长链非编码RNA FAM224A调控miRNA-590-3p表达对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FAM224A调控miRNA-590-3p(miR-590-3p)表达对卵巢癌细胞增殖及迁移的影响。方法选择人卵巢癌细胞株OC3、SKOV-3、HO-8910、A2780及人正常卵巢上皮细胞株IOSE80, 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测FAM224A在各个细胞株中的相对表达水平, 筛选FAM224A相对表达水平最低的细胞株进行后续实验。将细胞分为FAM224A组(转染FAM224A模拟质粒)和对照组(转染对照模拟质粒), 分别采用CCK-8法和细胞划痕实验检测两组细胞增殖和迁移能力。采用生物信息学网站LncBase v.2预测FAM224A可能互补结合的靶基因为miR-590-3p。qRT-PCR检测miR-590-3p和叉头框蛋白A2(FOXA2)mRNA的相对表达水平, 蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达情况。结果卵巢癌细胞株OC3、SKOV-3、HO-8910、A2780及正常卵巢上皮细胞株IOSE80中FAM224A的相对表达水平分别为0.23±0.04、0.65±0.05、0.45±0.03、0.63±0.08和1.0...     

长链非编码RNA FOXD2-AS1对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

  目的  观察长链非编码RNA（lncRNA）FOXD2-AS1对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响。  方法  收集2017年2月至2017年9月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院（武汉市妇幼保健院）手术切除的16例卵巢癌患者的组织标本,采用荧光实时定量聚合酶链式反应（quantitative PCR,qPCR）检测组织标本、人卵巢癌细胞系及人正常卵巢上皮细胞系中的FOXD2-AS1表达水平。将HO-8910细胞分为实验组和对照组,分别转染siRNA-FOXD2-AS1和阴性对照RNA。细胞计数CCK-8法、Transwell迁移实验分别检测沉默FOXD2-AS1表达对卵巢癌HO-8910细胞增殖活性和迁移能力的影响。生物信息学方法预测FOXD2-AS1的下游靶基因,qPCR检测下游靶基因表达,Western blot法检测葡萄糖调节蛋白94（glucose regulated protein94,GRP94）和信号通路Wnt/β-catenin的蛋白表达。  结果  卵巢癌组织中的FOXD2-AS1相对表达量8.56±0.51明显高于正常癌旁组织的2.38±0.21（P < 0.01）,FOXD2-AS1在卵巢癌细胞系OC3、HO-8910、A2780、SKOV-3中表达明显增加（P < 0.05）。下调FOXD2-AS1表达明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖活性和迁移能力（均P < 0.01）。生物信息学方法显示,FOXD2-AS1靶向结合miR-150-5p后,可靶向结合GRP94基因。实验组和对照组miR-150-5p相对表达量分别为5.45±0.91和1.01±0.08（P < 0.01）,GRP94 mRNA相对表达量分别为0.32±0.05和1.02±0.11（P < 0.01）。GRP94和Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达减少。  结论  FOXD2-AS1在卵巢癌组织和细胞系呈高表达,下调FOXD2-AS1可调控miR-150-5p表达,抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖和迁移,可发挥抑癌基因的功能。      

miRNA-541-5p负调控细胞周期蛋白D1抑制结肠癌细胞增殖和迁移的相关研究

目的:探讨miRNA-541-5p（miR-541-5p）负调控细胞周期蛋白D1（CCND1）对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其相关机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-541-5p在结肠癌细胞株HT29、SW480、SW620、HCT116和正常人肠上皮细胞株HIEC以及2017年4月至...     

miRNA-373-3p靶向调控CD44表达对肾母细胞瘤细胞增殖的影响

目的:探讨miRNA-373-3p（miR-373-3p）靶向调控CD44表达对肾母细胞瘤G401细胞增殖的影响。方法:利用生物信息学方法,基于miRDB、miRanda、PITA以及DIANA-microT生物信息学数据库预测miR-373-3p可能的靶基因。取G401细胞,分别转染miR-373-3p模拟物、模拟物...     

慢病毒体外干扰长链非编码RNA LINC00630表达对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA LINC00630在膀胱癌细胞中的表达,以及体外干扰其表达对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测膀胱癌细胞株5637、BIU-87、T24、J82和正常膀胱上皮细胞株SV-HUC-1中LINC00630的表达。选择LINC0063表达量最高的膀...     

