蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白治疗胶原诱导性关节炎大鼠的相关作用机制研究

目的 探讨蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)治疗胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的相关作用机制.方法 60只10周龄Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组和空白组、模型组、塞来昔布(对照)组,每组10只.除空白组外,其余5组采用牛CⅡ-弗氏完全佐剂乳剂注射法构建CIA大鼠模型,2周后分别给予相应药物治疗,治...     

川芎嗪抑制Ⅱ型胶原诱发关节炎大鼠滑膜损伤作用机制的研究

目的观察川芎嗪对大鼠胶原性关节炎(CIA)炎症发展和滑膜分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法皮内注射Ⅱ型胶原诱导大鼠CIA,给予不同剂量川芎嗪灌胃,以环孢霉素A(CSA)为阳性对照.检测关节炎指数积分和炎症足垫厚度,X摄片检测关节结构,透射电镜观察滑膜毛细血管内皮细胞超微结构,免疫组化观察滑膜VEGF的表达和滑膜微血管密度(MVD).结果与模型组比较,CSA和100 mg/(kg·d)川芎嗪可降低关节炎指数积分和炎症足垫厚度,减轻炎症关节结构的破坏,改善滑膜毛细血管内皮细胞超微结构,抑制滑膜表达VEGF和减少滑膜MVD.结论川芎嗪可抑制CIA大鼠关节炎症发展和关节结构的破坏,其机制与川芎嗪可抑制滑膜表达VEGF,从而抑制滑膜组织血管生成密切相关.     

胶原诱导性和佐剂性大鼠关节炎模型的比较

目的:比较胶原诱导性和佐剂性关节炎制备大鼠关节炎模型的效果。方法:雄性SD大鼠30只,随机分成胶原诱导性关节炎组(CIA组)10只,佐剂性关节炎组(AA组)10只,对照组10只。CIA组以等体积牛Ⅱ型胶原(CⅡ)醋酸溶液与弗氏完全佐剂的混合液注射至大鼠的膝关节腔内;AA组以弗氏完全佐剂注射至大鼠的膝关节腔内;对照组以生理盐水注射至大鼠的膝关节腔内。注射后定期用游标卡尺记录各组大鼠的踝关节肿胀程度。1个月后处死大鼠,检测骨密度,拍摄钼靶片。结果:与AA组、对照组比较,CIA组大鼠膝关节肿胀度增加,骨密度下降,钼靶X线骨质吸收更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:CIA模型较AA模型理想,对研究类风湿性关节炎CIA模型更为适合。     

2种品系大鼠Ⅱ型胶原诱导关节炎模型的比较

【目的】构建SD大鼠和Wistar大鼠Ⅱ型胶原诱导关节炎模型(CIA),比较和评价2种品系大鼠的建模效果。【方法】将SD大鼠和Wistar大鼠(各12只)分别于第1、8天给予尾根部皮下注射Ⅱ型胶原蛋白+弗氏完全佐剂(CFA)乳剂、Ⅱ型胶原蛋白+弗式不完全佐剂(IFA)乳剂建立CIA模型。造模结束后,比较SD大鼠与Wistar大鼠的一般形态、关节炎指数、关节病理变化。【结果】(1)SD大鼠和Wistar大鼠造模后14 d均可见关节炎症,造模后21、28 d关节炎症加重且存在相应病理改变。(2)造模后14、21、28 d,SD大鼠关节炎指数评分显著高于Wistar大鼠(P 0.01),病理改变也是前者比后者严重。【结论】采用尾根部皮下注射适量Ⅱ型胶原蛋白法均能成功建立SD大鼠和Wistar大鼠CIA模型,且SD大鼠的关节炎症重于Wistar大鼠。     

