非霍奇金淋巴瘤中p53基因突变情况研究

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin′s Lymphoma,NHL)中p53基因第5~8外显子突变情况。方法采用PCR-SSCP法对47例NHL进行p53基因第5~8外显子的点突变研究。结果p53基因第5~8外显子总突变率为48.94%(23/47)。其中第6外显子的突变率最高为17.02%,其次为第8外显子,突变率为12.87%;高度恶性组和低度恶性组突变率分别为50.00%(12/24)、34.78%(8/23)(P>0.05);T细胞和B细胞突变率分别为39.29%(11/28)、47.37%(9/19)(P>0.05)。结论NHL中存在较高p53基因突变率,提示其突变可能参与了NHL的发生发展。高度恶性组p53基因突变倾向于高发。     

非霍奇金淋巴瘤中的17p杂合性丢失

采用ＡＢＣ和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）检测了４８例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）中１７ｐ杂合性丢失（ＬＯＨ）的情况，发现１２例发生ＬＯＨ，阳性率为２５．０％，尤其是在恶性程度较高的弥漫型大细胞性淋巴瘤（ＤＬＣＬ）中阳性率为６２．５％，显著高于非ＤＬＣＬ中的１７．５％（Ｐ＜０．０１），提示１７ｐＬＯＨ与ＮＨＬ的病理类型有一定的相关性；而且，ＬＯＨ与突变型ｐ５３的表达也有相关性，在有突变型ｐ５３蛋白表达的ＮＨＬ中ＬＯＨ为６６．７％，在无突变型ｐ５３蛋白表达的ＮＨＬ中ＬＯＨ为３３．３％（Ｐ＜０．０５）。作者认为，在国人ＮＨＬ中可同时存在ｐ５３突变和１７ｐＬＯＨ，与ＮＨＬ中ＤＬＣＬ的发生和发展有较明显的相关性。     

非霍奇金淋巴瘤中p53基因mRNA的表达

目的　探索研究非霍奇金淋巴瘤中 p5 3mRNA的表达与突变型p5 3蛋白和临床病理的相关性。 方法　采用原位杂交和ABC法。结果　在 4 8例各型非霍奇金淋巴瘤中 p5 3mRNA有不同程度的表达 ,检出率为5 8.3 % ,突变型 p5 3蛋白染色阳性率 4 1.7% ;在突变型p5 3蛋白阳性组中 p5 3mRNA的检出率为 80 .0 % ,显著高于突变型 p5 3蛋白阴性组 ( 4 2 .8% ) (P <0 .0 5 )。 结论　在非霍奇金淋巴瘤中存在 p5 3基因突变 ,产生了突变型p5 3mRNA ,提示后者的表达增强可能是导致突变型 p5 3蛋白表达增强的主要原因之一。     

48例非霍奇金淋巴瘤的P53基因突变

采用ＡＢＣ和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法在４８例ＮＨＬ中研究Ｐ５３基因外显子５－８中发生突变的类型、频率与突变型Ｐ５３蛋白的表达以及它们与病理分型、恶性程度的相关性。结果：突变型Ｐ５３蛋白在ＮＨＬＫ 的阳性率为４１．７％，其中在弥漫型大细胞性淋巴瘤（ＤＬＣＬ）为７５％，在非ＤＬＣＬ为３５％，两者差异显著（Ｐ＜０．０５）；在Ｐ５３蛋白表达阳性的ＮＨＬＫ ＰＣＲ－ＳＳＣＰ阳性主要见于ＤＬＣＬ，检出率为１５％，在     

非霍奇金淋巴瘤中p16基因突变情况研究

目的探讨非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin’s Lymphoma，NHL）中p16基因外显子1、2突变情况。方法采用PCR-SSCP法对40例NHL进行p16基因第1、2外显子的点突变研究。结果p16基因第1、2外显子总突变率为32．5％（13／40）。其中第2外显子的突变率最高为25％（10／40），其次为第1外显子的突变率为7．5％（3／40）；其中惰性、侵袭性组、高侵袭组突变率分别为25．0％（1／4）、31．25％（10／32）和50．0％（2／4）（P〉0．05）；T/NK细胞和B细胞突变率分别为38．46％（5／13）和29．63％（8／27）（P〉0．05）。结论NHL中存在较高p16基因突变率，提示其突变可能参与了NHL的发生发展。侵袭组、高侵袭组p16基因突变倾向于高发。     

