小鼠放射性肺损伤过程中TGF-β1和TNF-α的表达变化

目的 观察放射前后肺组织中两种炎症细胞因子的表达,明确放射性肺损伤的发生发展机制.方法 35只Balb/c健康雄性小鼠,随机分为照射组(全肺单次照射12 Gy)和对照组.各组于照射后15、30和90 d终止实验.肺组织行组织病理学检查及Masson染色、免疫组织化学粢色观察TGF-β1、TNF-α表达情况.结果 照射组照射野脱毛、皮肤可见湿疹,部分有糜烂.30 d时即出现广泛胶原纤维沉积.照射后肺组织TGF-β1、TNF-α表达强度均较对照组增高,且随时间延长表达增多(P＜0.05).结论 TGF-β1和TNF-α参与了放射性肺损伤的发生发展.     

复方丹参对实验性急性坏死性胰腺炎细胞因子的影响

目的:探讨复方丹参对实验性急性坏死性胰腺炎(acute necrotic pancreatitis,ANP)细胞因子的影响.方法:制作ANP鼠模型,给予复方丹参治疗,制备血清,ELISA检测TNF-α、IL-1β和TGF-β的表达水平.结果:ANP模型中,TNF-α和IL-1β早期(3 h)即显著升高,TGF-β进展期(6 h)显著升高;复方丹参可以抑制炎症细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌,抑制发病后期TGF-β的高表达.结论:复方丹参对急性坏死性胰腺炎的治疗作用可能与其抑制炎症性细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌和影响TGF-β的产生有关.     

川芎嗪对大鼠肠粘连组织MMP-9、TIMP-1和细胞因子表达的影响

目的:观察川芎嗪对肠粘连模型大鼠粘连肠组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达及血清白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子(TGF-β)水平的影响,探讨川芎嗪预防肠粘连作用机制。方法:72只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、假手术组、手术组及川芎嗪组,每组18只。正常对照组不行手术,假手术组仅行腹腔开关术,川芎嗪组术后每天腹腔注射川芎嗪溶液10mL(净含川芎嗪约0.1g),其余三组注射等量生理盐水。各组于术后第2、7、14天取血,肉眼观察肠粘连的程度分级;酶联免疫吸附法测定血清细胞因子IL-1、TNF-α、TGF-β。免疫组织化学染色加图像分析法观测MMP-9及TIMP-1表达。结果:手术组及川芎嗪组肠粘连程度显著增加(P<0.05),与手术组比较,川芎嗪组肠粘连程度明显减轻(P<0.05)。与手术组比较,川芎嗪组IL-1、TNF-α及TGF-β水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。术后2天,与手术组比较,川芎嗪组肠组织MMP-9表达显著降低(P<0.05),TIMP-1未见明显改变(P>0.05)。术后7天及14天,川芎嗪组肠组织TIMP-1表达较手术组有显著增高(P<0.05),MMP-9无明显改变(P>0.05)。结论:川芎嗪可能通过影响血细胞因子IL-1β、TNF-α和TGF-β1水平及肠组织MMP-9和TIMP-1表达,一定程度上抑制大鼠肠粘连。     

系统性红斑狼疮患者尿液相关细胞因子的检测及临床意义探讨

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者尿液TNF—α、TGF—β1、IL-6、MCP-1水平与狼疮活动指数之间的关系。方法选取诊断明确的湖北省荆州市第一人民医院住院SLE患者86例,依据患者SLEDAI评分分为两组：疾病活动组（SLEDAI≥10分,52例,c组）和疾病非活动组（SLEDAI〈10分,34例,B组）。笔者医院体检中心的健康体检者30例为正常对照组（A组）。收集受检者晨尿,采用免疫散射比浊法检测患者尿液TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1水平;对活动性狼疮患者进行药物治疗,治疗后再次记录患者SLEDAl评分,并检查尿液细胞因子水平,并进行相关分析各指标与SLE疾病活动指数（SLEDAI）的相关性。结果活动期C组患者以上4种细胞因子水平均明显高于B组,B组以上4种细胞因子水平明显高于A组。而C组患者经药物治疗后,SLEDAI评分下降,其尿液4种细胞因子水平也降低,相关分析显示以上4种细胞因子的水平与SLE患者疾病活动指数SLEDAI呈正相关。结论SLE患者尿液细胞因子的检测可以提示系统性红斑狼疮患者疾病活动,对患者疗效的判断也具有重要意义。     

