血清miR-367、miR-383表达水平与宫颈癌根治术后复发及预后的相关性

目的:探讨血清微小RNA-367（microRNA-367,miR-367）、微小RNA-383（microRNA-383,miR-383）表达水平与宫颈癌根治术后复发及预后的相关性。方法:选取2012年01月至2014年12月在本院行宫颈癌根治术的114例患者为研究对象,记录患者年龄、肿瘤大小、病理类型、病理分级、临床分期、间质浸润深度、淋巴结转移等一般资料,根据术后36个月复发与否将其分为预后良好组（97例）及预后不良组（17例）,采用荧光实时定量聚合酶链反应法（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测血清中miR-367、miR-383表达水平并进行比较;分析miR-367、miR-383表达水平与宫颈癌患者临床病理特征的关系;采用乘积极限法（Kaplan-Meier,K-M）进行宫颈癌患者术后36个月预后分析,并采用Log-rank检验进行显著性比较;采用COX模型分析影响宫颈癌患者术后复发的因素。结果:宫颈癌患者血清miR-367、miR-383表达水平与年龄、肿瘤大小、病理类型均无关（P＞0.05）,与病理分级、临床分期、间质浸润程度、淋巴结转移均有关（P＜0.05）。与预后良好组相比,预后不良组血清miR-367、miR-383表达水平均较低（P＜0.05）。114例接受宫颈癌根治术的患者随访36个月,17例复发,复发率为14.91%。K-M曲线结果显示,miR-367高表达组、miR-367低表达组术后36个月复发率分别为8.20%、22.64%,无进展生存期平均值分别为35.049个月（95%CI:34.165~35.933）、32.736个月（95%CI:30.954~34.517）（P=0.028);miR-383高表达组、miR-383低表达组术后36个月复发率为5.08%、25.45%,无进展生存期平均值分别为35.153个月（95%CI:34.213~36.092）、32.091个月（95%CI:30.164~34.017）（P=0.002）。COX风险评估模型结果显示,miR-367低表达、miR-383低表达、低分化、Ⅱa期、间质浸润深度＞1/2、伴淋巴结转移均是影响宫颈癌患者术后复发的独立危险因素（P＜0.05）。结论:宫颈癌患者血清miR-367、miR-383均为低表达,且与术后复发情况密切相关,可能为预测患者预后提供临床参考依据。     

100例宫颈癌患者血清miR-155、miR-501水平及其与术后复发的相关性分析

摘 要：［目的］ 探讨宫颈癌患者的血清微小核糖核酸（miR）-155、miR-501水平，并分析两者与患者术后复发的关系。［方法］ 选取2016年1月至2021年3月东南大学医学院附属南京同仁医院收治的最终纳入分析的100例宫颈癌患者，均接受手术治疗，术后接受相应治疗，对患者进行为期1年的随访，记录患者随访期间的复发情况。术前检测患者血清miR-155、miR-501水平和其他相关实验室指标，分析血清miR-155、miR-501水平与患者术后复发的相关性。［结果］ 经过1年的随访，100例行手术治疗的宫颈癌患者中，有18例出现复发，复发率为18.00%。复发组患者HPV持续阳性比例高于未复发组，且血清SCC-Ag、CA125、miR-155 相对表达量和miR-501 相对表达量均高于未复发组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。Cox回归分析结果显示，HPV持续阳性、血清SCC-Ag、CA125、miR-155 相对表达量和miR-501 相对表达量与宫颈癌患者术后复发有关（P＜0.05）。受试者工作特征（ROC）曲线显示，血清SCC-Ag、CA125、miR-155、miR-501单独及联合预测宫颈癌患者术后复发的AUC均＞0.7，有一定预测价值，且以联合预测的价值最好；经决策曲线显示，在阈值0.16～0.50、0.59～0.61、0.77～0.87范围内，血清miR-155、miR-501联合检测的预测模型预测宫颈癌患者术后复发的净收益率优于单纯血清miR-155或miR-501检测。［结论］ 宫颈癌患者血清miR-155、miR-501水平与术后复发相关，可用于患者术后复发的辅助评估。     

