宫颈脱落细胞RASSF1A基因甲基化在宫颈癌中的临床意义

目的研究宫颈脱落细胞RAS相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子甲基化在宫颈癌中的临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测宫颈癌患者和健康女性宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化,分析与病理因素间的关系。结果宫颈癌患者宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化率为64.0%,高于健康女性的1.3%(P<0.05)。宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化率在宫颈癌不同组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、器官转移、Figo分期患者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化与宫颈癌病理因素密切相关,可作为宫颈癌病情判断和预后评估的标志物。     

IL-22基因启动子区甲基化检测在宫颈癌中的临床意义

目的:检测IL-22基因启动子区域甲基化修饰的改变,以明确IL-22激活的可能机制及其在宫颈癌中的临床意义。方法:选取2016年1月至2017年6月惠州仲恺高新区人民医院收治的宫颈癌患者104例,选取同期我院因子宫良性病变行子宫全切手术的患者60例作为对照。IL-22基因启动子甲基化使用特异性PCR(MSP)检测,ELISA检测IL-22因子表达。结果:宫颈癌患者IL-22启动子甲基化阳性率为32.7%(34/104)显著高于对照组的15.0%(9/60)(P<0.05),宫颈癌患者IL-22表达水平为(28.36±5.48)ng/L,显著高于对照组的(14.52±1.37)ng/L(P<0.01)。IL-22启动子甲基化阳性率和IL-22因子表达量在临床III,IV期患者为40.4%(19/47)和(30.71±6.11)ng/L,均显著高于I,II期的26.3%(15/57)和(27.42±4.74)ng/L(P<0.05);在淋巴结有转移患者为42.1%(16/38)和(31.02±6.58)ng/L,显著高于无转移的27.3%(18/66)和(27.42±4.74)ng/L(P<0.05);在中、低分化患者为36.6%(26/71)和(30.13±6.37)ng/L,显著高于高分化的24.2%(8/33)和(24.56±4.85)ng/L(P<0.05)。结论:宫颈癌患者中IL-22基因启动子高甲基化,IL-22表达增加可能参与宫颈癌的发生、发展和转移过程。     

胃镜活检组织RASSF1基因启动子甲基化检测及其临床意义分析

目的：探讨胃镜活检组织RAS相关结构域蛋白1（RASSF1）基因启动子甲基化水平及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测胃癌患者胃镜活检癌组织、癌旁组织及健康者正常胃组织RASSF1基因启动子甲基化状态,并比较其差异;分析胃癌患者RASSF1基因启动子甲基化与不同临床病理因素的关系。结果胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率为62．7％,癌旁组织甲基化率为4．0％,健康者正常胃组织甲基化率为2．7％,癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织（P＜0．05）。胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率在不同性别、年龄、病变部位及幽门螺杆菌感染患者间比较差异无统计学意义（P＞0．05）,在不同分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和 TNM 分期患者间,比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论胃癌患者胃镜活检癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织,且甲基化率与癌组织分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期有关,可反映胃癌患者的病情及预后。     

死亡相关蛋白激酶与肿瘤的相关研究进展

DAPK是一个肿瘤抑制基因,由钙离子/钙调蛋白调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,具有抑制肿瘤作用。DAPK可以影响细胞活力,诱导细胞的凋亡和自溶作用,从而发挥抗肿瘤作用。现将DAPK与肿瘤相关的研究进展做一综述。     

死亡相关蛋白激酶1、KLF4、6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶甲基化状态检测及与宫颈癌人乳头瘤病毒16感染的关系

目的 检测宫颈癌组织死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)、KLF4、6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)启动子区域甲基化状态,初步探讨其甲基化状态与宫颈癌人乳头瘤病毒16(HPV16)感染的关系。方法 选取宫颈癌患者103例为宫颈癌组,另选取同期年龄相匹配的慢性子宫颈炎患者110例为对照组。检测2组宫颈脱落组织DAPK1、KLF4、MGMT基因甲基化状态。通过人乳头瘤病毒检测HPV16感染情况,分析宫颈癌组织DAPK1、KLF4、MGMT基因甲基化与HPV16感染相关性。结果 与对照组相比,宫颈癌组患者HPV16感染阳性率升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,宫颈癌组DAPK1、KLF4、MGMT基因异常甲基化率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度低、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移及有远处转移患者宫颈癌组织DAPK1、KLF4、MGMT甲基化率高于分化程度高、中及TNM分期Ⅰ～Ⅱ、无淋巴结转移、无远处转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。与HPV16感染阴性相比,HPV16感染阳性患者中APK1、KLF4、MGMT甲基化比例...     

