铁皮石斛多糖的凝胶特性表征

为探究不同因素对铁皮石斛多糖凝胶特性的影响,研究多糖浓度、成胶温度、碱和离子对铁皮石斛多糖凝胶特性、持水性、乙酰基含量等的影响,通过差示扫描量热仪(DSC)、傅里叶红外光谱仪(FTIR)、X射线衍射仪(XRD)对多糖的性质进行表征。结果表明,多糖质量浓度从5 mg/mL增加到25 mg/mL时,其凝胶强度从70.87 g增加到206.39 g,持水性从78.52%增加到94.25%;在温度达到40 ℃时,凝胶强度达到最大为129.29 g,对应的持水性也最大为90.58%;随着不同碱(NaOH、Na2CO3、KOH、K2CO3)质量浓度的升高,凝胶强度均先持续增加后降低,凝胶的持水性均逐渐降低,在同等碱添加量条件下,形成的凝胶强度大小顺序为Na2CO3>K2CO3>NaOH>KOH;电解质方面,钠离子可以提高凝胶的强度和持水性,而尿素会显著降低凝胶的强度和持水性。FTIR图谱表明:乙酰基的吸收峰强度随Na2CO3添加量的升高而降低。多糖的脱乙酰程度与碱含量有关。XRD结果表明:其衍射峰强度与碱的添加量有关,表现为碱添加量越高,衍射峰越强。DSC结果表明:随着碱量的增多,水吸收峰的峰值温度升高,峰的热焓值增大。凝胶形成机理可能与乙酰基的水解促进多糖分子间的相互作用有关。     

铁皮石斛茎部和叶部多糖的性质和活性

铁皮石斛是一种含有多种活性物质的名贵中药,目前主要利用其茎部进行活性和结构等方面的研究。作者通过研究和比较铁皮石斛茎部和叶部中的各种物质的质量分数和分布,发现茎部与叶部中物质组成相同,但茎部中多糖和石斛碱质量分数分别是叶部的2.71和3.02倍,而脂溶性成分和粗蛋白在叶部的质量分数要明显高于茎部。将提取后的茎部和叶部多糖进行分析,发现两种多糖的单糖组成具有较大差异,茎部多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成,摩尔比为3.07∶1,叶部多糖主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为8.81∶1∶0.57∶0.37。此外,茎部和叶部多糖特性粘度分别为56.26、8.05 dL/g,与之对应的相对分子质量分别为1 207000和318 000,为高相对分子质量高粘度的生物大分子。在抗氧化活性实验中,清除DPPH自由基的结果显示,叶部多糖明显优于茎部多糖,表明其具有较高的抗氧化应用价值。在对提取条件中的温度、提取时间和料液比进行考察后,最终确定了茎部和叶部多糖提取的最优条件。     

铁皮石斛多糖分子量测定及其影响因素分析

目的:研究了铁皮石斛多糖的分子量及其主要的影响因素。方法:对铁皮石斛多糖进行了三次重复的提取分离,经过纤维素凝胶树脂DEAE-52和葡聚糖凝胶Sephacryl S-300柱进行纯化,得到一个多糖片段WDOPA并采用高效凝胶渗透色谱法进行多次的分子量测定。采用单因素比较的方法,分别用加热和超声的手段处理铁皮石斛多糖,考察不同的加热温度、时间及不同的超声功率、时间对铁皮石斛多糖分子量的影响。结果:该WDOPA的分子量为776054 u,RSD在10%以内,加热的温度及时间对多糖分子量的影响不明显,而超声功率、超声时间的不同对铁皮石斛多糖分子量影响较大,随着超声功率的加大及时间的延长,分子量逐渐变小。结论:该实验方法可用于测定多糖,且超声可用于改变铁皮石斛多糖的分子量,应用于筛选不同分子量的多糖片段。      

铁皮石斛多糖的微波辅助提取工艺研究

优化铁皮石斛多糖的提取工艺。分别考察单因素料液比、微波功率、提取时间和提取温度的影响,并在单因素基础上进行了四因素三水平正交设计试验。结果表明,铁皮石斛多糖的最佳提取工艺为料液比为1∶45(g/mL),微波功率为900 W,提取时间30 min,提取温度95℃。在最佳条件下,铁皮石斛多糖的提取率达到9.77%。该提取工艺简单、快速、高效,可以应用于从铁皮石斛中提取多糖物质。     

