Bromelain对HL—60细胞的诱导分化作用

为获得对ＨＬ－６０细胞具有高效低毒作用的天然诱导分化剂而进行的研究。方法；以菠萝酶Ｂｒｏｍｅｌａｉｎ为药物，对人前髓细胞性白血病细胞株ＨＬ－６０进行作用，通过不同浓度及不同作用时间的药物作用，统计ＨＬ－６０细胞的增殖率，生化变化有形态不的变化。     

全反式维甲酸诱导HL－60细胞分化的时相动力学特点

全反式维甲酸（ＲＡ）是迄今研究的最强的分化诱导剂之一，它能诱导ＨＬ－６０细胞分化为成熟的粒细胞。作者运用动力学方法观察了ＲＡ诱导ＨＬ－６０细胞分化的时相特点，即将ＨＬ－６０细胞与１．０μｇ／Ｌ肌ＲＡ分别作用１２，２４，４８，７２，９６小时后洗去药物，移至新鲜培养基重培养４８，９６和１４４小时，再测定细胞形态、ＮＢＴ及细胞周期的变化，发现一旦ＨＬ－６０细胞与１．０μｍｏｌ／ＬＲＡ连续作用达４８小时，ＨＬ－６０细胞就能终末分化，表现为６０％～９０％细胞呈ＮＢＴ反应阳性、４０％～８０％细胞显示成熟粒细胞表型、４８％～８５％的细胞被阻断在Ｇ１期。如果相互作用时间少于４８小时，则细胞不能终末分化。这些结果表明ＲＡ诱导ＨＬ－６０细胞分化具有一个４８小时的潜伏期，然后细胞的分化就表现为一种不依赖ＲＡ的不可逆过程。     

小剂量rhTNF－α对HL－60细胞的诱导分化及增殖抑制作用的实验研究

采用细胞生长状态、细胞形态学变化、ＡＣＰ、α－ＮＡＥ酶活力和ＮＢＴ还原能力作为分化检测指标，研究了小剂量ｒｈＴＮＦ－α对ＨＬ－６０早幼粒白血病细胞株的诱导分化作用；同时采用细胞生长动力学，３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验观察了ＴＮＦ诱导ＨＬ－６０细胞分化过程中对其生长增殖的抑制作用。结果发现：在ＴＮＦ５０～２００ｕ／ｍｌ的剂量下，对ＨＬ－６０细胞具有访导分化作用。使其向单核／巨噬细胞途径分化，其分化效率呈ＴＮＦ作用剂量和诱导时间依赖性；在ＨＬ－６０细胞分化同时尚伴有增殖抑制现象。     

肿瘤坏死因子对人早幼粒白血病历细胞系HL－60F增殖和分化的影响

肿瘤坏死因子对人早幼粒白血病历细胞系ＨＬ－６０Ｆ增殖和分化的影响朱宁希，卢家祥，顾桂玲浙江中医学院附属医院（杭州·３１０００６）人早幼粒白血病细胞系ＨＬ一６０是目前白血病体外研究常用的实验模型，多种分化诱导剂能诱导ＨＬ一６０细胞向成熟细胞分化［１］。...     

两种分化诱导剂对HL－60细胞诱导分化过程中酪氨酸蛋白磷酸化作用的影响

研究了两种诱导分化剂星状孢子素（ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）及金雀异黄素（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）在诱导人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０细胞）的过程中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）及酪氨酸蛋白磷酸酶（ＰＴＰＰ）的活力变化。结果表明，两种分化诱导剂对胞浆及膜两部分的ＴＰＫ活力均有不同程度的抑制，而对这两部分的ＰＴＰＰ活力则有不同程度的激活作用，说明分化诱导剂可使ＨＬ－６０细胞内的酪氨酸的磷酸化水平提高，揭示了诱导分化与酪氨酸磷酸化及脱磷酸化之间的关系，为寻找新的抗癌药物提供了帮助。     

α—双炔失碳酯诱导分化作用的形态定量研究

应用自动化图像分析仪对低剂量α双炔失碳酯（ＡＮＯ）诱导ＨＬ－６０细胞分化的作用进行了形态测量研究，４μｇ／ｍｌＡＮＯ连续作用ＨＬ－６０细胞５天，共测８个形态指标。结果表明，细胞面积；核面积，核周长，核最大直径，核最小直径，核灰度／核面积随药物作用时间增加而增大，而核浆比却随增加而减小，所有数据表明，在低剂量ＡＮＯ（４μｇ／ｍｌ）作用下，ＨＬ－６０细胞在１～４天内作为细胞生命基本的ＤＮＡ变化显著，但     

α－双炔失碳酯诱导分化作用的形态定量研究

应用自动化图像分析仪对低剂量α－双炔失碳酯（ＡＮＯ）诱导ＨＬ－６０细胞分化的作用进行了形态测量研究。４μｇ／ｍｌＡＮＯ连续作用ＨＬ－６０细胞５天。共测８个形态指标。结果表明，细胞面积：核面积，核周长，核最大直径，核最小直径，核灰度／核面积随药物作用时间增加而增大，而核浆比却随时间增加而减小。所有数据表明，在低剂量ＡＮＯ（４μｇ／ｍｌ）作用下，ＨＬ－６０细胞在１～４天内作为细胞生命基本的ＤＮＡ变化显著，但细胞形态基本稳定。第５天开始呈现显著性地向成熟细胞转化的倾向。     

