生长因子在颅缝闭合中调节作用的实验研究

最近的研究表明硬脑膜和其分泌的生长因子(TGF)决定着颅缝的闭合，颅缝早闭的模型研究中发现许多生长因子的高表达，而在开放颅缝中生长因子表达微弱^[1]。我们拟进一步探讨生长因子对大鼠颅缝间质细胞的成骨诱导作用和IGF，体外对小鼠矢状缝闭合的直接作用。     

生长因子FGF在颅缝细胞培养中作用的研究

目的:研究生长因子FGF在颅缝闭合中的调控作用.方法:以颅缝早闭动物模型(SD鼠)的颅缝为研究模型,采用细胞生物学技术、组织化学技术,研究颅缝闭合期间,生长因子bFGF作用下,细胞胶原及骨钙素分泌情况;观察生长因子bFGF,对分离培养的颅缝细胞增殖与代谢影响.结果:在大鼠颅缝分离培养细胞中,bFGF促进颅缝分离培养细胞分泌胶原、骨钙素,加快细胞增殖生长曲线平台期出现,并有效促进大鼠颅缝分离培养细胞S期增殖(p＜0.05).结论:在体外器官培养中,bFGF能促进大鼠分离培养颅缝细胞的活性(p＜0.05).     

生长因子在颅缝早闭症中作用的研究进展

颅缝早闭是一种较常见的先天性颅面畸形,表现为一条或多条颅缝过早闭合。多种因素可以在胚胎期及出生后影响头骨的发育,从而导致不同类型的颅缝早闭。目前研究表明,生长因子与颅缝闭合过程有着密切的联系,本文就生长因子在颅缝早闭症中作用的研究进展进行综述。     

子宫内局部生物力学改变与胚胎兔颅缝早闭相关性的实验研究

目的研究兔子宫内作用于胚胎颅骨局部生物力在兔颅缝闭合过程中的调控作用。方法通过对妊娠25d大白兔宫内胚胎，硬脑膜外的颅骨矢状缝用5—0可吸收线缝合，改变其矢状缝局部生物作用力，建立子宫内胚胎颅骨局部生物力学改变的模型。采用胚胎外科技术、组织化学技术，研究局部生物动力学改变后，颅缝组织中的骨钙素（Osteocalcin，OCN）及骨桥蛋白（Osteopontin，OPN）的分泌情况。结果在胚胎兔出生后9d，其被缝合的矢状缝组织中OCN及OPN的含量明显增加。与对照组之间有明显差异（p〈0．05）。结论宫内局部生物力学改变，促进兔单条颅缝组织中OCN及OPN的分泌。     

胰岛素样生长因子-1对成骨细胞生长影响的实验研究

目的:探讨胰岛素样生长因子-1对成骨细胞生长增殖的影响.方法:采用酶消化法获取兔骨膜成骨细胞,取第三代成骨细胞与0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml的胰岛素样生长因子-1共同体外培养,在第1～7d观察细胞的形态、生长特点,MTT法测定细胞增殖情况,并通过细胞计数绘制细胞生长曲线.结果:不同浓度的胰岛素样生长因子-1对成骨细胞的生长增殖与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01),各浓度之间对成骨细胞的生长增殖亦存在显著性差异(P＜0.05).结论:胰岛素样生长因子-1对成骨细胞生长增殖具有促进作用,在0.1～10ng/ml范围内此种作用与浓度呈正相关.     