非霍奇金淋巴瘤中p16基因突变与MSI的关系

目的 研究p16基因突变与微卫星不稳定性（Microsatellite instability MSI）在非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin＇s lymphoma NHL）发生发展中的作用,探讨p16基因内外显子1、2（exon1、exon2）的分子遗传学改变与非霍奇金淋巴瘤的关系.方法 采用PCR-SSCP法对40例已确诊NHL进行p16基因外显子1、2的突变研究;选取p16基因内部微卫星位点D9S265,D9S259,D9S161,D9S169对MSI进行检测.结果 40例NHL中,P16基因总突变率为35.0％ （14/40）,位点D9S161、D9S259的MSI组的P16的突变率明显高于MSI阴性组,而D9S265和D9S169则与之相反（P＞0.05）,D9S259、D9S161、D9S265外显子2的突变和缺失率均高于外显子1.结论 ①NHL中存在较高p16基因突变率和MSI,提示其突变和MSI可能参与NHL的发生、发展;②通过统计分析,微卫星位点的MSI主要影响p16基因外显子2的突变和缺失;③微卫星位点D9S161和D9S169与p16基因的关系较紧密.     

非霍奇金淋巴瘤中p53基因mRNA的表达

目的 探讨研究非零奇金淋巴瘤中ｐ５３ ｍＲＮＡ的表达与为型ｐ５３蛋白和临床病理的相关性。方法 采用原位杂交和ＡＢＣ法。结果 在４８例各型非霍奇金淋巴瘤中ｐ５３ ｍＲＮＡ有不同程度的表达，检出率为５８．３％，突变型ｐ５３蛋白阳性组ｐ５３ｍＲＮ的检出率为８０．０％，显著高于突变型ｐ５３蛋白阴性组（４２．８％）（Ｐ〈０．０５）结论 在非零奇金淋巴瘤中存在ｐ５３基因突变，产生了突变型ｐ５３ｍＲＮＡ，提示后     

p53、bcl-6等癌基因在睾丸原发性非霍奇金淋巴瘤中的表达

目的 探讨睾丸原发性非霍奇金淋巴瘤的临床病理特点、免疫表型及分子异常。方法 采用免疫组织化学S—P法检测7例睾丸原发性非霍奇金淋巴瘤中p53、bcl—6、LCA、CD20、CD45RO蛋白的表达。结果 7例睾丸原发性非霍奇金淋巴瘤中B细胞淋巴瘤6例，T细胞淋巴瘤1例，p53阳性4例(57．1％)，bcl—6阳性l例(14．3％)。结论 睾丸原发性非霍奇金淋巴瘤以B细胞淋巴瘤居多，p53基因与该肿瘤的发生有相关性。     

p16和p53蛋自在儿童非霍奇金淋巴瘤的表达

目的 探讨儿童非霍奇金淋巴瘤(NHL)抑癌基因p16和p53蛋白的表达及其与NHL的关系.方法 用免疫组织化学S-P法检测46例儿童NHL患者和12例对照组儿童病理组织中p16和p53蛋白的表达.结果 NHL患儿p16蛋白阳性表达率为32.6%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),p53蛋白阳性表达率为19.6%,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);p16蛋白阳性率与NHL患者的多位点淋巴结外侵犯、血清LDH增高呈负相关(P<0.05),与病理高度恶性、临床分期晚、B状态呈非常明显负相关(P<0.01);p53蛋白的表达与NHL病理分类及临床特征间均无明显相关性(P>0.05).结论 儿童NHL患者p16、053蛋白表达率较低,p16蛋白阴性表达与儿童NHL患者的不良预后有关.     

p16和p53蛋白在儿童非霍奇金淋巴瘤的表达

目的探讨儿童非霍奇金淋巴瘤（NHL）抑癌基因p16和p53蛋白的表达及其与NHL的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测46例儿童NHL患者和12例对照组儿童病理组织中p16和p53蛋白的表达。结果NHL患儿p16蛋白阳性表达率为32.6%,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,p53蛋白阳性表达率为19.6%,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;p16蛋白阳性率与NHL患者的多位点淋巴结外侵犯、血清LDH增高呈负相关（P〈0.05）,与病理高度恶性、临床分期晚、B状态呈非常明显负相关（P〈0.01）;p53蛋白的表达与NHL病理分类及临床特征间均无明显相关性（P〉0.05）。结论儿童NHL患者p16、p53蛋白表达率较低,p16蛋白阴性表达与儿童NHL患者的不良预后有关。     