全反式维甲酸诱导HL－60细胞分化过程瘤细胞行为改变的单细胞定量测量

利用细胞微管吸吮实验系统对全反式维甲酸体外诱导人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）分化过程中细胞变形及对血管内皮细胞粘附行为的改变行单细胞动态定量测量。结果发现：经ＲＡ处理４８小时以上的ＨＬ－６０细胞随着分化的基本成熟，其原来的僵硬和高粘附状态得到明显改善，几与正常多形核细胞（ＰＭＮ）无明显差异。提示ＲＡ对ＨＬ－６０细胞的诱导分化是一种全方位的改善作用     

全反式维甲酸诱导HL—60细胞分化过程瘤细胞行为改变的单细胞定量测量

利用细胞微管吸吮实验系统对全反式维甲酸体外诱导人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）分化过程中细胞变化及对血管内皮细胞粘附行为的改变行单细胞一量测量。结果发现：经ＣＡ处理４８小时以上的ＨＬ－６０细胞随着分化的基本成熟，其原来的僵硬和高粘附状态得到了明显改善，几与正常形核细胞（ＰＭＮ）无明显差异。提示ＲＡ对ＨＬ－６０细胞的诱导分化是一种全方位的改善作用。     

安吖啶诱导白血病细胞程序化死亡及bcl—2表达的研究

目的探讨安吖啶诱导不同分化阶段的人急性粒白血病细胞株ＨＬ－６０（ＡＭＬ２）及ＮＢ４细胞（ＡＭＬ３）程序化死亡的作用。方法应用光镜、ＤＮＡ电泳及流式细胞术检测程序化死亡细胞,应用免疫组化法检测ｂｃｌ－２基因表达。结果１～２０μｇ／ｍｌ的安吖啶作用６～１２小时后,ＮＢ４细胞的形态学改变较ＨＬ－６０细胞更明显;ＮＢ４细胞的ＤＮＡ梯带较ＨＬ－６０细胞明显;流式细胞术检测ＮＢ４程序化死亡细胞数较ＨＬ－６０细胞多;ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２蛋白的平均水平明显高于ＮＢ４细胞。结论ＨＬ－６０细胞对安吖啶诱导程序化死亡作用的敏感性较低,可能与ｂｃｌ－２基因高表达有关。     

两种分化诱导剂对HL—60细胞诱导分化过程中酪氨酸蛋白磷酸化作用…

研究了两种诱导人发化剂星状孢子素及金雀异黄素在诱导人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０细胞）的过程中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）及酪氨酸蛋白磷酸酶（ＰＴＰＰ）的活力变化。结果表明，两种分化诱导剂对胞浆及膜两部分的ＴＰＫ活力均有不同程度的抑制，而对这两部分的ＰＴＰＰ活力则有不同程度的激活作用，说明分化诱导剂可使ＨＬ－６０细胞内的酪氨酸的磷酸化水平提高，揭示了诱导分化与酪氨酸磷酸化及脱磷酸化之间的关系，为寻找新     

丹参酮ⅡA诱导HL-60细胞凋亡

目的：在以往对丹参酮ＩＡ诱导分化和抗癌作用研究的基础上，进一步研究丹参酮ＩＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，以探讨其抗癌作用机理。方法：应用体外细胞培养技术，以１～１０μｇ／ｍｌ丹参酮ＩＡ作用于培养的ＨＬ－６０细胞５天后，进行光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪的观察和分析。结果：丹参酮ⅡＡ作用后，ＨＬ－６０细胞的生长受到明显抑制，其半数抑制浓度ＩＣ５０约为１０μｇ／ｍｌ光镜、电镜观察到细胞呈现凋亡特征，琼脂糖凝胶电泳显示细胞ＤＮＡ呈梯状降解，流式细胞仪分析表明，１０μｇ／ｍｌ丹参酮ⅡＡ作用后，ＨＬ－６０细胞凋亡率达２８．８％，细胞被阻止于Ｇ０／Ｇ１期，Ｓ期细胞明显减少（Ｐ＜０．０１），其ｂｃｌ－２基因的表达显著降低，而ｐ５３基因的表达增强（Ｐ＜０．０１）。结论：丹参酮ⅡＡ可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，这可能为丹参酮ⅡＡ抗癌抑癌的重要机理之一，诱导分化与诱导凋亡之间的关系有待进一步探讨。     

端粒酶活性与白血病细胞系的分化

为了探讨白血病细胞的分化和端粒酶活性改变的关系。方法采用ＰＣＲ－ＬＩＳＡ方法检测白血病细胞株Ｋ－５６２和ＨＬ－６０诱导分化前后的端粒酶活性。结论分化是细胞自身调控的过程,端粒酶活性的高低与细胞所处的分化状态密切相关。     

