c-myc、Rb及细胞G1期调控蛋白在乳腺癌中的表达

目的探讨乳腺癌中c-myc、Rb蛋白及cyclin E、cyclin D1等细胞G1期调控蛋白的表达、相互关系及其意义.方法应用免疫组化检测57例乳腺癌患者组织中4种蛋白的表达情况.结果c-myc、cyclin E及cyclin D1在乳腺癌中表达的阳性率均高于乳腺纤维腺瘤(p＜0.05);Rb在乳腺癌中的阳性率低于乳腺纤维腺瘤(P＜0.05).乳腺浸润性导管癌中cyclin E的表达与c-myc蛋白正相关.乳腺导管内癌中cyclin D1的表达与Rb蛋白正相关.结论在乳腺浸润性导管癌发展的不同阶段,细胞周期异常的机制可能不同.cyclin D1在乳腺导管内癌中的过表达可能部分依赖于Rb蛋白的表达.c-myc引起的细胞周期调控异常在乳腺癌发病中为较晚期事件.细胞周期调控成分的异常与乳腺癌的发病机制关系密切.     

c-myc、c-myb基因在白血病骨髓基质细胞中的表达及相关性研究

本研究检测分析c-myc、c-myb原癌基因在白血病细胞和骨髓基质细胞(BMSC)中的表达及其相关性。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术定量分析原癌基因c-myc、c-myb的表达水平,通过流式细胞术分析白血病细胞和BMSC的膜表面抗原,同时采用染色体显带技术分析细胞核型。结果表明:①c-myc、c-myb基因在白血病细胞及其BMSC中均有一定的表达,尤其是在染色体异常的白血病细胞中高表达,其均值分别为1.15±0.38和1.03±0.48,与对照组比较均具有统计学差异(P<0.05);在染色体异常的BMSC中其均值分别为2.08±0.82(P<0.05)和1.46±0.29(P<0.05);②在白血病细胞和BMSC中,c-myc mRNA、c-myb mRNA的表达水平均与血小板计数具有相关性;③在不同预后组中,c-myc mRNA、c-myb mRNA表达呈线性相关;④在白血病细胞及急性组BMSC中原癌基因c-myc、c-myb的表达存在正相关;⑤白血病细胞中c-myc的表达量分别与BMSC中c-myc、c-myb的表达量有相关性。结论:在白血病中降低c-myc或c-myb原癌基因的表达水平可能成为治疗白血病的一种治疗方案。     

急性髓系白血病细胞中c—myc蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中的表达极其临床意义。方法：采用免疫细胞组织化学染色方法,检测20例急性髓系细胞白血病病人化疗前后及20例非白血病病人的c-myc蛋白的表达水平。结果 白血病组c-myc蛋白表达较非白血病组明显增高,两者呈显著性差异（P＜0．01）,白血病组中,化疗后完全缓解与不缓解病人c-myc基因的表达有显著性差异（P＜0．05）。结论 c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中高表达,而且与化疗疗效密切相关,提示c-myc蛋白的检测对于急性髓系细胞白血病的诊断、疗效评价及预后估计均有一定意义。     

急性髓系白血病细胞中c-myc蛋白的表达及其临床意义

目的探讨c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中的表达极其临床意义.方法采用免疫细胞组织化学染色方法,检测20例急性髓系细胞白血病病人化疗前后及20例非白血病病人的c-myc蛋白的表达水平.结果白血病组c-myc蛋白表达较非白血病组明显增高,两者呈显著性差异(P＜0.01).白血病组中,化疗后完全缓解与不缓解病人c-myc基因的表达有显著性差异(P＜0.05).结论 c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中高表达,而且与化疗疗效密切相关,提示c-myc蛋白的检测对于急性髓系细胞白血病的诊断、疗效评价及预后估计均有一定意义.     

