中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)基因组微卫星特征分析

对中国对虾基因组随机测序，获得了总长度约为641000个碱基的基因组DNA序列，从中找到1362个重复序列。其中，两碱基重复类型的重复数目最多(985个)，占重复序列总数目的72．32％；其次是三碱基(149个)和四碱基(102个)，分别占重复序列总数目的10．94％和7．49％。另外，六碱基重复34个，单碱基重复50个，五碱基重复5个，分别占重复序列总数目的2．50％、3．67％、0．37％。在单碱基重复类型中，重复拷贝类别为A的重复数目最多；两碱基重复类型中，AT重复数目最多，其次是AC和AG；三碱基重复类型中以AAT重复拷贝类别最多．其次是AAG和ATC；四碱基重复类型中，AGAT重复数目最多；五碱基重复类型只发现了AGAGA、GAGGC、TCTYC和TTTCT四种重复拷贝类别；六碱基重复中以ATTATC重复数目最多。其中一些序列已经提交GeneBank注册，注册号为AY545898-AY545913。中国对虾基因组二碱基重复类型中以不完全(Imperfect)形式的微卫星序列为主，其中GC重复拷贝类别的重复数目很少。利用8对微卫星引物对60个个体遗传多样性分析，共获得了60个等位基因，因此认为微卫星技术在中国对虾基因组研究中具有较好的应用前景。     

中国对虾(Penaeus chinensis)精子ATP酶活力与生殖关系的探讨

首次报道了中国对虾精子存在有Ｎａ，Ｋ－ＡＴＰ酶及Ｍｇ－ＡＴＰ酶活力，并对 其生物功能进行了探讨。对来自不同季节的雌虾纳精囊中精子的两种ＡＴＰ酶活力 进行了测定。酶分析的结果为春虾精子的 Ｎａ，Ｋ－ＡＴＰ酶活力为 １．１４５±０．２２９μｍｏｌ Ｐｉ／ｍｇ· ｈ，秋虾则为 １． ０５８±０． ４３１μｍｏｌ Ｐｉ／ｍｇ· ｈ；春虾精子的 Ｍｇ－ＡＴＰ酶活力为 １． ６４７±０． ６９１μｍｏｌ Ｐｉ／ｍｍ· ｈ，秋虾则为 １． ５８４±０． ３１５μｍｏｌ Ｐｉ／ｍｇ· ｈ。因此在表观 上，春虾精子的两种ＡＴＰ酶活力均略高于秋虾，但差异不够显著。     

中国对虾(Penaeus chinensis)病害爆发流行期间杆状病毒亚微形态的电镜观察

对１９９４￣１９９５年中国对虾病害爆发期间病虾肝胰脏、鳃、胃、及肠组织进行了透射电镜观察。结果表明，多亚群杆状病毒感染是病害发生的主要原因。杆状病毒以无包涵体１００￣１３０ｎｍ×５００￣５２０ｎｍ、１１０￣１３０ｎｍ×３００￣３３０ｎｍ及有包涵体的１００￣１３０×３００￣３３０ｎｍ３种形态存在。     

斑节对虾(Penaeus monodon)蛋白质的氨基酸分析

１９９３年分析了不同大小斑节对虾肌肉中游离氨基酸含量和肌肉蛋白质中的氨基酸组成。虾体肌肉中有各种游离氨基酸存在，但数量很少，而且比例与肌肉中结合氨基酸不一致。不同大小斑节对虾，其肌肉中氨基酸组成基本一样，不同的是小虾的半胱氨酸、蛋氨酸含量比中虾、成虾的低；成虾的缬氨酸、异亮氨酸含量比小虾、中虾的低，而酪氨酸、苯丙氨酸、天门冬氨酸较高。随着虾体的长大，甘氨酸、丙氨酸的含量逐渐下降，而脯氨酸的含量升高     