miR-95和miR-19b在骨肉瘤组织中的表达及与顺铂耐药性的关系

目的 探究miR-95和miR-19b在骨肉瘤组织中的表达及与顺铂耐药性的关系。方法 选取骨肉瘤患者100例,收集患者临床资料。采用RT-PCR法检测组织miR-95和miR-19b表达水平,分析其与临床病理参数以及化疗耐药的关系。结果 miR-95和miR-19b表达与性别无关(P>0.05),与临床分期、肿瘤直径以及远处转移有关(P均<0.05),临床分期Ⅲ期、肿瘤直径≥5 cm、发生远处转移患者miR-95表达水平显著低于其他患者(P<0.05),miR-19b表达水平显著高于其他患者(P<0.05)。miR-95在耐药组的表达水平明显低于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-19b在耐药组的表达水平明显高于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-95和miR-19b评估骨肉瘤患者化疗耐药的预测AUC分别为0.707、0.692,联合检测AUC为0.808,高于单独检测的AUC值。结论 miR-95和miR-19b在骨肉瘤组织中的表达水平与临床病理参数以及化疗耐药有一定关系,为进一步研究骨肉瘤病情提供了一定的研究基础。     

非小细胞肺癌组织中miR-449a／b／c的表达及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中微小RNA（miRNA）-449a/b/c的表达水平、临床意义及与预后的关系。方法 收集2013年1月至2015年12月收治的82例手术切除的NSCLC组织及69例癌旁组织标本,采用荧光实时定量PCR（QPCR）法检测以上组织中miR-449a/b/c的表达并比较3者在NSCLC组织及癌旁组织中的分布差异,Pearson相关分析NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c表达的相关性,分析NSCLC组织中miR-449a/b/c表达与临床病理特征（性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型和淋巴结转移）的关系,同时根据随访数据比较不同miR-449a/b/c表达患者的预后情况。结果 QPCR结果显示,NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的平均表达量依次为0.210±0.028、0.359±0.031和0.133±0.020,均低于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的表达均呈正相关,相关系数rmiR-449a/b、rmiR-449a/c和rmiR-449b/c分别为0.246、0.390和0.331（P＜0.05）;NSCLC组织中miR-449a/b/c表达均与TNM分期有关,miR-449a和miR-449c表达与肿瘤大小有关。全组中位总生存期（OS）为12.4个月,其中miR-449a低表达组和高表达组的中位OS分别为11.2个月和13.5个月（P＞0.05）,miR-449b低表达组和高表达组的中位OS分别为9.6个月和14.2个月（P＜0.05）,miR-449c低表达组和高表达组的中位OS分别为11.7个月和13.7个月（P＞0.05）。结论 miR-449a/b/c在NSCLC组织中表达降低,且均与TNM分期有关,miR-449b表达与预后有关,可能与NSCLC发生、发展有关,对NSCLC诊断及病情评估有一定价值。     

miR-15b通过下调细胞因子诱导的杀伤细胞PD-1表达抑制宫颈癌细胞增殖

目的:探讨微小RNA-15b（miR-15b）与程序性死亡蛋白-1（PD-1）在细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）抑制宫颈癌细胞增殖过程中的调控作用,并初步分析其中miR-15b与PD-1的可能作用机制。方法:采用传统方法培养CIK细胞,采用流式细胞仪检测CIK细胞免疫表型,CCK-8法检测CIK细胞对宫颈癌细胞（SiHa）增殖的影响。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及蛋白印迹（WB）法检测CIK细胞共培养前后SiHa细胞中miR-15b及PD-1表达水平。实验将CIK细胞共培养SiHa细胞分为3组:空白对照组（未进行任何处理）,NC组（加入miR-15b阴性对照质粒）,si-miR-15b组（加入miR-15b siRNA）。采用qRT-PCR与WB分别检测各组miR-15b及PD-1表达水平;CCK-8法检测各组SiHa细胞增殖情况。采用WB法检测细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原（PCNA）及Ki67表达。结果:CIK细胞共培养组SiHa细胞增殖抑制率显著高于单纯培养SiHa细胞组（P＜0.05）;CIK细胞共培养后SiHa细胞中miR-15b表达水平显著高于单纯培养SiHa细胞组（P＜0.05）,而PD-1蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）;si-miR-15b组miR-15b表达水平、SiHa细胞增殖抑制率均显著低于空白对照组、NC组（P＜0.05）,而PD-1、PCNA、Ki67蛋白表达均显著升高（P＜0.05）。结论:miR-15b可能通过下调CIK细胞上PD-1表达进而抑制宫颈癌细胞增殖。     