生物可降解性基因释放血管内支架抑制小型猪肾动脉球囊扩张后c-myc基因表达及内膜增生的实验研究

目的　研究释放ASODN基因片段的生物可降解血管内支架在抑制小型猪肾动脉球囊损伤后c-myc基因表达及内膜增生中的作用。方法将ASODN涂层BES与裸BES分别植入到16只实验小型猪球囊扩张后的双侧肾动脉内，分别在术后24h、1周、4周及12周各处死4只动物；用Western　Blot法进行c-myc基因蛋白表达分析；病理分析对两种支架不同时期的内膜厚度、内膜面积、管腔面积及PCNA染色增殖指数进行比较。结果ASODN涂层BES及裸BES置入段血管在损伤后12周内均表现出连续的内膜愈合与生长过程；支架置入后24h，ASODN涂层BES置入段血管表达c-myc蛋白与健康肾动脉相似，均明显低于裸支架置入段血管，差异持续至术后4周；12周时，各组c-myc蛋白表达差异消失，裸BES、ASODN涂层BES置入段血管及健康肾动脉c-myc蛋白均呈微弱表达。除24h外，ASODN涂层BES各期内膜增生程度均较裸BES弱，以支架周围明显，管腔面积均大于裸BES组，PCNA指数均小于裸BES组（P〈0．05）。结论ASODN涂层BES能有效抑制小型猪肾动脉球囊损伤后c-myc基因蛋白表达，损伤后12周内表现出对新生内膜增生较强的抑制作用，使用PI，LA材料制作的BES是基因释放的良好载体。     

Fas死亡结构域调节白血病细胞Meg-01内c-myc的表达

目的 探讨人白血病Meg-01细胞的异常增殖机制以及凋亡因子Fas对细胞异常增殖的调节作用。方法 用基因重组技术将Fas的细胞外区、跨膜区与白血病抑制因子（LIF）受体两亚基（gp190,gp130)细胞内区构成嵌合型受体（Fas/190,Fas/130),同时,将Fas死亡区域（FASDD）替换Fas/130中gp130细胞内区无结构域部分（Fas/130f),分别在Meg-01细胞内表达后,用抗Fas抗体激活这些嵌合型受体,随后用免疫组化和免疫印迹法分析受体细胞内区形成同源性寡聚体（190cyt-190cyt-190cyt,130cyt-130cyt-130cyt及FASDD－FASDD－FASDD）后的细胞状况和细胞内c-myc的表达。结果 转染pED Fas/130后用抗Fas抗体作用6－8h,Meg-01细胞c-myc表达量增加,细胞增殖明显;而pED Fas/190形成寡聚体后,Meg-01细胞c-myc的表达有所下降。另外,Fas/130与Fas/130f比较,后者的c-myc的表达明显下降,细胞形态大小不一。结论 LIF受体中gp130亚基细胞内区促进白血病Meg-01细胞内的c-myc表达及细胞增殖信号的传递;Fas死亡域可抑制gp130的细胞增殖活性。     

Amplification of c-myc gene and overexpression of c-Myc protein in breast cancer and adjacent non-neoplastic tissue.

BACKGROUND: Deregulated c-Myc expression and alterations of c-myc oncogene have been reported to play an important role in breast cancer tumorigenesis. We examined the relationship between c-Myc protein level, amplification of c-myc oncogene and commonly used clinical and pathologic factors. METHODS: The studies were conducted on 94 ductal and lobular cancers. Amplification of c-Myc was assessed by the semiquantitative multiplex PCR assay. The amount of c-Myc protein was estimated by the densitometry analysis of Western blots. RESULTS: Amplification of c-Myc was found in 21% of examined cancers. There was no association of c-myc amplification with established risk factors. Overexpression of c-Myc protein without c-myc amplification was associated with negative status of axillary lymph node. The size of lobular carcinoma displaying overexpression of c-Myc and the normal copy number of c-myc gene was significantly smaller than the size of tumor with elevated c-Myc and amplification of c-myc gene (p < 0.01). Within tumors displaying overexpression of c-Myc protein and c-myc gene amplification the size of ductal carcinoma was smaller than the size of lobular carcinoma (p < 0.007). CONCLUSION: Data presented in this study suggest that alterations of c-myc gene and c-Myc protein level might be related to breast cancer progression. The prognostic utility of elevated level of c-Myc protein associated with normal status of c-myc gene for patients with lobular carcinoma requires further studies.     