肝细胞癌患者中p53基因的突变研究

为了解肝细胞癌（ＨＣＣ）中ｐ５３基因的突变情况，收集８６例ＨＣＣ手术切除标本，采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ）、聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）和ＤＮＡ序列分析，研究了ｐ５３基因的突变情况。８６例ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变率为３６％，其中，密码子２４９的突变率为３３．７％，１例ＳＳＣＰ和ＲＦＬＰ均提示密码子２４９存在突变者经ＤＮＡ序列分析显示密码子２４９的第三个碱基发生了ＡＧＧ／ＡｒｇＡＧＴ／Ｓｅｒ突变。以上结果提示，ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变主要以点突变为主，主要发生在密码子２４９，其突变率、突变谱和突变方式与启东等ＨＣＣ高度流行区相似     

宫颈癌P53基因第6,7外显子突变的检测

（１）目的 探讨人宫颈癌Ｐ５３基因突变与临床病理特征的关系。（２）方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性酶切片断长度多态性分析（ＲＦＬＰ）技术,检测３４例宫颈癌第６,７外显子的突变。（３）结果 检出突变６例,突变与临床分期,病理学分级有关,而与年龄、组织学类型无关。（４）结论 Ｐ５３基因突变是宫颈癌发生的原因之一。     

乳腺癌P53基因点突变的检测

目的：探讨Ｐ５３基因点突变检测在乳腺癌预后判断中的意义。方法：应用聚合酶链反应———单链构像多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）方法对３５例乳腺癌患者的Ｐ５３基因位点的点突变进行检测。结果：３例出现点突变，经ＤＮＡ序列分析，１例为第１３６密码子ＣＡＡ（Ｇｌｎ）被ＣＡＧ（Ｇｌｎ）替代，１例为第２２７密码子ＴＣＴ（Ｓｅｒ）被ＧＣＴ（Ａｌａ）替代，１例为第２７３密码子ＣＧＴ（Ａｒｇ）被ＣＡＴ（Ｈｉｓ）替代。结论：Ｐ５３基因突变可能是引起乳腺癌分化不良的因素之一，并可能预示着乳腺癌预后较差。     

DELETIONS AND POINT MUTATIONS OF p16,p15 GENE IN PRIMARY TUMORS AND TUMOR CELL LINES

Aberrations of chromosome 9 p21-22 are involved in the genesis of many forms of cancer. The gene p16 and p15 kave been assigned to this region. Both p l 6 and p 15 axe an inhibitor of cyclin D-cdk4,cyclin D-odk6 compiex and have been implicated in a wide variety of cancer types,including the germllne of patients with familial melanoma. In order to investigate and compare the status of p16,p15 gene in primary tumors and cell lines,we examined 357 primary tumors and 29 call lines derived from diverse tumor types. In addi-tion to analysis of these primary tumors and cell llnes,blood specimens from 91 patients either with sporadic mulriple cancers or from cancer-prone families were also analyzed. The data showed the foilowing:1)Ho-mozygous deletions of p16,p15 were comparatively rare and far less common than previously reported,al-though hemizygnus deietions were observed in a significant fraction of many tumor types;2)the incidence of p16,p15 deleticms(either homozygous deletions or heterozygous deietions)varied significantly among differ-ent tumor types;3)most delefions involved in both p16 and p15 genes;4)sequence variations in the coding sequence of p16,p15 were comparativeiy rare among these tumor types,though mutations and poiymor-phisrrm were identified; 5)sntne tumors which showed LOll at 9p,contaioing p16 and p15 gene,did not show deletions or point mutations in the p16,p15 gene. 6)In a subset of retinoblastoma and osteosarcoma where no Rb gene mutations were present a significant fraction was found to contain p16,p15 gene dele-tions.     

