间点左室舒张末容积、左室收缩末容积均显著降低,左室射血分数增高（P〈0.05）。各随访期间均未发现相关不良事件发生。结果表明利用人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭,可显著改善患者心功能及左室重构情况。     

血管内皮细胞生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为血管内皮样细胞

背景：骨髓间充质干细胞植入机体不同类型组织后可以分化为相应组织的靶细胞，提示机体内局部微环境可诱导和决定干细胞的发育取向，但其诱导分化条件和具体作用机制尚不清楚。目的：检测血管内皮细胞生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子在体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为血管内皮样细胞的可行性。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2006—03／2007-01在南昌大学第一附属医院烧伤研究所完成。材料：健康骨髓来源于南昌大学第一附属医院内科同期收治的临床骨髓穿刺检查正常的5例住院患者，无血液系统疾病和家族遗传病史。血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子为Cytolab公司产品。方法：无菌条件下取健康人骨髓，采用Ficoll密度梯度离心＋贴壁法分离纯化培养骨髓间充质干细胞。取传至第3代细胞，诱导组加入含10μg/L血管内皮细胞生长因子、5μg/L碱性成纤维细胞生长因子和10％胎牛血清的DMEM培养液，对照组仅加入含体积分数为0.1的胎牛血清的DMEM培养液，置37℃、体积分数为0．05的CO2饱和湿度恒温培养箱培养14d。主要观察指标：倒置相差显微镜下观察细胞生长情况和形态学变化，免疫细胞化学染色检测CD34、Ⅷ因子的表达，透射电镜观察细胞超微结构。结果：诱导组细胞由长梭形变为短梭形和扁平形，呈内皮样细胞形态特征，CD34、Ⅷ因子均呈阳性表达，细胞胞浆内可见W-P小体。对照组细胞CD34、Ⅷ因子呈阴性。结论：血管内皮细胞生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子可成功诱导人骨髓间充质干细胞分化为血管内皮样细胞。     

人脐血单个核细胞移植对裸鼠造血及免疫功能的影响

随机对照动物实验，于2006-11／2007-02在辽宁医学院SPF级动物实验室完成。应用^60Co对Balb／Cnu^＋裸鼠进行移植前放射。照射后脐血移植组输入新鲜人脐血单个核细胞，对照组输入生理盐水。结果移植组小鼠存活率及存活时间均明显高于对照组。骨髓中人CD45^＋细胞2周时就已出现，随后迅速上升，4～8周维持较高水平，8周时达最高，8周后明显下降，至12周时仍可检测出。脐血移植后2周，在小鼠的骨髓、外周血中出现了人类特异性Cart—1基因，并继续存在至12周。对照组未检测到人DNA。证实人脐血干细胞移植能在免疫缺陷BALB／cnu^＋裸鼠体内成功植入，使免疫缺陷小鼠获得造血和免疫重建。     

脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的变化

背景：目前神经干细胞(Neural Stem Cells，NSCs)的来源仅限于胚胎，因此寻找一种新的：NSCs的来源对于神经科学领域基础与应用研究的发展至关重要，而脐血中资源丰富。目的：探讨脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的表达差异。地点与材料：研究地点为郑州大学医学院干细胞研究中心。材料为用肝素抗凝采血袋从郑州大学第一附属医院及第三附属医院产科无菌收集健康产妇足月孕娠顺产或剖宫产的婴儿脐带血50～100mL，充分混匀后，置保温盒中带回实验室。设计与方法：采用RT-PCR方法对脐血单个核细胞培养前后nestin，NF-M及MAP2 mRNA的表达进行检测。主要观察指标：脐血单个核细胞培养前后nestin，NF-M和MAP2 mRNA的表达。结果：nestin，NF-M及MAP2 mRNA在培养前后的脐血单个核细胞中表达呈阳性；同未培养的脐血单个核细胞相比，nestin，NF-M及MAP2 mRNA在培养的脐血单个核细胞表达增强。结论：在直接分离的脐血单个核细胞中存在着神经(干)细胞；培养后，神经元样细胞增多，nestin，NF-M及MAP2 mRNA表达增强。     