全反式视黄酸对神经干细胞诱导分化和c-myc基因表达的调控

目的:观察全反式视黄酸对神经干细胞的诱导分化情况,及其对c-myc基因、蛋白表达的影响。方法:实验于2005-03/06在南方医科大学高温医学研究室完成。①基础培养液:DMEM/F12中含Hepes15mmol/L,NaHCO32g/L,2?7,100U/mL青霉素,100U/mL链霉素。神经干细胞培养液:基础培养液 碱性成纤维细胞生长因子20μg/L。神经干细胞分化诱导培养液:基础培养液 体积分数为0.01的胎牛血清。全反式视黄酸储备液:以二甲基亚砜为溶剂,配成浓度为1.0×10-3mol/L全反式视黄酸储备液。②出生2～3d SD大鼠6只,麻醉后开颅取出全脑,机械分离结合无血清培养基进行鼠纹状体神经干细胞的分离培养,取生长状态良好的第3代细胞用于实验。③将神经干细胞克隆接种于12孔培养板中,全反式视黄酸组加入神经干细胞分化诱导培养液 不同浓度全反式视黄酸(0.01,0.1,1.0,10.0μmol/L)。二甲基亚砜对照组加入神经干细胞分化诱导培养液 0.01%二甲基亚砜。各组细胞培养7d后进行免疫组织化学染色鉴定,计数神经元样细胞分化率。RT-PCR分析c-myc基因表达情况,Western blots检测c-myc蛋白的表达。结果:①神经干细胞的原代和传代培养与鉴定:来源于新生大鼠纹状体组织的原代克隆和传代克隆,呈巢蛋白抗原阳性。第3代细胞加入含不同浓度全反式视黄酸的神经干细胞分化诱导培养液,呈神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白抗原阳性。②全反式视黄酸对神经干细胞分化的影响:随着全反式视黄酸浓度(0.01,0.1,1.0,10.0μmol/L)升高,神经元样细胞分化率逐渐增加(F=358.59,P=0.000)。全反式视黄酸浓度为1.0,10.0μmol/L时神经元样细胞分化率基本相似[(34.27±0.81)%,(35.27±0.32)%,P=0.163]。③全反式视黄酸对c-myc基因及其蛋白表达的影响:随着全反式视黄酸作用时间的增加,与二甲基亚砜对照组相比,全反式视黄酸组的c-myc mRNA表达下调(F=20.891,P=0.000),c-myc蛋白表达亦下调(F=43.138,P=0.000)。结论:生理浓度(1.0μmol/L)的全反式视黄酸是诱导神经干细胞向神经元方向分化的适宜剂量。全反式视黄酸可能通过细胞周期调控因子c-myc从而影响神经干细胞的增殖分化。     

端粒酶、人类表皮生长因子受体2和 c-myc 基因在宫颈病变中的表达及与高危型人乳头瘤病毒感染的相关性

目的：研究端粒酶基因（hTERC）、人类表皮生长因子受体2（HER-2）基因和 c-myc 基因在不同程度宫颈病变的表达情况及与高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染的相关性。方法选取236例就诊或筛查患者,行 TCT、HPV、hTERC、HER-2和 c-myc 基因检测。对任一阳性患者行阴道镜下多点活检,进行病理检测。结果①236例中有108例进行宫颈活检,在正常／慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ及浸润性子宫颈癌中 hTERC 阳性表达率分别为16．0％、39．5％、64．5％、100．0％;HER-2阳性表达率分别为4．0％、20．9％、45．2％、100．0％;c-myc阳性表达率分别为8．0％、30．2％、54．8％、100．0％;HPV 阳性率分别为40．0％、67．4％、80．6％、100．0％。②不同病理结果之间 hTERC、HER-2和 c-myc 阳性率比较差异均有统计学意义（P ＜0．05）,随着病理结果的严重程度,hTERC、HER-2和 c-myc 的阳性率逐渐增加（P ＜0．01）。③随着宫颈病变程度的加深,HPV 感染者中hTERC、HER-2和 c-myc 基因的阳性扩增率也增高（P ＜0．05）。结论hTERC、HER-2、c-myc 基因的阳性表达率与宫颈病变程度、高危型 HPV 感染密切相关,在宫颈癌的发生发展中可能起着重要作用。     