铁皮石斛快繁体系多糖积累的研究

为获得繁殖快且药用价值高的铁皮石斛,以多糖含量为筛选指标,选择原球茎为载体,运用Plackett-Burman设计从7种影响原球茎多糖含量的培养基成分中确定硝态氮/铵态氮分子比、蔗糖浓度和苄氨基腺嘌呤(BA)浓度为其中最重要的影响因素。进一步设计最陡爬坡实验逼近中心点并进行Box-Behnken Design响应面方法分析,得出回归模型存在的最优结果为:当硝态氮/铵态氮分子比、蔗糖浓度、BA浓度分别为1.90:1,29.1 g/L,1.65 mg/L时,多糖含量由优化前的25.36%提高到了33.95%,优化效果显著。     

铁皮石斛多糖不同级分的制备、性质分析及免疫调节活性比较

目的:制备铁皮石斛多糖(DOP)的不同分级组分,比较其理化性质及体外免疫调节活性的差异,并对多糖结构特征与活性的关系进行初探。方法:采用分级醇沉的方法获得铁皮石斛多糖不同分级组分,并对各组分的糖、糖醛酸、蛋白质含量、单糖组成、分子量进行分析。以巨噬细胞RAW264.7为研究模型,比较DOP不同分级组分的体外免疫调节活性。结果:DOP和四个组分(F30、F40、F50和F50S)均为中性糖,各组分糖醛酸含量较DOP均有所降低,F50S蛋白质含量最高。DOP、F30、F40、F50和F50S的平均分子量分别为262.4、314.5、248.3、202.9和136.2 kDa。DOP、F30、F40、F50和F50S均主要由甘露糖和葡萄糖组成,其摩尔比分别为5.16:1、3.67:1、4.16:1、5.62:1和5.86:1。DOP和各分级组分均可显著(p<0.05)增强RAW264.7巨噬细胞的增殖能力、NO的释放以及TNF-α和IL-1β的分泌。结论:铁皮石斛多糖及其分级组分均有免疫调节活性,且分子量较小的免疫调节活性较强。     

不同生长年限铁皮石斛多糖含量与特性分析

采用凝胶渗透色谱方法测定多糖分子质量,柱前衍生化高效液相色谱法测定多糖的单糖组成,研究不同种植年限铁皮石斛多糖结构组成的差异及抗氧化能力。结果表明,5?a生铁皮石斛多糖含量最高,为238.60?mg/g,3?a生次之,为232.74?mg/g;4?a生铁皮石斛主要多糖分子质量高达1?383?kDa,3?a生次之,为1?046?kDa;1?a生铁皮石斛多糖的甘露糖比例最大,3?a生次之;3?a生铁皮石斛多糖的Fe3＋还原能力、羟自由基清除能力和总抗氧化能力最高。综合多糖含量和抗氧化活性测定结果得出,3?a生铁皮石斛品质最佳。     

铁皮石斛多糖提取及抗氧化活性研究

从铁皮石斛中提取多糖。以铁皮石斛多糖提取得率为评价指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化提取条件,得到最佳提取条件:提取时间2h,料液比1∶80,提取温度80℃,提取次数3次。此条件下铁皮石斛多糖提取得率为19.01%±0.49%。通过测定铁皮石斛多糖对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O~(2-))和羟基自由基(-OH)的清除能力及铁皮石斛多糖对三价铁的还原能力,对铁皮石斛多糖进行抗氧化活性研究。结果表明,铁皮石斛多糖对三种自由基均有较高的清除能力,且清除能力随多糖浓度的增加而增大,在多糖浓度为3mg/mL时,自由基清除率分别达到38.83%、56.25%、56.58%。同时铁皮石斛多糖具有较高的还原能力。铁皮石斛多糖具有较强的抗氧化活性。     

微波辅助酶法提取铁皮石斛多糖的工艺

目的微波辅助萃取与酶提取法相结合,对铁皮石斛多糖提取工艺进行优化。方法在最适作用温度下将果胶酶与铁皮石斛水溶液混合,结合微波萃取技术辅助提取铁皮石斛中多糖,并对微波提取温度,微波提取时间,铁皮石斛的固液比,乙醇浓度等提取条件用正交法进行优化,探索最佳提取条件。结果本研究得到铁皮石斛多糖提取的最佳工艺条件为:微波提取时间40 min,固液比1:40,微波提取温度70℃,乙醇浓度90%。结论在此条件下得到铁皮石斛多糖提取率为29.40%,高于单独使用微波辅助法或单独使用酶提取法的提取率。     