miR-34a-3p、DDX27在结直肠癌组织中的表达水平及临床意义

目的:检测结直肠癌患者组织中微小RNA-34a-3p（miR-34a-3p）、DEAD盒多肽27（DDX27）的表达水平,并探讨二者表达水平与结直肠癌预后的相关性。方法:选取2016年01月至2017年04月于本院住院的102例结直肠癌癌组织作为结直肠癌组,选取其癌旁正常组织作为癌旁对照组。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测组织miR-34a-3p、DDX27 mRNA表达水平;分析结直肠癌患者组织中miR-34a-3p、DDX27 mRNA表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法分析结直肠癌组织中miR-34a-3p、DDX27表达水平与患者生存率的相关性;多因素Cox回归分析影响结直肠癌预后的因素。结果:Targetscan网站在线预测结果显示miR-34a-3p与DDX27的3' UTR之间存在碱基互补关系。双荧光素酶实验结果显示,与miR-NC相比,miR-34a-3p-mimics与野生型3' UTR区（WT-DDX27）共转出现了荧光减弱,而与突变3' UTR区（MUT-DDX27）共转后荧光强度未出现明显变化;Ualcan数据库中,结肠癌组织中DDX27水平高于正常结肠组织（P＜0.05）;结直肠癌组DDX27 mRNA水平高于癌旁对照组,miR-34a-3p水平低于癌旁对照组（P＜0.05）,且DDX27表达趋势与Ualcan数据库一致;miR-34a-3p、DDX27表达与肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关（P＜0.05）;miR-34a-3p低表达组三年内存活率（64.00%）低于高表达组（94.23%）,DDX27高表达组三年内存活率（66.67%）低于低表达组（92.16%）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;DDX27、组织分化程度、TNM分期是影响结直肠癌不良预后的独立危险因素（P＜0.05）,miR-34a-3p是影响结直肠癌不良预后的保护因素（P＜0.05）。结论:结直肠癌组织中miR-34a-3p、DDX27表达水平与组织分化程度、TNM分期等临床病理特征密切相关,且均是影响结直肠癌预后的因素,可对结直肠癌的病情评价及治疗提供一定理论依据。     

miR-150-5p在甲状腺癌中的表达及其生物学功能研究

摘 要：［目的］ 探讨微小RNA-150-5p（miR-150-5p）在甲状腺癌组织中的表达水平及其通过PI3K/Akt信号通路对甲状腺癌细胞增殖和凋亡能力的影响。［方法］ qRT-PCR检测68例甲状腺癌患者病变组织及其相应癌旁组织中miR-150-5p的表达水平。将miR-150-5p抑制剂和阴性对照转染至人甲状腺癌TPC-1细胞株,以空脂质体作为对照,qRT-PCR检测转染结果,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,生物信息学网站Targetscan 预测miRNA-150-5p与PI3K的靶向结合情况,荧光素酶试验验证miR-150-5p与PI3K的靶向关系,Western blotting检测Cleaved caspase-3、PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达。［结果］ 68例甲状腺癌患者病变组织及相应癌旁组织中miR-150-5p的相对表达水平分别为0.96±0.06和1.66±0.11,差异有统计学意义（P＜0.05）;空白对照组和阴性对照组中miR-150-5p的表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）,miR-150-5p抑制剂组中miR-150-5p的相对表达量为0.12±0.02,明显低于空白对照组和阴性对照组（P＜0.05）。空白对照组和阴性对照组24、48和72h细胞增殖率的差异无统计学意义（P＞0.05）,而miR-150-5p抑制剂组24、48和72h细胞增殖率分别为9.56%±1.38%、24.36%±4.66%和33.63%±5.32%,同一时间点均明显低于空白对照组和阴性对照组（P＜0.05）。空白对照组和阴性对照组48h细胞凋亡率的差异无统计学意义（P＞0.05）,而miR-150-5p 抑制剂组的细胞凋亡率为16.25%±2.98%,明显高于空白对照组和阴性对照组（P＜0.01）。TargerScan网站预测结果显示,miR-150-5p可与PI3K互补结合,荧光素酶报告基因分析证实miR-150-5p与PI3K存在靶向结合位点。空白对照组和阴性对照组间PI3K、p-Akt和Cleaved caspase3蛋白表达的差异无统计学意义（P＞0.05）,miR-150-5p抑制剂组PI3K、p-Akt蛋白表达低于空白对照组和阴性对照组（P＜0.01）,Cleaved caspase3蛋白表达高于空白对照组和阴性对照组（P＜0.01）,3组间Akt蛋白表达的差异无统计学意义（P＞0.05）。［结论］ miR-150-5p在甲状腺癌组织中表达异常升高,干扰miR-150-5p表达能够抑制甲状腺癌TPC-1细胞株的增殖,并通过上调Cleaved caspase-3促进细胞凋亡,其调控作用可能与PI3K/Akt信号通路有关。     

卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的水平分析及临床意义

目的 探讨卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的表达水平,分析3者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法 收集本院确诊的65例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本（卵巢癌组）,采用实时定量RT-PCR（qRT-PCR）法检测miR-29c、miR-133b及miR-1水平,收集对应卵巢癌患者的临床病理参数（年龄、临床分期、分化程度、组织类型及淋巴结转移）,同时选取32例正常卵巢上皮组织（正常组）和39例良性卵巢上皮囊肿组织（良性组）作对照,以正常组的各指标均数为界值,将卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平分为高水平组（＞正常组）和低水平组（≤正常组）,比较miR-29c、miR-133b及miR-1不同表达水平与卵巢癌临床病理参数的关系,同时分析卵巢癌组织中3者水平的关系。结果 卵巢癌组miR-29c水平高于正常组和良性组,而miR-133b和miR-1水平均低于正常组和良性组,差异有统计学意义（P＜0.05）;卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平均与分化程度有关,miR-29c水平与临床分期及淋巴结转移有关,而miR-133b亦与淋巴结转移有关,差异均有统计学意义（P＜0.05）;卵巢癌miR-29c水平与miR-133b和miR-1均呈负相关（r=-0.541、-0.361）,miR-133b与miR-1呈正相关（r=0.447）,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 卵巢癌患者组织中miR-29c呈高表达,miR-133b及miR-1呈低表达,与临床病理学特征有关,且在卵巢癌诊断中有一定的价值,可用于辅助卵巢癌的诊断和病情评估。     

血清微小RNA-451对食管癌放化疗效果评估价值

摘 要：［目的］ 探讨血清微小RNA-451对食管癌的诊断及放化疗效果评估价值。［方法］ 选择食管癌患者60例（病例组）及同时间段内进行健康体检者60名（对照组）,分析血清微小RNA-451与食管癌临床病理特征的相关性及对放化疗效果的评估价值。［结果］ 治疗前病例组患者血清微小RNA-451表达水平高于对照组（t=11.674,P<0.001）。有淋巴转移患者的血清微小RNA-451表达水平高于无淋巴转移者（t=-5.378,P<0.001）,临床分期高的患者血清微小RNA-451表达水平高于临床分期低的患者（t=-5.740,P<0.001）。经过治疗后,所有患者的血清微小RNA-451表达水平均降低,其中完全缓解、部分缓解、稳定组患者与治疗前相比,差异均有统计学意义（t=5.297,6.610,3.204;P均<0.05）,而进展组与治疗前相比,差异无统计学意义（t=0.725,P=0.489）,患者的治疗效果与血清微小RNA-451表达水平下降的幅度之间呈现正相关（r=0.729,P<0.05）。［结论］ 血清微小RNA-451可进行食管癌患者治疗效果的评估。     

胃癌组织中miR-98和miR-183表达及临床意义

目的   探讨微小RNA-98（miR-98）及微小RNA-183（miR-183）在胃癌组织中的表达情况及临床意义。方法   收集本院2013年1月至2016年12月90例手术切除的胃癌组织和癌旁组织标本,采用实时定量PCR（QPCR）检测miR-98和miR-183表达水平,分析其与临床病理参数（性别、年龄、淋巴结转移、分化程度、远处转移、TNM分期、浸润深度、Lauren分型和肿瘤大小）的关系,采用受试者工作特征曲线（ROC）分析两者单独和联合预测胃癌的价值,采用Pearson相关分析miR-98和miR-183表达的相关性。结果   胃癌组织中miR-98和miR-183表达水平分别为1.567±0.124和0.629±0.097,与癌旁组织比较,miR-98在胃癌组织中表达显著上调而miR-183表达下调,差异有统计学意义（P＜0.05）。胃癌组织中miR-98和miR-183表达呈负相关（r=-0.2995,P=0.004）。miR-98表达与淋巴结转移及分化程度有关,而miR-183表达与淋巴结转移、远处转移及肿瘤大小有关（P＜0.05）。ROC曲线显示,miR-98诊断胃癌的曲线下面积（AUC）为0.794,灵敏度和特异度分别为61.11％和95.56％;miR-183的AUC为0.824,灵敏度和特异度分别为76.67％和76.67％;两者联合的AUC为0.903,灵敏度和特异度分别为74.44％和91.11％。结论  miR-98在原发性胃癌中高表达而miR-183异常低表达,两者表达存在负相关并与胃癌转移、分化有关,可作为胃癌潜在的分子筛查标志物。     