尿路上皮癌外周血死亡相关蛋白激酶的甲基化与纯合性缺失状态及其意义

目的:研究启动子区甲基化及纯合性缺失对死亡相关蛋白激酶(DAPK)表达及尿路上皮癌(UC)生物学行为的影响.方法:使用甲基化特异性PCR(MSP)检测45例UC患者外周血循环DAPK启动子区甲基化情况;使用Differential PCR技术检测DAPK纯合性缺失情况,分析DAPK启动子区甲基化及纯合性缺失与肿瘤分级分期的相关性.使用RT-PCR技术检测相应肿瘤的DAPK表达情况.结果:MSP提示10例出现DAPK启动子高甲基化(22％);Differential PCR提示6例出现启动子区纯合性缺失(13％);RT-PCR提示15例样本mRNA表达下调或缺失.统计学分析提示DAPK启动子高甲基化及纯合性缺失与DAPK表达下调或缺失明显相关(P＜0.01),启动子高甲基化与肿瘤浸润性明显相关(P=0.002),启动子纯合性缺失与肿瘤分级明显相关(P=0.003).结论:DAPK启动子区高甲基化与纯合性缺失是导致DAPK表达异常的重要因素.     

血浆DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌的关系

目的探讨死亡相关蛋白激酶（DAPK）启动子甲基化在非小细胞肺癌病人中的表达及其临床意义。方法采用甲基化特异性PCR的方法,对42例健康人和61例非小细胞肺癌病人外周血中DAPK基因启动子甲基化的情况进行检测。结果在42例健康人的血浆中均未检出DAPK基因的甲基化,而61例非小细胞肺癌病人中,18例检测到DAPK基因启动子甲基化（x^2=15．018,P〈0．05）。DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌病人性别、肿瘤分化程度无关,但与病人淋巴结转移和临床分期有关（x^2=4．961、9．678,P〈0.05）。结论DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌的淋巴结转移和临床分期有相关性,有可能作为评估非小细胞肺癌分期的分子生物学指标。     

宫颈癌相关基因甲基化研究

DNA甲基化属于表观遗传修饰的一种,是真核细胞DNA最普遍的修饰方式,可以通过影响基因突变、表达调控、细胞增殖等调节基因转录活性和表达。研究发现基因启动子甲基化的程度直接影响基因的转录活性,并且呈负相关。由于肿瘤的形成从本质上讲就是细胞原癌基因的激活和抑癌基因的失活所致,所以异常的DNA甲基化在致癌作用上扮演了重要角色。     

细胞周期相关蛋白激酶2在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探索细胞周期相关蛋白激酶2(NIMA-related kinase 2,NEK2)在结肠癌中的表达及临床意义。方法:回顾性分析武汉市第一医院2012年11月至2015年5月间收治的120例结肠癌患者临床资料及随访情况。采用免疫组织化学法检测结肠癌组织与癌旁组织中NEK2的表达情况,依据结肠癌免疫组织化学结果分成NEK2高表达组和低表达组,卡方检验分析NEK2的表达与病理因素的关系,单因素及多因素分析影响总生存率及累计复发率的危险因素,Kaplan-Meier(K-M)法绘制生存曲线。结果:NEK2在结肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织。NEK2高表达组与年龄(P=0.260)、性别(P=0.580)、肿瘤直径(P=0.522)、浆膜浸润(P=0.116)无关,而与肿瘤分化程度(P=0.021)、淋巴结转移(P=0.017)、AJCC分期(P=0.018)相关。AJCC分期及NEK2的表达为影响总生存率和累计复发率的独立影响因子。NEK2高表达组1,3年总生存率分别为33.4%,19%,NEK2低表达组1,3年总生存率为70.3%,35%,NEK2高表达组1,3年总生存率低于NEK2低表达组(P<0.05);NEK2高表达组1,3年累计复发率分别为69.7%,84.3%,NEK2低表达组1年累计复发率为35.8%,72.4%,NEK2高表达组1,3年累计复发率高于NEK2低表达组(P<0.05)。结论:NEK2在结肠癌组织中高表达,NEK2高表达与恶性临床病理因素相关,NEK2是影响结肠癌患者预后的独立危险因素。     

