禽脑脊髓炎灭活油乳剂疫苗的研制

将ＡＥＶ－ＶＲ株接种于６日龄ＳＰＦ鸡胚卵黄囊，孵化至１６日龄时迫，要集鸡胚毛尿囊膜，尿囊液，胚体称重，研磨，离心取上清液加入福尔马林灭活，以灭菌ＰＢＳ稀释成１：１、１：１０、１：２０三种浓度，加入吐温－８０制成水相，另以白油，司斑－８０和硬质酸铝煮沸灭菌制成油相，搅拌混合制成不同浓度的灭活油乳剂疫苗，分别免疫２日龄ＳＰＦ雏鸡，安全可靠。用ＡＥＶ－ＶＲ、ＡＥＶ－１１４３、ＡＥＶ－ＮＨ９３７三株混合毒     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的现场应用试验

以分离到的禽离脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）野毒接种ＳＰＦ鸡胚，取其病料用福尔马林灭活并制成油乳剂苗。免疫种鸡的试验结果表明，这种灭活苗应激反应小，对产蛋时的鸡基本无影响，免疫后的鸡产生的抗体较快，用间接免疫荧光反应检测（ＩＦＡ），第５天即可检出特异的抗体，琼扩抗体可在２０～３０天查出。田间试验的初步结果表明，这种灭活苗的免疫效果稳定，３０天和４５天后的琼扩抗体检出率分别为４／４和６０／６０，免疫鸡的后代均被有效保护不发生ＡＥ。     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的田间免疫试验

以禽脑脊髓炎ＶＲ株病毒接种ＳＰＦ鸡胚，取发病胚病粒经福尔马林灭活制成油乳剂灭活苗，用实验室制品４批，分别在济宁，章丘，茌平，禹城四个种鸡场共３７３００只种鸡进行田间免疫试验。结果表明，疫苗对鸡群不良反应，鸡群于免疫后３周ＡＧＰ检出率１００％，鸡群开产后产蛋性能良好，产蛋量与蛋壳质量正常，免疫鸡的后代均被有效保护不发ＡＥ。     

禽脑脊髓炎灭能油乳剂疫苗免疫试验

前言禽脑脊髓炎(AE)遍及世界所有饲养商品鸡的地区。采用疫苗接种以控制本病是一种有效的办法。早在50年代,A.J.Macleod(1959)和Kermit Schaaf(1964)等分别利用人工感染的发病鸡脑和鸡胚研制灭能疫苗对鸡进行免疫试验。试验证实,加入适量氢氧化铝的疫苗免疫效果较好,一周龄的鸡免疫接种后,无任何临床反应。母鸡免疫接种后产的蛋孵育的蛋胚对强毒攻击有一定的保护能力。母鸡免疫接种后112天,其     

禽脑脊髓炎油佐剂灭活疫苗免疫效果观察

将感染了ＡＥＶ－ＶａｎＲｏｃｋｅｌ株的ＳＰＦ全胚磨制的乳剂离心分离,取上清液制成抗原含量不同的两种灭活疫苗。将两种疫苗各接种３月龄的ＳＰＦ鸡,未见接种鸡出现症状。４周后以强毒ＡＥＶ攻击,所有疫苗接种鸡皆被保护,组织学检查进一步证明了疫苗的效力。抗原含量较高的疫苗引起的保护力更好,作者认为攻击时经过脑内接种更适合于临床评价疫苗效力。     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗安全性检验及免疫保护性试验研究

该试验采用6日龄鸡胚、2日龄商品肉雏鸡和7日龄SPF雏鸡，分别进行了禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的鸡胚卵黄囊接种及雏鸡脑内和皮下接种试验，通过病理检验检测了疫苗的安全性，同时利用琼扩试验进行了疫苗的免疫效应性检测，利用攻毒试验进行了免疫保护性试验。结果表明，禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗具有可靠的安全性和良好的免疫保护性，其琼扩效价可达1：32。     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗安全性检验及免疫保护性试验研究

该试验采用6日龄鸡胚、2日龄商品肉雏鸡和7日龄SPF雏鸡,分别进行了禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的鸡胚卵黄囊接种及雏鸡脑内和皮下接种试验,通过病理检验检测了疫苗的安全性,同时利用琼扩试验进行了疫苗的免疫效应性检测,利用攻毒试验进行了免疫保护性试验.结果表明,禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗具有可靠的安全性和良好的免疫保护性,其琼扩效价可达1∶32.     

禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

本品系用A型禽流感病毒A／Ostrich／Denmark／72420／96(LPAI-H5N2)株及A／Chicken／Shanghai／1／98(H9N2)株分别接种易感鸡胚、收获感染胚液、超滤浓缩后经甲醛溶液灭活，加油佐剂混合乳化制成的油乳剂灭活疫苗。疫苗用4周龄SPF鸡作安全试验，每只鸡肌肉注射2ml，结果表明试验鸡均无全身症状和局部病变，证明疫苗安全性良好。取疫苗一羽份免疫4周龄SPF鸡作效力检验，免疫鸡全部获得保护，对照鸡全部感染或死亡。经不同免疫剂量测定，证明一羽份疫苗中至少含有8个免疫剂量。免疫干扰试验证明两种抗原具有免疫协同作用。     

禽脑脊髓炎、鸡痘二联活疫苗安全性、最小免疫剂量及免疫效力试验

为确定禽脑脊髓炎(AE)、鸡痘(AP)二联活疫苗的安全性、最小免疫剂量及免疫效力,自制3批二联活疫苗进行研究。结果显示,鸡接种10倍剂量疫苗后精神、食欲及发育均正常,临床表现和剖检均无异常;AEV YBF02株的最小免疫剂量为100 EID50,鸡痘鹌鹑化弱毒株的最小免疫剂量为10 EID50;3批疫苗AEV YBF02株的病毒含量均≥103.2EID50/羽份,鸡痘鹌鹑化弱毒株的病毒含量均≥103.4EID50/羽份,攻毒后保护指数为89~100。试验表明,自制二联活疫苗安全、有效、质量可控,可用于预防禽脑脊髓炎和鸡痘。     