miR-27a在三阴性乳腺癌中的表达及其对细胞耐药的影响

目的:探讨miR-27a在三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）中的表达及其对细胞耐药的影响。方法:首先通过QRT-PCR检测TNBC细胞株及非TNBC细胞株中miR-27a及P-gp的差异表达;上调TNBC细胞中的miR-27a的表达,通过CCK8检测细胞对化疗药物敏感性的变化。同时收集TNBC患者化疗前后血液标本,将其分为化疗敏感组和化疗耐药组,QRT-PCR检测患者血液标本中miR-27a及P-gp的表达,分析miR-27a与乳腺癌患者预后相关性。结果:miR-27a在TNBC细胞株中的表达明显低于非TNBC细胞株,上调TNBC细胞株中miR-27a的表达能够降低P-gp的表达,增加细胞对化疗药物的敏感性,此外TNBC组中miR-27a的表达与患者组织学分级、临床分期及淋巴结转移相关（P<0.05）;在非TNBC组中miR-27a的表达与患者临床病理特征无明显相关性（P均＞0.05）。结论:miR-27a参与调节TNBC细胞耐药,miR-27a可作为评估乳腺癌化疗敏感性及临床预后的潜在靶基因。     

结肠癌组织中miR-802和RAB23的表达水平及临床意义

目的:检测微小RNA-802(miR-802)和RAB23在结肠癌组织中的表达水平,探究其临床意义。方法:以本院2014年3月至2015年4月收治的结肠癌患者84例为研究对象,所有患者经诊断后行结肠癌根治术,术中取患者癌组织及癌旁正常组织。实时荧光定量PCR检测miR-802和RAB23 mRNA表达水平,免疫组化分析RAB蛋白表达水平。结果:miR-802在结肠癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织,RAB23表达水平显著高于癌旁正常组织（P<0.05）;结肠癌组织中RAB23蛋白表达阳性率显著高于癌旁正常组织（P<0.05）;相关性分析表明结肠癌组织中miR-802表达水平与RAB23 mRNA表达水平呈负相关（P<0.05）;miR-802和RAB23表达水平与患者肿瘤大小和淋巴转移情况有关（P<0.05）;结肠癌患者中miR-802低表达者、RAB23阳性表达者生存率分别显著低于miR-802高表达者、RAB23阴性表达者（P<0.05）;COX分析显示miR-802和RAB23表达水平是影响结肠患者不良预后的独立危险因素（P<0.05）。结论:miR-802在结肠癌患者癌组织中表达水平显著降低,RAB23表达水平显著升高,与结肠癌患者预后有关,可为结肠癌患者预后判断提供参考。     

miR-106a下调MAP3K2抑制骨肉瘤细胞增殖的实验研究

目的:探讨miR-106a对骨肉瘤细胞增殖的影响及机制。方法:利用Real-time PCR比较了正常成骨细胞（hFOB11.9）及三种骨肉瘤细胞（MG-63、U-2OS和HOS）中miR-106a的表达情况;将NC（negative control)、miR-106a mimics及miR-106a inhibitor分别转染MG-63细胞;转染后通过CCK-8实验、平板克隆形成实验检测miR-106a对细胞增殖的影响;通过生物信息学软件预测miR-106a的靶基因-蛋白激酶2（MAP3K2）;分别构建MAP3K2 3'-UTR结合区野生型和突变型载体,通过荧光素酶报告基因实验检测miR-106a对MAP3K2的调控;在转染了NC以及miR-106a mimics的MG-63细胞中,利用Western blot检测MAP3K2的蛋白水平。结果:与正常成骨细胞相比,骨肉瘤细胞MG-63、U-2OS和HOS中miR-106a的表达明显降低（P＜0.05）;CCK-8生长曲线表明,转染48、72和96小时后,与NC相比,miR-106a mimics能够显著抑制MG-63细胞的生长（P＜0.05）,而miR-106a inhibitor则能促进肿瘤细胞的生长（P＜0.05）;平板克隆形成实验也表明miR-106a mimics能够抑制MG-63的生长,miR-106a inhibitor发挥相反作用;荧光素酶报告基因实验表明转染了克隆MAP3K2 3'-UTR的荧光素酶质粒组中,荧光素酶活性受到miR-106a mimics的明显抑制（P＜0.05）,而在MAP3K2 3'-UTR突变组中,荧光素酶活性与对照相比无显著差异（P=0.877）;与NC组相比,转染miR-106a mimics后,MAP3K2的表达明显降低（P＜0.05）。结论:miR-106a可能通过下调MAP3K2的表达抑制骨肉瘤细胞的生长。     

