深冻异体骨复合自体骨髓修复兔桡骨节段性骨缺损

目的：研究兔深冻异体骨复合自体骨髓对节段性骨缺损的修复及其机制。方法：36只新西兰大白兔采用桡骨15mm节段性骨缺损模型，随机分为3组．A组植人深冻异体骨复合自体骨髓．B组植入深冻异体骨，C组植入自体骨。术后不同阶段分别行大体、组织学及x线检测。结果：(1)3组骨缺损均有成骨现象发生；(2)A、C组骨生成、骨连接情况明显优于B组；(3)A、C组骨缺损愈合时间较B组明显缩短，A、C组骨缺损均于术后8周愈合．B组骨缺损在术后10周仍未愈合。结论：提示兔深冻异体骨复合自体骨髓具有良好的组织相容性及成骨作用，其取代自体骨植骨修复骨缺损具有可能性。     

异种骨复合自体骨髓基质干细胞修复节段性骨缺损

目的探讨异种骨复合骨髓基质干细胞(MSCs)修复节段性骨缺损的可行性。方法将MSCs与异种松质骨在体外联合培养,兔桡骨中上段制成1.5 cm的骨-骨膜缺损模型,实验组植入复合异种骨,对照组植入单纯异种骨,空白对照组不植入任何材料,分别于术后4、8、12周各时间点行标本的组织学观察、X线片观察、透射电镜观察及骨密度测试,比较其骨缺损区骨修复情况。结果术后第12周,实验组骨缺损区完全修复,骨密度接近正常;对照组骨缺损区修复缓慢,新骨形成量少;空白对照组骨缺损区未修复。结论异种骨复合MSCs修复节段性骨缺损能力强,在成骨速度和量上明显优于单纯异种骨。     

同种异体脂肪源性间充质干细胞复合β-磷酸三钙支架修复兔桡骨大段骨缺损

 目的  探讨以β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)陶瓷为支架材料复合兔脂肪源性间充质干细胞(rabbit adipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs)构建组织工程骨修复骨缺损的可行性。方法 将体外培养的rADSCs接种于β-TCP支架上,构建rADSCs/β-TCP骨组织工程复合体,并进行体外培养。将24只新西兰大白兔在双侧桡骨中下段造成2 cm长度的节段性骨缺损模型,随机平均分为3组,A组：空白对照组,不植入任何材料;B组：单β-TCP人工骨对照组;C组：rADSCs/β-TCP复合体实验组。在手术后2周、4周、6周和8周时进行X线检查,然后每组各选2只兔处死后取出标本,对标本进行大体观察以及常规HE染色,光镜下观察骨修复情况,并观察是否发生免疫排斥反应。结果  rADSCs在适当的诱导条件下具有成骨细胞分化潜能,复合β TCP后对其生长分化无影响。X线检查结果发现,A组有稍多的骨组织形成,未见髓腔及正常骨影像学表现;B组虽然骨连接性基本恢复,但骨髓腔尚未完全再通;C组骨连接性完全恢复,骨缺损基本修复,骨髓腔再通。术后4周,C组可观察到骨缺损周围开始形成新生骨,并随着时间的延长新生骨量逐渐增多。术后6周,材料逐渐降解,材料孔隙内有新生骨长入。术后8周,C组材料降解明显,材料孔隙基本消失,髓腔已基本再通;B组部分骨髓腔再通,而A组未发现骨髓腔再通。新生骨组织面积比较,各时间点C组的面积最大,且其差异有统计学意义。组织学检测未见免疫排斥现象。结论  rADSCs在适当的诱导条件下具有成骨细胞分化潜能。ADSCs有望成为理想的修复骨缺损、促进骨折愈合的组织工程骨所需要的种子细胞,为大段骨缺损组织工程的修复提供可行的技术方案,为临床治疗大段骨缺损提供新的方法。     

Bovine Calcined Bone for the Repair of Radial Defect in a Rabbit Model

The treatment of large segment bone defect isone of the challenging problems in orthopaedic prac-tice.Artificial biomaterials find its application in thiskind of surgery and their use form an extremely im-portantand active subject of ongoing research[1,2 ] .Arelatively large number of researches in the pastusedcalcium phosphate ceramic and demonstrated encour-aging results.But up to date a challenge exists toproduce a suitable material consistent with humanbone mineral structure ( porality,tra…     