禽脑脊髓炎琼扩抗原的研制与应用

利用禽脑脊髓炎病毒Ｖａｎ Ｒｏｅｋｅｌ株和山东野外分离株，分别脑内接种１日龄ＳＰＦ雏鸡，在隔离器中饲养，以典型发病鸡脑，胃肠和胰腺等制备琼扩抗原。通过特异性检查，效价测定，与进口抗原及血清对比，田间试验等证实，该方法所制备的抗原性能稳定，效价高，特异性强。可广泛用于ＡＥ抗体的普查，适合于评价免疫鸡群抗体的水平。     

美国七彩山鸡传染性脑脊髓炎的诊治及病理研究

山西省某场美国七彩山鸡发病,确诊为七彩山鸡的传染性脑脊髓炎。其外部症状明显表现为精神沉郁、反应迟钝、头颈震颤,共济失调。病理解剖表明,该病病变主要在脑部,具体表现为脑膜紧张、湿润,血管呈树枝状充血状态,大小脑水肿。观察其病理组织学特征,切片表现为神经细胞变性和坏死、神经小胶质细胞增生、脑和脊髓出现明显的血管周围浸润现象,即血管套现象。     

禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

选用AEV(VR株 )CEF适应毒制备抗原 ,免疫Balb/c小鼠。应用杂交瘤技术以间接ELISA方法筛选获得一株分泌抗AEV(VR)单克隆抗体的杂交瘤细胞。制备细胞上清及腹水进行单抗特性鉴定 ,经染色体计数、免疫球蛋白类及亚类测定、特异性试验、稳定性试验、SDS PAGE电泳 ,表明该杂交瘤细胞染色体数目介于 90～ 110之间 ,该单克隆抗体亚类为IgG2a,分子量为 142KD ,ELISA测定细胞上清效价为 1∶1× 10 4 ,腹水效价为 1∶1× 10 6,与其它病原无交叉反应 ,抗体分泌稳定。     

SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法检测禽活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒

为快速、准确检测禽活疫苗中的禽网状内皮组织增生症病毒(REV),根据REV p30基因上的一段保守序列,利用Primer Premier 5.0软件设计合成了1对特异性引物,建立了基于SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法,并以常规PCR产物为标准品绘制了标准曲线,对方法的特异性、敏感性、重复性、与经典方法的符合率进行了评价。结果表明:扩增产物片段大小为222 bp,与预期片段大小相符,测序结果证实为REV靶序列;标准曲线具有良好的线性关系,相关系数为1.0,扩增效率为94.2%,溶解温度Tm=(86.0±0.50)℃,无引物二聚体;该方法只从REV阳性样本检出扩增信号,其他病原无扩增信号,特异性好;最低可检测26.97拷贝数的阳性标准品,比常规PCR敏感1000倍;组内变异系数、组间变异系数分别为0.79%~5.36%,1.61%~5.25%。运用建立的实时荧光PCR方法对17批禽用活疫苗进行检测,并与间接免疫荧光法(IFA)进行同步比较试验,结果两者符合率为100%。且实时荧光PCR法更快捷、更方便,结果判定更为直观可用于疫苗中REV污染情况的监测。     

鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗免疫持续期的研究

应用3批鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗进行了免疫持续期的试验。结果表明，鸡群免疫1次后，对A型强致病力菌株的攻毒保护率为83%，对C型强致病力菌株的攻毒保护率为51.5%，在首免后4周左右进行二免，则免疫鸡群对A型菌的保护率在免疫后13个月仍然保持100%，对C型菌的保护率在免疫后9个月内可达到90.5%。免疫鸡血清抗体也均保持较高的水平，其中B-ELISA的A型抗体的检出率为83%-100%、C型的检出率为33%-87%，血凝抑制试验（HI）的A型抗体阳性检出率为87%-100%，C型抗体的检出率为62.8%-93%，血清平板凝集抗体的检出率为62.8%-100%，此结果充分显示了鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的良好的免疫效力以及B-ELISA、HI及血清平板凝集试验较高的敏感性的特异性，研究还证实了HI抗体与攻毒保抗力的密切相关。     

鸽新城疫油乳剂灭活苗的研制

本文报导了一种源自病鸽的鸽新城疫病毒ＱＬ株制备的灭活油乳剂疫苗。以此种疫苗接种后,接种鸽均正常无任何病症,接种疫苗获得保护能抵抗鸽新城疫病毒株攻击的鸽子数多于接种ＬａＳｏｔａ油乳剂疫苗的鸽子。已在野外以此种疫苗接种了大量的鸽子,效果满意     

鸽禽Ⅰ型副粘病毒病蜂胶佐剂灭活疫苗的研制

鸽禽Ⅰ型副粘病毒（A/PMV-Ⅰ）病是鸽的一种严重病毒性传染病，给养鸽业造成了巨大损失。为了更好地预防本冱的发生，我们用从现场分离鉴定的7株鸽A/PMV-Ⅰ毒株中筛选出3株抗原性良好的毒株作为种毒，研制成蜂胶佐剂混合毒株灭活疫苗，经安全试验、最佳免疫剂量测定、铲力试验，以及田间应用的结果，表明该疫苗抗原性良好、使用安全和免疫保护效果确定。实验室试验，用本疫苗免疫后30、90、180天，其保护脂数分别为100%、77.8%和55.6%,免疫有效期最少达6个月；在4℃-8℃保存,其有效其最少可达180天。