Diagnostic Performance of Serum miR-586 and miR-493 in Patients with Osteosarcoma

This study aimed to explore the expression and diagnostic performance of miR-586 and miR-493 in patients with osteosarcoma. We enrolled 63 patients with osteosarcoma treated between May 2016 and May 2019 as the experimental group and 55 healthy volunteers who underwent physical examination during the same period as the control group. We detected miR-586 and miR-493 expression in serum, normal bone tissue, and tumor samples. We also evaluated the relationship between clinical indicators and the miR-586 and miR-493 expression levels. The correlation between the serum and osteosarcoma tissue expression of miR-586 and miR-493 was examined by Pearson analysis. Furthermore, the diagnostic performance of miR-586 and miR-493 in osteosarcoma was determined by the ROC curve analysis. The experimental group had higher serum miR-586 expression levels and lowered serum miR-493 expression levels than the control group (p < 0.05 on both). In tumor tissues, the miR-586 expression level was higher, whereas the miR-493 expression level was lower than in normal bone tissues (p < 0.05). The serum and tumor tissue expression of miR-586 and miR- 493 had a positive correlation (p < 0.05). The AUC, cutoff level, sensitivity, and specificity of miR-586 for osteosarcoma were 0.8413, 66.435, 66.67, and 98.18, whereas those of miR-493 were 0.7763, 62.540, 82.53, and 78.18, respectively. Patients with osteosarcoma exhibited up-regulated miR-586 levels and downregulated miR-493 levels in serum and tumor tissues significantly.     

上皮性卵巢癌血清miR-1294及miR-4443的表达及其与预后的关系

目的:探讨上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer,EOC）患者血清miR-1294及miR-4443的表达水平及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取我院2015年1月至2017年12月收治的106例EOC患者作为EOC组,另选取90例卵巢良性肿瘤患者作为良性组和60例正常健康女性作为对照组,检测血清miR-1294及miR-4443表达水平。以miR-1294及miR-4443的最佳截断值为标准将EOC患者分为高miR-1294组（n=33）、低miR-1294组（n=73）和高miR-4443组（n=36）、低miR-4443组（n=70）。EOC患者预后不良的危险因素应用单因素及多因素COX回归模型进行分析。结果:血清miR-1294表达水平（0.48±0.13 vs 1.16±0.57、1.21±0.62）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。血清miR-4443表达水平（0.71±0.18 vs 1.36±0.64、1.45±0.70）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。miR-1294和miR-4443高表达组的EOC患者临床分期、分化程度、淋巴结转移及腹膜转移与miR-1294和miR-4443低表达组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。Kaplan-Meier分析显示,EOC患者生存期短与miR-1294及miR-4443低表达有关（P<0.001）。多因素分析显示,EOC患者预后不良的独立危险因素为淋巴结转移［HR（95%CI）=1.885（1.206～4.118）］、腹膜转移［HR（95%CI）=3.106（2.315～6.226）］、miR-1294＜0.73［HR（95%CI）=2.614（1.865～5.512）］及miR-4443＜1.04［HR（95%CI）=1.975（1.508～4.903）］。结论:miR-1294及miR-4443的低表达与EOC患者生存期短有关,是EOC患者预后预测的生物标志物。     