心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子对兔骨髓间充质干细胞自体移植的影响

目的：了解骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)在心肌梗死的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性，及同时心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)对此过程的影响。方法：将21只兔结扎左前降支制作急性心肌梗死模型，骨穿抽取骨髓，分离培养扩增MSCs。随机分成3组，术后2周进行心肌梗死瘢痕内移植5-溴脱氧尿嘧啶(bromodeoxyuridine，BrdU)标记的MSCs(加或不加bFGF)(MSCs组、MSCs+bFGF组)，对照组注射培养基。心肌梗死手术前、手术后3d及移植后4周做超声心动图检测心功能，处死动物取左室标本作冷冻切片，采用免疫荧光法鉴定植入细胞，并检测VIII因子相关抗原以测量毛细血管密度。结果：两细胞移植组左室切片中均可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞。对照组未见BrdU染色阳性细胞。VIII因子阳性内皮细胞计数表明MSCs组及MSCs+bFGF组毛细血管密度分别为每高倍视野29&;#177;8和31&;#177;6，显著高于对照组(21&;#177;5)(F=11．971，P&;lt;0．01)，超声心动图检测证实MSCs组及MSCs+bFGF组移植后4周射血分数显著大于对照组(F=5．850，P&;lt;0．05)，两细胞移植组间上述各项差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：缺血心肌内注射MSCs可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌，促进血管新生从而改善心功能，可用于心肌梗死的治疗；心肌内单次直接注射bFGF对MSCs自体移植无显著影响。     

脐血单个核细胞移植治疗糖尿病足23例

背景:以自体骨髓、外周血间充质干细胞移植治疗糖尿病足,对缺血性病变及周围神经损伤所致临床症状有改善作用。目的:观察脐血单个核细胞移植治疗糖尿病足病缺血及神经损伤的疗效。对象:选取2006/2010住院行脐血单个核细胞移植治疗的糖尿病足病患者23例,脐血单个核细胞稀释后双下肢肌肉内注射,每点1~3mL,间隔约3cm。单个肢体移植1.23×108~1.06×109个,共计38条肢体。结果与结论:移植后踝肱指数升降不一,移植后6个月疼痛评分及冷感评分明显改善,间歇性跛行及皮肤温度、经皮氧分压治疗后3,6个月比较差异均有显著性意义;对神经病变损伤自觉症状评分、临床检查评分、振动觉阀值移植后6个月与移植前比较差异有显著性意义。腓浅神经、胫神经感觉神经传导速度,腓总神经、胫神经运动神经传导速度,在移植后3个月与移植前比较,差异无显著性意义(P>0.05),移植6个月与移植前相比较有升高,差异有显著性意义(P<0.05)。可见脐血单个核细胞可以改善糖尿病缺血性病变及周围神经病变的临床症状及客观指标。     

不同时间移植人脐血CD34~+细胞可影响心肌梗死大鼠心功能及血管内皮细胞生长因子的分泌

背景:干细胞移植可以改善心脏功能,改善预后。目的:观察不同时间经静脉移植人脐血CD34+细胞对心肌梗死大鼠心功能及细胞因子分泌的影响。方法:结扎冠状动脉左前降支制备Wistar大鼠心肌梗死模型,于梗死后1,5,10,30d经尾静脉注入0.5mL人脐血CD34+细胞(实验组)或磷酸盐缓冲溶液(对照组)。结果与结论:与对照组相比,梗死后5,10d实验组大鼠左室射血分数明显升高(P<0.05),左室收缩末内径明显减小(P<0.05),左室后壁增厚率更高(P<0.05),毛细血管密度明显增加(P<0.05),且以梗死后10d移植大鼠心功能改善效果最明显(P<0.05)。梗死后10d实验组心肌局部血管内皮细胞生长因子最高(P<0.05)。说明大鼠心肌梗死后5,10d经静脉移植脐血CD34+细胞可明显改善心功能,梗死后10d移植血管内皮细胞生长因子分泌更多,血管生成更多,对心功能的改善更明显;同时说明脐血单个核细胞移植可能是通过增加血管内皮细胞生长因子分泌,提高毛细血管密度来改善心功能的。     

碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子联合诱导成年鼠骨髓基质细胞向神经元样细胞的分化

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子联合诱导成年大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的可能性和条件，为神经细胞的再生和脊髓内移植提供实验基础。 方法：实验于2005—07／10在锦州医学院附属第一医院骨科实验室完成。选取清洁级、鼠龄1个月SD大鼠1只，拉颈处死后无菌条件下取出股骨，除去骨周围的肌肉组织，剪开骨两端，显露骨髓腔，以IMDM培养液从一端冲洗骨髓腔，将骨髓冲到平皿中，进行骨髓基质细胞的分离培养，传至第5代的骨髓基质细胞用于实验。诱导前24h先用含1μg／L碱性成纤维细胞生长因子及体积分数为0．2的胎牛血清的DMFM培养液培养，以促进细胞分裂，然后用神经生长因子作诱导剂，观察细胞形态的变化，并采用免疫组织化学法检测诱导后细胞表达神经丝蛋白、神经元烯醇化酶等特异性标志物情况。 结果：①原代和传代培养时大鼠骨髓基质细胞的生长情况；原代培养2～4d细胞处于静止状态。第五六天可见有贴壁细胞开始伸展为椭圆型、短梭型、长梭型等，这些细胞即为骨髓间充质干细胞。至第14天骨髓基质细胞基本铺满瓶底，此时即可传代。传代后2-4d第1代细胞基本处于静止状态，第5天开始缓慢增殖，约在第8天长满瓶底，传代周期为六七天。②碱性成纤维细胞生长因子与神经生长因子联合诱导后骨髓基质细胞的形态变化：经碱性成纤维细胞生长因子预诱导2h后，骨髓基质细胞形态无明显变化，但胞体变大。神经生长因子诱导12h后，部分细胞分化，胞体向胞核收缩呈锥形，类似神经细胞，细胞突起之间呈渐进性变化，但无明显增殖现象。③大鼠骨髓基质细胞分化后的鉴定和。转化率的测定：神经样细胞的胞体与突起，神经元烯醇化酶（γ-γ）和神经丝蛋白染色呈强阳性，而未分化的骨髓基质细胞为阴性。定量计数分析表达神经元烯醇化酶（γ—γ）为（69．6&;#177;3．8）％，表达神经丝蛋白为（71．3&;#177;3．3）％。 结论：碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子联合应用能将骨髓基质细胞诱导成神经元样细胞，预诱导24h后撤离二者可增加细胞转化率，促进诱导后的细胞成熟，为细胞移植治疗脊髓损伤提供一种高效种子细胞生产方法。     

人脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞移植用于大鼠脊髓损伤的实验研究

目的:探讨人脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞(MSCs)移植对脊髓损伤功能恢复的影响,寻找一种更适合治疗脊髓损伤的细胞源。方法:采集新鲜人脐带血和脐带,分离培养单个核细胞和MSCs。将脊髓损伤模型随机分成3组:单个核细胞移植组、MSCs移植组和低糖必需培养基(L-DMEM)培养组。采用免疫组化和免疫荧光检测细胞移植后1—4周细胞在脊髓内的存活情况和迁移情况,使用BBB行为学评分评估大鼠脊髓功能恢复情况。结果:L-DMEM培养液组在术后各时间点观察评分无明显差异,而细胞移植组脊髓功能处于逐渐恢复过程,与L-DMEM培养液比较,差异有显著性意义。单个核细胞移植组对损伤脊髓功能的修复作用较MSCs移植组显著,且差异有显著性意义。结论:与MSCs相比较,人脐血单个核细胞更适合作为治疗脊髓损伤的细胞源。     

CM-Dil及DAPI联合标记示踪人脐血单核细胞细胞膜及细胞核的可行性

背景：氯甲基-1,1十八烷基-3,3,3’,3’-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸盐（chlormethylbenzamido-1,1-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylin-docarbocyamine,CM-DiI）和4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐（4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI）是常用的活细胞示踪剂,分别用来标记细胞膜和细胞核。目的：观察应用细胞膜及细胞核标记物CM-DiI及DAPI联合示踪人脐血单核细胞的可行性及双标后人脐血单核细胞体外培养过程中细胞形态及活性的变化。方法：将新鲜分离的人脐血单核细胞用示踪剂CM-DiI及DAPI进行双标记,体外培养双标后的人脐血单核细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,锥虫蓝染色检测不同时间细胞活性,同时倒置荧光显微镜观察不同时间经CM-DiI和DAPI双标的人脐血单核细胞荧光染色阳性数。结果与结论：人脐血单核细胞在CM-DiI和DAPI联合标记15min后,荧光显微镜下可见标记细胞的细胞膜、细胞核分别在不同波长下分别呈现红色和蓝色的荧光。CM-DiI/DAPI双标后的人脐血单核细胞体外培养1,3,7,14,21d,CM-DiI和DAPI双染的阳性细胞数各时间点比较差异无显著性意义。锥虫蓝染色观察人脐血单核细胞存活率为95.6%-98.8%。双标后的人脐血单核细胞体外培养过程中细胞形态变化与未经示踪标记的脐血单核细胞相比差异不明显,仍保持了良好的生长状态、贴壁能力和细胞增殖能力。由此证实,CM-DiI和DAPI可有效标记人脐血单核细胞,两种示踪剂对活细胞无毒不良反应,荧光衰减较慢,适用于干细胞标记及示踪。     