血管内皮祖细胞对组织工程骨成骨能力影响的实验研究

目的观察血管内皮祖细胞（EPCs）时组织工程骨修复兔桡骨大段骨缺顿时成骨能力的影响。方法自体骨髓通过不同方法的体外培养，获得EPCs厦经成骨诱导的MSCs，与DBM构建组织工程骨修复兔桡骨大段骨缺损。观察术后不同时期的影像学及骨密度改变。结果术后2周，EPCs组与对照组的X线观察厦骨密度差异无统计学意义。术后4、8、12周，EPCs组的骨密度明显高于对照组，X线示EPCs组骨痂明显多于对照组，8周可见EPCs组髓腔部分再通，对照组髓腔尚封闭。12周EPCs组新生骨密度均匀，髓腔已完全再通，对照组新生骨仍可见部分低密度区，髓腔大部分再通。术后16周，两组骨密度差异无统计学意义，X线示EPCs组新生骨已基本完成塑形，对照组髓腔完全再通，新生骨处于重建塑形期。结论EPCs可以促进组织工程骨修复大段骨缺损时的成骨能力，加速骨愈合。     

间充质干细胞与其诱导血管内皮细胞联合种植构筑血管化组织工程骨修复兔大段骨缺损

目的 研究间充质干细胞(MSC)与其诱导的血管内皮细胞(EC)联合种植于多孔β-磷酸三钙(β-TCP)构筑血管化组织工程骨修复大段骨缺损的作用.方法 制备兔双侧尺骨1.5 cm骨缺损共64侧,分4组修复(n=16),A空白未治疗组,B单纯材料组(植入β-TCP),C组织工程骨组(植入MSC+β-TCP),D血管化组织工程骨组(植入MSC+EC+β-TCP),各组交叉配对.术后4、8、12、16周行x线片、放射性核素骨显像、大体解剖、组织切片、生物力学等检查,观察各组骨缺损修复效能及移植物血管化情况.结果 D血管化组织工程骨组完美修复骨缺损,且修复效能及血管化情况优于C组织工程骨组,C组织工程骨组优于B单纯材料组,A空白组未能修复骨缺损.各组结果差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 MSC与其诱导EC联合种植构筑的血管化组织工程骨能促进成骨过程和新生骨的血管化,显著提高组织工程骨修复大段骨缺损的能力.     

Experimental Study on Low Intensity Ultrasound and Tissue Engineering to Repair Segmental Bone Defects

In order to evaluate the efficacy of low intensity ultrasound and tissue engineering technique to repair segmental bone defects, the rabbit models of 1.5-cm long rabbit radial segmental os-teoperiosteum defects were established and randomly divided into 2 groups. All defects were implanted with the composite of calcium phosphate cement and bone mesenchymal stem cells, and additionally those in experimental group were subjected to low intensity ultrasound exposure, while those in control group to sham exposure. The animals were killed on the postoperative week 4, 8 and 12 respectively, and specimens were harvested. By using radiography and the methods of biome-chanics, histomorphology and bone density detection, new bone formation and material degradation were observed. The results showed that with the prolongation of time after operation, serum alkaline phosphatase (AKP) levels in both groups were gradually increased, especially in experimental group, reached the peak at 6th week (experimental group: 1.26 mmol/L; control group: 0.58 mmol/L), suggesting the new bone formation in both two group, but the amount of new bone formation was greater and bone repairing capacity stronger in experimental group than in control group. On the 4th week in experimental group, chondrocytes differentiated into woven bone, and on the 12th week, remodeling of new lamellar bone and absorption of the composite material were observed. The mechanical strength of composite material and new born density in experimental group were significantly higher than in control group, indicating that low intensity ultrasound could not only effectively increase the formation of new bone, but also accelerate the calcification of new bone. It was concluded that low intensity ultrasound could evidently accelerate the healing of bone defects repaired by bone tissue engineering.     

