血必净对兔急性肺损伤的早期保护作用及其机制研究

目的探讨血必净对爆炸致兔急性肺损伤（ALI）的早期保护作用及其机制。方法将40只家兔随机分为血必净低剂量（L）组、高剂量（H）组、地塞米松（D）组、氯化钠溶液对照（N）组及ALI模型（A）组,每组8只。除了N组外其他组均建立ALI模型。L、H组分别给予血必净10、20ml/kg;D组给予0.5ml/kg地塞米松;N、A组给予10ml/kg氯化钠注射液;各组于给药后24h采集血液及肺组织标本。采用ELISA法测定血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的含量,采用Westernblot法和RT-PCR法测定肺组织核转录因子-κB（NF-κB）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的蛋白及mRNA表达水平,测定肺湿干重比（W/D）,并在光镜下观察肺组织病理变化。结果A组MMP-9、NF-κB的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量以及W/D均比N组高（均P＜0.05）;经血必净治疗后,L、H组MMP-9、NF-κB的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6含量以及W/D均比A组低（均P＜0.05）,IL-10表达量比A组高（P＜0.05）,其中均以H组改变最显著（均P＜0.05）;肺病理切片显示血必净治疗后肺组织损伤明显减轻。结论血必净可抑制爆炸致ALI早期炎性介质的生成和释放,减轻组织病理损害,从而起到保护作用。     

人参皂甙Rb1对机械通气大鼠肺组织NF-资B和iNOs表达的影响

目的观察人参皂甙Rb1对机械通气肺损伤（VILI）大鼠炎症信号通路蛋白NF-资B及诱导型一氧化氮合酶（iNOs）的影响。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组（C组）、VILI组和人参皂甙Rb1预处理组（Rb1组）,每组10只。后两组大鼠潮气量40ml/kg机械通气4h建立大鼠VILI模型,Rb1组在通气前30min尾静脉注射40mg/kg人参皂甙Rb1,其他两组予等容量0.9%氯化钠溶液。观察各组大鼠肺组织病理改变,肺组织湿／干重比（W/D）,收集肺泡灌洗液（BALF）,采用ELISA法测定BALF中TNF-α、IL-6水平,硝酸盐还原酶法检测一氧化氮（NO）水平;RT-PCR测定肺组织中iNOsmRNA的表达水平,Westernblot检测肺组织的NF-资B蛋白水平。结果与C组相比,VILI组肺组织病理损伤严重,肺组织W/D显著增加,BALF中TNF-α、IL-6、NO水平增加,iNOsmRNA表达增加,NF-资B蛋白表达上调;与VILI组比较,Rb1组肺组织病理损伤程度减轻,肺组织W/D降低,BALF中TNF-α、IL-6、NO水平降低,iNOsmRNA表达降低,NF-资B蛋白表达下调。结论人参皂甙Rb1可下调机械通气大鼠NF-资B及iNOs活性,降低促炎因子TNF-α、IL-6、NO释放,减轻肺损伤。     

抑制炎症反应治疗急性肺损伤的实验研究

目的通过观察急性肺损伤（ALI）大鼠血液和肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒ等炎性细胞因子的变化,探讨抑制炎症反应在治疗急性肺损伤中的作用。方法应用气管内滴入内毒素（LPS）复制大鼠急性肺损伤模型。将48只大鼠随机分成4组：对照组（N组）、LPS组、N-乙酰半胱氨酸（NAC）治疗组（NAC组）、NAC联合地塞米松（Dex）治疗组（NAC＋Dex组）,采用免疫印迹法（Western Blotting）检测NF-κΒ的含量,采用RT-PCR检测肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒmRNA的表达,并采用放免检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中的IL-6、TNF-α的含量。结果LPS组大鼠肺病理可见明显的肺损伤表现,NAC组及NAC＋Dex组肺组织病理改变明显减轻;NAC组及NAC＋Dex组肺NF-κB,肺IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒmRNA表达水平及血清和BALF中的IL-6、TNF-α含量明显高于N组（P〈0.01）,而明显低于LPS组（P〈0.05）。结论NAC、Dex等可以抑制炎症反应,减少炎性介质的释放从而减轻肺损伤的程度,达到防治急性肺损伤的目的。     