小鼠脐血移植模型的建立及角质细胞生长因子增强移植后免疫重建的机制研究

目的 探讨角质细胞生长因子(KGF)在小鼠异基因脐血移植(UCBT)后免疫重建中的作用及其机制.方法 取孕19.5 d胎鼠外周血作为脐血移植物.第1批UCBT实验中32只BALB/c小鼠随机分为4组,每组8只,分别输注PBS、1×10~6、2×10~6、3×10~6个脐血单个核细胞(MNC).第2批UCBT实验中24只BALB/c小鼠随机分为3组,每组8只,分别输注1×10~6、2×10~6、3×10~6个脐血MNC,所有小鼠+8 d输注1×10~9个血小板支持.第3批UCBT实验中16只BALB/c小鼠随机分为2组,每组8只,KGF组小鼠TBI前注射KGF,对照组注射PBS,两组都输注2×10~6个脐血MNC,+8 d输注血小板支持.以生存期、脾脏淋巴细胞亚群、胸腺输出功能为观察指标.结果第1批UCBT实验中PBS组小鼠+13.5 d内全部死亡,输注1×10~6、2×10~6、3×10~6个MNC三组小鼠+100 d分别生存2只、3只、3只.第2批UCBT中输注1×10~6、2×10~6、3×10~6个MNC三组小鼠+100 d分别生存7只、8只、8只.第3批UCBT实验中,移植后对照组小鼠脾T细胞、NKT细胞、NK细胞和B细胞数分别为(9.57±0.74)×10~6、(0.64±0.06)×10~6、(1.43±0.10)×10~6、(19.13±1.50)×10~6个.KGF输注组分别为(13.47±0.74)×10~6、(0.89±0.03)×10~6、(1.79±0.04)×10~6、(20.50±0.91)×10~6个.KGF输注组T细胞、NKT细胞、NK细胞较对照组高(P＜0.05);对照组小鼠sjTREC水平为(182.2±10.7)拷贝/105个细胞;KGF输注组为(224.2±9.6)拷贝/105个细胞,KGF输注组明显高于PBS对照组(P=0.019).结论 孕19.5 d胎鼠外周血富含造血干细胞,+8 d输注血小板浓缩物可建立异基因UCBT小鼠模型.KGF具有增强小鼠异基因UCBT后胸腺输出功能及促进T细胞免疫重建作用.     

脐血间充质干细胞支持下脐血单个核细胞扩增的研究

目的 探讨脐血源间充质干细胞联合外源性细胞因子对脐血单个核细胞体外扩增的支持作用.方法 从脐血中分离、培养出间充质干细胞并检测其细胞表面抗原;以此间充质干细胞作为细胞滋养层.将脐血单个核细胞接种于无血清培养体系中培养18天,在第0、7、10、14及18天检测有核细胞总数、CD34+、CDl33+细胞数、集落形成单位数和(G2+M+S)期细胞含量变化.结果 ①从脐血中分离、培养出的间充质干细胞能稳定表达CD29、CD105和CD44,但不表达CD34和CD133;②外源性细胞因子及脐血源间充质下细胞均支持脐血间充质干细胞扩增,但以细胞因子联合脐血源间充质干细胞组效果最好,在第10天上述榆测指标达到峰值,分别为第0天的(6.91±1.91)、(7.75±1.24)、(6.49±1.33)、(15.62±1.29)和(28.26±6.58)倍,且维持造血至少18天.结论 ①从脐血巾能成功分离、培养出间充质下细胞,并完成细胞表型的初步鉴定;②外源性细胞因子联合脐血源间允质干细胞可有效扩增脐血单个核细胞.     