TGF-β1在羟基磷灰石多孔层修饰镍钛合金修复骨缺损中的表达及意义

目的：研究TGF-β1在羟基磷灰石多孔层修饰镍钛合金修复骨缺损过程中的表达和意义,为羟基磷灰石多孔层修饰镍钛合金作为生物医学材料在临床上广泛应用提供理论依据。方法：选取健康成年兔24只,随机分为实验组和对照组,选取左侧股骨下1／3处为种植区,其中实验组植入羟基磷灰石多孔层修饰镍钛合金,对照组植入镍钛合金,通过大体观察、HE染色观察术后1,2,4,8wk骨组织局部组织反应、骨缺损的修复情况以及免疫组织化学染色测定TGF-β1的表达。结果：大体观察、常规HE染色显示实验组1,2,4,8wk骨痂生长、骨缺损修复情况明显优于对照组;免疫组织化学染色显示实验组于1,2,4,8wk TGF-β1表达明显高于对照组,且具有统计学差异（P〈0.05）。结论：羟基磷灰石多孔层修饰镍钛合金能够刺激TGF-β1的表达,促进骨缺损修复;羟基磷灰石多孔层修饰镍钛合金与骨组织具有很好的相容性。     

去抗原牛松质骨块/bBMP复合材料修复兔长骨骨缺损

探讨大块异种骨的制备及其在修复节段性骨缺损中的作用。方法将大块的牛松质骨制备成消除抗原性的载体,与牛骨形态发性蛋白（ＢＭＰ）组合构成去抗原牛松质骨块／ｂＢＭＰ复合材料,采用兔桡骨１５ｍｍ节段性骨缺损模型,研究去抗原质骨块／ｂＢＭＰ复合材料在修复骨缺损中的作用。     

高能震波治疗节段性骨缺损的机制探讨

目的探讨高能震波治疗节段性骨缺损的成骨效能及愈合机制。方法实验兔18只,制造两侧兔桡骨中段10mm的骨缺损。第6周一侧骨缺损的两骨断端用高能震波进行冲击处理,作为实验组;另一侧为对照组。于术后第2,4,6,8,12周分别行双侧桡骨X射线检查。于术后第4,6,8,12周切取标本行组织学检查,第6,8周标本切片作bFGF、BMP免疫组化研究。结果实验组施加高能震波后bFGF、BMP阳性表达强度明显高于对照组,满12周6只中4只获骨性愈合,2只未愈;对照组满12周6只无1只愈合。结论高能震波能有效地促进骨的再生与修复。     

自体红骨髓移植修复关节软骨缺损的实验观察

[目的 ]实验观察自体红骨髓移植修复关节软骨缺损的形态变化过程 .[方法 ]将自体新鲜红骨髓移植于 2 6例中国家兔膝关节股骨髌面制作的 3 0mm× 6 0mm全层关节软骨缺损区 ,通过肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察和图像分析等方法 ,观察不同时期修复组织的形态变化 .[结果 ]于术后第4周 ,自体新鲜红骨髓移植组修复组织细胞的形态、分布及排列接近正常软骨组织 ,其修复组织中单个细胞面积达到正常水平 .[结论 ]自体新鲜红骨髓具有良好的成软骨能力 ,成软骨的过程分为肉芽组织形成期、前软骨期和成熟软骨期 3个阶段 .     

自体红骨髓-骨膜碎片复合移植修复关节软骨缺损的形态学研究

[目的 ]观察自体红骨髓 骨膜碎片复合移植修复关节软骨缺损的形态学变化 .[方法 ]将自体红骨髓和骨膜碎片复合移植到 2 0例家兔膝关节股骨髌面上制作的 3 0mm× 6 0mm全层关节软骨缺损区 ,通过肉眼、光学显微镜、电子显微镜和图像分析等方法 ,观察不同时期缺损区修复组织的形态学变化 .[结果 ]术后第 4周缺损区修复组织细胞形态、分布及排列接近周围正常软骨组织 ,修复组织中单个软骨细胞平均面积达到正常水平 .[结论 ]自体红骨髓 骨膜碎片复合移植组织具有良好的成软骨能力 .     