miR-586对骨肉瘤的诊断价值研究

目的 探讨miR-586对骨肉瘤的诊断价值,为该指标在诊断骨肉瘤的应用上提供理论依据.方法 选取接受手术治疗的35例骨肉瘤患者作为病例组,同时选取35例健康人群作为对照组.对比两组受试者的血清miR-586的检测结果;对比病例组患者骨肉瘤瘤体组织和周围正常骨组织的miR-586的检测结果;通过Pearson相关性分析检验骨肉瘤瘤体组织中miR-586表达与血清miR-586表达的相关性;通过ROC曲线分析两组受试者的血清miR-586检测结果,评估血清miR-586对骨肉瘤的诊断价值.结果 病例组miR-586的检测结果为(1.43±0.52),均显著高于对照组(P<0.05);骨肉瘤瘤体组织miR-586的检测结果为(5.38±0.31),显著高于正常骨组织miR-586的检测结果(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,骨肉瘤瘤体组织中miR-586表达与血清miR-586表达呈正相关关系(γ=0.912,P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-586诊断骨肉瘤的曲线下面积为0.879,0.952为最佳筛查阳性界值,血清miR诊断骨肉瘤的敏感度和特异度均为85%.结论 骨肉瘤患者血清以及瘤体组织的miR-586水平显著升高,两者呈正相关的关系.血清miR-586水平的检测对临床诊断骨肉瘤有一定的参考价值.     

血清miR-21和miR-34a与晚期胃癌患者Folfox化疗方案化疗疗效的关系研究

目的 探讨晚期胃癌患者Folfox方案化疗前后血清miR-21和miR-34a水平变化及其与化疗疗效的关系。方法 以在我院接受Folfox方案化疗的45例晚期胃癌患者为研究对象。采用Real-time PCR检测化疗前后miR-21和miR-34a水平,分析miR-21和miR-34a水平与化疗疗效和患者预后的关系,采用受试者工作曲线(ROC)评估miR-21和miR-34a对化疗疗效的评估。结果 化疗后,部分缓解6例(13.33%)、疾病稳定10例(22.22%)、疾病进展29例(64.44%),客观缓解率为13.33%,疾病控制率为35.56%,中位生存期为8.1个月。化疗后miR-21水平下调,而miR-34a水平上调,差异有统计学意义(P＜0.05)。化疗有效组miR-21水平低于无效组,而miR-34a水平高于无效组,差异有统计学意义(P＜0.05)。miR-21与化疗疗效呈负相关,miR-34a与之呈正相关(r_s=-0.431,0.504,P＜0.05)。miR-21低水平患者中位生存期7.6个月,而高水平患者为6.0个月;miR-34a低水平患者中位生存期5.5个月,而高水平患者为8.3个月,Log-Rank检验显示,miR-21低水平患者中位生存期大于高水平患者(P＜0.05),miR-34a高水平患者中位生存期大于低水平患者(P＜0.05)。miR-21和miR-34a联合评估化疗疗效的曲线下面积为0.865、灵敏度为80.9%、特异度为89.8%。结论 血清miR-21和miR-34a与晚期胃癌化疗疗效和患者中位生存期相关。     

肝癌细胞系中miR-9和转录因子E2F1的表达及其与药物敏感性的关系

目的:研究肝癌细胞系中微小RNA（microRNA,miR）-9和转录因子E2F1的表达及其与药物敏感性的关系。方法:体外培养肝细胞系HL-7702，肝癌细胞系HepG2、Hep3B2.1-7，处理细胞分miRNA NC组、miR-9 inhibitor组、顺铂（CDDP）组、CDDP+miRNA NC组、CDDP+miR-9 inhibitor 组。实时荧光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测miR-9表达水平；免疫印记（Western blot,WB）法检测E2F1蛋白水平；CCK-8法检测miR-9对细胞存活的影响；克隆计数检测miR-9对细胞数量的影响。结果:与正常肝细胞系HL-7702相比，肝癌细胞系HepG2、Hep3B2.1-7中miR-9、E2F1蛋白水平升高（P＜0.05）。在HepG2、Hep3B2.1-7细胞系中，与miRNA NC组相比，miR-9 inhibitor组、CDDP+miR-9 inhibitor组miR-9、E2F1蛋白表达水平、细胞克隆数量降低（P＜0.05）。与miR-9 inhibitor组相比，CDDP组、CDDP+miRNA NC组miR-9、E2F1蛋白表达水平、细胞克隆数量升高（P＜0.05）；CDDP+miR-9 inhibitor组细胞克隆数量、48 h细胞OD450降低（P＜0.05）；与CDDP组、CDDP+miRNA NC组相比，CDDP+miR-9 inhibitor组miR-9、E2F1蛋白表达水平、细胞克隆数量降低（P＜0.05）。在HepG2细胞系中，与miRNA NC组、CDDP组、CDDP+miRNA NC组相比，miR-9 inhibitor组、CDDP+miR-9 inhibitor组（12、24、48 h）细胞OD450降低（P＜0.05）。在Hep3B2.1-7细胞系中，与miRNA NC 组相比，miR-9 inhibitor组（12、24、48 h）、CDDP+miR-9 inhibitor组（6、12、24、48 h）细胞OD450降低（P＜0.05）；与CDDP组相比，miR-9 inhibitor组（12、24、48 h）、CDDP+miR-9 inhibitor组（3、6、12、24、48 h）细胞OD450降低（P＜0.05）；与CDDP+miRNA NC组相比，miR-9 inhibitor组（24、48 h）、CDDP+miR-9 inhibitor组（12、24、48 h）细胞OD450降低（P＜0.05）。结论:肝癌细胞系HepG2、Hep3B2.1-7中miR-9和E2F1表达上调；干扰miR-9可抑制E2F1表达，抑制细胞增殖、抑制细胞克隆形成，提高药物敏感性。     