脐带血单个核细胞体外培养分化为肝细胞的实验观察

目的探讨脐带血单个核细胞在体外定向分化为肝细胞的条件及能力,为建立脐血干细胞移植治疗慢性肝衰竭提供实验依据。方法采集脐带血分离单个核细胞后,在实验组加入成纤维细胞生长因子(FGF)及促肝细胞生长因子(HGF)、或FGF加胎肝上清液培养,对照组只加FGF培养,观察细胞生长分化状况,免疫组化检测两组人甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)。结果实验组可见类圆形及多边形细胞,呈类肝细胞形态,对照组大多为梭形细胞,未见多边形细胞;实验组细胞AFP、Alb免疫组化染色为阳性,对照组未见AFP,Alb阳性细胞。HGF的诱导分化效果优于胎肝上清液。结论脐带血单个细胞在HGF或胎肝上清液的诱导下可以定向分化为能分泌Alb及AFP的类肝细胞。     

脐血移植后患者的T淋巴细胞免疫重建特点

目前,造血干细胞移植(HSCT)为根治各种恶性血液病和免疫缺陷性疾病的唯一手段,脐血移植(UCBT)作为HSCT的一种,已凭借其诸多优势越来越广泛地被应用于多种疾病的治疗.但是由于脐血所含造血干细胞数量有限,UCBT后患者的T淋巴细胞免疫重建相对延迟,导致感染的发生风险显著增高.为了更好地了解UCBT后机体的免疫功能状态,笔者拟就UCBT后患者T淋巴细胞免疫重建的特点、影响因素,以及如何加速T淋巴细胞免疫重建进行综述.     

NOD/SCID小鼠脐血单个核细胞骨髓腔内移植的实验研究

目的观察骨髓腔内移植(iBM)人脐血单个核细胞(MNC)对小鼠造血重建和免疫功能恢复的作用。方法NOD/SCID小鼠经137Cs全身照射后,在4h内无菌条件下局部麻醉后从尾静脉或骨髓腔内输注分离脐血MNC。受体小鼠随机分为5组:①对照组:骨髓腔内输注培养液;②阳性对照组(iTV):尾静脉输注脐血MNC3×107/只;③实验Ⅰ组(iBM1):骨髓腔内输注脐血MNC3×106/只;④实验Ⅱ组(iBM2):骨髓腔内输注脐血MNC1×107/只;⑤实验Ⅲ组(iBM3):骨髓腔内输注脐血MNC3×107/只。对照组4只小鼠,实验Ⅱ组7只小鼠,其余每组5只。24h后观察iBM22只小鼠未移植侧胫骨骨髓腔脐血细胞的迁移分布,动态观察移植后小鼠的存活和造血重建情况,7～8周后处死各组小鼠,检测骨髓细胞表面CD分子表达、碳青花(DilCM)染料示踪研究和脐血βactin的DNA标记。结果①照射后骨髓腔内输注脐血MNC,24h后在未输注脐血MNC的一侧胫骨骨髓细胞膜有DilCM标记;②7～8周后小鼠存活14只,其中对照组存活1只,iTV组、iBM1组各存活2只,iBM2组存活4只,iBM3组存活5只;③外周血常规检查结果显示iBM组白细胞的恢复速度比iTV组和对照组快而且稳定;④移植后存活小鼠骨髓细胞表面CD45标记、DilCM染料示踪研究和βactin均显示人源的标记。结论经iBM途径移植脐血MNC至NOD/SCID小鼠骨髓可以重     

脐血干细胞移植及电针治疗脊髓损伤大鼠神经生长因子及神经营养因子3的表达

背景：研究表明,脐血干细胞移植对脊髓损伤的恢复起促进作用,而电针也能够通过抑制星形胶质细胞增生,来减少损伤部瘢痕形成,故推测两者结合可能在急性脊髓损伤治疗中发挥重要作用。目的：观察人脐血干细胞局部移植联合督脉电针治疗后大鼠脊髓损伤组织神经生长因子、神经营养因子3的表达。方法：选取雌性SD大鼠72只,随机分为对照组、损伤组、移植组、联合组。对照组单纯性背部切口后缝合,损伤组脊髓横断处(T 10结果与结论：脊髓损伤后,移植组与损伤组相比,联合组与移植组相比,神经生长因子、神经营养因子3在7,14,28 d表达量均增加(P<0.05)。Western Blot、实时荧光定量PCR与免疫组化结果相一致。结果显示人脐血干细胞移植与电针联合治疗脊髓损伤具有协同作用,显著上调损伤脊髓神经生长因子、神经营养因子3的表达水平,有利于脊髓损伤后功能恢复。水平)放置约1 mm×2 mm×2 mm大小、浸润生理盐水的明胶海绵;移植组及联合组在脊髓横断处放置浸润人脐血干细胞悬液的明胶海绵,联合组于造模后1 h开始给予督脉电针治疗。在相应处理7,14,28 d后应用免疫组织化学、Western Blot及实时荧光定量PCR方法检测脊髓组织神经生长因子、神经营养因子3表达量的变化。