VERO细胞狂犬病疫苗免疫效果的观察

目的 比较氢氧化铝佐剂和无佐剂Vero细胞狂犬病疫苗免疫效果的影响。方法 以常规免疫程序用氢氧化铝佐剂与无佐剂两种疫苗分别免疫豚鼠。并分别于3、7、14、30、60、90、180和360d采血并以小鼠中和法测定不同时间抗体水平。结果 氢氧化铝佐剂组和无佐剂组，抗体出现时间不一致，无佐剂组稍早，阳转率于第3d已为5．0％，而佐剂组为0，两组于第60d皆达到100．0％；抗体水平两组也稍有差别，无佐剂组较高，但比较差异无显著性，在第60d达到高峰，第90d逐渐下降。结论 初步显示，无佐剂Vero细胞狂犬疫苗免疫效果较佐剂组稍好。     

HBV基因疫苗诱导正常及HBV转基因小鼠产生体液免疫应答

目的:用乙型肝炎病毒(HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答,以探讨其预防及治疗HBV慢性感染的可行性.方法:将HBV S2.S基因的真核表达载体pCMV-S2.S(PS)和相应的空载体pcDNA3.0分别免疫正常C57BL/6小鼠及同一品系HBV转基因小鼠(n=5).每只小鼠肌内注射纯化质粒100 μg.用ELISA方法检测小鼠血清抗HBs和抗preS2效价及HBV转基因小鼠血清HBsAg和HBeAg的水平.注射基因疫苗后第8周,活检取转基因小鼠肝脏组织,制备石蜡切片并行H-E染色,光镜下观察其病理改变.结果:PS诱导正常及转基因小鼠产生了抗HBs及抗preS2,并且抗preS2的出现早于抗HBs约1～2周.PS免疫8 周后,转基因小鼠血清HBsAg和HBeAg为阴性.注射基因疫苗后第8周病理检查转基因小鼠肝脏组织,肝细胞出现程度不同的广泛浊肿和水样变性,而相应的对照组无明显改变.免疫前后肝组织内单个核淋巴细胞数量无显著变化.结论:研究表明HBV中蛋白基因疫苗能够有效诱导HBsAg特异性的体液免疫应答,能够清除转基因小鼠血清中的HBsAg和HBeAg;初步的实验结果为研制治疗HBV慢性感染的基因疫苗提供了依据.     

乙肝病毒adr型基因疫苗诱导小鼠体液免疫应答

目的：构建乙肝病毒adr型基因疫苗pCMVS2-S,观察其免疫小鼠的特异性体液免疫应答。方法：将构建的乙肝病毒基因疫苗注射于C57BL/6小鼠胫骨前肌肉,运用ELISA检测不同时间小鼠血清中抗HBs抗体。结果：注射基因疫苗1周后,血清中抗HBs抗体转阳,1个月后抗体达到高峰,并以高水平维持至少2个月。结论：基因疫苗pCMVS2-S诱导C57BL/6小鼠产生较好的体液免疫应答。     

Eg95基因疫苗不同免疫途径的体液免疫应答比较

目的：用构建的细粒棘球蚴95(Eg95)抗原基因真核表达重组质粒pcDNA3-Eg95．直接免疫小鼠，观察其所诱导的体液免疫反应。方法：碱裂解法大量提取重组质粒。采用肌肉注射、静脉注射、皮下注射3种免疫途径和不同剂量的重组质粒免疫小鼠．用ELISA法测定小鼠血清抗体滴度。结果：在相同剂量下，重组质粒免疫小鼠刺激机体产生抗体反应强度的免疫途径依次为肌肉、皮下和静脉注射，阳性反应率由高到低依次为皮下、肌肉和静脉注射。以肌肉注射方式免疫小鼠的抗体反应维持时间较长，主要产生IgG2a为主的抗体。结论：用pcDNA3-Eg95重组质粒DNA免疫小鼠可以产生体液免疫应答。     