中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)人工选育群体不同世代的微卫星分析

采用微卫星DNA技术对中国对虾人工选育快速生长基础群体和4个连续世代共计100个个体进行了遗传分析。对8个基因位点进行了扩增，共得到71个等位基因。每个位点的等位基因数从6到16不等，其大小在159--600bp之间，P，C(Polymorphism Information Content)值为0．6628—0．9051，基因型数为17—67。5个世代群体的平均杂合度分别为0．7188、0．5687、0．6188、0．6438、0．66937。从F-检验的数据来看，配对比较Fst值表明5个世代群体间的遗传分化程度较弱。Fi值的计算结果表明，有5个群体位点杂合度处于过剩状态，但对整个群体而言，5个世代群体均表现为一定程度的杂合子缺失。通过计算每个位点的等位基因数(nα)、有效等位基因数(αe)、基因型数目(G)、最高频率等位基因的频率(F)，以及基于基因型的P值，比较了5个群体的遗传变化。另外，5个世代群体间的相似性系数以及彼此间的遗传距离，体现出人工选育群体间的遗传分化程度较低，说明5个世代群体间的遗传分化程度较低，还有较大的选育潜力，可以继续保持遗传响应。     

摘除眼柄诱导斑节对虾成熟产卵的研究

本实验结果表明,摘除斑节对虾(Penaeus monodon Fabficius)左或右侧眼柄,可以诱导卵巢发育成熟产卵,且成活率高,亦不影响正常摄食和交配活动。不摘除眼柄和摘除两侧眼柄,迄今尚未见到卵巢发育之虾。 实验还表明:选择雌虾体长210mm、体重140g以上,在水温27—3l℃,盐度30—35‰,pH值7.2—8.5,弱光(光照度100—500Ix),光质为蓝或绿光,溶解氧4mg/L以上,外界环境尽量避免干扰,微循环水流动,饵料以贝类,日投喂量10%的条件下培养,催熟效果好。 本实验也为在对虾属中进行种间杂交培育优良品种提供了依据。     

中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)耐低温和生长性状的遗传参数估计

The inability of Fenneropenaeus chinensis to tolerate low temperatures is of major economic concern in temperate climates,as it reduces their growing season and leads to over-winter mortality.In this study,the heritability of body weight under low grow-out temperature and cold tolerance in F.chinensis were first investigated and estimated using 88 ful-sib families,which might provide crucial information in Chinese fleshy prawn breeding programs.The heritability for body weight under suitable and low temperature of F.chinensis were both moderate(0.158 0±0.307 5 and 0.132 0±0.026 9 respectively);the large coefficient of variation(approximately 21%) and moderate estimate of heritability for body weight indicated substantial potential for selective breeding.The heritability estimate for cold tolerance was low(0.019 2±0.023 5),and showed no significant differences from zero(P0.05).A weak genetic correlation between cold tolerance and body weight was also estimated in the present study,also showing no significant differences from zero(P0.05).Thus,more research needs to be conducted on the more accurate heritability estimate of cold tolerance and genetic correlations between traits in F.chinensis to further improve the achievement of breeding goals.     

中国对虾三倍体诱导的研究

中国对虾(Penaeus chinensis)主要分布于我国北方沿海,是我国水产养殖业的主要养殖对象,具有极其重要的经济价值。随着养殖事业的发展和人民生活水平的提高,提供优良的对虾品种已势在必行,于是遗传育种的研究引起了人们极大的重视。国家把生物技术在对虾上的应用列为国家“七五”和“八五”攻关课题。 近年来海洋生物多倍体诱导引起了水产养殖界的广泛兴趣(楼允东,1984;吴宝玲等，1986;姜卫国等,1987;王子臣,1990;相建海等,1992; Stanley,1981; Johnstone,1985;Downing,1987; Gosling,1989; Cai et al,1991),主要原因是三倍体较二倍体的生长速度快,长出的个体也比二倍体大,可得到较高的经济效益;同时,多倍体的诱导方法对染色体调控、性别决定和人工雌核发育(蔡难儿等,1995)等的研究都具有重要的意义。中国对虾的多倍体诱导不论从理论上还是从应用上都具有积极的意义,是一条值得探索的改良对虾品种的良好途径。     

