葛根素抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的机制探讨

目的:探讨葛根素对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制.方法:不同浓度葛根素处理非小细胞肺癌A549细胞后,采用CCK-8法检测葛根素对非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制作用及半数抑制浓度(half-inhibitory concentration,IC50);显微镜下观察葛根素对非小细胞肺癌A549细...     

PAGE5对非小细胞肺癌细胞生长、凋亡和侵袭能力的影响

目的：探讨前列腺相关基因5（PAGE5）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响。方法：采用实时定量PCR和Western blot方法检测37例NSCLC及其癌旁组织中PAGE5的表达;采用MTT法、流式细胞术、Transwell以及Western blot法检测转染PAGE5 siRNA对A549和H1299细胞生长、凋亡、侵袭以及Bax、Bcl－2和MMP－2表达的影响。结果：在37．84％（14／37）的肺癌组织样本中PAGE5基因表达上调。转染PAGE5 siRNA的A549和H1299细胞生长无明显变化、细胞凋亡显著增加、侵袭能力显著下降（P＜0．05）,Bax蛋白表达显著上调,Bcl－2和MMP－2蛋白表达显著下调（P＜0．05）。结论：PAGE5可能通过调控Bax、Bcl－2及MMP－2蛋白的表达影响NSCLC细胞的生长、凋亡与侵袭,有望成为肺癌诊断标志物及潜在的治疗靶点。     

大肿瘤抑制激酶2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:检测大肿瘤抑制激酶2（large tumor suppressor kinase 2,LATS2)在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达水平,对NSCLC细胞增殖、侵袭和患者临床特征的影响。方法:收集2017年6月-2019年6月在我院接受手术治疗的NSCLC患者260例,免疫组化实验检测NSCLC和癌旁组织中LATS2的表达水平;卡方检验分析LATS2的表达与患者临床特征的关系;qRT-PCR检测NSCLC组织和癌旁组织中LATS2 mRNA的相对表达水平;转染实验将LATS2质粒转染至A549细胞中;MTT实验检测LATS2对A549细胞增殖的影响;Transwell实验检测LATS2对A549细胞侵袭的影响。结果:LATS2在癌组织中的表达低于癌旁组织;LATS2的高表达率为72.3%（188/260）,低表达率为27.7%（72/260）;LATS2高表达组与低表达组患者在性别、肿瘤类型、胸膜侵犯、血管侵犯、淋巴管侵犯和T分期之间无统计学差异,在年龄、肿瘤直径、淋巴转移和病理分级之间有统计学差异（P＜0.05）;NSCLC组织和细胞中LATS2 mRNA的相对表达水平显著低于癌旁组织和人正常肺上皮细胞HPAEpiC;LATS2质粒转染至A549细胞中使其表达水平升高,LATS2高表达组细胞的OD值和发生侵袭的细胞数显著降低。结论:LATS2与患者的年龄、肿瘤直径、淋巴结转移和病理分级有关,其表达水平增加后可显著抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭,有可能成为NSCLC治疗的新作用靶点。     

miR-21靶向Atg5对非小细胞肺癌A549细胞自噬调控促进细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究

目的  探讨miR-21通过靶向作用自噬相关靶基因5（Atg5）调控非小细胞肺癌（NSCLC）自噬的作用机制及其在A549细胞增殖、迁移及侵袭中的作用。方法  无义核酸序列NC（NC组）、miR-21 模拟物（miR-21 mimics组）、miR-21抑制物（miR-21 抑制组）分别转染A549细胞, CCK-8检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移能力; Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证miR-21和Atg5之间的靶向关系。Western blotting检测LC3B-II、p62和Atg5蛋白的表达。结果  与NC组比较,miR-21 mimics组细胞增殖、迁移、侵袭能力均上调,miR-21 抑制组细胞增殖、迁移、侵袭能力均下调（P＜0.05）。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-21显著抑制野生型Atg5 3’-UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性（P＜0.05）,但对突变型Atg5 3’-UTR的基因报告质粒与miR-21 mimics共转染之后,并未对荧光素酶活性产生影响。NC组LC3B-II蛋白表达量为1.24±0.059,低于miR-21 mimics组的1.98±0.077,高于miR-21抑制组的0.52±0.021（P＜0.05）;NC组p62蛋白表达量为0.62±0.021,高于miR-21 mimics组的0.45±0.020,低于miR-21抑制组的0.79±0.031（P＜0.05）;NC组Atg5蛋白表达量为1.17±0.025,高于miR-21 mimics组的0.38±0.014,低于miR-21抑制组的1.40±0.039（P＜0.05）。与NC组比较, 3-MA处理降低miR-21 mimics转染诱导的A549细胞增殖能力（P＜0.05）;划痕实验和Transwell实验表明,3-MA处理抑制了miR-21mimics转染诱导的A549细胞的迁移和侵袭,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论  miR-21靶向Atg5调控NSCLC自噬促进细胞增殖、迁移和侵袭。     

survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)中survivin表达水平及凋亡指数(AI)大小,探讨其临床病理意义、在肺癌发生和进展中的作用以及二者可能存在的相关性.方法:应用免疫组织化学法检测108例NSCLC,60例癌旁肺组织survivin表达情况,原位末端标记法(TUNEL)检测AI大小.结果:survivin在NSCLC中表达高于癌旁肺组织(P＜0.05),NSCLC 中AI小于癌旁肺组织(P＜0.05),survivin表达及AI均与肿瘤组织的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P＜0.05),survivin表达与AI呈负相关(P＜0.05).结论:细胞凋亡水平异常可能在肺癌发生发展中起重要作用,survivin可能通过抑制细胞凋亡参与了肺癌的发生、发展.     

下调ZEB-1表达对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的:探讨ZEB-1对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。方法:构建干扰ZEB-1的质粒,转染至A548细胞株,运用体外增殖、迁移、侵袭实验来观察ZEB-1表达下调后对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。结果:下调ZEB-1的表达可降低A549细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。结论:ZEB-1表达水平与非小细胞肺癌侵袭转移的能力显著相关。     

PDCD5与Caspase-3在人非小细胞肺癌中的表达

目的:研究PDCD5及Caspase-3在人非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)组织中的表达及其相关性,探讨二者在非小细胞肺癌发生、发展中的作用.方法:采用免疫组织化学法检测54例NSCLC肿瘤组织和20例癌旁正常肺组织中PDCD5和Caspase-3蛋白的表达情况.结果:PDCD5和Caspase -3在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常肺组织(79.6%vs100%,75.9%vs100%,P＜0.05),且二者在肺癌中的表达随NSCLC临床分期的上升及组织学分级的下降逐渐减弱.结论:PDCD5和Caspase-3在非小细胞肺癌组织中表达下调,且二者在肺癌组织中的表达呈正相关,PDCD5可能作为Caspase-3蛋白的正调控因子促进细胞凋亡.     

NDRG2在非小细胞肺癌中的表达意义

目的:探讨NDRG2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其在病理分类、分级、TNM分期中的差异性,为进一步研究NDRG2在NSCLC中的作用及其机制提供依据.方法:采用免疫组化EnVimion法检测NDRG2蛋白在155例非小细胞肺癌中的表达,统计学分析其病理分类、分级及临床TNM分期的差异性.结果:NDRG2阳性表达主要定位于胞质中和胞膜上,在癌和相应正常肺组织中总阳性率分别为63.23%、100%,两者相比差异性非常显著(P=0.0000),其中肺鳞癌和腺癌阳性率分别为54.65%、73.91%,与正常组织比差异性均非常显著(P=0.0000);鳞癌与腺癌间的阳性率和阳性强度差异性显著(P=0.0131),鳞癌高、中、低分化阳性率分别为87.10%、41.3%和11.11%,经Kruskal-Wallis H检验差异性显著(P=0.0000),腺癌的高、中、低分化的阳性率分别是100.0%、88.89%和31.58%,经检验差异性非常显著(P=0.0000);鳞癌、腺癌的TNM分期Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa、Ⅲb的阳性率有逐渐降低的趋势,经检验其差异性显著,P值分别为0.0005、0.0342.结论:NDRG2在NSCLC中低于相应正常组织中的表达,表达的高低与病理分级高低成正比、与TNM分期高低成反比,很可能对NSCLC发生、发展产生重要影响.     

bcl-xl 、bcl-2 在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中bcl-xl和bcl-2表达情况及其意义.方法 采用免疫组化SP法,检测10例正常肺组织,49例NSCLC组织和9例配对淋巴结转移癌组织中的bcl-xl及bcl-2表达强度.结果 NSCLC组织中,bcl-xl表达强度显著高于正常肺组织(P<0.05).伴淋巴结转移的NSCLC组织bcl-xl和bcl-2表达强度均高于不伴淋巴结转移的NSCLC组织(P<0.01).NSCLC中bcl-xl与bcl-2表达强度无相关性(P＞0.05).结论 bcl-xl表达增强可能与NSCLC发生有关.bcl-xl和bcl-2表达增强在NSCLC的淋巴结转移方面可能起着重要作用.在NSCLC组织中,bcl-xl与bcl-2表达无相关性.     