低剂量低分子肝素对内毒素诱发的急性肺损伤的影响

目的 探讨低剂量低分子肝素(LMWH)对内毒素(LPS)诱发的急性肺损伤(ALI)的影响.方法 选取36只雄性SD大鼠分为3组:正常对照组(A组),LPS组(B组)和LPS+ LMWH组(C组),每组12只.B、C组腹腔注射6 mg/kg LPS诱发ALI.C组腹腔注射低分子肝素100 U/kg,B组腹腔注入同等容积的生理盐水.6h后处死动物,光镜下观察各组大鼠肺组织病理改变,行动脉血气分析、检测肺湿质量/干质量(W/D)比值和支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度;测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)水平;ELISA法测定血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及白细胞介素6(IL-6)水平.结果 B、C组PaO2、pH值低于A组,C组与B组相比明显升高(P＜0.05).B、C组大鼠肺W/D、BALF总蛋白及肺组织MDA、MPO水平明显高于A组(P＜0.01);C组与B组相比,肺W/D、BALF中蛋白及肺组织MDA、MPO水平明显下降(P＜0.05).B、C组大鼠血浆中TNF-α、IL-1β及IL-6水平较A组明显升高(P＜0.01),而C组较B组明显降低(P＜0.01).结论 LMWH处理能够减轻LPS诱发的急性肺损伤.     

ω-3鱼油脂肪乳剂对急性肺损伤兔肺组织TXB2、6-keto-PGF1α表达的影响

【目的】探讨ω-3鱼油脂肪乳剂对内毒素脂多糖（LPS）致兔急性肺损伤（ALI）急性肺损伤兔肺组织中血栓素B2（TXB2）、6酮前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）表达的影响。【方法】清洁级新西兰兔24只,随机分为对照组（A组）、LPS致伤组（B组）、ω-3鱼油脂肪乳剂预处理＋LPS致伤组（C组）,每组8只,记录0h、0．5h、1h、2h、4h时间点氧和指数（PaO2/FiO2）的改变,4h点处死动物,取肺组织测定TXB2和6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）含量、观察病理变化,并做病理评分。【结果】注射LPS0．5h、1h后B、C两组0．5h、1h兔肺组织TXB2、6-keto-PGF1α均较A组明显升高（P＜0．05）,B、C两组比较有统计学意义（P＜0．05）,注射LPS2h、4h后三组比较无统计学意义（P＞0．05）;B组TXB2/6-keto-PGF1α（T/P）明显高于A、C两组（P＜0．05）,A组与C组T/P均有增高趋势（0．75VS0．73）,但两组比较无显著差异（P＞0．05）;A组、C组肺损伤病理组织评分均低于B组（P＜0．05）。【结论】ω-3鱼油脂肪乳可明显减少LPS致ALI的肺组织TXB2含量,对6-keto-PGF1α最终合成无明显抑制,从而显著下调T/P,对内毒素致兔ALI具有一定保护作用。     

米力农对兔早期急性肺损伤TNF-α、IL-1β及IL-10的影响

目的：观察米力农对兔早期急性肺损伤炎性因子TNF-α、IL-1β及抗炎介质IL-10表达的影响,探讨米力农对肺损伤保护机制。方法：将18只家兔麻醉后气管切开行机械通气,随机均分为正常对照组（A组）、急性肺损伤（ALI）模型组（B组）和治疗组（C组）。B、C组采用内毒素滴入气管内复制急性肺损伤（ALI）模型,C组予以米力农50μg/kg静注后以5μg.kg-1.min-1持续输注治疗120 min,A、B组予以输注生理盐水。在基础状态（T1）、建模后0 min（T2）、120 min（T3）时,监测平均动脉压（MAP）和平均肺动脉压（mPAP）;采集血标本检测血清TNF-α、IL-1β及IL-10并行动脉血气分析。动物处死后测肺湿/干重比及支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞（PMN）百分比,并观察肺组织形态学变化。结果：与B组比较,C组PaO2提高,mPAP显著下降（P〈0.01）,通气功能改善;TNF-α、IL-1β显著下降,IL-10明显上升,BALF中PMN显著减少（P〈0.01）。结论：米力农能改善肺通气功能,减轻肺损伤,其作用机制可能是通过增加IL-10的生成,抑制TNF-α和IL-1β的释放,调节炎症/抗炎介质的平衡。     