卵巢癌中胰岛素样生长因子-1及其受体表达与临床病理特征的相关性

目的研究卵巢癌中胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)及其受体IGF-1R表达与临床病理特征、手术预后的相关性。方法采用免疫组化检测卵巢癌、卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤中IGF-1、IGF-1R的阳性表达率,分析IGF-1、IGF-1R与临床病理特征、手术预后的相关性。结果卵巢癌中IGF-1、IGF-1R的阳性表达量率分别为65.63%、70.31%,明显高于卵巢交界性肿瘤中IGF-1、IGF-1R的阳性表达量率22.22%、16.67%及卵巢良性肿瘤中IGF-1、IGF-1R的阳性表达量率5.00%、10.00%(χ^2/P=27.548/0.000、31.335/0.000),IGF-1、IGF-1R的mRNA表达量及蛋白表达量也明显高于卵巢交界性肿瘤及卵巢良性肿瘤(F/P=31.922/0.000、26.865/0.000、34.567/0.000、27.667/0.000);国际妇产科协会(federation international of gynecology and obstetrics,FIGO)III^IV期、组织分化程度G2~G3、CA125≥35 U/ml、Ki67阳性的卵巢癌中IGF-1、IGF-1R的阳性表达率明显高于FIGO I^II期、组织分化程度G1、CA125<35 U/ml、Ki67阴性的卵巢癌(IGF-1的χ^2/P=8.505/0.004、4.980/0.026、7.481/0.006、10.907/0.001;IGF-1R的χ^2/P=9.785/0.002、4.950/0.026、7.211/0.007、6.471/0.011);卵巢癌IGF-1阳性患者的总生存时间较IGF-1阴性患者缩短。结论IGF-1、IGF-1R在卵巢癌中高表达,且与病理特征及手术预后的恶化相关。     

颅缝早闭症相关实验荧光定量PCR内参基因的选择研究

目的探讨用于颅缝早闭症相关实验的荧光定量PCR的最佳内参基因。方法应用与颅骨成骨、颅缝闭合相关的3组实验标本,分别为:Fgfr2cC342Y/+Crouzon综合征小鼠颅缝组织、颅缝早闭患者体外培养颅缝原代细胞和体外培养的小鼠Kusa 4b 10成骨细胞株。以常用的候选管家基因作为研究对象,利用geNorm软件对RT-qPCR结果进行比较分析,以筛选出在不同组织细胞中表达最为稳定的管家基因作为内参。结果Fgfr2cC342Y/+小鼠颅缝组织,Cyc1-Gapdh-Canx为最佳组合;颅缝早闭症患者体外培养颅缝原代细胞,18S rRNA和ATP5B为最佳组合;体外培养的小鼠Kusa 4b10成骨细胞株,18S rRNA和Canx为最佳组合。选择不同内参基因对目的基因RT-qPCR的结果影响显著。结论在设计RT-qPCR实验之前,应针对所选择的标本类型与种类进行管家基因稳定性分析,以增加结果的可信度。     

胰岛素样生长因子-1及其受体在前列腺癌组织的表达及其临床意义

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)在前列腺癌(PCa)组织中的表达及其临床意义。方法:取2017年1月至2019年12月河北医科大学第三医院泌尿外科的41例前列腺癌患者的前列腺组织作为实验组;并收集21例良性前列腺增生(BPH)患者前列腺组织当做对照组;并通过前列腺特异性抗原(PSA)...     

胰岛素生长因子—1与成骨细胞

胰岛素样生长因子 - 1(ＩＧＦ - 1)是一个由 70个氨基酸残基组成的单链多肽 ,由 3个二硫键相连 ,分子量为 760 0。胰岛素样生长因子 - 1和生长介素Ｃ是同一部分 ,受垂体生长激素的控制。胰岛素样生长因子 - 1是各种组织细胞有丝分裂原 ,包括成纤维细胞、成骨细胞、平滑肌细胞等 ,对成骨细胞有中等促进有丝分裂作用。调节了动物细胞周期Ｇ1期的活动 ,并具有胰岛素样作用。胰岛素样生长因子 - 1是骨骼细胞分泌的重要生长因子 ,以自分泌、旁分泌的形式调节成骨细胞的功能。以下就胰岛素样生长因子 - 1基因构成、骨骼分布特点及其对成骨细胞作用…     

