抗人胃癌单克隆抗体的研究——Ⅱ.抗人胃癌单克隆抗体(GMG_1系列)的反应性鉴定

用国内胃癌细胞株GGC-81-40免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了一系列抗人胃癌细胞的McAb。经IF和ABC染色法进行免疫组织化学鉴定,按其反应特性可分为三种类型:(1)只与靶细胞反应,基本上不与其它组织细胞反应。(2)不但与靶细胞反应也与所有正常及异常组织反应。(3)与靶细胞反应还与某些癌瘤等组织细胞反应,但与绝大多数正常组织细胞不反应。对于第三类抗体进行了吸收试验;证明经靶细胞吸收后反应强度明     

标记抗人肝癌单克隆抗体SPIO对荷瘤裸鼠的定位诊断作用

目的：探讨标记抗人肝癌单克隆抗体超顺磁性氧化铁粒子（ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ）对荷瘤裸鼠模型的诊断作用。材料和方法：用过碘酸盐法将Ｈａｂ－１８ 抗人肝癌单抗标记到ＳＰＩＯ粒子;建立裸鼠载瘤模型（ｎ＝１２ 只）。结果：实验组（ｎ＝ ８）从尾静脉注入０．３ ｍ ｇ Ｆｅ／２０ｇ 的ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ,给药后２４ 小时成像观察到裸鼠瘤结均有选择性信号下降,对照组（ｎ＝ ４）在注射ＬｇＧ－ＳＰＩＯ后未见明显信号改变。结论：ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ磁共振免疫成像对肝癌的早期定性诊断有较高价值。     

抗人粒细胞单克隆抗体的特异性鉴定及其核素99Tcm标记

目的以人粒细胞免疫Balb/c小鼠制备抗粒细胞单克隆抗体(mAb),并对其组织特异性进行鉴定,同时评价其在兔炎症模型中的显像价值。方法常规免疫制备抗粒细胞mAb经间接ELISA法、流式细胞仪和SP免疫组化进行特异性鉴定。99Tcm间接法标记SZ102。兔左下肢炎症模型制备完毕,耳缘静脉注入99TcmSZ1024h后探讨其在兔炎症模型中的体内分布。结果制备抗粒细胞mAbSZ102,其免疫球蛋白亚类为IgG1。流式细胞仪测定表明其与外周血粒细胞、单核细胞呈强阳性反应,而与淋巴、红细胞、血小板不反应,并且与正常骨髓中较成熟粒细胞、单核前体起反应。SP免疫组化法检测正常人组织中SZ102抗原分布,显示抗原表达在肝、肺、脾、胸腺、淋巴结组织中的巨噬细胞表面。注射99TcmSZ1024h后,离体炎症肌肉/血液和对侧正常肌肉/血液单位质量放射性比值分别为0.22±0.02和0.02±0.01。结论SZ102是一株稳定高效价抗粒细胞杂交瘤细胞株,99TcmSZ102具有活体内炎症定位导向能力,对隐匿性炎症的放免显像可能有一定的诊断价值。     

抗人胃癌单克隆抗体的制备

分别以SGC-7901胃癌细胞以及MKN-28胃癌细胞无血清培养上清免疫Balb/c 小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。此外,尚取荷胃癌裸小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。经筛选及克隆化后获得六株分泌胃癌单抗的杂交瘤(RWS3,RWS4,RSD5,RSC12,RNE8,RNF11)。     

抗人胃癌单克隆抗体的研究——Ⅰ.分泌抗人胃癌细胞单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用国内胃癌细胞株GGC-81-40免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag融合,经ELISA法和IFS法筛选,获得了5个产生抗人胃癌细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系。这些杂交瘤细胞系具有双亲代生物学性质,现已传代培养一年多,染色体数为103～105条,免疫球蛋白分型:二株分泌的单抗为IgG_1,其它三株为IgM。它们均分泌高效价的抗体,ELISA测定效价为10~(-5) ,IFS效价为1:500;细胞结合试验与GGC-81-40呈现强阳性反应,但不与正常骨髓细胞,扁桃体T、B细胞以及外周血细胞反应。     

抗人胃癌单克隆抗体的制备及反应性研究

用国内胃癌细胞系GGC-81-40免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag~(14)融合,经ELISA和IF法筛选,获得了5株产生抗人胃癌单克隆抗体的杂交瘤细胞系,称GMG_1系列(GMG_1:1D_(1-1);1D_(1-2);1A_2;4D_6;5B_(10))。现已传代培养     