尿液蛋白激酶Y基因启动子位点甲基化在前列腺癌早期诊断中的价值

目的 探讨尿液蛋白激酶（PRKY）基因启动子位点甲基化在前列腺癌（PCa）早期诊断中的临床价值。方法 收集50例疑似PCa患者的尿液,提取DNA后,通过定量甲基化特异性PCR(qMSP)法检测PRKY基因启动子位点cg05163709、cg08045599及cg05618150甲基化水平,同时将患者分为良性前列腺增生（BPH）组和PCa组,并分析两组患者临床指标差异以及两组患者尿液中的PRKY基因启动子位点甲基化状态。建立受试者工作特征曲线（ROC）,计算曲线下面积（AUC）,分析其在PCa中的诊断价值,并联合临床指标进行联合诊断。结果 PCa患者尿液标本中cg05163709和cg05618150甲基化率明显高于BPH患者,其中cg05163709甲基化诊断PCa的AUC为0.762,敏感度为86.70%。与前列腺特异性抗原（tPSA）等临床指标相比,PRKY甲基化在PCa早期筛查中表现更好。cg05618150甲基化与前列腺特异抗原密度（PSAD）联合诊断的AUC为0.787,敏感度为86.70%;cg05163709甲基化与PSAD联合诊断PCa的AUC为0.855,特异度为95...     

基因甲基化水平在宫颈癌诊断中的应用价值

摘要：目的：探讨SOX14基因甲基化定量检测对宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌诊断的临床应用价值。 方法：采用荧光定量甲基化PCR(QMSP)检测101例宫颈液基细胞样本（包括正常细胞27例,CIN2期24例,CIN3期33例,宫颈癌17例）中SOX14基因的甲基化水平,通过Kruskal-Wallis H检验分析其在正常、CIN2期、CIN3期及宫颈癌分组中的甲基化水平差异,并采用ROC曲线分析SOX14甲基化对宫颈癌的临床诊断效能。 结果：SOX14基因甲基化水平随宫颈病变程度的升高而逐渐升高,各期间差异有统计学意义（H=52.55,P＜0.01）。当cut off值为87.21时,SOX14基因甲基化水平诊断宫颈癌的敏感性和特异性分别为94.12%和96.30%。 结论：SOX14基因甲基化水平与宫颈病变程度具有一定相关性,宫颈脱落细胞样本SOX14基因甲基化水平可能作为宫颈癌诊断的潜在指标。     

结肠癌中RASSF 1A基因启动子甲基化及其临床意义

本研究探讨结直肠癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化和mRNA表达异常与结直肠癌病理生物学特征的关系,为阐明抑癌基因RASSF 1A基因在结直肠癌发生发展中作用及其分子机理提供有力科学实验依据。     

骨肉瘤外周血Runx3基因启动子甲基化检测及临床意义

目的研究骨肉瘤患者外周血Runt相关转录因子3(Runx3)基因启动子甲基化及临床意义。方法选择骨肉瘤患者及健康人作为研究对象,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测两组研究对象外周血Runx3基因启动子甲基化并比较其差异,分析骨肉瘤患者Runx3基因启动子甲基化与临床病理因素的关系。结果骨肉瘤患者外周血Runx3基因启动子甲基化率(57.1%)显著高于健康人(2.0%),差异有统计学意义(P0.05)。在不同性别、年龄、肿瘤部位和病理类型的骨肉瘤患者之间,外周血Runx3基因启动子甲基化率的差异无统计学意义(P0.05),在不同KPS评分、肿瘤最大径、病理性骨折、组织学分级和Enneking分期的骨肉瘤患者之间,差异均有统计学意义(P0.05)。KPS评分低于70分、肿瘤最大径大于或等于10cm、有病理性骨折、组织学分级G3+G4及Enneking分期晚的骨肉瘤患者,其Runx3基因启动子甲基化率显著高于KPS评分大于或等于70分、肿瘤最大径小于10cm、无病理性骨折、组织学分级G1+G2及Enneking分期早的骨肉瘤患者。结论骨肉瘤患者外周血Runx3基因启动子呈高甲基化状态,与KPS评分、肿瘤最大径、病理性骨折、组织学分级和Enneking分期密切相关,可用于评估骨肉瘤患者病情及预后。     

