大白鼠视前外侧区的传入联系—HRP法研究

本文用HRP逆行追踪技术研究了大白鼠视前外侧区的传入纤维联系。结果表明:梨状皮质、杏仁皮质核、杏仁内侧核、杏仁前核、视上核、下丘脑腹内侧核,下丘脑外侧核、中缝背核、中央上核、蓝斑核、联合核和迷走神经背核等同视前外侧区有传入联系。     

大白鼠屏状核纤维联系研究

用辣根过氧化物酶（HRP）法研究大白鼠屏状核与视皮质之间往返的纤维联系。结果显示：1．在屏状核中部引入HRP：视皮质内未见标记细胞。逆行标记细胞出现在同侧丘脑腹侧核的腹外侧部，背内侧部以及丘脑腹内侧核。2.在视皮质（17区）各部位引入HRP：屏状核内未见标记细胞。而在双侧视皮质18区和对侧视皮质17区、双侧外侧膝状体背核和丘脑外侧后核可见逆行标记细胞。由此提示：大白鼠视皮质与屏状核之间无往返的纤维朕系。屏状核主要接受丘脑腹侧核团的投射。     

睡眠剥夺大鼠腹外侧视前区腺苷水平的变化

目的研究睡眠剥夺大鼠促睡眠中枢腹外侧视前区(VLPO)内腺苷变化规律。方法将SD大鼠随机分为对照组和睡眠剥夺组。采用脑立体定位、微透析、多导睡眠描计技术和高效液相色谱法观察两组大鼠的睡眠剥夺前、睡眠剥夺期以及睡眠剥夺后恢复期VLPO内腺苷含量变化。结果与对照组比较,睡眠剥夺组睡眠剥夺前觉醒(W)、非快速眼动(NREM)睡眠和快速眼动(REM)睡眠无明显变化;而在睡眠剥夺期W时间增加58.5%(P<0.01),NREM时间减少55.7%(P<0.01),REM时间差异无统计学意义;在睡眠剥夺后恢复期W时间减少18.4%(P<0.05),NREM时间增加17.4%(P<0.05),REM时间差异无统计学意义。与对照组比较,睡眠剥夺开始的2 h内睡眠剥夺组的VLPO内腺苷相对含量无显著变化。而随后的4 h VLPO内腺苷相对含量明显升高(P<0.05)。睡眠剥夺后恢复期的3 h内睡眠剥夺组的VLPO内腺苷相对含量显著减少(P<0.05)。结论腺苷在VLPO内参与睡眠-觉醒周期的调节。     

去甲肾上腺素对腹外侧视前区神经元的作用途径研究

目的 研究去甲肾上腺素(NA)对腹外侧视前区(VLPO)中两种类型神经元(促睡眠神经元和中间神经元)的作用途径.方法 采用全细胞膜片钳技术,通过药理学方法在C57BL/6小鼠脑片上,研究NA对VLPO中两种类型神经元兴奋或抑制作用的途径.通过RT-PCR鉴定VLPO脑区NMDA受体表达的类型.结果 电生理结果显示,NA(100 μmol/L)对VLPO中间神经元的兴奋作用能被NMDA受体阻断剂(AP5)阻断(P＜0.05,n = 8),不能被AMPA受体阻断剂(CNQX)和γ-氨基丁酸受体阻断剂阻断.NA(100μmol/L)对VLPO促睡眠神经元的抑制作用均不能被AP5、CNQX和氟马西尼(flumazenil)阻断.RT-PCR结果显示NM-DA 受体的3种亚型(GluN2A、GluN2B、GluN1)在VLPO中均有表达.结论 NA对VLPO中间神经元的兴奋作用是通过谷氨酸能神经元释放谷氨酸引起的间接效应,该兴奋效应由VLPO中间神经元上的NMDA受体介导.     