胰岛素样生长因子-1在原发性结直肠癌中表达的研究

目的 通过在肝特异性胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)基因缺失(LID)小鼠体内建立稳定的原发性结直肠癌模型,探讨IGF-1 与小鼠原发性结直肠癌发生可能存在的关系.方法 ①建立结直肠癌模型: 使用LID小鼠(实验组)和BALB/c小鼠(对照组).LID小鼠体循环中的IGF-1水平仅为BALB/c小鼠的25%,用化学致癌剂1,1二甲基肼(DMH)颈部皮下注射诱导原发性结直肠肿瘤.②应用免疫组织化学法(SP)对80只模型小鼠的结直肠癌组织及其癌旁组织标本进行IGF-1的抗原染色,将染色结果与小鼠的体质量及结直肠的致癌情况进行综合分析.结果 ①实验组和对照组小鼠的体质量在注药后与注药前比较体质量均减轻,注药后18及24周时与各组注药前相应时相比较差异有统计学意义(P＜0.05).②IGF-1免疫组化染色结果: IGF-1在结直肠癌中的表达部位是在癌细胞的核周胞浆中,呈弥散状分布.③IGF-1在实验组和对照组结直肠癌组织及癌旁组织中表达阳性者分别为6/7只、2/7只及13/16只、7/16只.2组结直肠癌组织中的IGF-1表达阳性者均高于癌旁组织(P＜0.05).实验组和对照组两组间癌组织和癌旁组织中的IGF-1的表达阳性情况差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在致癌剂DMH诱导的结直肠癌模型中,IGF-1 对结直肠癌的发生和发展起重要作用.     

Prognostic value of insulin-like growth factor 1 and insulin-like growth factor binding protein 3 blood levels in breast cancer

High circulating insulin-like growth factor 1 (IGF-1) levels are firmly established as a risk factor for developing breast cancer, especially estrogen positive tumors. The effect of circulating IGF-1 on prognosis once a tumor is established is unknown. The authors explored the effect of IGF-1 blood levels and of it's main binding protein, IGFBP-3, on overall survival and occurrence of second primary breast tumors in breast cancer patients, as well as reproductive and lifestyle factors that could modify this risk. Patients were accrued from six hospitals in the Netherlands between 1998 and 2003. Total IGF-1 and IGFBP-3 were measured in 582 plasma samples.No significant association between IGF-1 and IGFBP-3 plasma levels and overall survival was found. However, in a multivariate Cox regression model including standard prognostic variables high IGF-1 levels were related to worse overall survival in patients receiving endocrine therapy (HR = 1.37, 95% CI: 1.11, 1.69, P 0.004). These data at least indicate that higher IGF-1 levels, and as a consequence most likely IGF-1-induced signaling, are related to a less favorable overall survival in breast cancer patients treated with endocrine therapy. Interventions aimed at reducing circulating levels of IGF-1 in hormone receptor positive breast cancer may improve survival.     

碱性成纤维生长因子对颅缝细胞成骨分化的影响

目的 探讨碱性成纤维生长因子（FGF-2）对颅缝细胞成骨方向分化的影响.方法 ①获取新生SD大鼠颅骨矢状缝及冠状缝处颅缝细胞.②添加不同浓度FGF-2,观察颅缝细胞ALP染色、ALP活性及成骨标志物（osteocalcin,OC）表达量,了解不同浓度FGF-2对颅缝细胞向成骨分化的影响.结果①各浓度FGF-2作用于颅缝细胞后,ALP染色、活性均较对照组减弱（P ＜0.05）.其中10ng/ml FGF-2诱导的细胞ALP受到的抑制最弱.②各浓度FGF-2作用于颅缝细胞后,OC表达量均较对照组增加（P ＜0.05）.其中10ng/mlFGF-2诱导的细胞其OC表达量最高.结论 ①FGF-2抑制颅缝细胞早期成骨标志物ALP的表达,而增强晚期成骨标志物OC的表达.②较低浓度的FGF-2（10ng/ml）对ALP抑制作用最弱,对OC促进作用最强,最利于促进颅缝细胞向成骨方向分化.     