长链非编码RNA MAFG-AS1通过靶向miR-143-3p/AKT2轴促进胃癌的进展

目的:探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) MAFG-AS1在胃癌(gastric cancer,GC)的发生和发展中的生物学功能及可能的作用机制.方法: 分别用GEPIA (Gene Expression Profiling Interactive Analysis)和Kap...     

长链非编码RNA STAG3L5P过表达对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响

  目的  研究长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）STAG3L5P在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞中的表达和定位及其对OSCC细胞增殖及迁移的影响。  方法  使用数据库GEPIA2（gene expression profiling interactive analysis 2）分析STAG3L5P在头颈部鳞状细胞癌（head and neck squamous cell carcinoma,HNSC）中的表达;利用数据库UCSC Xena（University of California Santa Cruz Xena）分析STAG3L5P在OSCC中的表达;实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR）检测STAG3L5P的表达水平;RNA核质分离实验检测其亚细胞定位;细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）实验和Transwell迁移实验检测STAG3L5P过表达对OSCC细胞增殖和迁移能力的影响;qPCR和Western blot检测STAG3L5P过表达对上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关基因的影响;Western blot检测STAG3L5P过表达对PI3K/AKT通路的影响。  结果  STAG3L5P在OSCC组织中高表达,且其表达与组织学分级显著相关;STAG3L5P在OSCC细胞的表达水平显著升高,且在细胞质占比明显高于细胞核占比;STAG3L5P过表达组的细胞增殖和迁移能力均显著高于阴性对照组。STAG3L5P过表达导致N-cadherin和Vimentin的mRNA和蛋白表达均上调,E-cadherin蛋白表达下降。STAG3L5P过表达引起p-PI3K和p-AKT表达增多。  结论  STAG3L5P在OSCC组织和细胞中高表达,STAG3L5P过表达可以促进OSCC细胞的增殖及迁移能力,这可能与STAG3L5P激活PI3K/AKT通路促进EMT发生有关。     

miR-200b对人结肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究miR-200b对人结肠癌sw620细胞E-cadherin表达的调节作用,探讨miR-200b对sw620细胞增殖及迁移的影响.方法 采用实时PCR (RT-PCR)技术分别检测转染pEGP-miR-200b后24h和72 h sw620细胞中miR-200b的表达变化;采用RT-PCR技术和Western blot方法检测转染miR-200b后对E-cadherin表达的影响;采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)和划痕擦伤实验检测转染miR-200b对sw620细胞增殖、迁移的影响.结果 miR-200b转染sw620细胞48 h和72 h后,miR-200b相对表达量较对照组显著上调(t=11.579,P＜0.01;t=11.579,P＜0.01);且抑制了细胞的增殖能力,第3天抑制作用最显著,抑制率为55.34％;细胞的迁移速度受到明显的抑制,两组在24、48、72 h的迁移距离有显著差异(t=11.579,P＜0.01;t=10.419,P＜0.01;t=6.955,P＜0.01).同时细胞中E-cadherin基因的mRNA和蛋白表达水平显著升高(t=10.432,P＜0.01;t=8.325,P＜0.01).结论 上调miR-200b表达可抑制结肠癌细胞的生物活性,该作用可能与E-cadherin的表达有关.     

野黄芩素通过miRNA-496和基质细胞衍生因子1对子宫颈癌细胞增殖及迁移的影响

目的:探讨野黄芩素通过miRNA-496（miR-496）、基质细胞衍生因子1（SDF-1）对子宫颈癌细胞株HCC94细胞增殖及迁移能力的影响。方法:取对数生长期的HCC94细胞,分别加入20 μmol/L野黄芩素溶液（野黄芩素组）和二甲基亚砜（DMSO）（对照组）。分别采用CCK-8法和Transwell实验检测两组...     

miRNA-1-3p通过肌细胞增强因子2A对骨肉瘤细胞生物学功能的影响

目的:探讨miRNA-1-3p（miR-1-3p）对骨肉瘤细胞肌细胞增强因子2A（MEF2A）表达及生物学功能的影响。方法:收集2019年1月至2020年1月山西省肿瘤医院临床确诊的20例骨肉瘤患者的肿瘤组织及癌旁正常组织,使用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测样本中miR-1-3p表达水平。采用qRT-P...     

miRNA-5193对子宫颈癌Caski细胞顺铂敏感性的影响

目的:探讨miRNA-5193（miR-5193）对子宫颈癌Caski细胞顺铂敏感性的影响和机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定子宫颈癌细胞株C33A、SiHa、Caski和正常子宫颈细胞株Ect1/E6E7中miR-5193的表达水平。将Caski细胞分成对照组（不转染,正常培养）、miR-...     