SU5416在小鼠急性肺损伤中的作用及其机制研究

目的探讨血管内皮生长因子抑制剂Z-3-[（2,4-二甲基吡咯-5-烃基）亚甲基]-2-吲哚满酮（SU5416）在小鼠急性肺损伤（ALI）中的作用及其机制。方法将30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组（0.9%氯化钠溶液灌胃）、SU5416组（SU5416灌胃）、地塞米松组（地塞米松灌胃）、SU5416+地塞米松组（SU5416+地塞米松灌胃）、空白对照组（0.9%氯化钠溶液灌胃）,各6只。模型组、SU5416组、地塞米松组、SU5416+地塞米松组采用脂多糖（LPS）滴鼻制备小鼠ALI模型。观察并比较5组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞、淋巴细胞计数;使用试剂盒检测肺组织超氧化物歧化酶（SOD)、活性氧簇（ROS）活性;ELISA法检测肺组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1水平;Westernblot法检测肺组织bcl-2、TLR4、VEGF、NF-资B蛋白水平;观察肺组织病理形态。结果5组小鼠BALF中性粒细胞、淋巴细胞计数比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。5组小鼠肺组织SOD、ROS活性比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,模型组小鼠肺组织SOD活性明显下降,ROS活性明显上升。5组小鼠肺组织IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1水平比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,模型组小鼠肺组织IL-1β、IL-6、TNF-琢、MCP-1水平均明显上升。5组小鼠肺组织bcl-2、TLR4、VEGF、NF-资B蛋白水平比较差异均有统计学差异（均P＜0.05）,模型组小鼠肺组织在LPS刺激下抗凋亡蛋白bcl-2的表达下调,TLR4、VEGR、VEGFR2和pNF-资B的表达上调。SU5416组与地塞米松组小鼠肺组织的肺泡结构破坏、水肿,肺泡毛细血管充血、出血,肺泡间隔增厚,炎症细胞浸润等病理状态较模型组改善明显。SU5416与地塞米松均能明显逆转以上LPS刺激下小鼠ALI的改变,两者无明显差异,且两者联用的逆转改变明显强于其中一种单独使用。结论SU5416对小鼠ALI具有保护作用,其作用机制可能是通过减轻炎症反应、氧化应激以及调控TLR4/VEGF/NF-资B信号通路实现。     

白果内酯对脓毒症急性肺损伤大鼠TLR4/NFκB信号通路及Th1/Th2细胞的影响

【摘要】目的 探讨白果内酯（BB）对脓毒症致急性肺损伤（ALI）大鼠Toll样受体-4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及辅助性T细胞1/2（Th1/Th2）的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组(ALI组)、BB低（2.5 mg/kg）剂量组、BB高（10 mg/kg）剂量组、地塞米松阳性对照组（0.45 mg/kg）,每组各10只,除Sham组外,其余各组采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症ALI模型,术后6 h各药物组经尾静脉注射相应剂量药物,Sham组、ALI组经尾静脉注射生理盐水,均3次/d,共3 d。末次给药1 h后处死大鼠,取肺组织,以苏木精-伊红染色（HE）检测各组大鼠肺组织病理变化;以酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒检测大鼠肺组织氧化物酶(MPO)活性、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;凝胶电泳迁移率转变分析（EMSA）法检测肺组织 NF-κB 活性;以蛋白免疫印迹法检测肺组织中TLR4通路蛋白表达;采用流式细胞仪(FACS）检测肺脏细胞中辅助性T细胞1/2(Th1/Th2)比值。结果 与Sham组相比,ALI组大鼠肺组织可见水肿、炎性细胞浸润等病理损伤,肺组织MPO、IL-6、TNF-α含量、TLR4蛋白表达、NF-κB活性均明显升高（P＜0.05）,Th1/Th2、TNF-α/IL-6均明显降低（P＜0.05）。与ALI组相比,BB低、高剂量组及地塞米松阳性组肺组织水肿、炎性细胞浸润等病理损伤减轻,肺组织MPO、IL-6、TNF-α含量、TLR4蛋白表达、NF-κB活性均明显降低（P＜0.05）,Th1/Th2、TNF-α/IL-6均明显升高（P＜0.05）。与BB低剂量组相比,BB高剂量组及地塞米松阳性组肺组织水肿、炎性细胞浸润等病理损伤减轻,MPO、IL-6、TNF-α含量、TLR4蛋白表达、NF-κB活性均明显降低（P＜0.05）,Th1/Th2、TNF-α/IL-6均明显升高（P＜0.05）。结论 BB可抑制TLR4/NF-κB信号通路活化,调节Th1/Th2平衡,减轻炎性介质释放,改善脓毒症ALI大鼠肺组织损伤。     