两种大鼠心肌梗死模型的比较研究

目的通过对大鼠冠状动脉前降支结扎法和超声波凝固法制作心肌梗死模型进行对比研究,探讨两种心梗模型的优缺点。方法 45只SD大鼠,随机分成假手术组(n=15)、冠状动脉结扎组(n=15)、超声刀组(n=15)。假手术组:冠脉左前降支只套线,不结扎;冠状动脉结扎组:用620缝合线结扎大鼠左冠状动脉前降支;超声刀组:用超声刀凝固冠状动脉左前降支。术后4周分别测定大鼠血清肌酸磷酸激酶(CK)及其同功酶(CK-MB),乳酸脱氢酶(LDH),天门冬氨酸氨基转换酶(AST)水平,并行心肌HE染色进行病理组织学分析,探讨两种模型的优劣。结果与冠脉结扎组比较,超声刀组血清CK、CK-MB、LDH、AST活性均无明显差异(P>0.05);HE染色显示:两组心肌组织均出现凝固性梗死,炎细胞浸润,继而有肉芽组织长入,最后形成瘢痕。冠状动脉结扎组大鼠术后死亡率50%,超声刀组大鼠术后死亡率20%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二者均可有效复制心肌梗死模型。超声刀凝固法操作简单,死亡率低,能建立稳定的大鼠心肌梗死模型,可用于心肌梗死的相关研究。     

两种草酸钙结石大鼠模型的比较研究

目的 比较乙二醇法与草酸铵法大鼠草酸钙结石模型的肾脏病理改变及功能损害情况,探讨两种草酸钙结石模型的选择与应用。方法 36只SPF级雄性健康Wistar大鼠随机分为空白对照组、乙二醇组和草酸铵组(n=12)。乙二醇组大鼠给予1%乙二醇自由饮水和每日2%氯化铵2 m L灌胃,草酸铵组大鼠给予5%草酸铵饲料。造模后,检测各组大鼠血尿素氮(UN)、血清肌酐(Cr)及血清钙(Ca2+)、磷(P)和镁(Mg2+)含量,24 h尿草酸、Ca2+、P和Mg2+含量;显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化。结果 乙二醇组和草酸铵组大鼠的尿草酸、Ca2+及P含量明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。两种方法复制大鼠草酸钙结石模型的成石效果均较显著、稳定,但大鼠肾脏病理改变及功能损害程度的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 与乙二醇法造模比较,草酸铵法造模致大鼠肾脏病理改变及肾损害较严重,更适合应用于结石病致肾功能受损的研究。     

Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型的制备及评价

目的提取纯化Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)并制备胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型。方法采用胃蛋白酶消化法从鸡胸骨剑突上提取CⅡ,通过DEAE-52纤维树脂处理、NaC l的反复盐析纯化并采用SDS-PAGE鉴定和吸收光谱分析。所提CⅡ加以完全弗氏佐剂采用皮内注射的方法建立大鼠C IA模型。容积法检测大鼠足爪肿胀度并进行评分;HE染色法对关节组织作病理检查;ELISA法检测体内抗CⅡ抗体的含量;放免法检测血清细胞因子IL-1β、TNFα-含量。结果自提的CⅡ与标准品分子量一致,最大吸收峰为226 nm。CIA大鼠足爪的炎症反应强烈,关节肿胀明显;病理检查关节组织可见其组织纤维化,伴有大量炎性细胞浸润;血清中抗CⅡ抗体水平和IL-1β、TNFα-显著升高。结论该方法提纯CⅡ简单、高效,用以制备大鼠CIA模型成功。     