基因间长链非编码RNA00963通过靶向miRNA-511-3p调控胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

目的 探讨基因间长链非编码RNA00963(LINC00963)对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法 常规培养正常胰腺上皮细胞hTERT-HPNE和胰腺癌细胞系Capan-1、SW1990、PaTu8988,将Capan-1细胞分为NC组、si-NC组、si-LINC00963组、pcDNA-NC组、pc...     

miRNA-324-5p和转录因子叉头框C1在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨miRNA-324-5p（miR-324-5p）、转录因子叉头框C1（FOXC1）在脑胶质瘤中的表达及与患者预后的关系。方法:收集2012年3月至2015年3月重庆海吉亚肿瘤医院和重庆市南川区人民医院收治的72例脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织以及28例因颅脑手术切除的正常人脑组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qR...     

DNMT1在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)在卵巢癌组织中的表达及对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:采用免疫组化方法检测15例正常卵巢组织及31例卵巢癌组织中DNMT1的表达水平;利用DNMT1的过表达质粒及DNMT1 siRNA瞬时转染SKOV3细胞系,Western blot检测DNMT1的蛋白表达水平,CCK8法检测各组细胞的增殖情况,Transwell小室实验检测DNMT1对卵巢癌细胞迁移能力的影响。结果:31例卵巢癌组织中DNMT1阳性率（83.9%,26/31）显著高于15例正常卵巢组织（20.0%,3/15）。临床分期Ⅲ-Ⅳ期、病理分级G3、远处转移者DNMT1阳性率明显升高（P＜0.05）。过表达DNMT1后,SKOV3细胞增殖能力及迁移能力均增强;敲低DNMT1后,SKOV3细胞生长及迁移能力受抑。结论:DNMTl在卵巢癌组织中的表达明显高于正常卵巢组织,其具有促进卵巢癌细胞增殖和远处转移的作用。     

长链非编码RNA PVT1异常表达对肝癌细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(PVT1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖和迁移侵袭过程的影响及潜在调控机制。方法 检测HCC肿瘤组织和细胞中PVT1和微小RNA-488-3p(miR-488-3p)的表达水平。将MHCC97-H细胞分为Control组(空白未处理)、siRNA组(转染阴性对照siRNA-NC)、siRNA-PVT1组(干扰PVT1表达)和siRNA-PVT1+miR-488-3p inhibitor组(干扰PVT1表达同时抑制miR-488-3p表达)。MTT、划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测MHCC97-H细胞的增殖、迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验验证PVT1与miR-488-3p之间的靶向关系。结果 PVT1在HCC组织和细胞中表达水平增高(P<0.05),miR-488-3p在HCC组织和细胞中表达水平降低(P<0.05)。与siRNA组相比,siRNA-PVT1组MHCC97-H细胞增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数量均降低(P<0.05);与siRNA-PVT1组相比,siRNA-PVT1+miR-48...     

长链非编码RNA LOC101927476抑制卵巢癌细胞侵袭迁移和增殖

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LOC101927476在卵巢癌细胞中的表达及其对卵巢癌生物学特征的影响。方法选取2018—2019年于中国医学科学院肿瘤医院手术治疗的卵巢癌患者。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测卵巢癌细胞系3AO、OVCA429、TOV21G、A2780、SKOV3以及22例卵巢癌原发瘤和转移瘤组织中LncRNA LOC101927476的表达水平, 采用TCGA数据库中卵巢癌转录组测序数据验证LncRNA LOC101927476和GATA4的表达, 采用慢病毒包装体系构建过表达LOC101927476(OE-LOC101927476组)和空载(OE-EV组)慢病毒并转染至3AO细胞。设计单链向导RNA(sgRNA), 利用CRISPR/Cas9构建LncRNA LOC101927476敲除细胞系。采用Transwell法和划痕实验检测LncRNA LOC101927476对卵巢癌细胞侵袭和转移能力的影响。采用细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞的增殖能力。结果 real-time PCR显示, 22例卵巢癌患者中, 20例转移灶中L...