中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)视神经节神经内分泌细胞电生理特征

利用膜片钳技术对体外培养24—48h中国对虾的视神经节端髓A型和B型神经内分泌细胞进行电生理特征研究。电流钳的结果表明，A型细胞具有自发和诱发放电活动；B型细胞没有记录到明显放电活动。在电压钳模式下，中国对虾视神经节神经内分泌细胞表达TTX敏感Na^ 通道、高电压激活L型Ca^2 通道、TEA敏感晚钾通道、早钾通道。Ca^2 通道电流在-40— -30mV被激活，在-10—0mV时达到峰值；Ca电流受钳制电压的影响。一定电压范围内，钳制电压越负，Ca电流就越大。外向的钾通道电流均在-40mV左右被激活。晚钾通道电流对TEA敏感，但TEA不能完全阻断晚钾通道电流。     

中国对虾人工诱导雌核发育的研究Ⅰ──四步诱导法

１９９０￣１９９３年于青岛采用研究鱼类人工诱导雌核发育相类似的方法－紫外线照射精子、受精、温度或细胞松胞素Ｂ处理卵子方法，对中国对虾进行人工雌核发育的研究。实验结果，有三批材料获得较好的效果；二批培育到蚤状幼体，另一批培育到３￣３．５ｃｍ幼虾。经受精细胞学观察，被照射的精子经受精，其核有的不能原核化，有的虽能原核化，且能向中央迁移，但都不能与卵原核结合。实验表明，这三批育出的个体是雌核发育的个体。     

中国对虾微卫星DNA的筛选

于2000年2月以中国科学院海洋研究所水族楼暂养的中国虾对材料，采用常规方法从尾部肌肉中提取DNA，构建小片段部分基因组文章，采用人工设计合成的（CT）7，（AT）7重复征段作引物，利用RCR法对中国对虾小片段部分基因组文库进行筛,一实验首冼 对中国对虾中获得31个微卫星序列，分别分析于18个阳性重组克隆中，其中perfect共23个，占74％，imperfect2个，占7％，compound perfect1个，占3％，compound imperfect5个，占16％，结果还表明，在中国对虾基因组DNA中，（CT）n,(AT)n)形式的微卫星序列的含量非常丰富。     

中药制剂对中国对虾免疫活性物的诱导作用

分别于１９９４年和１９９５年９－１０月以胶州湾海捕中国对虾为材料，取其血淋巴测定血凝素活力，溶菌活力，并以投喂添加ＶＣ，ＶＢ６，中药制剂１号，中药制剂２号的药饵１７ｄ，２５ｄ后的免疫性的活力动态变化，     

中国对虾雌虾的心率及有关影响因素的研究

１９９６年４月初在青岛近海捕成熟中国对虾雌虾,观察其在产卵期间的心率变化以及惊扰、温度、光照等条件对其心率的影响。结果表明,成熟雌虾的心率在静态时约为３８－７５次／ｍｉｎ,且与温度呈正相关;在受到惊扰时,心率急剧升至为静态水平的１．５倍,约３０ｍｉｎ后回落到静态水平,产有２－４ｈ,雌虾心率开始逐渐升高,产卵时达到１３０－１５０次／ｍｉｎ,约为静态心率的２－３倍,产卵后２－４ｈ回落到静态水平,光心率     

中国对虾幼体中肠的超微结构

１９９５年４月,在山东日照市涛雒对虾育苗场采集中国对虾各期幼体,采用超薄切片和电观察的方法,对其中肠结构进行观察研究,结果表明,中国对虾幼体的中肠肠壁由３部分组成,即肠上皮、基膜和肌层。中肠上皮细胞具发达的微绒毛,胞质中富含线粒体、内质网、高尔基复合体及酶原颗粒等,它由两类细胞组成。第一类细胞在发育早期占多数,随着幼体的发育逐渐减少,至仔虾期后,肠上波完全由第二类细胞组成,基膜分为内、外两层,且在     

