扩增大片段DNA的PCR方法

本实验通过比较两种缓冲体系对ＰＣＲ扩增产物的影响，提出一种适合扩增大片段ＤＮＡ使用的缓冲体系，它与常规使用的缓冲体系的主要区别在于前者不含ＫＣｌ，使用这种缓冲体系扩增的大片段ＤＮＡ特异性强，且重复性好。     

PCR技术在DNA片段扩增的应用与意义

1985年,Mullis等人发明了PCR技术,短短十余年间,这一技术得到迅速发展和应用,由扩增已知基因发展到扩增未知基因。本文旨在介绍利用PCR技术扩增未知序列DNA片段的最新进展及这些技术在基因克隆研究中的应用。1985年,美国PE2cetus公司人类遗传研究室的Mullis等人发明了体外无限扩增核酸片段的聚合酶链式反应,即PCR技术。目前,PCR技术已在众多的研究领域得到广泛应用,如在基因克隆、基因定点突变、c DNA文库构建、基因测序、载体构建以及人类基因组计划等方面发挥着重要作用。在今天的基因大战中,新基因的发现与克隆已成为研究的热点。而扩增未知序列的PCR技术格外引人注目,许多新方法应运而生,本文旨在介绍这方面的研究进展。     

通过优化PCR反应条件扩增富含GC的DNA片段

在被扩增的ＤＮＡ片段的特殊结构时，通过改变ＰＣＲ反应成分，并采用没的退火温度热启协，得到了满意的特异的ＰＣＲ扩增产物。     

通过优化PCR反应条件扩增富含GC的DNA片段

在被扩增的ＤＮＡ片段存在特殊结构时，通过改变ＰＣＲ反应成分，并采用不同的退火温度加热启动，得到了满意的特异的ＰＣＲ扩增产物。     

扩增DNA片段的影像技术研究

<正> PCR(聚合酶链式反应)扩增DNA片段技术,在分子病理学研究中得到较广泛的应用。但提取、纯化、扩增后的DNA片段,经聚丙烯酰胺凝胶电泳和溴化乙锭染色后,在紫外线检测仪下作直观检查。效果虽然较好,但紫外光对人体特别是眼角膜有一定的损害作用,人不能较长时间地处于紫外光的照射之下。经影像技术处理,使其如实地转化在感光胶上,既有利于作永久性资料保存、又减轻了紫外光对人的损害作用。过去我们用常规影像技术     

PCR对脑膜炎双球菌DNA片段的检测

用聚合酶链反应(PCR)检测脑膜炎双球菌,在该菌染色体DNA中的保守区域中选择一段核苷酸作为靶DNA,用PCR技术进行扩增,经过35个循环后可将1ngDNA扩增到能通过凝胶电泳检测出其596bp的特异性DNA产物,与其设计的该菌核苷酸序列长度一致.该方法对人有致病性的A,B,C 3型细菌均能扩增出阳性结果,且能快速、敏感、特异地检测出脑膜炎双球菌,在临床上具有重要的应用价值和广泛的应用前景.     

DNA体外PCR扩增鉴定胎儿性别方法的应用

本实验采集4例X连锁遗传病高危中孕胎儿羊水,从中抽提DNA,进行体外Y染色体特异片段扩增鉴定胎儿性别。结果其中2例胎儿为女性,2例为男性,均在引产或足月分娩后证实。     

一种简便的PCR扩增模板DNA的制备方法

PCR(Polymerase Chain Reaction)扩增技术对模板DNA的质量和数量要求较低,常规的DNA制备方法均能满足PCR基因扩增要求,但操作繁琐。根据PCR扩增技术特点,我们建立了一种快速、简便的PCR扩增模板DNA的制备方法。1.取血1200μl置于含有50μl 15%EDTA的Eppendorf管中。2.     

凋亡细胞核DNA片段检测方法进展

当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡。开展对细胞凋亡的研究，首先要解决是方法学问题。作者从调亡细胞的特征性核DNA片段检测着手，阐述了多种调亡细胞核DNA片段检测方法以及近年来的一些新进展。     

OPC纯化合成DNA片段方法探讨

ＯＰＣ纯化合成ＤＮＡ片段方法探讨韩金祥，张翠，杨晓春，唐天华，王美岭（山东省医学科学院基础所分子生物研究室）关键词寡核甘酸类；脱氧核糖核酸；纯化ＯＰＣ（ＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｔｉｄｅＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎＣａｒｔｒｉｄｇｅ）是纯化合成ＤＮＡ片段一种较...     

凋亡细胞核DNA片段检测方法进展

当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡,开展对细胞凋亡的研究,首先要解决是方法问题,作者从凋亡细胞的特性性核ＤＮＡ片段检测着手,阐述了多种凋亡细胞核ＤＮＡ片段检测方法以及近年来的一些新进展。     

结核杆菌特异性重复DNA序列的PCR扩增检测

结核杆菌特异性重复ＤＮＡ序列的ＰＣＲ扩增检测徐华梅，巫绪芳，潘理明，吴竞生，王祖贻结核杆菌染色体ＤＮＡ中有一段多次重复出现的核甙酸序列，以此基因片段作为靶ＤＮＡ，利用ＰＣＲ技术进行扩增，为结核病人快速诊断，及时治疗提供依据。本文摘要报告我们的研究结果...     

介绍一种DNA片段回收的方法

本文介绍了本实验室摸索的一种ＤＮＡ片段回收的实验方法，经过几年克隆实践证明，该操作简便，省时省力，结果稳定可靠，切实可行。     

从石蜡包埋的组织中提取DNA进行PCR扩增的方法

肿瘤的分子生物学研究是当今的热门课题之一，但研究者在短期内通常难以获得大量的病例分析的新鲜标本，从而阻碍研究的进程。近年来文献报告从贮存的石蜡包埋组织切片提取ＤＮＡ，可用于ＰＣＲ（Ｐｏｌｙｍｅｒａｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）及进一步的基因分析［１～...     

介绍一种简便、快速的回收DNA片段的方法

我们采用国产 DF-17型电洗脱槽回收了限制性内切酶酶切的 DNA 片段,证明该方法是一种简便、快速、可靠的回收核酸片段的方法.回收的 DNA 片段可进一步用于 DNA 克隆、探针标记和 DNA 分析.     

介绍一种简便、快速的回收DNA片段的方法

我们采用国产DF－17型电洗脱槽回收了限制性内酶酶切的DNA片段，证明该方法是一种简便、快速、可靠的回收核酸片段的方法。回收的DNA片段可进一步用于DNA克隆、探针标记和DNA分析。     

乙醇固定石蜡包埋组织提取DNA及PCR扩增方法的探讨

自从1985年Goelg等成功地发明了从4%甲醛固定、石蜡包埋组织中提取脱氧核糖核酸(de-oxyribonucleic acid,DNA)的方法以来,国内外文献中已有大量关于应用该方法提取DNA进行分子病理学研究的报道[1].     

介绍一种滤纸片快速回收DNA片段的方法

采用置于Ependorf管中的滤纸片，快速离心的方法回收DNA片段。实验表明，该方法是一种简便，快速，可靠的回收DNA片段的方法，回收率高。回收的DNA片段可进一步用于基因工程中克隆连接，酶切和探针标记。