牛骨形态发生蛋白复合煅烧骨治疗骨缺损的实验研究

目的 :验证从牛皮质骨中提取的骨形态发生蛋白 (bBMP)的异位诱导成骨能力 ,探讨煅桡骨 (SB)作为其载体对骨缺损的治疗作用。方法 :①将bBMP植入 1 6只balb/c小鼠肌袋内 ,每周宰杀 4只行细胞学检查 ,连续 4周。② 1 6只新西兰大白兔手术造成双侧桡骨 1cm缺损 ,分别植入bBMP -SB和SB进行自身对照 ,分批宰杀后行X -线照片和组织学检查。结果 :植入肌袋内的bBMP术后一周即可诱导软骨细胞形成 ,2周时可见编织骨 ,4周时可见小梁骨及骨髓成形。而骨缺损实验中 ,bBMP -SB组在软骨诱导、小梁骨的形成数量、骨折愈合等方面均明显优于单纯SB组。结论 :①bBMP有强大的异位诱导成骨能力 ;②bBMP -SB复合骨可促进骨缺损愈合     

牙周膜干细胞膜片复合生物陶瓷纳米载体修复兔牙槽骨缺损

目的探讨PDLSCs细胞膜片与纳米级B-TCP复合叠层三维结构对牙槽骨缺损的相关修复及治疗作用。方法分离及培养牙周膜干细胞,制备牙周膜干细胞生物膜片,构建PDLSCs细胞膜片与纳米级B-TCP复合叠层三维结构模型,将其植入新西兰兔缺损骨模型内,于术后第4周、第8周、第12周处死新西兰兔并分离牙周组织,通过形态学分析评判修复效果。结果 WB结果示,Runx2、ALP蛋白的表达量比对照组分别增加9.2倍和4.3倍;移植后第8周,苏木精-伊红染色示PDLSCs细胞膜片与纳米级B-TCP复合叠层三维复合结构组新骨形成的百分比显著高于对照组及空白对照组(P0.05);免疫组化染色示构建PDLSCs细胞膜片与纳米级B-TCP复合叠层三维复合结构组成骨相关标志物OCN、ALP、Runx2蛋白表达高于对照组及空白对照组(P0.05)。结论牙周膜干细胞膜片与B-TCP三维叠层结构复合结构可促进兔牙槽骨缺损部位的修复及再生,为临床牙槽骨缺损的治疗提供一种新的思路,有广阔的应用前景。     

重组合异体冻干骨修复兔桡骨节段性骨缺损

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和透明质酸凝胶 (HAG)复合异体冷冻干燥骨修复兔桡骨缺损的能力 ,并探讨它们的作用机制。方法 :于 36只新西兰大白兔两侧桡骨干处造成 15mm缺损 ,采用 3种不同的治疗方法 :A组 ,植入bFGF ,HAG与冻干骨的复合物 ;B组 ,植入吸附bFGF的冻干骨 ;C组 ,单纯植入冻干骨作为对照。在术后不同时间进行放射学、组织学和核素扫描检查 ,并测定钙含量。结果 :A组在术后不同时间的骨代谢活性 ,新骨生成量和钙含量均高于B组 ,B组高于C组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。A组和B组缺损分别于术后 8周和 10周完全愈合。结论 :bFGF作为一种骨生长因子 ,促进新骨生成 ;HAG作为缓释载体 ,提高bFGF的效能 ,三者结合可有效修复骨缺损     

How much platelet-rich plasma can be soak-loaded onto beta-tricalcium phosphate? A comparison with or without a unidirectional porous structure

Objective: This study aimed to examine differences in platelet-rich plasma (PRP) soak-loaded volumes of β-tricalcium phosphate (β-TCP) with or without a unidirectional porous structure.Materials and Methods: Leukocyte-rich PRP was extracted from 15 healthy volunteers by centrifugation. Two types of artificial bones were soaked for either ten seconds or ten minutes. The volume ratios of PRP soak-loaded onto the artificial bone and soaked area ratios were evaluated. Statistical analyses were performed using the Tukey-Kramer HSD test and the Games-Howell method. A P-value of <0.05 was considered statistically significant.Results: Regardless of the soaking time, the PRP soak-loaded volume ratio and soaked area ratio were significantly higher in the unidirectional porous β-TCP (UDPTCP) group than in the spherical porous β-TCP (SPTCP) group.Conclusion: PRP can be soak-loaded faster and in larger amounts onto UDPTCP compared to SPTCP. Understanding the basic biology of β-TCP soak-loaded with PRP can help develop more novel and effective β-TCP treatments for orthopedic surgery.     