人类脑胶质瘤P53基因突变与预后的关系

目的　探讨P5 3突变在胶质瘤发生发展中的作用及其与临床病理特征和预后的关系。方法　利用聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR -SSCP)及LSAB免疫组化法对已明确诊断的 4 8例脑胶质瘤进行P5 3基因突变以及蛋白表达的检测。结果　 4 8例胶质瘤中 2 0例P5 3蛋白呈阳性表达 (4 1.7% )。在高级别的肿瘤 (Ⅲ、Ⅳ级 )中P5 3表达率明显高于低级别 (Ⅰ、Ⅱ级 )的肿瘤 (分别是 6 3.2 %、2 7.6 % ) (P <0 .0 5 )。PCR -SSCP检测发现 17例 (35 .4 % )呈现P5 3基因的单链构象多态性改变 ,均位于 5 - 8外显子 ,突变例数依次为 7(4 1.2 % )、1(5 .9% )、4 (2 3.5 % )、5 (2 9.4 % )。两种方法检测的符合率为 89.6 % (4 3/4 8)。在单因素分析中P5 3突变与预后相关 ,而在多因素分析中P5 3突变与预后无关 ,肿瘤的组织学分级与预后相关性显著。该基因的突变与患者年龄、肿瘤大小、性别无关 ,但与胶质瘤的恶性程度相关性显著。结论　胶质瘤中P5 3突变多发于第 5、7、8外显子 ,该基因的突变与胶质瘤的发生及恶性进展相关 ,与预后无关。     

FREQUENT STRUCTURE ALTERATIONS OF p53 GENE IN NASOPHARYNGEAL CARCINOMA

By southern hybridization with 1.8 kb cDNA probe,a high freqnency (40.5%) of structural abnormality of p 53 gene was observed in primary nasopharyngeal carcinoma (NPC) biopsies. The regioas of exons 1 to 4 of the gene were examined by poiymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism, no point nmtation was found. Because very low rate of point mutation had been reported in exons 5 to 8,we considered that structural ahnormality in the region of exons 1 to 8 of the gene might be uncommon in NPC. The speetrophotometer scaaning analysis of outoradiograms and rehybridization investigation of nitrocellulose filter with exon 11 probe indicated that most of structure aberrations we observed might be rearrangement occurring in exon ll.     

Ha-ras、p53基因变异与膀胱癌预后关系的探讨

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测了３９例膀胱癌及７例正常膀胱组织中Ｈａ－ｒａｓ基因、ｐ５３基因变异，并结合临床分期、病理分级等参数进行了综合分析。结果表明，膀胱癌组织中Ｈａ－ｒａｓ基因、ｐ５３基因变异率分别为３６％、３０．８％，两者均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）；且与分级分期呈正相关。复发肿瘤的Ｈａ－ｒａｓ基因突变率显著高于原发肿瘤；６例标本同时呈现Ｈａ－ｒａｓ基因与ｐ５３基因突变。提示Ｈａ－ｒａｓ基因、ｐ５３基因变异及相互作用在很大程度上参与了膀胱癌的发生及演变，并与其生物学行为密切相关，有望成为判断肿瘤恶性程度、自然病程及预后的评估指标     

p53基因在卵巢肿瘤中的改变

采用聚合酶链式反应——单链构象多态性溴乙锭染色法，分别检测４３例卵巢肿瘤ｐ５３基因外显子５－８。结果显示：卵巢癌ｐ５３基因改变率高于良性肿瘤（Ｐ＜０．０５），ｐ５３基因改变见于交界性瘤及Ⅰ－Ⅳ期卵巢癌。提示ｐ５３基因改变与卵巢癌的发生密切相关；它可能参与卵巢癌变的机制，同时可发生在卵巢癌的早期，并对其发展过程中起作用。     

转染野生型p53基因对肝癌细胞生长的影响

目的：通过转染野生型p53基因致肝癌细胞株BEL-7404，研究其对肝癌细胞的生长及凋亡作用。方法：野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株BEL-7404。用四甲基偶氮唑（MTT）法测定细胞生长曲线，用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果：肝癌细胞BEK-7404转染野生型p53基因后，其生长作用明显受到抑制．细胞生长抑制率在第4天可达50．8％。流式细胞仪分析细胞凋亡结果：阴性对照组为1．7％，转染pUHD10-3组为3．2％．转染pUHD10-3-p53组为40．7％。结论：野生型p53基因可诱导肝癌细胞BEL-7404的生长抑制及发生凋亡。