铁皮石斛多糖复合酶法提取工艺及其抗氧化性

探讨复合酶法提取铁皮石斛多糖的最佳工艺以及酶解多糖的抗氧化活性。利用单因素及L₁₈(3⁷)正交实验研究了酶配比、酶浓度、酶解温度、酶解时间、料液比及pH对多糖得率的影响,并通过清除DPPH、ABTS自由基研究酶解多糖的抗氧化活性。结果显示酶解最优条件:中性蛋白酶与纤维素酶比例为2:1,酶浓度为10%,料液比为1:120,酶解温度为55 ℃,pH6.0,酶解时间为3 h,在此条件下多糖得率为43.85%±1.8%;酶解多糖对DPPH、ABTS自由基的IC₅₀分别为1.331、0.467 mg/mL,说明酶解石斛多糖具有较好的抗氧化活性。     

铁皮石斛叶多糖对秀丽隐杆线虫体内抗衰老作用

目的：基于模式生物秀丽隐杆线虫（以下简称线虫）探究铁皮石斛叶多糖的抗衰老能力。方法：采用含不同质量浓度（0.5、1.0、2.0 mg/mL）铁皮石斛叶多糖的大肠埃希氏菌OP50菌液每天饲喂线虫,以饲喂大肠埃希氏菌OP50菌液组作为空白对照,观察铁皮石斛叶多糖对线虫寿命、生殖能力、运动能力和应激能力的影响,同时测定线虫体内活性氧水平及抗氧化酶的酶活力,分析铁皮石斛叶多糖对线虫体内抗氧化能力的影响。结果：与空白对照组线虫相比,在本实验考察的质量浓度范围内,铁皮石斛叶多糖均可延长线虫的寿命,提高其运动、应激能力,同时不会损害线虫的生殖能力,并且能有效提高过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力,显著降低线虫体内丙二醛含量（P＜0.05）。结论：铁皮石斛叶多糖可能通过提高线虫抗氧化酶活力及提高线虫抗应激能力,降低线虫体内活性氧水平并减缓细胞氧化损伤,进而发挥延长线虫寿命的功效。     

干燥温度对铁皮石斛颗粒中多糖溶出特性的影响

本研究旨在探明干燥温度对铁皮石斛颗粒多糖溶出率和溶出速度的影响及其机理。以新鲜铁皮石斛颗粒(直径5 mm×长5 mm)为原料,通过60～140℃热风干燥制备干燥铁皮石斛颗粒,于60℃水浴锅上进行铁皮石斛颗粒的多糖浸提,同时比较新鲜和干燥铁皮石斛颗粒的组织结构。新鲜铁皮石斛颗粒的多糖溶出率和多糖扩散系数分别为(46.65±0.86)%、1.02×10-2 mm2/h。在60～100℃的干燥温度范围内,干燥促进了铁皮石斛颗粒中多糖的溶出,干燥温度越低,对多糖溶出的促进作用越大。60℃干燥铁皮石斛颗粒的多糖溶出率和多糖扩散系数分别高达(64.54±1.27)%和1.94×10-2mm2/h。较低的干燥温度有利于铁皮石斛颗粒保持组织结构,减少材料收缩,减轻美拉德反应和焦糖化反应,同时产生一定的内部空隙,从而促进其多糖的溶出。本研究为铁皮石斛的干燥加工和利用提供了技术数据和理论依据。     

体外模拟3 种消化液对铁皮石斛多糖的消化作用

本实验采用人体胃肠道模拟系统,体外模拟3 种消化液对铁皮石斛多糖的消化行为。通过高效凝胶液相色谱、铁氰化钾法和高效离子交换色谱分别测定消化后多糖分子质量变化、还原糖含量和单糖组成的情况。结果表明：唾液不能改变铁皮石斛多糖的分子质量;模拟胃液和模拟胃肠液可以降低多糖的分子质量,同时提高多糖溶液中的还原糖含量,但没有检测到单糖。结论：在体外模拟胃肠道的消化体系中,铁皮石斛多糖的分子质量减小,糖苷键发生断裂,但没有游离单糖的释放。     