胃癌细胞因子变化规律与肿瘤相关性乏力关系研究

目的 研究胃癌伴肿瘤相关性乏力患者细胞因子基因表达谱的变化规律,验证肿瘤相关性乏力的发病学机制可能是由TNF和TGF-β等细胞因子基因表达上调引起的理论研究结论。方法 采用基因芯片技术检测胃癌伴乏力患者及胃癌不伴乏力患者的外周血单个核细胞的细胞因子基因表达谱的变化情况。结果 胃癌伴有乏力患者较胃癌不伴乏力患者的TNF—α、TGF-β1等细胞因子基因表达上调。结论 胃癌伴有乏力时TNF—d、TGF-β。等细胞因子基因表达上调,初步验证了肿瘤相关性乏力的发病学机制可能是由TNF及TGF—β等细胞因子基因表达上调引起的。     

细胞因子IL-1β和TNF-α在骨关节炎软骨中mRNA表达的变化及意义

目的探讨IL-1β和TNF-α mRNA在大鼠实验性骨关节炎软骨表达的变化和意义。方法采用Hulth法制作大鼠膝关节0A动物模型，于术后8周取标本并观察关节软骨形态，RT—PCR技术检测mRNA表达。结果0A模型侧关节软骨的IL-1β和TNF-α mRNA表达均高于对照侧。结论OA软骨中存在IL-1β和TNF-α mRNA表达的上调，可能是OA的发病机制之一。     

IL-9等细胞因子在OA软骨组织中的表达与软骨退变的关系

目的观察骨关节炎关节软骨中TNF-α、TGF-β、IL-6和IL-9的表达,探讨其与软骨退变的关系及可能的作用机制,为OA的预防与治疗提供理论依据。方法选取20例因骨关节炎行关节置换的软骨组织,ABC免疫组化法观察关节软骨TNF-α、TGF-β和IL-6、IL-9的表达,2例因意外受伤截肢患者的正常膝关节软骨标本作为对照。用SimplePCI图象分析系统进行半定量分析。统计采用Mann-WhitneyU非参数检验及相关分析。结果TNF-α和IL-6在正常软骨全层均呈低表达,但在退变软骨中的表达则明显增多,光密度值行U检验,两组差异有显著性(P&lt;0.01)。在正常与OA中、晚期软骨的浅层,TGF-β的表达无显著性差异;但在深层软骨中,OA软骨的TGF-β表达较正常软骨明显增多,两组差异有显著性(P&lt;0.01)。在正常与OA中期软骨的浅层,IL-9表达无差异,但均较OA晚期软骨浅层高表达,差异有显著性(P&lt;0.01);而在软骨深层,OA中、晚期IL-9的表达均较正常软骨高,差异有显著性(P&lt;0.01),但在OA中期与晚期两者间无显著性差异。结论TNF-α、IL-6在软骨退变中起分解性细胞因子作用,TGF-β、IL...     

复方大承气汤灌服加中药脐眼外敷对肠粘连大鼠模型腹膜粘连程度的影响

目的 研究复方大承气汤灌服和芒硝、冰片、吴茱萸适量混合后于脐眼外敷预防大鼠模型术后肠粘连的作用及机制.方法 雄性SD大鼠120只,随机分为对照组、模型组、医用几丁糖组、生长抑素组、中草药一组和中草药二组.除正常对照组外,其余各组大鼠均采用Ellis法制备肠粘连模型,造模后对照组和模型组正常喂养,其余各组分别给予相应药物:医用几丁糖组在造模关腹时局部涂抹几丁糖;生长抑素组给予皮下注射醋酸奥曲肽0.1 μg/g,1次/12 h;中草药一组给予复方大承气汤煎液0.05 mL/g灌服,2次/d;中草药二组在一组用药的基础上,用芒硝、冰片、吴茱萸适量混合后外敷于脐眼.各组于造模术后第8天下腔静脉取血后处死,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,肉眼观察肠粘连的程度并分级,采用免疫组化法测定腹膜粘连组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达.结果 与模型组对比,医用几丁糖组、生长抑素组、中草药一组和中草药二组大鼠血清中TNF-α含量依次降低,局部粘连程度依次减轻,粘连组织中TGF-β1表达依次减少,中草药一组和二组与模型组、医用几丁糖组、生长抑素组相比差异有统计学意义(P<0.05),中草药二组和中草药一组之间相比差异有统计学意义(P<0.05),医用几丁糖组和生长抑素组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 联合应用复方大承气汤灌服和芒硝、冰片、吴茱萸适量混合后于脐眼外敷能显著抑制纤维结缔组织的增生,减轻造模大鼠模型局部粘连程度.     