两种炎症性关节炎小鼠模型的比较

目的 通过比较胶原诱导(CIA)和人肿瘤坏死因子α转基因(hTNFα-Tg)小鼠关节炎模型的临床特征,为炎症性关节炎疾病的致病机理和药物筛选研究提供合适的模式动物.方法 分别采用鸡Ⅱ型胶原注射DBA/1小鼠建立经典的类风湿性关节炎(RA)模型,利用人肿瘤坏死因子α注射FVB小鼠建立关节炎转基因小鼠模型,通过关节表观特征观察、关节炎指数分析和病理观察评分对炎症性关节炎模型进行评价.结果 在炎症细胞浸润方面,CIA模型主要有中性粒细胞浸润,hTNFα-Tg模型主要是淋巴细胞浸润,且差异有统计学意义(P<0.05);在细胞增殖方面,两种模型都显示滑膜细胞的增生,与CIA模型相比,hTNFα-Tg模型滑膜增生最为严重,差异有统计学意义(P<0.05);在骨侵蚀方面,两种模型都显示增生滑膜对骨的侵蚀,两种模型比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 两种关节炎模型均在一定程度上模拟人关节炎的临床症状,但也存在着差异.CIA模型造模时间长,能较好模拟RA临床特征;hTNFα-Tg模型属于自发型,表现为滑膜不断增生,符合RA晚期临床特征.     

橙皮苷对大鼠胶原性关节炎的治疗作用及部分机制

目的 研究橙皮苷(HDN)对胶原性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及部分机制.方法 用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)联合氟氏完全佐剂(FCA)诱导CIA大鼠模型;采用足爪肿胀及病理组织学变化等指标观察HDN(80、160、320 mg/kg)对CIA大鼠的影响;ELISA法测定外周血清白介素17(IL-17)水平;体外用药(HDN ...     

口服Ⅱ型胶原及抑肽酶对佐剂型关节炎大鼠治疗作用研究

目的研究口服Ⅱ型胶原（CⅡ）及抑肽酶对大鼠佐剂型关节炎的治疗作用。方法将50只大鼠随机分为5组,采用完全佐剂制备大鼠佐剂型关节炎模型。按不同方案口服给与CⅡ及抑肽酶后考察对踝关节肿胀的影响。采用免疫荧光技术,用流式细胞仪检测大鼠外周血T细胞亚群的变化,并且用大鼠TNFa检测试剂盒检测大鼠外周血TNFa水平的变化。结果建立了大鼠佐剂型关节炎实验动物模型,Ⅱ型胶原组及Ⅱ型胶原和抑肽酶组与生理盐水组比较均可显著减轻踝关节肿胀的程度,且两组大鼠外周血CD3 T细胞、CD4 T细胞、CD8 T细胞及外周血TNFa水平与生理盐水组比较也均有显著性差异;Ⅱ型胶原组与Ⅱ型胶原和抑肽酶组组间作用比较,后者作用好于前者,部分结果有显著性差异;抑肽酶组与生理盐水组比较,治疗作用差异不显著。结论Ⅱ型胶原中加入抑肽酶后能更有效地治疗大鼠佐剂型关节炎。     

胶原诱导Wistar和Lewis大鼠类风湿关节炎模型病理特点的比较

目的探讨牛Ⅱ型胶原(CII)诱导Wistar和Lewis大鼠类风湿关节炎(RA)模型的病症表现与病理特点的差异性。方法采用尾根部皮内注射与CFA混合液进行首次免疫,14 d时注射牛2型胶原(CII)与弗氏完全佐剂(IFA)混合液加强免疫,建立Wistar和Lewis大鼠RA模型,观察Wistar-RA组和Lewis-RA组发病情况,测定足肿胀度和血清抗CII抗体效价水平,在第12周进行足趾形态和组织的病理学检查,测定踝关节滑膜VEGF、IL-6、IL-10和IL-17A的表达。结果胶原诱导后,Wistar与Lewis大鼠分别在第10天和14天出现后足肿胀,第21天和24天达到高峰,血清抗CII抗体效价第3周后显著升高(P0.01),关节炎指数(AI)明显升高(P0.01);WistarRA组的成模率80%,第5周足肿胀消退并进入平缓期,Lewis-RA组的成模率100%,第7周足肿胀消退并进入平缓期;在12周时两模型组均发现关节严重软骨侵蚀、滑膜增生以及炎症细胞浸润,关节滑膜血管新生和血管翳形成,后肢股骨和胫骨骨密度明显降低(P0.01),关节滑膜中VEGF、IL-6、IL-17A表达显著增加(P0.05,P0.01),IL-10表达明显下降(P0.01)。与Wistar-RA组比较,Lewis-RA组足容积和足掌厚度增长持续时间较长,AI高于Wistar-RA组,滑膜血管新生和血管翳形成更明显,踝关节滑膜VEGF表达显著高于Wistar-RA组(P0.05),而IL-17A表达显著低于Wistar-RA组(P0.05)。结论 Wistar-RA模型和Lewis-RA模型均出现关节肿胀、变形、活动减少等症状,关节炎指数升高,关节滑膜中VEGF、IL-6、IL-17A的表达增加,IL-10表达下降,与临床相符。但Wistar-RA模型肿胀持续时间短,而Lewis-RA模型肿胀持续时间长,关节损伤也更为严重,血管新生和血管翳形成更明显;Wistar-RA模型IL-17A表达高,而Lewis-RA模型则VEGF高表达,这可能与其病理特点有关。     