荧光定量聚合酶链反应检测c-myc在乳腺癌诊断中的临床应用

目的建立荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）法检测核内原癌基因c—myc表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用。方法建立FQ—PCR法,并以β2-微球蛋白作为内对照测定30名健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中c-myc的表达水平。结果c—myc表达水平在正常对照组和良性乳腺疾病组间差异无统计学意义（P〉0．05）,乳腺癌组均高于前2组（P〈0．05）,β2-微球蛋自在3组间差异无统计学意义（P〉0．05）。81例乳腺癌患者阳性率为40．7％,良性乳腺疾病组为0。c—myc表达水平与患者年龄和肿瘤大小和类型无关（P〉0．05）,与乳腺癌临床分期、组织学分级以及腋淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论FQ—PCR技术是高灵敏度、高特异性的快速定量检测c—myc方法,可有效监测乳腺癌的诊断、疗效、转移和预后。     

c-myc在大黄素抑制HL-60细胞增殖及诱导凋亡中的作用

目的研究中药大黄素(emodin)对人髓系白血病细胞株HL-60细胞的影响及探讨c—myc基因在其中的作用。方法应用MTT法绘制细胞生长曲线；细胞集落培养观察大黄素对HL-60细胞增殖的影响；DNA倍体分析、线粒体细胞凋亡检测法、末端缺失原位标记(TUNEL)法及DNA凝胶电泳分析细胞凋亡；RT—PCR及Western blot检测大黄素作用前后c—myc基因mRNA及蛋白表达水平的变化。结果大黄素能明显抑制HL-60细胞增殖，半数抑制浓度(IC50)约为20μmol／L；DNA片段化、亚G1峰(凋亡峰)的检出及线粒体细胞凋亡检测等证实大黄素能有效诱导HL-60细胞凋亡，细胞凋亡率与药物作用浓度呈正相关。大黄素与HL-60细胞作用后c—myc基因mRNA及蛋白的表达水平与作用时间呈负相关。结论大黄素能有效抑制HL-60细胞增殖，诱导其凋亡；c—myc基因可能参与了大黄素抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的过程。     

P53和c-myc及Bcl-2基因蛋白的表达对子宫平滑肌肿瘤发生与预后的影响

目的:研究P53,c-myc,Bcl-2基因蛋白在子宫平滑肌肿瘤中的表达状况,以探讨上述基因与子宫平滑肌肿瘤发生与预后的关系。方法:根据术后肿瘤病理组织学类型,65例子宫平滑肌肿瘤患者分为平滑肌瘤组、平滑肌交界性肿瘤组、平滑肌肉瘤组。选取20例功能失调性子宫出血患者切除的子宫组织作为正常子宫平滑肌组。应用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织及正常平滑肌组织中P53,c-myc,Bcl-2基因蛋白的表达状况。结果:P53基因蛋白的表达阳性率正常子宫平滑肌组无,子宫平滑肌瘤组为10%,子宫平滑肌交界性肿瘤组为39.3%,子宫平滑肌肉瘤组为85.7%,正常子宫平滑肌组与子宫平滑肌瘤组比较差异无显著性意义(P>0.05),其余各组比较差异均有显著性意义(χ=4.83～22.04,2P<0.01～0.05)。c-myc基因蛋白的表达阳性率正常子宫平滑肌组无,子宫平滑肌瘤组为6.7%,子宫平滑肌交界性肿瘤组为35.7%,子宫平滑肌肉瘤组为71.4%,正常子宫平滑肌组与子宫平滑肌瘤组比较差异无显著性意义(P>0.05),其余各组比较差异均有显著性意义(χ2=3.89～17.53,P<0.01～0.05)。Bcl-2基因蛋白表达阳性率子宫平滑肌瘤组为63.3%,子宫平滑肌交界性肿瘤组为21.4%,子宫平滑肌肉瘤组为14.3%,正常子宫平滑肌组为35%,正常子宫平滑肌组与子宫平滑肌瘤组比较差异有显著性     

Induction of platelet-derived growth factor A-chain and c-myc gene expressions by angiotensin II in cultured rat vascular smooth muscle cells.