CT判断不同密度同种异体骨犬椎体间融合效果研究

目的  计算机断层扫描（CT）判断不同密度同种异体骨在犬椎体间融合情况,为临床椎体间植骨融合术中植入合适密度骨提供依据。方法  将21只健康中华田园犬随机分成3组,每组7只。所有动物均行经前路腰椎间盘摘除椎体间植骨融合术。3组分别予高密度植骨（甲组）,正常密度植骨（乙组）,空白对照（丙组）。于术后12周行腰椎CT平扫+三维重建观察椎间融合效果。应用Photoshop软件测量融合骨横截面CT图形面积,计算椎体间融合程度。结果  术后12周,3组椎体间融合的比例分别为甲组（75.91±8.25）、乙组（94.67±3.35）、丙组（37.78±1.16）。植骨组（甲组、乙组）与空白对照组（丙组）比较,差异有统计学意义（P <0.05）,正常密度植骨组（乙组）椎间融合效果优于其他两组（P <0.05）。结论  椎体间融合术中移植未经压缩的同种异体骨,有利于促进椎体间融合。

     

Reconstruction of segmental bone defects in the rabbit ulna using periosteum encapsulated mesenchymal stem cells-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) scaffolds

Background  Repair of large bone defects remains a challenge for clinicians. The present study investigated the ability of mesenchymal stem cells (MSCs) and/or periosteum-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) to promote new bone formation within rabbit ulnar segmental bone defects.

Methods  Rabbit bone marrow-derived MSCs (passage 3) were seeded onto porous PLGA scaffolds. Forty segmental bone defects, each 15 mm in length, were created in the rabbit ulna, from which periosteum was obtained. Bone defects were treated with either PLGA alone (group A), PLGA + MSCs (group B), periosteum-wrapped PLGA (group C) or periosteum-wrapped PLGA/MSCs (group D). At 6 and 12 weeks post-surgery, samples were detected by gross observation, radiological examination (X-ray and micro-CT) and histological analyses.

Results  Group D, comprising both periosteum and MSCs, showed better bone quality, higher X-ray scores and a greater amount of bone volume compared with the other three groups at each time point (P <0.05). No significant differences in radiological scores and amount of bone volume were found between groups B and C (P >0.05), both of which were significantly higher than group A (P <0.05). 

Conclusions  Implanted MSCs combined with periosteum have a synergistic effect on segmental bone regeneration and that periosteum plays a critical role in the process. Fabrication of angiogenic and osteogenic cellular constructs or tissue-engineered periosteum will have broad applications in bone tissue engineering.

     

富血小板纤维蛋白修复牙种植体周围骨缺损的研究

采用牙种植术将36颗牙种植体植于6只杂种犬双侧下颌缺牙区,同时在种植体近中造3.5 mm×3.5 mm×3.5mm的骨缺损,然后填入β-TCP/PRF混合物、β-TCP,另设空白对照组(不做任何处理)于各骨缺损区,分别于种植术后4、8、12周各处死2只犬,行大体、X线及组织学观察各个时期各组骨缺损区的成骨情况。植入的36颗种植体无脱落,无明显不良并发症发生。β-TCP/PRF混合物是一种良好的骨修复材料,具有促进新骨形成的作用,有利于骨组织的愈合。     

负载BMP的新型组织工程骨的构建及骨缺损修复实验

目的 探讨以聚乳乙醇酸(poly-(D,L-lactide-co-glycolide),PLGA)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨髓基质干细胞(BM-SCs)构建成新型组织工程骨并观察其在动物体内的成骨能力。方法 制作新西兰大白兔右桡骨中段15mm骨缺损实验模型,随机分为实验组、对照组和空白组,实验组植入同时负载5mgBMP及1×10⁶个已向成骨细胞诱导的BMSCs的PLGA、对照组植入负载1×10⁶个已向成骨细胞诱导的BMSCs的PLGA、空白组仅植入PLGA。术后对动物进行大体观察、摄X线片观察各组不同时相骨缺损修复情况、比较不同时相的骨缺损区X线阻射密度、并于术后第4、8、12周取出骨缺损区标本进行大体观察和组织学切片观察,图像分析骨小梁的生成数量。结果 实验组在12周内骨缺损完全修复,且同时期内新生骨的数量和质量显著优于对照组,空白材料组骨缺损主要由纤维结缔组织填充。结论 利用含BMP的PLGA支架与BMSCs复合构建的新型组织工程骨具有良好的骨缺损修复能力。