亚硒酸钠和维甲酸联合对HL－60细胞生长、分化的影响

以人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）为实验对象，观察了亚硒酸钠和维甲酸联合作用对其生长、分化的影响。结果表明：５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸联合可显著抑制细胞生长，且细胞毒性并无增加，强于两者的单独作用。而且可明显诱导细胞向粒系细胞分化，在处理５天后有７２％的细胞进行分化。单用０．１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸只有３９％的细胞分化成熟。ＮＢＴ还原实验表现出类似结果。     

二乙酰二脱水卫矛醇在体内外的抗瘤作用及其机制

目的：观察二乙酰二脱水卫柔醇（ｄｉａｃｅｔｙｌｄｉａｎｈｙｄｒｏｇａｌａｃｔｉｔｏｌ,ＤＡＤＡＧ）在体内外的抗肿瘤作用,探讨其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡的关系。方法：建立小鼠脑内接种艾氏腹水癌模型,观察ＤＡＤＡＧ体内抗瘤作用;ＭＴＴ法观察ＤＡＤＡＧ对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０和人红白血病细胞株Ｋ５６２的生长抑制作用,ＤＮＡ电泳和流式细胞仪分析ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞凋亡的情况。结果：ＤＡＤＡＧ１０ｍｇ／ｋｇ ｉｐ,每天１次,连续给药７天,可显著延长小鼠中位生存时间;对ＨＬ－６０和Ｋ５６２均有生长抑制作用,药物作用７２ｈ的ＩＣ５０分别为３．７ｍｇ／Ｌ和２５．５ｍｇ／Ｌ;作用ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞后电泳显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带,ＤＮＡ直方图出现亚Ｇ１峰。结论：ＤＡＤＡＧ抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。     

细胞因子对HL—60白血病细胞分化作用的研究

目的 研究细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ及ＩＬ－６对白血病细胞的分化作用的影响。方法 以ＨＬ－６０白血病细胞为模型，采用几种细胞因子单一或联合作用于ＨＬ－６０细胞。通过检测细胞分化抗原、ＮＢＴ试验和细胞内酶α－ＮＡＥ指标，观察细胞因子对白血病细胞的单一和联合促分化作用。结果 ＴＮＦ－α可显著增加ＮＢＴ还原率和α－ＮＡＥ阳性细胞数；ＩＬ－６无诱导ＨＬ－６０细胞分化作用；ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α可协同作     

丹参酮ⅡA诱导HL—60细胞凋亡

在以往对丹参酮ⅡＡ诱导分化和抗癌作用研究的基础上，进一步研究丹参酮ⅡＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，以探讨其抗癌作用机理。方法：应用体外细胞培养技术，以１－１０μｇ／ｍｌ丹参酮ⅡＡ作用于培养的ＨＬ８０细胞５天后，进行光镜，电镜，琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪的观察和分析。     

反义核酸与维甲酸对NR4和HL—60细胞生长分化的影响

急性早幼粒细胞白血病染色体ｔ易位形成的ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因作为早幼粒细胞白血病的标志与ＡＰＬ的发病及维甲酸诱导分化效应密切相关。本研究对ＰＭＬ－ＲＡＲα基因的反义核酸和维甲酸夺ＮＢ４细胞和ＨＬ－６０细胞生长分化的影响加以比较，探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα基因对维甲酸诱导分化作用的影响。     

反义核酸与维甲酸对NB4和HL-60细胞生长分化的影响

目的：急性早幼粒细胞白血病染色体ｔ（１５；１７）易位形成的ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因作为早幼粒细胞白血病的标志与ＡＰＬ的发病及维甲酸诱导分化效应密切相关。本研究将针对ＰＭＬ－ＲＡＲα基因的反义核酸和维甲酸对ＮＢ４细胞和ＨＬ－６０细胞生长分化的影响加以比较，探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα基因对维甲酸诱导分化作用的影响。方法：用反义核酸来封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的表达并用ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测。ＮＢ４细胞的生长、分化及功能通过细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及ＮＢＴ还原试验加以判定，细胞周期应用流式细胞仪进行分析。结果：①反义核酸仅能够抑制ＮＢ４的生长，促进ＮＢ４细胞的分化，具有特异性；②维甲酸能够同时影响ＮＢ４和ＨＬ－６０细胞的生长分化；③反义核酸能够降低ＮＢ４细胞Ｓ期细胞百分比，而维甲酸不能。结论：ＡＳＯＤＮ和维甲酸影响ＡＰＬ细胞的生长分化作用机制可能不同，而且反义核酸作用特异性强，作用时相早。     

三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病的机制研究

细胞形态学和白血病细胞系ＨＬ６０的实验研究表明，三氧化二砷对急性早幼粒细胞白血病细胞有诱导分化作用；并可能是通过“原浆毒”作用同时诱导细胞凋亡；大剂量时有抑制细胞增殖作用，这三种作用的依次出现与治疗的累积量有关。认为砷剂是目前治疗ＡＰＬ的较理想药物。