大鼠下丘脑腹外侧视前区和结节乳头体核的直接神经纤维投射研究

目的探讨促睡眠调节中枢下丘脑腹外侧视前区(VLPO)与促觉醒调节中枢结节乳头体核(TMN)之间是否具有双向调节的直接通路。方法将SD大鼠随机分为对照组( ACSF 组)与实验组( TMN + ACSF&VLPO + DiO 组, TMN+DiO&VLPO+ACSF组),采用脑立体定位技术,核团内微量注射、冰冻切片等方法观察和记录大鼠VLPO和TMN分别注射细胞膜荧光探针Fast DiO后的TMN和VLPO的荧光信号。结果 TMN+ACSF&VLPO+DiO组大鼠注射Fast DiO术后72 h, TMN 脑区神经细胞可见明显的绿色荧光;TMN+DiO&VLPO+ACSF组大鼠注射Fast DiO术后72 h, VLPO脑区神经细胞也可见明显的绿色荧光。结论 VLPO与TMN间有双向直接神经纤维投射。     

大鼠面神经后核内侧区与脑干呼吸相关区间纤维联系

目的：研究大鼠面神经后核内侧区与脑干呼吸相关区间的纤维联系，方法：于13只成年SD大鼠的面神经后核内侧区内注射辣根过氧化物酶（HRP）0．5－1．9ul,5只注射30％麦角HRP20－60nl，并以7只成年SD大鼠为对照，逆行／顺行追踪mNRF神经元。结果：发现HRP标记神经元胞体主要位于双侧延髓孤束核，疑核，巨细胞网状核，旁巨细胞背侧网状核，中间网状核，外侧网状核，中缝核（raphe nuclei)，桥脑臂旁核，K－F核，脊核中间区（spinal intermediate zone)，脊髓后角，延髓及桥脑网状结构;WGA-HRP 标记神经纤维主在存在双侧于孤束核，疑核，脊髓中间区，延髓网状结构，结论：mNRF 神经元与脑干不同呼吸相关核团之间具有广泛的纤维联系，基本呼吸节律起源及维持过程中可能通过这些神经结构进行调控。     

大鼠面神经后核内侧区与脑干呼吸相关区间纤维联系

目的 研究大鼠面神经后核内侧区与脑干呼吸相关区间的纤维联系。方法于13只成年SD大鼠的面神经后核内侧区内注射辣根过氧化物酶(HRP)0.5－1.0μl,5只注射30%麦角HRP 20-60 nl,并以7只成年SD大鼠为对照,逆行/顺行迫踪mNRF神经元。结果发现HRP标记神经元胞体主要位于双侧延髓孤束核、疑核、巨细胞网状核。旁巨细胞背侧网状核、中间网状核、外侧网状核、中缝核群(raphe nuclei)、桥脑臂旁核、K－F核、脊髓中间区(Spinal intermediate zone)、脊髓后角、延髓及桥脑网状结构;WGA-HRP标记神经纤维主要存在双侧于孤束核、疑核、脊髓中间区、延髓网状结构。结论mNRF(神经元与脑干不同呼吸相关核团之间具有广泛的纤维联系,基本呼吸节律起源及维持过程中可能通过这些神经结构进行调控。     

大鼠丘脑腹内侧核的传入纤维联系

采用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）微量注射和微电泳方法，观察大鼠丘脑腹内侧核（ＶＭ）的传入纤维联系，结果表明：ＶＭ接受大脑皮质、无名质、丘脑网状核、脚内核、下丘脑结构、上丘、黑质网状部、蓝斑、臂旁核、中缝核、前庭神经核群、脑桥网状核、小脑齿状核、小脑间位核和脊髓灰质的某些板层的传入纤维。     

大鼠中脑中央灰质外侧区的传入联系

用辣根过氧化物酶(H R P)逆轴突标记法,研完了成年大白鼠中脑中央灰质外侧区的传入联系。将HRP 注射到中央灰质外侧区后.可见到标记的神经元核团有:外侧丘系核、楔状区、二叠体旁核、黑质密带、丘脑底核、未定带、丘脑网状核、束旁核、丘脑腹内侧核大细胞部、Forel 氏H_1区;下丘脑背内侧核及腹内侧核、下丘脑前核、视上核、视前大细胞恢、视前外侧核、第三脑室室周灰质及隔外侧核;脑桥首尾侧网状核、被盖网状核、小细胞网状核、中缝大核;脊髓背角RexedⅡ、Ⅲ层。针对这些核团,就脑内镇痛系统的形态学基础进行了讨论。     

大鼠隔外核的传入联系—HRP法

用ＨＲＰ法研究大鼠隔外侧核的传入联系。主要在下列脑部见标记细胞：额皮质，嗅内皮质，海马，盖带，灰被，灰小束，杏仁基底内，外侧核，丘脑后核群，未定带，下丘脑室周核，下丘脑背侧区，下丘脑背，腹内侧核，弓状核，下丘脑后核，中脑中央灰质腹外侧部，中缝背核，被盖背外侧区，黑质密部及蓝斑。     