心乐胶囊对病毒性心肌炎模型小鼠TNF-α、TGF-β1mRNA表达的影响

目的：通过观察心乐胶囊对CVB3致病毒性心肌炎BABL/c小鼠TNF-α、TGF-β1 mRNA表达影响,探讨心乐胶囊治疗病毒性心肌炎的作用机制和疗效。方法：健康雄性BABL/c小鼠60只,随机数字表法分为6组：空白组、模型组、玉丹荣心丸组及心乐胶囊高、中、低剂量组,每组10只。利用原位杂交技术观察心乐胶囊对CVB3致病毒性心肌炎小鼠TNF-α、TGF-β1 mRNA表达影响。结果：与空白组比较,模型组小鼠心肌组织TNF-αmRNA表达增高,有显著差异（P〈0.05）,模型组小鼠心肌组织TGF-β1 mRNA表达增高,有显著差异（P〈0.01）;与模型组比较,玉丹荣心丸组、心乐胶囊各剂量组均可降低心肌组织TNF-αmRNA表达,有显著差异（P〈0.01）,玉丹荣心丸组、心乐胶囊各剂量组均可降低心肌组织TGF-β1 mRNA表达,有显著差异（P〈0.05）;与玉丹荣心丸组比较,心乐胶囊各剂量组均可使小鼠心肌组织TNF-α、TGF-β1 mRNA表达降低,有显著差异,其中以心乐胶囊高剂量组最为明显（P〈0.01）。结论：（1）心乐胶囊能够明显地降低病毒性心肌炎小鼠TNF-α、TGF-β1 mRNA表达。（2）心乐胶囊可以减轻心肌细胞炎症反应,抗心肌纤维化,保护心肌,减轻心肌的损伤。     

关节炎疼痛对大鼠脊髓促炎性细胞因子的影响

目的观察关节炎疼痛对大鼠脊髓促炎性细胞因子IL-1β和TNF-α水平的影响。方法Wistar大鼠20只，150—180g，雌雄各半，随机分为对照组和实验组。对照组右后踝关节腔注射生理盐水，实验组左后踝关节腔注射完全弗氏佐剂，制备单发佐剂性关节炎动物模型。4周后用屈关节疼痛试验评分法测定关节炎疼痛行为学变化，取腰段脊髓，ELISA法测定脊髓中IL-1β和TNF-α含量。结果实验组屈关节疼痛试验评分较对照组明显降低（P〈001），IL-1β和TNF-α水平较对照组明显升高（P〈001）。结论关节炎疼痛时脊髓IL-1β和TNF-α水平升高，提示脊髓促炎性细胞因子与关节炎疼痛的病理生理机制有关。     

X射线致EA.Hy926内皮细胞血管损伤模型的建立

目的:探讨构建血管内皮细胞持续分泌炎症因子的血管损伤模型的方法。方法:2 Gy分割剂量的6 MV-X线(2Gy/F,5F/W,总计40Gy)照射人脐静脉融合细胞系EA. Hy926,照射野35cm×35cm,源皮距100cm。在照射期间及末次照射后1月,2月,3月,4月,5月提取细胞总RNA、总蛋白,以未照射组为对照组,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测炎症相关因子转录水平表达情况,Western Blot法检测炎症因子蛋白水平的表达情况。结果:经2Gy×20次放疗后1-5月,人脐静脉融合细胞系EA. Hy926细胞炎症因子,与对照组相比,在转录与蛋白水平,表达均升高(P<0.05)。结论:放射性血管损伤细胞模型中,内皮细胞EA. Hy926炎症因子表达上调,导致放疗后血管损伤,促进放疗后晚期皮肤纤维化的发生。     