HCV核心蛋白DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫应答

目的：观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体液免疫应答的效力，为研制应用于人类的ＨＣＶ ＤＮＡ疫苗提供实验依据。方法：将全长ＨＣＶ核心蛋白基因插入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３．１，构建ＨＣＶ核心蛋白重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１ＨＣＶｃｏｒｅ，肌注ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＨＣＶ抗体。以此重组质粒转染小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以ＨＣＶ抗体阳性小鼠血清为捕获抗     

纯化狂犬病疫苗免疫失败1例

宜丰县自1981年用原代地鼠肾组织培养疫苗取代存在变态反应的羊脑狂犬病疫苗以来，该疫苗副反应虽然比后者较小，但保护效价仍然较低，在1981-1988年间，曾出现5例免疫失败病例。2000年改用纯化狂犬病疫苗以来，免疫失败病例相应减少，2002年8月，作者发现首例，现报告如下。     

乙肝病毒表面抗原基因疫苗诱导小鼠细胞及体液免疫应答的 …

为观察乙肝病毒ＨＢｓＡｇ基因疫苗免疫小鼠后的细胞及体液免疫应答,将该疫苗定向克隆于质粒ｐｅＤＮＡ３巨细胞病毒启动子下游,构建能在真核细胞内表达的重组基因疫苗ｐｃＤＮＡ－ＨＢｓＡｇ。将此疫苗通过多点肌肉注射免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠后第六周,实验组小鼠均出现抗－ＨＢｓＩｇＧ阳性,其抗体水平明显高于对照组,同时Ｔｈ１免疫应答相关的细胞因子ＩＬ－２及γ干扰素水平显高于对照组,表明本文构建的基因疫苗ｐｃＤＮＡ３     

冻干Vero细胞狂犬病纯化疫苗临床效果观察

目的观察国产冻干Vero细胞狂犬病纯化疫苗临床应用的免疫效果和安全性。方法选择犬致伤者240例．随机分为试验组和对照组。实验组接种冻干Vero细胞狂犬病纯化疫苗，对照组接种地鼠肾狂犬病纯化疫苗。两组人群均按照狂犬病疫苗暴露后常规免疫程序进行接种，于全程接种后15d检测中和抗体，并观察副反应。结果实验组抗体阳性率为96．7％，明显高于对照组的90．0％（P〈0．05）；副反应发生率为10．8％，明显低于对照组的21．7％（P〈0．05）。结论冻干Vero细胞纯化疫苗抗体阳转率高、副反应发生率低，临床应用优于地鼠肾纯化疫苗．适宜推广使用。     

CpG 2006佐剂对呼吸道合胞病毒重组疫苗诱导体液免疫应答的作用

目的研究CpG 2006佐剂对呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白疫苗诱导的体液免疫应答的作用。方法重组RSV疫苗G1F/M2与CpG佐剂混合,鼻腔或腹腔注射免疫BALB/c小鼠3次,最后一次免疫2周后取血,分离血清,用间接ELISA检测特异性抗体IgG、IgG1和IgG2a水平。结果鼻腔免疫途径:CpG佐剂组诱导的IgG1均显著低于无佐剂组(t=3.365,P0.05),而IgG2a显著高于无佐剂组(t=2.675,P0.05),佐剂组IgG1/IgG2a的比值(1.05)明显低于无佐剂组(1.25)。腹腔免疫途径:CpG佐剂组的IgG1明显低于无佐剂组(t=6.869,P0.05),而IgG2a显著高于无佐剂组(t=2.893,P0.05),且前者IgG1/IgG2a的比值(0.97)明显低于后者(1.30)。结论CpG 2006作为G1F/M2的佐剂,对体液免疫应答无增强作用,但可以调节免疫应答的类型,使Th1型应答升高,Th2型应答降低。     