结肠癌患者血清中miR-30a、miR-106b的表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其在结肠癌进展及预测患者预后中的价值。方法:选取2012年06月至2013年02月本院收治的接受结肠癌手术治疗的患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组。逆转录 PCR法检测外周血血清中 miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR-30a、miR-106b表达与结肠癌临床病理及预后的关系。Spearman分析miR-30a、miR-106b表达的相关性。采用多因素logistic回归模型对结肠癌患者的预后影响因素进行分析,采用Kaplan-Meier生存分析miR-30a低表达组、miR-30a高表达组,miR-106b低表达组、miR-106b高表达组患者中位生存时间。结果:结肠癌患者血清miR-30a表达水平（1.03±0.02）低于正常人群（5.15±0.06）,差异具有统计学意义（t=16.38,P=0.01）;结肠癌患者血清miR-106b表达水平（2.62±0.35）高于正常人群（1.15±0.06）,差异具有统计学意义（t=10.17,P=0.03）。miR-30a、miR-106b表达与患者的组织分化类型、浆膜侵犯、淋巴结转移、远处转移、TNM分期有显著相关性(P＜0.05)。多因素logistic回归模型对结肠癌患者预后影响因素进行分析,TNM分期（Ⅲ+Ⅳ）、miR-106b高表达及miR-30a低表达是结肠癌患者预后不良的危险因素。miR-30a低表达组患者总体生存时间（55.3±4.1）个月低于miR-30a高表达组（76.4±2.4）个月（P=0.000）;miR-106b低表达组患者的总体生存时间（75.1±7.3）个月高于miR-106b高表达组（51.8±3.1）个月（P=0.000）。结论:miR-30a在结肠癌患者血清中低表达,miR-106b在结肠癌患者血清中高表达,二者的表达与肿瘤的进展、预后不良有关。     

miR-155在MALT淋巴瘤组织中的表达及其与预后的关系

目的:探讨miR-155在MALT淋巴瘤组织中的表达及其与预后的关系。方法:收集2007年3月至2014年3月首次就诊于河北工程大学附属医院的36例均经病理证实为MALT淋巴瘤患者的带瘤组织和瘤旁组织（距瘤＞2 cm），qPCR法检测MALT淋巴瘤患者瘤组织和瘤旁组织中miR-155表达水平，入选患者均给予标准CHOP方案化疗治疗8个周期，根据实体瘤疗效评价标准，将患者分为有效组和无效组，对比观察两组患者血清中miR-155表达水平；通过门诊或打电话方式对患者进行随访，以miR-155表达水平的平均值为阈值将治疗后患者分为miR-155高表达组（23例）和miR-155低表达组（13例），对比观察两组患者3年生存率。结果:36例MALT淋巴瘤患者瘤组织和瘤旁组织中miR-155表达水平分别为6.63±0.70、1.29±0.05，两者差异具有统计学意义（P<0.05）；CHOP方案治疗8个周期后，有效组和无效组患者血清中miR-155表达水平分别为2.21±0.14、7.01±0.54；随访发现，治疗后miR-155高表达组和miR-155低表达组患者3年生存率分别为56.5%和76.9%，以上差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:miR-155表达水平可能与MALT淋巴瘤发生发展及预后有关。