抵抗素诱导脐静脉内皮细胞功能异常

【目的】研究抵抗素（resistin）对脐静脉内皮细胞功能的影响，以探讨抵抗素在粥样硬化性疾病中的作用及其机制。【方法】原代培养人脐静脉内皮细胞，不同浓度人抵抗素（0、50、100ng／mL）培养24h。流式细胞检测抵抗素对内皮细胞间黏附分子（ICAM-1）、血管细胞间黏附分子（VCAM-1）与活性氧簇（ROS）表达的影响；RT-PCR检测抵抗素对内皮素（ET-1）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达的影响。【结果】人脐静脉内皮细胞经人抵抗素（50ng／mL、100ng／mL）处理24h后ICAM-1和ET-1mRNA表达显著增高，而各组间VCAM-1表达、ROS生成，以及eNOS和iNOS mRNA表达无明显差别。【结论】抵抗素可通过增加ICAM-1表达，上调ET-1表达直接促进内皮细胞激活，提示脂肪细胞与内皮细胞的相互作用可能是动脉粥样硬化性疾病的发病因素之一。     

抵抗素诱导脐静脉内皮细胞功能异常

 【目的】研究抵抗素（resistin）对脐静脉内皮细胞功能的影响，以探讨抵抗素在粥样硬化性疾病中的作用及其机制。【方法】原代培养人脐静脉内皮细胞，不同浓度人抵抗素（0、50、100ng／mL）培养24h。流式细胞检测抵抗素对内皮细胞间黏附分子（ICAM-1）、血管细胞间黏附分子（VCAM-1）与活性氧簇（ROS）表达的影响；RT-PCR检测抵抗素对内皮素（ET-1）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达的影响。【结果】人脐静脉内皮细胞经人抵抗素（50ng／mL、100ng／mL）处理24h后ICAM-1和ET-1mRNA表达显著增高，而各组间VCAM-1表达、ROS生成，以及eNOS和iNOS mRNA表达无明显差别。【结论】抵抗素可通过增加ICAM-1表达，上调ET-1表达直接促进内皮细胞激活，提示脂肪细胞与内皮细胞的相互作用可能是动脉粥样硬化性疾病的发病因素之一。     

高糖通过Akt信号通路诱导内皮细胞衰老

目的:探讨高糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)衰老及Akt表达的影响。方法:不同浓度的葡萄糖(5.6mmol/L、16.7mmol/L、33mmol/L)加入体外培养的人脐静脉内皮细胞,24小时后β半乳糖甘酶染色检测细胞衰老率和免疫组化法检测Akt活性。结果:5.6mmol/L葡萄糖对内皮细胞衰老作用不明显,16.7mmol/L和33mmol/L均导致细胞的衰老,并且随着浓度增加,衰老更为显著。同时,出现了Akt磷酸化水平的下降。结论:高糖可导致血管内皮细胞的衰老,其机制可能与Akt蛋白活性下调有关。     

缺血再灌注诱导大鼠脑毛细血管内皮细胞凋亡

研究了大鼠大脑中动脉短暂闭塞后血脑屏障通透性与凋亡脑毛细血管内皮细胞的关系。结果表明，血脑屏障受损程度与凋亡脑毛细血管内皮细胞数量随缺血时间延长而增加，脑毛细血管内皮细胞凋亡可能参与了血管源性脑水肿的形成机制。     

人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立

目的 运用人重组Fas配体（rhFasL），体外诱导稳定而又典型的Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型，为针对其细胞凋亡过程中的细胞周期机制研究、肿瘤的生物学治疗和自身免疫性疾病的防治等提供科学的研究平台。方法 以白血病细胞系（Molt-4和Jurkat细胞系）和进入细胞周期的外周血淋巴细胞为载体，用人重组Fas配体诱导细胞6～36h后，用亚G1峰法、传统的AnnexinV／PI和改良后的API法进行标记并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 改良后的API法显示人重组Fas配体诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性及始动位点；传统的AnnexinV／PI显示在将细胞凋亡控制在10％～20％并以早期细胞凋亡为主时诱导的模型最典型；亚G1峰法只能检测晚期细胞凋亡和进行DNA直方图分析。结论人重组Fas配体体外诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性并始动于G1期，联合应用传统的Annex-in-V／PI及改良后的API法能为建立稳定而又典型的体外Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型提供技术支撑。     