抗人黑(素)瘤单克隆抗体免疫组化的研究

本文应用3种小鼠抗黑色素瘤单克隆抗体(McAbs)Leo Me13、HB 59、HB60和APAAP免疫组化染色对5种黑(素)瘤细胞系、7种其它肿瘤细胞系以及黑(素)瘤和各种皮肤色素痣的病理标本进行了研究。结果表明,黑(素)瘤细胞系均呈阳性反应,其它肿瘤细胞系仅1种呈弱阳性反应;黑(素)瘤病理标本的阳性率为93％,皮肤色素痣的阳性率为11％。提示这3种McAbs特异性较高。本文所获结果可为黑(素)瘤抗原的基础研究和临床病理诊断提供实验依据。     

抗胃肠粘液骨架蛋白单克隆抗体和移植人胃癌裸鼠体内示踪定位分布研究

应用人工合成人胃肠粘液骨架蛋白之序列七肽片段,评价了系列抗胃肠癌单抗之抗原决定簇,结果首次发现一个抗人胃肠粘液的单克隆抗体,其抗原决定簇为富含苏氨酸的粘液分子骨架蛋白的七肽片段ITTTT-TV。并进一步采用2株组织类型不同的移     

胃癌单克隆抗体的免疫电镜定位研究

采用免疫电镜技术对作者制备的3种单克隆抗体(mAb)3G9、3H11及PD4在胃癌细胞MGC803及BGC823上的定位进行了研究。经Mu IgG-Sepharose CL-4B亲和层析纯化的山羊抗小鼠IgG(GαMu IgG)以及GαMuIgG与胶体金复合物(GαMu IgG-Au)均     

111-IN标记单克隆抗体对恶性肿瘤的放射免疫定位诊断

单抗2C10为一株抗结直肠癌抗体,与卵巢癌和胃癌有交叉反应。以放射性核素111-In标记,裸鼠实验显示良好的肿瘤定位效果。临床应用共检查病人15例。其中结直肠癌11例,卵巢癌2例,胃癌2例。肿瘤类型以腺癌为主。其中10例经手术、病理证实,肿瘤最大体积为10×8×7cm(卵巢癌):最小体积为3×3×2cm(胃癌)和3×3×5cm(直肠癌)。另外5例经纤维内窥镜、B超及X光证实。病人检查前一般行肝、肾功能及常规检查和血清CEA水平测定。注射前作过敏皮试并予抗过敏药防止过敏反应。 药检合格之2C10无菌条件下标记111-In,以2～3mCi/1mg的剂量加入100ml生理     

DTPA连接的~(114m)In标记的抗人纤维蛋白原单克隆抗体的化学研究

本文研究了用DTPA环状酸酐法将DTPA与小鼠抗人纤维蛋白原单克隆抗体的连接反应,探讨了连接反应请条件对抗体抗原结合能力及标记率的影响,并且制备了其In~(3+),~(114m)In的标记物。DTPA环状酸酐(cDTP AA)通过一步简单的有机反应而制得,产物     

~(181)I-抗人肝癌细胞系(BEL-7402 )单克隆抗体在裸鼠人肝癌模型中的定位

肿瘤导向是当前十分活跃的研究领域,近来,随单克隆抗体技术的发展,用放射性核素标记抗肿瘤单克隆抗体作肿瘤定位及治疗已引起普遍的关注。 我们自1986年起,用~(131)I标记抗人肝癌细胞系(BEL-7402)单克隆抗体(Hepama I),     

抗CEA单克隆抗体-~(111)In标记及其临床应用

本研究利用放射性核素~(111)In标记抗CEA单抗进行放射免疫显像,并将抗体标记技术药盒化.同时对药盒稳定性、安全性及与肿瘤细胞结合力等方面进行了研究。结果表明,本药盒可供放射免疫显像研究。 利用此药盒对9例临床上难以诊断的消化系统病人进行了放射免疫显像。与病理对     

抗人肺癌单克隆抗体的研究

用人肺腺癌LTEP-a_2细胞免疫BALB/c小鼠取其脾细胞与Sp/0骨髓瘤细胞融合,用间接免疫荧光染色法在a_2癌细胞及人胚肺二倍体纤维母细胞2BS上进行筛选,得到2A_7、2E_9、4F_2、5F_(11)四个杂交瘤,这些抗体主要识别人肺癌细胞,与2BS及包括四种不同ABO血型的10个人红血球和淋巴细胞无反应,用ABC免疫酶染色试验检查了四种单克隆抗体与     

鼠抗人胃癌单克隆抗体血清学检查在胃癌普查中的意义

为了防治胃癌,对58204人进行胃癌普查。本组报告经初级筛选后的4810人。采用放射免疫学技术,使用鼠抗人胃癌单克隆抗体(MG-单抗),检查血清中的胃癌相应抗原(MG-Ags),对阳性者中的340例,作胃镜检查。在胃癌普查中,采用MC-单抗检测血清中MG-Ags的出现,浓度高低,持续时间,即可在分子水平上了解癌变过程,而确定出易患人群,并可采取措施,阻断癌变的发展,达到一级预防的目的。本组慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎及疾病     