RASSF1A基因的甲基化检测对宫颈癌和宫颈上皮内瘤变患者的临床意义

目的探讨RASSF1A基因甲基化程度对宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)患者的临床意义。方法选取2017年5月至2019年2月大同市第五人民医院的46例宫颈癌组织,30例CIN及10例正常宫颈组织作为对照组。采用甲基化特异PCR技术来检测RASSF1A启动子区的甲基化程度;分析RASSFIA基因启动子区甲基化程度与临床及病理特征(即肿瘤组织学分级、FIGO分期、淋巴结转移、宫颈间质的浸润深度及HPV感染)的关系。结果本研究检测了46例宫颈癌、30例CIN及10例正常宫颈中RASSF1A的甲基化程度,结果显示其在宫颈癌中的甲基化率为39.1%(18/46),未甲基化率为60.9%(28/46),CIN及正常宫颈组织未见有明显甲基化。RASSF1A基因的甲基化程度与宫颈癌的FIGO分期及肿瘤的组织学分级相关,而与宫颈间质侵犯深度、淋巴结是否转移及是否有HPV感染无关。结论RASSF1A的甲基化程度可能与宫颈癌的发生相关。RASSF1A基因启动子区在宫颈癌组织中高甲基化程度,其与宫颈癌的FIGO分期、肿瘤的组织学分级有关,使其有望成为宫颈癌检测的敏感标志物,并可用于早期宫颈癌的诊断及临床治疗的预后分析。     

宫颈脱落细胞DKK-3基因甲基化在宫颈癌中的意义

目的检测宫颈脱落细胞Dickkopf相关蛋白3(DKK-3)基因启动子甲基化并研究其在宫颈癌中的临床意义。方法选择宫颈癌患者(CER组)和健康女性(CON组)为研究对象,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测两组研究对象宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化,比较DKK-3基因启动子甲基化率在不同临床病理因素中的差异。结果 CER组宫颈癌患者宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化率明显高于CON组健康女性(53.8%vs.0.0%,P0.01)。CER组宫颈癌患者宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化率在HPV感染、组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和国际妇产科联盟(FIGO)分期中的差异均有统计学意义(均P0.05),有HPV感染、组织学分级高、肿瘤最大径大于或等于4cm、有淋巴结转移、有远处转移和FIGO分期晚的宫颈癌患者DKK-3基因启动子甲基化率明显高于无HPV感染、组织学分级低、肿瘤最大径小于4cm、无淋巴结转移、无远处转移和FIGO分期早的患者。结论宫颈癌患者宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化与HPV感染、组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和FIGO分期有关,可用于评估宫颈癌的病情严重程度和预后。     

GFRA1/SOX1甲基化检测对于宫颈癌诊断的临床意义

目的探讨定量检测GFRA1(GDNF家族受体α1)/SOX1(性别决定区域Y1)甲基化对于宫颈癌诊断的临床价值。方法采用荧光定量甲基化PCR(QMSP)检测114例宫颈液基细胞样本(包括正常细胞26例,宫颈上皮内瘤变CIN2期27例,CIN3期30例,宫颈癌31例)中GFRA1/SOX1的甲基化水平,并分析其与临床参数间的相关性。通过ROC曲线和二元Logistic回归分析单一和联合指标检测对于宫颈癌的临床诊断效能。结果 GFRA1和SOX1在不同分组中的甲基化水平差异有统计学意义(χ2分别为49.371和34.981,P均0.01),并且随着宫颈上皮内瘤变CIN2、CIN3期和宫颈癌病变程度的加重,GFRA1和SOX1基因的甲基化程度逐步升高。GFRA1的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.890(95%CI:0.813~0.966),SOX1的AUCROC为0.860(95%CI:0.772~0.948),两者联合检测的AUCROC为0.897(95%CI:0.825~0.970)。以GFRA13 961.68,SOX15 502.23,联合诊断的预测概率72.80%为cut off值,两者联合诊断的敏感性(87.10%)、特异性(92.77%)、阳性预测值(81.82%)、阴性预测值(95.06%)和准确度(91.20%)均高于单独检测。此外,GFRA1和SOX1甲基化水平与患者年龄、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移和宫颈癌FIGO分期等均无显著相关性(P0.05)。结论 GFRA1/SOX1甲基化是宫颈癌发生的独立指标,其在宫颈液基细胞样本中的定量联合检测可作为临床宫颈癌筛查及早期诊断的敏感指标。     