建立doxycycline诱导表达Xaf1的肿瘤细胞株

【目的】为探索XIAP相关因子1（Xaf1）调节肿瘤细胞凋亡的机制，利用基因开关调节系统（Tet-on），拟建立由doxycycline调控表达的Xaf1诱导细胞株。【方法】将pTREHA-Xaf1和pWZL-Hyg质粒用基因转染技术转入稳定表达nTA的Saos-2细胞中。经过hygromycin的抗性筛选，挑出并扩增表达Xaf1的细胞株。在8例实验组中加入doxycycline，和不加doxycycline的8例对照组比较，重复3次实验用免疫印迹法和免疫荧光显微镜检测doxycycline对Xaf1表达的调控。Xaf1诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示。【结果】在30个抗hygromycin的细胞株中，免疫印迹法筛选出5个明显由doxycychne调控诱导表达Xaf1的细胞株，免疫荧光显微镜检测显示doxycycline诱导Xaf1表达于细胞核内。流式细胞检测Xaf1于8h开始诱导Saos细胞凋亡，凋亡率最高约20％，而且不影响细胞周期。【结论】Xaf1-Saos诱导细胞株是研究Xaf1调节肿瘤细胞凋亡机制的良好细胞模型；Xaf1是一种核蛋白，能独立诱导肿瘤细胞凋亡。     

脂质过氧化损伤的内皮细胞对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的研究脂质过氧化损伤的内皮细胞(endothelial cell,EC)对血管平滑肌细胞(vessel smooth musclecells,VSMC)凋亡的影响.方法以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应,将制备的内皮细胞条件培养液(endothelial cell conditional medium,     

兔髂动脉内膜损伤后血管狭窄模型的建立

建立经皮冠状动脉成形术（PTCA）后再狭窄动物模型是研究再狭窄机制的基础。根据国人冠状动脉的解剖特点，用直径2.5mm球囊导管，损伤兔髂动脉内膜，28d后，组织经HE染色，Van Gieson胶原染色，α-肌动蛋白免疫组化实验，通过图像分析系统分析，测定狭窄指数和增殖指数。结果表明，此动物模型能较好地模拟PTCA后血管再狭窄的病理过程，证实平滑肌细胞的增生是引起再狭窄的主要原因。     

雌激素诱导泌乳素瘤动物模型的建立及稳定性的观察

【目的】 通过注射苯甲酸雌二醇建立大鼠泌乳素瘤动物模型,并鉴定肿瘤模型的稳定性?【方法】 取40只雌性Wistar大鼠随机分成对照组(A组)和用药组:注射苯甲酸雌二醇8周组(B组)?注射苯甲酸雌二醇12周组(C组)和撤除苯甲酸雌二醇4周组(D组),每组10只?每隔15 d记录大鼠的体质量变化,并在相应的时间处死大鼠称量垂体质量并观察成瘤情况质量?取各组垂体进行HE染色和泌乳素免疫组化来鉴定泌乳素瘤?选取1只大鼠做标记,分别在注射苯甲酸雌二醇8?12周以及撤除苯甲酸雌二醇4周后做MRI,通过动态观察垂体大小的变化来鉴定泌乳素瘤模型的稳定性?【结果】苯甲酸雌二醇诱导组大鼠体质量明显增长缓慢,并且在2周左右开始出现脱毛现象,B?C和D组致瘤率分别为70%?100%和100%?苯甲酸雌二醇诱导组HE染色细胞排列紊乱,出现核深染细胞,血管丰富?免疫组化鉴定为泌乳素瘤,泌乳素阳性表达细胞明显多于对照组?MRI显示随着苯甲酸雌二醇诱导时间的增长,垂体体积逐渐增加,且在撤除苯甲酸雌二醇后垂体体积并未缩小,证明泌乳素瘤模型的稳定性? 【结论】 腹腔注射苯甲酸雌二醇诱导大鼠泌乳素瘤不仅诱导率高,而且具有很好的稳定性?