狂犬病疫苗细胞免疫作用研究

目的:观察狂犬病暴露后接种狂犬疫苗对机体的细胞免疫作用。方法:狂犬病暴露者接种狂犬病疫苗后,检测狂犬病毒抗体的同时,运用淋巴细胞转化试验检测自发淋巴细胞转化率和狂犬病疫苗剌激后的狂犬病毒淋巴细胞转化率,以后者减前者计算出狂犬病毒特异性淋巴细胞转化率。结果:狂犬病疫苗接种后,抗体效价达到>1∶5的100例中,76例同时产生细胞免疫力(即狂犬病毒特异性淋巴细胞转化率>5%);而抗体效价等于1∶5的4例和未产生抗体的35例中,均未产生细胞免疫力。结论:狂犬病暴露者接种狂犬病疫苗后,并非都能同时产生体液和细胞免疫力,不能产生细胞免疫力者,其总体细胞免疫功能亦偏低。     

狂犬疫苗接种后抗体水平及免疫效果观察

目的了解狂犬疫苗的免疫效果、抗体产生的情况和可能影响的因素。方法采用ELISA法对2 413例被犬、猫致伤者注射狂犬疫苗后14d的血清标本进行抗体检测。结果接种疫苗后抗体阳性率为97.1%,年龄在70岁~组的抗体阳性率最低,为94.1%;全程注射狂犬疫苗者抗体阳性率为95.8%,未全程注射者阳性率为89.2%,同时注射狂犬免疫球蛋白者抗体阳性率为100.0%,各组间差异有统计学意义（χ2=45.49,P〈0.05）。女性阳性率高于男性,差异有统计学意义（χ2=13.58,P〈0.05）;接种进口疫苗者1 242例,阳性率95.4%,国产疫苗者998例,阳性率98.8%,进口疫苗和国产疫苗混合173例,阳性率99.0%,差异有统计学意义（χ2=24.31,P〈0.05）。结论对被犬、猫致伤者及时接种狂犬疫苗可获得有效地保护。严重暴露者狂犬免疫球蛋白和疫苗联合免疫可获得最佳的免疫效果。     

人用狂犬病纯化疫苗免疫效果观察

目的：评价人用狂犬病纯化疫苗的免疫效果。方法：按年龄及干扰因素的暴露情况分组，对狂犬病纯化疫苗全程免疫检测狂犬病毒抗体。结果：狂犬病纯化疫苗免疫后抗体阳性率为96．43％，年龄与酸辣、酒茶、抗菌素等干扰因素对抗体阳转率的作用不明显。结论：注射狂犬病纯化疫苗是预防狂犬病行之有效的措施。     

新型呼肠病毒S基因DNA疫苗在小鼠体内的免疫原性

目的 探讨新型呼肠病毒R4株S片段免疫小鼠后引发的免疫应答。方法 构建4个不同S基因节段的重组真核表达质粒，并免疫小鼠；ELISA检测血清以研究R4特异性抗体升高水平，并对其抗体亚型进行鉴定；ELISPOT检测小鼠淋巴细胞INF-γ的表达情况。结果 与对照组相比，4个重组质粒免疫的小鼠血清都有明显的R4特异性抗体升高，尤其以S1和S3基因免疫后抗体水平较高，且均以IgG2a占绝对优势；S1基因免疫组小鼠的细胞免疫应答最强。结论 S1基因重组质粒免疫小鼠后可同时引发较强的体液免疫和细胞免疫应答，是较为理想的疫苗备选基因片段。     

国产和进口人用纯化Vero狂犬疫苗的免疫效果研究

目的评价目前我国常用的国产狂犬疫苗和进口人用纯化Vero狂犬疫苗的免疫效果,为临床选择经济有效的狂犬疫苗提供依据。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测分别经长春、辽宁和法国维尔博三种狂犬疫苗全程免疫接种的300名暴露后接种者的血清狂犬病毒中和抗体,分析比较其抗体阳转率、实际抗体水平及接种副反应。结果排除年龄、免疫-检测时间间隔等干扰因素的影响后,三种人用纯化Vero狂犬疫苗不仅抗体阳转率(分别为93.0%,93.2%,86.7%)和抗体浓度(分别为16.21±5.27,15.93±4.35,15.89±6.17IU/ml)没有统计学差异,在接种副反应方面的差别也没有显著性。结论国产与进口人用纯化Vero狂犬疫苗的免疫效果具有较好的可比性,因其价格低可以在临床推广使用。     