颅面多骨缝固定对颅颌形态影响的实验研究

目的通过固定幼兔颅骨缝，模拟颅骨多骨缝早闭，观察固定后颅颌面生长方式的变化及相互影响的关系。方法采用牙科釉质粘合剂固定２周龄幼兔冠状缝、矢状缝和额间缝，模拟颅骨多骨缝早闭。术后不同时期测量颅穹窿长度、高度、面中部高度、上颌骨长度、面角、腭角和颅底角。结果多骨缝早闭后，颅穹窿高度和长度明显减少，使颅骨变短且扁平。面中部高度和上颌骨长度增大，整个面中骨结构有整体向上移动趋势。面、腭和颅底角增大，这与颅穹窿变浅，面中部高度增大相对应。结论兔出生后１０周前是颅骨缝扩张性生长高峰期，在此期间，某些原因影响颅骨正常生长，必然导致颅面畸形。实验结果与临床颅骨骨缝早闭后表现类似，和主张早期手术矫正畸形观点一致     

胰岛素和胰岛素样生长因子及其结合蛋白与结直肠癌发生的关系

目的探讨血清胰岛素、胰岛素样生长因子（IGF-1）、IGF结合蛋白（IGFBPs）体质量指数（BMI）、腰臀围比（WHR）的变化及与结直肠癌发生、发展的关系。方法检测对象为2006年6月至2007年10月间住院收治和门诊复查的结直肠癌患者615例（术前检测244例,术后371例）和健康对照者150例。采用酶联免疫吸附法检测血清胰岛素、IGF-1和IGFBPS水平。结果结直肠癌患者术前血清胰岛素、IGF-1水平和IGF-I／IGFBP-3比值与健康对照组、术后患者比较,均明显升高,IGFBP-3水平明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结直肠癌术后未发生转移者与有肝或腹腔远处转移者胰岛素、IGF-1、IGFBP-1、IGFBP-3、IGF-1／IGFBP-3比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结直肠癌患者WHR明显高于健康对照组（P〈0.01和P〈0.05）;而BMI与健康对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结肠癌患者WHR、BMI与胰岛素水平、IGF-1／IGFBP-3比值呈正相关（P〈0.01,P〈0.05）,与IGFBP-3呈负相关（P〈0.01,P〈0.05）;直肠癌患者WHR与血清瘦素、胰岛素水平及BMI与血清IGFBP-1水平均呈正相关（P〈0.05）,与其他无相关性（P〉0.05）。结论胰岛素、IGF-1水平和IGF-I／IGFBP-3比值升高及IGFBP-3水平降低,可能与结直肠癌的发生有关,但与肿瘤转移与否无关,中心性肥胖是结肠癌发生的危险因素之一。     

生长因子与老年性骨质疏松症相关性的临床研究

目的观察老年性骨质疏松患者转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1),表皮生长因子(EGF)血清水平以及与骨质疏松的相关性.方法采用双能X线骨密度仪测量了86例在本院老年病门诊和住院的老年人腰椎正位以及股骨颈、ward三角区、大粗隆部位的骨密度(BMD),受试者均为老年男性,平均年龄为69.97±5.73岁,按照WHO推荐的诊断标准,参考中国人骨质疏松症建议诊断标准(第二稿),将其分为非骨质疏松组(NOP)、腰椎骨质疏松组(OP1)和股骨上段骨质疏松组(OP2),测定所有受试者血清TGF-β1,IGF-1,EGF水平.结果腰椎骨质疏松组和股骨上段骨质疏松组血清IGF-1浓度值均低于非骨质疏松组((P＜0.01)).腰椎骨质疏松组血清TGF-β1浓度值与非骨质疏松组无明显差异((P>0.05)),股骨上段骨质疏松组血清TGF-β1浓度值低于非骨质疏松组(0.01<P<0.05),骨质疏松组血清EGF值与非骨质疏松组无差异(P>0.5).腰椎骨密度值与血清IGF-1值呈正相关(相关系数分别为0.212、0.325、0.228),腰椎骨密度值与血清TGF-β1值呈显著正相关(相关系数分别为0.373、0.328、0.341、P<0.05).股骨颈、Ward三角、大粗隆的骨密度值与IGF-1和TGF-β1无显著相关性.骨密度值与表皮生长因子无显著相关性.结论老年骨质疏松患者血清TGF-1含量低而血清TGF-β1浓度值差异较大,但从相关分析结果看,骨密度值与IGF-1和TGF-β1有较密切关系,为进一步探讨骨质疏松的发病机理,需做生长因子的骨组织表达.血清表皮生长因子(EGF)可能与骨重建无明显相关性.     