GPD2 在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究GPD2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达和临床意义,及GPD2基因对裸鼠成瘤能力的影响。方法:选取119例NSCLC肿瘤组织及配对正常组织,行GPD2免疫组化实验,并分析GPD2的表达与NSCLC患者临床病理特征的关系。使用ＲNA干扰慢病毒载体感染A549细胞,接种至裸鼠右侧腋窝,监测小鼠肿瘤生长情况,测量最终体积和重量。结果:肺癌患者肿瘤组织中GPD2的表达明显高于对照组(P＜0.01)。III/IV期组织中GPD2表达明显高于I/II期（P＜0.05）,同时GPD2在淋巴结转移患者中高表达（P＜0.05）。 shGPD2细胞形成肿瘤体积明显小于shCtrl细胞形成肿瘤体积,且肿瘤生长速度远低于shCtrl细胞形成的肿瘤。结论:GPD2蛋白在NSCLC组织中表达显著高于癌旁组织,其表达水平与患者TNM分期、淋巴结转移均显著相关,可能参与了NSCLC的发生、发展。     

长链非编码RNA SPRY4-IT1对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响及机制

目的:探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞系中的表达水平,以及SPRY4-IT1对NSCLC细胞增殖和侵袭功能的影响及分子机制.方法:用实时定量PCR技术检测SPRY4-IT1在NSCLC组织及细胞系中的表达水平.将pCDNA-SPRY4-IT1转染SPC-A1和A549细胞,过表达SPRY4-IT1,用MTT法和克隆形成实验检测SPRY4-IT1对SPC-A1和A549细胞增殖和克隆形成能力的影响.Transwell实验评价SPRY4-IT1对细胞迁移、侵袭能力的影响.qPCR和Western blot检测过表达SPRY4-IT1对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物上皮性钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达水平的影响.结果:SPRY4-IT1的表达在NSCLC组织和细胞系中出现显著下调(P<0.01).过表达SPRY4-IT1能降低SPC-A1细胞和A549细胞的增殖和侵袭能力.过表达SPRY4-IT1显著上调E-cadherin的水平、抑制Vimentin的表达,从而影响肿瘤细胞EMT过程.结论:长链非编码RNA SPRY4-IT1表达下调可能通过调控EMT机制促进NSCLC细胞的增殖和侵袭.     

HER2在非小细胞肺癌临床分期中的预测价值

目的:人类表皮生长因子受体2(HER2)可能在肺癌的发生发展中,尤其在表皮生长因子受体1（EGFR）突变状态下,起着重要作用。我们探讨初治晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）血清HER2表达特征及临床意义。方法:本院肺癌研究所2012年9月到2013年6月血清标本共63例。用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测其外周血清中HER2表达水平。结果:HER2中位浓度为25.78ng/ml（10.29~488.28ng/ml）,HER2浓度在不同的肿瘤大小、淋巴结转移及远处转移均有显著性差异（P=0.007、P=0.024、P=0.046）。与淋巴结转移、远处转移呈负相关（P=0.012,P=0.005）。HER2血清浓度定量与年龄、性别、组织学分类、病理学类型、治疗前CEA浓度、吸烟状态、EGFR突变状态均无统计学意义。结论:在外周血清中检测HER2是可行的,与临床特征存在相关性,HER2在肺癌的发展过程中发挥重要作用。     

DDX17基因表达下调对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨 DDX17基因在非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的中的作用。方法：采用慢病毒介导的 shRNA,下调非小细胞肺癌 A549细胞中 DDX17的表达,实时荧光定量 PCR 和 Western blot 验证下调效果。CCK －8和平板克隆实验检测细胞增殖能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell 实验检测细胞侵袭能力变化。结果：DDX17－shRNA 可有效下调非小细胞肺癌 A549细胞中 DDX17蛋白和 mRNA 的表达。DDX17表达下调后,A549细胞的增殖受到抑制,24、48、72小时细胞增殖能力较对照组分别降低23％、42％和59％。细胞克隆形成数目较对照组明显减少,两组细胞克隆数目分别为75±9和30±6。细胞迁移速率较对照组降低,两组迁移率分别为（49．4±7．4）％和（17．8±3．7）％。细胞侵袭数目较对照组明显减少,两组细胞24小时侵袭数目分别为89．7±13．2和30．0±5．7。结论：DDX17表达下调可显著抑制非小细胞肺癌 A549的增殖、迁移和侵袭。     

Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族的新成员Livin及其两种异构体Livinα和Livinβ在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与NSCLC临床病理的关系。方法：采用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）检测NSCLC组织中LivinαmRNA和LivinβmRNA的表达。结果：58例NSCLC组织中LivinmRNA表达阳性率为74．1％,而在癌旁组织低表达（5．1％,P〈0．01）。LivinmRNA表达与患者年龄,病理分型、肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系。结论：Livin在非小细胞肺癌组织中特异性地高表达,可能与肿瘤的发生、发展密切相关,可能成为诊断和治疗的新靶点。     

miR-211通过靶向下调SATB2表达促进非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移与侵袭

目的:探讨miR-211及SATB2基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达情况,探究miR-211在NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用及其相关机制.方法:双荧光素酶报告系统验证miR-211和SATB2的相互作用机制;qRT-PCR检测miR-2...     