大白鼠上丘水平导水管周灰质外侧区的传入联系

HRP注入大白鼠上丘水平导水管周灰质外侧区后,标记细胞出现在下列脑区:前额内侧皮质,额顶运动皮质,额顶体感皮质,扣带前、后皮质,纹状皮质17、18区,颞叶听皮质,下托及海马1、2区:缰核、丘脑室旁核、背内侧核、前背核、束旁下核、未定带,下丘脑前区、背侧区,下丘脑背、腹内侧核,乳头体上核,背、腹侧乳头体前核,下丘脑外侧区:中缝背核、被盖背外侧核、中缝正中核、黑质网状部,外侧丘系腹侧核及二叠体旁核;兰斑、上橄榄核、第四脑室底灰质、脑桥尾侧网状核、三叉神经脊束核、外侧网状核小细胞部、薄束核及楔束核     

大白鼠嗅球传入纤维联系的实验性研究：辣根过氧化物酶逆行标记法

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行标记技术,探索大白鼠嗅球传入纤维的起源.直视下将HRP注入大鼠一侧嗅球后,可在嗅前核、梨状皮质、屏状核、视前大细胞核、斜角带核、伏隔核、中缝背核和中央上核内观察到HRP逆行标记细胞.     

大鼠丘脑束旁核的传入纤维联系

用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）微量注射和微电泳方法，观察大鼠丘脑束旁核（ｐｆ）的传入纤维联系。结果表明，ｐｆ接受大脑皮质、丘脑室旁核、丘脑网状核、下丘脑腹内侧核、下丘脑外侧核、未定带、上丘、中央灰质、黑质网状部、蓝斑、ＬｏｒｅｎｔｅｄｅＮｏ＇核、小脑齿状核、小脑间位核、前庭神经核、舌下神经前置核、脑干网状结构、某些感觉中继核和脊髓灰质的某些板层的传入纤维。     

大鼠额前皮质的皮质-皮质传入纤维联系——CB-HRP及HRP法研究

本实验用CB-HRP及HRP法研究了27只大鼠额前皮质的半球间和半球内的皮质-皮质传入纤维联系。观察结果如下：皮质中标记细胞主要见于梨状区，扣带区和岛叶无颗粒皮质，其次见于额叶，顶叶、枕叶、颗叶皮质和海马后区皮质。而且发现额前皮质不同部位的传入郊位有区别，新皮质主要投射到额叶内侧面，中间皮质和旧皮质主要投射到岛叶无颗粒皮质前部，而古皮质只投射到额叶内侧面和眶回。另外，发现各区域内部存在固有纤维联系，各不同区域间也存在着往返纤维联系。     

大鼠外侧隔核的传出纤维联系

用HRP、WGA—HRP及CB—HRP法顺行追踪了大鼠外侧隔核的传出纤维联系。结果表明外侧隔核发生较多的纤维经内侧前脑束投射到下丘脑;经丘脑髓纹投射到丘脑带旁核、双侧内侧缰核,也有少量纤维投射到外侧缰核,外侧隔核向扣带皮质的投射主要终止在扣带皮质前部,少量纤维投射到后部。此外,有少量纤维投射到杏仁中央核、杏仁内侧核、中缝背核、中央灰质腹、外侧部、被盖腹侧区、脚间核及蓝斑等。     

臂外侧皮瓣微血管构筑的研究

应用新鲜成人尸体,墨汁灌注。将臂外侧皮瓣分为九个区,每区各取两个组织块,按常规固定、包埋、切片(纵、横切)。在显微镜下观察,皮瓣血管网共分五层,即:乳头层、乳头下层、真皮深层、浅筋膜层和深筋膜层网。并对各层血管网的网眼内径和构成血管网的周围血管口径作了测量。     

电刺激下丘脑外侧区对外周伤害性传入冲动的抑制作用

本试验以钾离子透入大鼠尾部作为伤害性刺激,诱发尾神经的传入冲动。观察到电刺激下丘脑外侧区(LHA)可使诱发冲动减少到对照值的72.82％(P<0.01)。同样条件下,电刺激下丘脑背侧的不定带区,对诱发冲动无明显影响。结果表明,电刺激LHA能够抑制外周伤害性冲动的输入。切除肾上腺髓质后,电刺激LHA对诱发冲动的抑制效应明显减弱;同时去除肾上腺髓质和交感神经,上述抑制效应完全消失。结果提示下丘脑对外周伤害性传入的抑制效应是通起交感神经及肾上腺髓质激素而实现的,后者起主要作用。