~(125)Ⅰ标记抗MIF单克隆抗体制备及其生物学活性的研究

目的:建立125Ⅰ标记抗巨噬细胞移动抑制因子(MIF)单克隆抗体(mAb)方法,探讨其在体内外生物学活性。方法:①利用Iodogen法,Na125Ⅰ标记Anti-mMIF mAb,用Sephadex G-25柱凝胶过滤层析法分离纯化,测定其标记率。纸层析法测定放射化学纯度和稳定性。②采用ELISA和改良MMI鉴定其免疫活性及生物学活性。③观察小鼠体内的生物学分布情况。结果:①标记的最佳条件为Iodogen 40~100μg、抗体20~50μg[Iodogen(m)∶抗体(m)=2∶1],加入Na125I15~30 MBq、室温反应10~15 min,标记率为(90.40±3.34)%,放射化学纯度为(97.60±1.14)%,比活度为12.2~26.0 MBq/μg;标记物4℃条件下放置3周后放射化学纯度仍为90.36%。②125Ⅰ-mMIF mAb能与抗原MIF特异性结合,较好地保持其免疫活性及生物学活性。③体内生物学分布,在肺、肝、脾、肾内具有较高的放射性计数。结论:Iodogen法获得高标记率和放射化学纯度的125Ⅰ-mMIF mAb,具有很好的体外稳定性,其在体内外保持较好的生物学活性。为进一步应用125I-mMIF mAb进行放射免疫显像和靶向治疗奠定了实验基础。     

抗旋毛形线虫单克隆抗体的制备和抗原定位研究(文摘)

作者用旋毛形线虫感染期幼虫免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与Sp2/0骨髓瘤细胞进行杂交。融合率92.1％,抗体阳性率16.6％,通过克隆化已初步建立分泌抗幼虫可溶性抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞18株。采用间接过氧化物酶法,以证实能特异地识别此虫感染期幼虫抗原组分的3株单克隆抗体定位抗原,揭示相关抗原组分主要位于幼虫的角皮层、杆状体,其次为肠道。     

抗人CTLA-4单克隆抗体的制备及其生物学活性研究

以我室用基因工程表达的人CTLA 4蛋白[1,2 ] 作为免疫原 ,采用细胞融合、ELISA法和免疫印迹等方法制备并筛选到鼠抗人CTLA 4的单克隆抗体 ,并以单向混合淋巴细胞刺激反应 (MLR )测定了抗人CTLA 4抗体对淋巴细胞增殖的影响。结果表明我们得到了 4株单克隆抗体 (1H7、 2G2、 2F11、 3A7) ,它们均可与近似天然构象的人CTLA 4Ig融合蛋白结合 ,又可与大肠杆菌表达出的经复性后的人CTLA 4蛋白结合 ,并且可分别识别人CTLA 4Ig融合蛋白不同抗原决定簇。其中一株(3A7)既和近似天然构象的蛋白结合又可与变性的蛋白结合 ,并具有显著阻断CTLA 4的抑制性免疫信号传递 ,促进同种异体混合淋巴细胞增殖的功能     

抗合胞病毒单克隆抗体用于(IFA)临床快速诊断的研究

本文以8株合胞病毒单克隆抗体(以下简写RSV-McAb)和北京地区近三年RSV地方株结合,选其中7株敏感性、特异性高的McAb进行混合,以RSV多价动物血清(以下简写RSV-Poly Ab)和双份血清学作对照,用免疫间接萤光法(IFA)检测100例患儿鼻咽部脱落细胞内的RSV-Ag。证实了McAb对RSV快速诊断敏感性高,特异性强,具有极大实际应用价值。它可以完全作为一种RSV快速诊断新试剂来代替Poly Ab。     

一株抗人血小板第4因子单克隆抗体(SZ-95)的特异性鉴定

目的 研究一株新制备的抗人血小板第4因子（PF4）单克隆抗体（mAb)SZ－95的抗原表位和对PF4结合肝素功能的影响。方法 通过间接ELISA、Western blot以及肝素－PF4复合物ELISA研究SZ－95所识别的抗原决定簇和其对PF4生物学功能的影响。结果 这株特异性识别人PF4的mAb不识别与PF4高度同源的β－血小板球蛋白（β－TG），以及包括PF4分子中部大部分β折叠的合成多肽（P34－58）。并且，抗体结合肝素－PF4复合物的数量随复合物中的肝素量增加而减少。结论 我们推测SZ－95识别的抗原表位可能位于人PF4 N末端的可变区域或者C末端α螺旋。并且mAb结合肝素－PF4复合物的肝素剂量依赖性改变，说明SZ－95识别的抗原表位与肝素与PF4的结合位点有关，可能影响PF4中和肝素的功能，有助于PF4结构和功能的进一步研究。