两种溃疡性结肠炎大鼠模型的比较

目的:比较2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro-benzene-sulfonic acid.TNBS)与免疫复合法介导的溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)动物模型的效果.方法:SD大鼠随机分为免疫复合法(Ⅰ组)、TNBS/乙醇(Ⅱ组)、乙醇对照(Ⅲ组)和生理盐水对照(Ⅳ组).Ⅰ组先间隔2周给予兔肠黏膜制备的抗原乳化液(含抗原8 mg)免疫2次.4组均于禁食24h后用0.65ml不同液体灌肠:Ⅰ、Ⅱ组均为100mg TNBS/kg 50％~醇;Ⅲ组为50％乙醇;Ⅳ组为生理盐水.造模后第1、21d,第8周、12周处死大鼠,观察大体病灶及光镜下组织形态学改变.结果:Ⅰ、Ⅱ组均出现糜烂、溃疡等典型UC结肠病变,Ⅰ组还伴有末段回肠病变;Ⅰ组的病变可维持8周,Ⅱ组病变3周后趋向愈合.Ⅲ组病变仅黏膜充血水肿和少量糜烂或浅表溃疡,第21d痊愈.Ⅳ组未见组织损伤.结论:免疫复合法重复性好,病变更类似人UC,持续时间长,是较理想的造模方法.     

两种IgA肾病大鼠模型的比较

目的 探讨快速建立IgA肾病大鼠模型的方法.方法 雌性SD大鼠被随机分为3组.A组采用口服牛血清白蛋白(BSA) 葡萄球菌肠毒素B(SEB)方法,B组采用口服BSA SEB 皮下注射CCl4方法,C组为正常对照组.分别于10、14周处死后取动脉血、肾脏,检测血生化指标,检查组织病理及lgA免疫荧光.于第10、12、14周收集24h尿检测尿蛋白.结果 与空白对照组相比,A组和B组血肌酐、尿素氮和尿蛋白均显著增高(P<0.05),有中度肾小球系膜扩张伴系膜细胞增生,A组和B组之间无明显差异(P>0.05).但B组出现血尿、蛋白尿早于A组,且IgA免疫荧光强于B组.结论 口服BSA SEB法与口服BSA SEB 皮下注射CCl4方法均能诱发SD大鼠IgA肾病模型,后者更早出现血尿、蛋白尿,肾脏IgA免疫荧光更强,是更为省时的制模方法.     

两种大鼠股骨骨折模型愈合的比较

目的 通过组织学及影像学观察,比较开放截骨模型与闭合骨折模型的骨折愈合过程,为长骨骨折动物模型的选择提供参考.方法 将48只雄性SD大鼠随机分为开放组与闭合组.开放组行开放截骨术造成股骨中段横行骨折,行逆行克氏针固定;闭合组行逆行克氏针固定后,使用造模支架致股骨中段闭合骨折.并于术后30min、1、2、3、4、8周对两组标本分别行X线片和HE染色进行观察及比较.结果 开放截骨模型造模过程软组织损伤较重,至观察结束,开放组共有8只标本发生骨折不愈合和畸形愈合,闭合组未见不愈合和畸形愈合标本,骨折愈合各期明显滞后.结论 与闭合骨折模型相比,开放截骨模型影响骨折愈合的夹杂因素较多,近中期骨折愈合明显滞后,不适合用于近中期骨折愈合的研究.     