干扰CIP2A表达对前列腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨干扰蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)表达对前列腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 应用siRNA干扰前列腺癌DU-145细胞的CIP2A表达后,检测细胞的增殖及凋亡水平.采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CIP2A的表达水平;采用MTT实验检测细胞增殖水平;采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;采用TranswellTM实验检测细胞侵袭水平.结果 siRNA干扰前列腺癌DU-145细胞的CIP2A表达,干扰效率为80%.培养120 h后,CIP2A siRNA组前列腺癌DU-145细胞的增殖率为(94.02±4.21)%,低于对照组的(135.21±4.13)%(P﹤0.05).CIP2A siRNA组G1期细胞所占比例为(58.07±2.10)%,高于对照组的(50.73±2.30)%(P﹤0.05).CIP2A siRNA组前列腺癌DU-145细胞的穿膜细胞数为(93.00±4.80)个,少于对照组的(143.00±15.80)个(P﹤0.05).结论 CIP2A在前列腺癌细胞的增殖、凋亡和侵袭中起着及其重要的作用,并有可能成为前列腺癌的治疗新靶点.     

Overexpression of HN1L promotes cell malignant proliferation in non-small cell lung cancer

Non-small cell lung cancer (NSCLC) is a progressive malignant disease, involving the activation of oncogenes and inactivation of tumor suppressors. In this study, we identified and characterized a novel oncogene hematopoietic- and neurologic-expressed sequence 1-like (HN1L) in human NSCLC. Overexpression of HN1L was frequently detected in primary NSCLC compared with their non-tumor counterparts (P < 0.001), which was significantly associated with tumor size (P = 0.022). In addition, Kaplan–Meier analysis showed that upregulation of HN1L correlated with worse overall survival (P = 0.029) and disease-free survival (P = 0.011) for NSCLC patients. Both in vitro and in vivo studies demonstrated that inhibition of HN1L expression with shRNA dramatically inhibited cell growth, adherent and non-adherent colony formation, and tumorigenicity in nude mice. The positive correlation of HN1L expression and Ki67 level in a large NSCLC samples further suggested the key role of HN1L in the regulation of cell growth. Further study showed that knockdown of HN1L resulted in dramatic cell cycle arrest by interfering with MAPK pathway via interacting with RASA4 protein. In conclusion, HN1L plays a crucial role in the progression of NSCLC by contributing to malignant proliferation, with possible use as a new intervention point for therapeutic strategies.     

Stathmin 基因在非小细胞肺癌中的表达

目的：检测 Stathmin 基因在非小细胞肺癌组织中的表达,探讨其与临床病理因素的关系。方法：用免疫组织化学 SP 法检测135例非小细胞肺癌及20例癌旁肺组织中 Stathmin 蛋白的表达,分析其与患者年龄、性别、肿瘤分化程度等临床病理特征之间的相关性。结果：小细胞肺癌组织中 Stathmin 基因蛋白的表达水平明显高于癌旁肺组织（P ＜0．05）,Stathmin 的表达与淋巴结转移有关（P ＜0．05）。结论：Stathmin 基因在非小细胞肺癌组织中的表达显著上调;Stathmin 基因的表达与淋巴结转移有关,而与年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、组织类型无关。     

长链非编码 RNA FENDRR 对非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：检测长链非编码 RNA FENDRR 基因在非小细胞肺癌（non －small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达及其对 A549细胞增殖及凋亡的影响。方法：Real －time PCR 检测 FENDRR 基因在 NSCLC 组织中的表达;构建 FENDRR 基因表达载体 pcDNA －FENDRR 并转染 A549细胞,Real －time PCR 检测转染效果;MTT 法检测 A549细胞的增殖活力;流式细胞术测定 A549细胞的凋亡率。结果：FENDRR 基因在 NSCLC 组织中的表达显著下调,为癌旁正常组织中 FENDRR 的37．24％（P ＜0．01）,FENDRR 的低表达与 NSCLC 的低分化及高 T 分期相关。pcDNA －FENDRR 的转染能够显著上调 A549细胞中 FENDRR mRNA 的表达（P ＜0．01）,而 FENDRR 过表达能够显著抑制 A549细胞的增殖活力,并诱导凋亡由3．41％升高至8．47％（P＜0．01）。结论：FENDRR 基因的表达下调与 NSCLC 的发生和进展相关,其在 NSCLC 中发挥肿瘤抑制基因的作用,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。