胸腺肽增强狂犬病疫苗免疫效果的研究

目的　探索胸腺肽作为人用纯化Vero -细胞狂犬病疫苗佐剂的可能性。　方法　分为单针和多针狂犬疫苗免疫方案。单针免疫是用狂犬疫苗 1支加胸腺肽 1针免疫 ;多针免疫按常规五针免疫程序 (即 0、3、7、14、2 8d各注射1针 ) ,加胸腺肽组按三针免疫程序 (即 0、7、2 8d各注射 1针 ) ,实验小白鼠每只均以狂犬病疫苗 0 .2ml与胸腺肽混合后肌肉注射。　结果　单针免疫加入胸腺肽 ( 2mg/只 )后抗体效价高且抗体产生时间早 ,抗体水平显著高于疫苗组 (P <0 .0 1)。而且加入胸腺肽 ( 6mg/只 )后免疫三针可达到五针常规疫苗免疫效果。　结论　胸腺肽作为人用纯化Vero -细胞狂犬病疫苗的佐剂可减少免疫次数。     

Specific humoral immune responses in rhesus monkeys vaccinated with the Alzheimer’s disease-associated β-amyloid 1-15 peptide vaccine

Background Alzheimer‘ s disease(AD) is a neurodegenerative disorder characterized by overproduction of β-amyloid (Aβ) , with the subsequent pathologic deposition of Aβ which is important for memory and cognition. Recent studies showed murine models of AD and AD patients inoculated with Aβ1-42 peptide vaccine had a halted or delayed pathological progression of AD. Unfortunately, the clinical phase Ⅱ a trial of Aβ1-42 peptide vaccine (AN1792) was halted prematurely because of episodes of menigoencephalitis in 18 of the vaccinated patients. The vaccination of BALB/c or Tg2576 transgenic mouse with Aβ1-15 peptide vaccine is safe and the immune effects are satisfactory. This study further characterizes the specific humoral immune responses in adult rhesus monkeys induced by Aβ1-15 peptide vaccine. Methods Five male adult rhesus monkeys were injected intramuscularly with Aβ1-15 peptide vaccine at baseline and at weeks 2, 6, 10, 14, 18 and 22. The titers and IgG isotypes of the antibody against Aβ1-42 in serum was measured by Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA). The specificity of the antibody against Aβ1-42 was determined by Western blot. The Aβ plaques in Tg2576 transgenic mouse brain were stained with the antiserum using immunohistochemistry method. Results At the eighth week after the vaccination, antibody against Aβ1-42 began to develop significantly in serum. The titers of the antibody increased following vaccine boosted and reached 1 : 3840 at the twenty-fourth week, then decreased after the termination of inoculation. The IgG1 was accounted for the highest level in the antiserum pool. The antibody against Aβ1-42 showed high specificity. The Aβ plaques in Tg2576 transgenic mouse brain were labeled with the antiserum. Conclusion Aβ1-15 vaccine can induce vigorously specific humoral immune resoonses in adult rhesus monkey.     

HBV adr亚型基因疫苗诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答

目的：构建乙型肝炎病毒（HBV)adr亚型基因疫苗pCMV-S2.S(PS），观察其诱导小鼠所产生的特异性体液和细胞免疫应答。方法：将PS注射于C57BL／6小鼠胫骨前肌内，应用ELISA方法检测不同时间小鼠血清中抗HBs抗体以及采用^51Cr释放实验检测淋巴细胞杀伤功能。结果：注射基因疫苗1周后，血清中抗HBs抗体转阳，4周后抗体达到高峰，并以高水平维持至少8周；第12周时PS诱导小鼠产生了良好的HBV特异的细胞免疫应答（P＜0.05）。结论；所构建的HBV adr亚型基因疫苗PS能够诱导小鼠产生较好的体液和细胞免疫应答。