铁皮石斛多糖提取工艺优化及对果蝇抗氧化能力的影响

在低超声波功率250?W条件下,利用响应面法优化铁皮石斛多糖提取工艺。根据Box-Behnken设计原理对提取温度、液料比、超声波处理时间进行中心组合试验,结果表明最佳提取条件为提取温度41.74?℃、液料比50.26∶1（mL/g）、超声波处理时间28.65?min,此条件下铁皮石斛多糖得率为25.39%。比文献报道传统热水浸提最佳条件下多糖得率提高了18%,提取时间为传统热水浸提的1/4,且超声波辅助法并没有造成多糖清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基能力、清除羟自由基能力的降低。利用不同剂量铁皮石斛多糖喂食果蝇,结果表明中剂量组为最佳剂量组,雄果蝇超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力提高了30%,丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量降低了46%;雌果蝇CAT活力提高了60%,SOD活力提高了6%,MDA含量降低了20%,雌、雄果蝇的平均最高寿命提高了20%。     

霍山铁皮石斛多糖的脱蛋白工艺及结构分析

优选霍山铁皮石斛多糖脱蛋白工艺,并对其进行分离纯化及结构分析。以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,比较Sevag法、酶法及酶-Sevag法3种脱蛋白方法。结果表明,酶-Sevag法脱蛋白效果最佳,蛋白脱除率为81.58%,多糖损失率为15.63%。采用DEAE-52纤维素柱、Sephadex G-100凝胶柱分离纯化石斛多糖,得活性组分DOPA-1;采用紫外扫描光谱、高效液相色谱鉴定DOPA-1为均一多糖;采用气相色谱分析表明组分单糖由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成(各单糖的物质的量比为1∶0.42∶0.27);采用红外光谱和刚果红实验分析糖链结构表明,DOPA-1有典型的糖类特征吸收峰,存在β-D-甘露吡喃糖苷,且具有三股螺旋构象。     

铁皮石斛低温干燥抑制其水溶性多糖的聚合反应

本研究旨在探明干燥温度对铁皮石斛中多糖分子结构和抗氧化活性的影响。分别以新鲜铁皮石斛、以及60、100和140℃热风干燥铁皮石斛为实验材料,通过提取和纯化制备水溶性石斛多糖FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP,然后对石斛多糖进行分子结构分析和抗氧化活性测定。FDOP和60 DOP的还原端含量分别为1.82%、1.70%。然而,100 DOP和140 DOP的还原端含量分别降低至1.42%、1.10%。各铁皮石斛多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成,单糖摩尔比与干燥温度之间无明显的关联。随着干燥温度的升高,石斛多糖的分子量分布曲线向大分子量方向偏移。FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP中分子量103～106 u的多糖组分质量比分别为70.68%、67.70%、62.24%和58.11%。在UV光谱的280 nm处,FDOP、60 DOP、100 DOP没有吸收峰,而140 DOP有吸收峰。分子量103～106 u的多糖组分、还原端较多的铁皮石斛多糖具有较大的自由基清除能力和还原力。在铁皮石斛干燥中,60℃的温度有利于抑制多糖的聚合反应,保持多糖的抗氧化活性。本研究为石斛功能食品的生产及利用提供了技术数据和理论依据。     

长期食用铁皮石斛多糖对正常小鼠的影响

目的 考察长期食用铁皮石斛多糖(Dendrobium officinale polysaccharides,DOP)对正常小鼠的影响.方法 采用水提醇沉法提取铁皮石斛多糖.将16只雄性昆明(Kunming,KM)小鼠分为正常组及铁皮石斛多糖组,适应性喂养1周后,铁皮石斛多糖组小鼠按临床等效剂量灌胃8周,每天1次,每次0...     

铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响

采用水提醇沉法结合冻融制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同方法修饰的铁皮石斛多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫活性影响。结果表明,铁皮石斛纯多糖(purified polysaccharides of Dendrobium officinale,DOP)的中性糖含量较高,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为87.37%、3.19%和0.51%,羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量。红外分析结果显示硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰衍生物均已成功制备。高性能凝胶渗透色谱法测定铁皮石斛多糖分子质量为960 k D,硫酸化及羧甲基化修饰显著增加了其分子质量。体外实验研究发现,硫酸化和脱乙酰化修饰的铁皮石斛多糖能够增强RAW264.7巨噬细胞的免疫活性,而羧甲基化修饰则表现为显著的抑制作用,表明不是所有的官能团接枝改性都可以改善铁皮石斛多糖对免疫活性的影响。