IGF-1R、PRKCZ基因启动子区甲基化检测方法的探讨

目的 探讨人和小鼠的IG-1R 、PRKCZ基因启动子区DNA甲基化检测的方法.方法 用亚硫酸氢钠处理人外周血白细胞基因组DNA及小鼠骨骼肌组织中DNA标本,以修饰后的DNA为模板,对人和小鼠两个不同基因分别设计合适的引物对启动子区进行Touch-Down PCR扩增,PCR产物进行克隆测序.结果 在利用合适的引物对修饰后DNA模板进行扩增时均能扩增出目的 片段,克隆测序结果显示IGF-1R、PRKCZ基因启动子区甲基化的胞嘧啶碱基C不变,而非甲基化的胞嘧啶碱基C转变为胸腺嘧啶碱基T.结论 成功的建立了人和小鼠IGF-1R、PRKCZ基因启动子区甲基化的检测方法,为进一步探讨这两种基因启动子区甲基化与相关疾病的关系奠定基础.     

人胚胎骨髓MSC及其突变株F6细胞DAPK基因表达及启动子甲基化检测

摘要：目的：研究人胚胎骨髓间充质干细胞（fetal mesenchymal stem cells, FMSC）及其突变肿瘤细胞F6死亡相关蛋白激酶（deathassociated protein kinase,DAPK）基因的表达及启动子区域甲基化。 方法：用RT-PCR和甲基化特异性PCR（methylationspecific PCR, MS-PCR）技术对FMSC及F6细胞系DAPK 基因的表达和启动子甲基化状态进行检测,并对甲基化产物测序鉴定。 结果：DAPK基因在FMSC中表达而在F6中不表达。通过MS-PCR检测证实F6中DAPK基因发生甲基化,FMSC中DAPK基因发生未完全甲基化。 结论：DAPK基因启动子区域发生甲基化可能是促使其基因表达下调的重要机制,在FMSC突变成F6肿瘤细胞过程中发挥重要作用。     

FANCF基因甲基化与宫颈癌关系研究进展

宫颈癌是常见妇科恶性肿瘤之一.如何早期诊断、提高治疗效果及患者生存率是目前研究热点.宫颈癌组织中抑癌基因的甲基化越来越受到关注.启动子CpG岛异常甲基化导致的基因失活是肿瘤发生发展过程中除基因突变和染色体物质缺失外的第3种机制.在某些情况下是抑癌基因失活的唯一机制.FANCF定位于11号染色体短臂l区5带,该基因的甲基化与宫颈癌的发生、发展有一定关系.本文针对FANCF基因启动子甲基化在宫颈癌发生及耐药形成中的作用作一综述.     

白血病患者RASSF1A基因甲基化状态及其临床意义

目的研究白血病患者骨髓中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子甲基化状态及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测86例白血病患者和60例非白血病患者对照组骨髓中RASSF1A基因启动子的甲基化状况,分析不同白血病类型之间的差异。结果 86例白血病患者中,有12例(13.95%)RASSF1A基因启动子甲基化,而60例非白血病患者骨髓均未检测到甲基化,二者比较差异均有统计学意义(P<0.05)。淋巴系白血病患者RASSF1A基因甲基化比例(23.1%)明显高于髓系白血病患者(6.4%)(P<0.05)。结论白血病患者骨髓中存在RASSF1A基因甲基化,淋巴系白血病甲基化比例明显高于髓系白血病。RASSF1A基因甲基化检测可能成为白血病分型的生物标志物之一。