Recently, angiotensin II (Ang II) has been shown to cause hypertrophy of cultured quiescent rat aortic smooth muscle (RASM) cells. This observation along with the demonstration of angiotensinogen mRNA in the vessel wall has led us to postulate a role for vascular angiotensin in hypertensive blood vessel hypertrophy. To investigate further the possible molecular mechanisms, we examined the effect of Ang II on the expression of two genes known to be involved with cellular growth response. Near-confluent RASM cells were made quiescent by 48-h exposure to a defined serum-free medium. Ang II (10(-6) to 10(-11) M) resulted in an induction of the protooncogene c-myc mRNA within 30 min which persisted for 6 h. Interestingly, 6 h after the addition of Ang II, platelet-derived growth factor (PDGF) A-chain mRNA expression was elevated, peaked in 9 h, and persisted for 11 h. This was accompanied with a 15-20-fold increase in PDGF concentration in the culture medium. These effects were dose-dependent and were blocked by saralasin. Whereas the inhibition of protein synthesis by cycloheximide resulted in a stabilization of c-myc mRNA, cycloheximide abolished the elevation of the PDGF A-chain mRNA. Taken together, our data show that exposure of RASM cells to Ang II results in the sequential activation of c-myc and PDGF A-chain mRNA expressions. This sequential activation of protooncogene and growth factor gene may be an important mechanism in angiotensin-induced smooth muscle growth and hypertrophy.     

c-myc基因与血液细胞生成及白血病研究现状

血液生成是机体一种极其重要的生理过程,期间受细胞间和细胞内的各种信号机制精确调控,当这种调节一旦失控,就会造成血液肿瘤的产生.c-myc是血液生成调控中一个关键的转录因子,它不仅在造血细胞生成的各个阶段起调节作用,其表达异常与血液系统疾病的发生,特别是各类型的白血病均有十分密切的关系.本文就原癌基因c-myc的生物学特性、它在正常血细胞分化及在各类型白血病发生发展中的调控机制的研究现状作一综述.     

肺腺癌细胞株在不同浓度化疗药物连续刺激下erbB-2与c-myc基因的动态变化

目的:观察肺腺癌细胞株在连续化疗过程中erbB-2与c-myc基因的动态变化。方法:人肺癌细胞株经阿霉素、足叶乙甙、顺铂单药及联合用药连续刺激,每种药物分高、低个剂量梯度组,同时设对照组。记录细胞每次刺2激间隔的时间。应用流式细胞术分别检测erbB-2,c-myc的阳性细胞数及平均荧光强度,以此推算出不同药物在不同浓度下连续两三次作用细胞株后以上各蛋白表达的细胞数、平均表达量、总表达量。结果:随着培养时间的延长各项检测指标其阳性细胞的百分数、平均荧光强度及总荧光强度均呈下降趋势。erbB-2在高剂量各组基本上均随刺激次数的增加呈下降趋势,总表达量由94.8～1708.3下降到5.3～81.3;而低剂量的顺铂单药及联合用药组则上升。c-myc则无一定规律。结论:第次化疗后,erbB-2表达增高,随化疗次数增加表达大幅度下1降;化疗剂量大小与c-myc的表达无关。     

针对c-myc基因的小干扰RNA对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞的c-myc、h-tert表达的影响

本研究探讨针对c-myc的小干扰RNA对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞c-myc,h-tert基因和蛋白表达的影响,为白血病的基因治疗提供新方法和靶点。针对c-myc mRNA的第1545-1565靶位点用化学合成法合成siRNA,经转染剂转染入Jurkat细胞。应用RT-PCR及Western blot分别检测c-myc siRNA作用前后c-myc、h-tert基因的mRNA及蛋白表达的变化。结果表明:c-myc siRNA能明显抑制Jurkat细胞的增殖,作用48小时的半数抑制浓度(IC50)约为75nmol/L。c-myc siRNA可引起Jurkat细胞的c-myc、h-tert mRNA和C-MYC、hTERT蛋白表达水平降低。结论:c-myc siRNA明显降低Jurkat细胞c-myc、h-tert基因的mRNA及蛋白表达水平。c-myc siRNA可能是通过抑制c-myc mRNA表达而降低胞内C-MYC蛋白水平。