电针预处理对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠炎性细胞因子及水通道蛋白5的影响

目的 探讨电针足三里穴预处理对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠的干预作用及可能机制。方法 将SD大鼠随机分为正常、ALI4h、ALI6h、针刺+ALI4h和针刺+ALI6h组，ALI4h、ALI6h组大鼠气管内用LPS（2mg/kg）分别滴注4h和6h以诱导ALI，后两组大鼠在针刺预处理双侧足三里穴1周后于气管内分别滴注LPS4h和6h。各组均取血、支气管肺泡灌洗液（BALF）及肺组织，计算BALF中白细胞总数及肺湿/干比（W/D），HE染色观察肺组织形态，ELISA方法检测血浆中AQP5、IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和BALF中AQP5水平，免疫组化方法观察肺组织AQP5表达。结果 与正常组比较，ALI4h组白细胞计数、W/D增高（P<0.05）、肺泡总面积和肺组织面积之比（A/t）降低（P<0.05）以及IL-1β、IL-10、TNF-α含量显著增高（P<0.001）；ALI6h组IL-6和IL-10含量明显增高（P<0.01）；ALI4h、ALI6h组AQP5含量显著降低（P<0.001）、积分光密度（IOD）明显降低（P<0.01）。与ALI4h组比较，针刺+ALI4h组白细胞计数与W/D降低（P<0.05）、IL-1β与TNF-α含量降低（P<0.05）、血浆及BALF中AQP5含量均升高（P<0.05），针刺+ALI6h组血浆AQP5含量有升高（P<0.05）。结论 电针足三里穴预处理对LPS诱导的ALI大鼠具有抗炎、降低肺水肿的保护作用，且在诱导4h时的ALI中更佳，其机制可能与电针下调炎性细胞因子和上调AQP5的表达有关。     

大潮气量通气加重脂多糖所致急性肺损伤及谷氨酰胺的防护作用

目的观察不同潮气量通气对脂多糖所致大鼠急性肺损伤的影响,以及谷氨酰胺的防护作用。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分为三组。实施麻醉和气管切开后,气管内注入脂多糖（LPS）5mg/kg,接小动物通气机进行机械通气,A组实施常规潮气量通气,B组实施大潮气量通气,C组大潮气量通气前1h静脉注入谷氨酰胺干预。每小时行1次动脉血气分析。通气4h后颈动脉放血处死大鼠。测定全肺湿重,并计算肺系数（肺湿重/体重×100）。测定BALF中白细胞及中性粒细胞计数、蛋白含量、TNF-α、IL-6和中性粒细胞趋化因子1（CINC-1）水平,肺组织匀浆髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果B组大鼠PaO2值、肺组织SOD水平较A组显著下降,肺系数、BALF中白细胞及中性粒细胞计数、蛋白含量、TNF-α、IL-6、CINC-1水平、肺组织MPO水平较A组显著增高;C组大鼠PaO2值、肺组织SOD水平较B组显著升高,肺系数、BALF中白细胞及中性粒细胞计数、蛋白含量、TNF-α、IL-6、CINC-1水平、肺组织MPO水平较B组显著下降。结论大潮气量通气能加重脂多糖所致大鼠急性肺损伤,而谷氨酰胺对此有较明显的防护作用。