中国对虾异常交配现象的观察

于1989年11月9日—12月10日,在山东莱州市东方红盐场养殖分场亲虾越冬室内,对35尾异常交配雌对虾进行了观察研究。结果表明,异常交配行为能引起对虾各种疾病,导致亲虾群体质量下降、数量减少。提出在人工越冬亲虾交配季节,应及时将已交配的雌虾选出单独培养,同时在越冬的早期水温较高时,不宜在已交配雌虾池内搭配雄虾。     

中国对虾受精生物学的研究

于１９８８－１９９１年在青岛对中国对虾进行受精能力和受精生物学的研究。对虾采用加温和不加温培育，然后用人工授精法－－水域法和滴管法授精研究精卵受精能力；应用扫描和透射电以及石蜡切片技术，精卵的形态结构和受精过程的变化。结果表明，水域法授精，精子入水后３ｈ仍具有受精能力；卵子入水后１ｍｉｎ之内受精率最高只达６２．７％。而滴客法授精，受精率最高可达到９８％。平均值也在６０－８０％之间。保持在低温的亲虾     

中国对虾精子超低温保存的研究

于1991年11月-1993年5月对中国对虾纳精囊中精子进行超低温保存研究。结果表明，以自然海水或人工海水作基础液添加10％DMSO（V／V）及5％－10％的甘油配制成抗冻稀释液，稀释中国对虾精子进行超低温保存最有效，存活率在60％以上；保存94-138d，解冻后作人工授精，受精率最高达59％；稀释液中Mg2+，K+，Ca2+为超低温保存所必需，但Ca2+浓度过高则不利于精子的保存。光镜及电镜观察表明。冷冻对中国对虾精子的损伤主要表现为“棘突”的折断，严重时须体脱落仅剩精核；冻伤的精子不发生正常项体反应，不形成项体丝。     

甜菜渣对中国对虾消化酶的影响研究

于１９９６年１０月在中国科学院海洋研究所选取人工养殖中国对虾（平均体长９．０２ｃｍ），以双缩脲法测定消化器官的蛋白含量；福林一酚试剂法测定蛋白酶活力；Ｓｏｍｏｇｙｉ比色法糖法测定淀粉酶和纤维素酶活力，同时研究中国对虾配合饵料中添加１０％的甜菜渣或１０％经不同方法处理的甜菜渣时，对消化器官蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶活力变化的影响。结果表明，在饵料中添加１０％甜菜渣 经不同方法处理的甜菜渣饲喂中国对虾，     

中国对虾血淋巴蛋白质、葡萄糖含量的研究

于１９９２－１９９３年５月和１０月，在胶州湾捕捞中国对虾亲虾，９月在莱州和胶南采集的人工养殖中国对虾，采用双缩脲法测定其血淋巴中的血清总蛋白含量，用０－ＴＢ法测定血清葡萄糖含量，并研究注射灭菌海水、海洋弧菌后，对中国对虾血清总蛋白含量和血清葡萄糖含量的影响规律。     

中国对虾对日本刺沙蚕的摄食率研究

于１９９６年６月在山东莱阳市养殖场采集中国对虾（体长４．５－６．０ｃｍ体重１．２－３．７ｇ）和日本刺沙蚕（体长１．０－５．０ｃｍ）通过持续２０的室内实验,研究中国对虾对日本刺沙蚕的摄食率,实验条件为：水温２１－２３℃,海水盐度３０－３１,ｐＨ＝８．２－８．６,室内自然光照,实验结果表明,中国对虾对日本刺沙蚕的摄食率Ｃ（ｇ．ｇ＾－１．ｄ＾－１）与体重Ｗ（ｇ）的关系为Ｃ＝０．１５３Ｗ＾０．７０７２,在