胰岛素样生长因子-1对成纤维细胞向成骨细胞转化的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1对成纤维细胞(Fb)向成骨细胞转化的影响. 方法 Fb来源于成年新西兰大白兔,通过分离、纯化、培养而得到.实验分为3组:空白对照组、成骨诱导组和实验组.空白对照组:常规培养液培养,不加入任何诱导剂及干预因子;成骨诱导组:成骨诱导液为常规培养液中加入浓度为1×10-8 mol/L地塞米松、50 mg/L维生素C、10 mmol/L β-甘油磷酸钠;实验组:成骨诱导液中加入终浓度为50 ng/mL的IGF-1.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况,检测各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,测定各组细胞培养后6d后的骨钙素含量,采用钙钴染色评价培养后2周的成骨能力.结果 实验组细胞增殖较其他两组旺盛,差异有统计学意义(P＜0.05),而空白对照组和成骨诱导组差异无统计学意义(P＞ 0.05).ALP活性和骨钙素测定:实验组ALP表达明显高于其他两组,差异有统计学意义(P＜0.05);成骨诱导组ALP表达高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组钙化结节数量明显较其他两组多,成骨诱导组次之,空白对照组未见钙化结节.结论 胰岛素样生长因子-1可以促进Fb在成骨过程中的增殖以及增加其成骨能力.     

The multi-functional role of insulin-like growth factor binding proteins in bone

The insulin-like growth factor (IGF) system is an important regulator of bone formation. The IGFs (IGF-I and IGF-II) are the most abundant growth factors produced by bone, and are regulated by their six high affinity binding proteins (IGFBPs). The IGFBPs are produced by osteoblasts and are responsible for transporting the IGFs and extending their half-lives. In general, IGFBP-1, -2, -4, and -6 inhibit and IGFBP-3 and –5 stimulate osteoblast function. IGFBP-4 and -5 are the most abundant IGFBPs produced by osteoblasts, and therefore they are the primary focus of this review. IGFBP-5 is an important stimulator of bone formation and may also function independently of IGFs. IGFBP-4 inhibits osteoblast function by sequestering IGF and preventing it from binding to its receptor. This review focuses on the specific IGF-dependent and IGF-independent roles of the IGFBPs in bone formation, as well as their potential mechanisms of action. In addition, discussion of the regulation of the IGFBPs by post-translational modification (i.e., proteolysis) has been included. Studies on the regulation of production and actions of IGFBPs suggest that the IGFBP system in bone is pleiotropic and capable of serving multiple effector inputs from systemic and local sources.This work was presented in part at the IPNA Seventh Symposium on Growth and Development in Children with Chronic Kidney Disease: The Molecular Basis of Skeletal Growth, 1–3 April 2004, Heidelberg, Germany     

胰岛素样生长因子1对2型糖尿病合并骨质疏松中骨钙素表达的影响

随着流行病学的调查研究发现,2型糖尿病患者与健康人群相比,其罹患骨折事件的发生率明显增高,所以骨质疏松及骨折等并发症需引起2型糖尿病患者的足够重视。在分子机制层面的研究显示,2型糖尿病合并骨质疏松的发生可能与胰岛素样生长因子1、葡萄糖毒性、硬骨素、骨钙素及氧化应激等多种代谢途径的改变有关。胰岛素样生长因子1是骨形成的调节因子,在调节成骨细胞和破骨细胞介导的骨骼重建过程中起着重要的作用。骨钙素是由成骨细胞产生的一种非胶原蛋白,能够反映成骨细胞的活性,常作为骨形成和骨转换的特异性指标。有研究显示,胰岛素样生长因子1以浓度依赖方式刺激骨钙素的合成增加,本文试就胰岛素样生长因子1对2型糖尿病合并骨质疏松中骨钙素表达的影响做一综述,探讨在2型糖尿病合并骨质疏松患者中胰岛素样生长因子1与骨钙素之间的相关性,以期对2型糖尿病合并骨质疏松患者能够进行早期诊断及治疗,预防骨折事件的发生,提高患者生活质量。