两种多囊卵巢综合征大鼠模型比较

目的:比较两种多囊卵巢造模方法(雄激素造模方法和芳香酶抑制剂造模法)的实验差异。方法:通过监测2组造模大鼠动情周期、体质量、血清激素水平、卵巢大体解剖及光镜形态,比较两种造模方法各项指标的变化差异。结果:⑴DHEA组阴道脱落细胞为角质细胞;来曲唑组为小而圆的有核细胞。⑵体质量:DHEA组体质量增加幅度更显著。⑶血清激素水平:DHEA组血清T、P浓度增加更明显;DHEA组血清E2浓度升高而来曲唑组降低。⑷卵巢组织学:来曲唑组卵巢包膜增厚更明显,卵巢体积大;光镜下来曲唑组囊状扩张的卵泡沿包膜下排列,大小基本一致;DHEA组囊状扩张的卵泡占据卵巢髓质,体腔扩张明显。结论:脱氢表雄酮造模法更适合用来研究多囊卵巢综合征在体质量和血清激素水平方面的改变;来曲唑造模法则在卵巢组织学改变方面更突出。     

两种内脏痛觉超敏大鼠模型的比较研究

目的 :通过比较评价物理、化学两种机制诱导的内脏痛觉超敏大鼠模型的异同 ,为肠易激综合征等疾病的药效学评价提供有效、可靠的动物模型。方法 :化学造模采用TNBS模型 ,物理模型采用新生鼠发育期肠激惹方式诱导模型。结果 :两种方法制作的动物模型均能复制成功 ,但模型的程度及伴随病理性改变等具有差异。结论 :在进行疾病机理探讨或药效评价应用研究时 ,应根据不同情况选择使用这两种动物模型。     

两种大鼠脾胃虚寒模型制备方法的比较研究

目的 对两种脾胃虚寒模型制备方法进行对比分析，为相关的研究提供参考。方法 参照文献介绍的方法，分别用冰氢氧化钠(NaOH)与冰食醋给大鼠灌胃，记录动物体重、进食量与饮水量，末次给药后检测动物胃排空与胃肠推进，取血、胃黏膜测胃肠激素与氧自由基含量。结果 食醋法造模动物体重增长缓慢、进食量、饮水量减少趋势，胃排空与小肠推进率明显降低，胃组织氧自由基损伤程度比正常动物明显增高，血与胃中胃动素含量下降，胃泌素下降不明显；氢氧化钠法造模后，动物体重、进食量和饮水量较正常对照组明显下降，但停止造模后迅速恢复；血中SOD活性及血与胃中胃动素含量下降，对其他指标的影响不明显。结论 食醋法造模所制备的脾胃虚寒模型较稳定，并与中医证候更接近。     

双氯芬酸钠对大鼠胶原型关节炎的影响

目的 探讨双氯芬酸钠对大鼠胶原诱导关节炎的影响.方法 采用Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,造模成功后随机分为3组,治疗21d.观察治疗前后大鼠的关节肿胀指数、外周血IL-β及TNF-a、PGE2的变化及关节滑膜HE染色.结果 关节肿胀指数比较:治疗前3组差异无统计学意义 (P>0.05),治疗后,双氯芬酸钠组、甲氨蝶呤组分别与生理盐水组比较差异有的统计学意义( P<0.05).双氯芬酸钠组、甲氨蝶呤组和生理盐水组比较,血清中TNF-a 、PGE2差异有统计学意义(P<0.05),双氯芬酸钠组和甲氨蝶呤组差异无统计学意义(P>0.05).3组血清IL-β浓度差异无统计学意义( P>0.05).结论 双氯芬酸钠可下调大鼠胶原型关节炎血清TNF-a、PGE2,对关节病理有改善.