用放射自显影术研究人参总皂甙对大鼠海马NMDA受体的影响

采用〔３Ｈ〕ＴＣＰ放射配基作海马ＮＭＤＡ受体的自显影，研究人参总皂甙在海马齿状回颗粒细胞层诱发ＬＴＰ效应和促进大鼠记忆保持能力时，海马内此受体的变化。给人参总皂甙的大鼠海马ＣＡ１、ＣＡ３和ＤＧ（ｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓ齿状回）的ＮＭＤＡ受体银粒数较给生理盐水大鼠的平均分别增多４２．８４％±２．４％，３８．５７％±３．１３％，３５．８１％±１．４６％（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１），表明人参总皂甙在诱发海马ＬＴＰ和促进大鼠记忆行为时，可增加海马的ＮＭＤＡ受体数目和活性。     

人参茎叶总皂甙对小鼠遗传物质损伤的保护作用

人参茎叶总皂甙对小鼠遗传物质损伤的保护作用姜官凤１朱玉琢１庞慧民１刘建伟２人参茎叶总皂甙（ＧＮＳ）对化学诱变剂引起的体细胞遗传物质损伤具有抗诱变作用，但其对雄性生殖细胞遗传物质损伤的影响研究甚少。我们以小鼠早期精细胞微核试验和初级精母细胞染色体畸变分...     

烧伤小鼠血清对离体培养的骨髓基质细胞的影响

目的　研究小鼠烧伤血清对离体培养的骨髓基质细胞的影响。方法　利用流式细胞仪、HE染色等技术观察小鼠烧伤后不同时间的血清对小鼠骨髓基质细胞 (BMSC)贴壁率和基质祖细胞 (CFU F)集落形成的作用及对不同剂量的6 0 Coγ射线体外照射后的BMSC的影响。结果　小鼠烧伤后 1～ 11d的血清对基质细胞贴壁率和CFU F的形成主要表现为抑制作用 ,13～ 15d的血清主要表现为刺激作用。小鼠烧伤后 15d的血清可明显减少 5 0、70Gy照射后BMSC的凋亡和坏死。 结论　小鼠烧伤后不同时间的血清对BMSC的作用不同 ,可能与血清内细胞因子的变化有关。     

人参总皂甙对K562细胞凋亡相关基因XIAP和Survivin表达的影响

目的 探讨人参总皂甙(TSPG)对K562细胞凋亡相关基因XIAP和Survivin表达的影响.方法 采用四唑盐比色试验(MTT法)检测TSPG对K562细胞增殖的影响;Hoechst33342/PI荧光染色法观察K562细胞的凋亡:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测K562细胞XIAP和Survivin基因的mRNA的表达.结果 TSPG在低浓度时有促进细胞增殖的作用(P>0.05),高浓度时逐渐出现抑制作用(P<0.05);荧光技术显示不同浓度TSPG培养K562细胞后24和48小时后凋亡细胞数目明显增多(P<0.01);TSPG下调K562细胞XIAP和Survivin基闪的表达(P<0.01).结论 TSPG通过下调K562细胞XIAP和Survivin基因的表达从而诱导K562细胞凋亡.     

染发剂对小鼠骨髓和生精细胞染色体畸变的影响

染发剂是一种成分复杂的特殊用途化妆品，近来其生产、使用和销售变得越来越普遍。我国对染发剂的毒理学研究较少，我们选择了７种不同染发剂进行实验，以观察其对小鼠骨髓和生精细胞造成的影响，并评估染发剂的使用安全性。材料与方法一、实验动物ＮＩＨ品系小鼠雌雄各半...     

成人骨髓基质细胞体外培养及其生物学特性

目的：探索体外培养脑出血后遗症患者骨髓基质细胞(BMSCs)的方法及扩增后的生物学特性。方法取脑出血后3个月以上患者髂骨骨髓组织,去除淋巴细胞后采用静置贴壁培养法接种培养,经多次换液纯化。在倒置相差显微镜下观察细胞形态,取第3、6代应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD34、CD45、CD105因子的表达。结果倒置相差显微镜下接种48 h后,发现少数细胞贴壁,呈梭形,6~8 d后细胞形成集落。传代后,细胞形态趋于一致,可成漩涡状。流式细胞仪检测显示CD34、CD45阴性,而CD29、CD105阳性。结论体外密度梯度离心法和贴壁静置可以获得大量高度均一的表型符合骨髓基质细胞的细胞。     

神经生长因子对骨髓基质细胞成骨分化影响的研究进展

神经生长因子（nerve growth factor,NGF）的来源十分广泛,可以由不同来源的细胞所分泌,组成结构认识的较为清楚,其促进成骨的作用近年来成为研究的热点。骨髓基质细胞（bone marrow—derived mesenchymal stem cells,BMSCs）向成骨细胞的分化潜能也为众多研究所认可,本文就NGF促进BMSCs成骨作用的可行性作一综述。     

地塞米松诱导小鼠骨髓基质细胞成骨的分子机制

目的 研究骨髓间充质细胞成骨分化的分子机制，为将其作为基因治疗的载体细胞奠定理论基础。方法 取成年小鼠股骨骨髓，贴壁培养，分别用矿化诱导培养基（10^-7 M地塞米松、10mM β-甘油磷酸钠和50mg／ml抗坏血酸）与骨形成蛋白2诱导，用RT-PCR检测Runx2，Osx和骨钙蛋白基因表达，茜素红染色鉴定钙节结。结果 RT-PCR显示，矿化培养基诱导组仅有Osx和OCN表达，BMP2诱导组Runx2，Osx和OCN全部表达，而两组茜素红染色均呈阳性钙结节。结论 地塞米松诱导的成骨作用中可能通过不同于BMP2的信号通路起作用。     

人参皂苷Rg_1对培养猪骨髓基质细胞增殖的影响

人参为中医传统“补气生血”药物 ,人参皂苷单体Ｒｇ1是人参三醇组皂苷的一个代表性单体 ,被认为是其主要药物成分 ,对心血管、神经系统及免疫功能等具有广泛的药理作用[1,2 ] 。既往的研究表明 ,人参总苷对体外培养的骨髓造血干细胞及祖细胞有增殖作用 ,对骨髓造血因子具有促分泌作用[3 ,4] ,但对骨髓基质细胞 (ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓ,ＢＭ ＳＣ)的增殖作用研究较少。为此 ,应用ＣＦＵ Ｆ形成法、[3 Ｈ]ＴｄＲ参入法和ＭＴＴ法研究人参皂苷Ｒｇ1对ＢＭＳＣ体外生长及其增殖的影响。1　材料与方法1.1　动物　实验用…     

阿伦磷酸钠对小鼠骨髓基质细胞成骨和成脂分化的影响

目的在离体条件下研究阿伦磷酸钠对小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)成骨和成脂分化的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测阿伦磷酸钠对骨髓基质细胞增殖的影响,碱性磷酸酶(ALP)活性测定法检测阿伦磷酸钠对骨髓基质细胞(MSCs)成骨分化的影响,油红O染色形态学及定量测定法检测阿伦磷酸钠对骨髓基质细胞成脂分化的影响。结果1×10-10,1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6和1×10-5mol.L-1的阿伦磷酸钠可以促进小鼠原代骨髓基质细胞增殖,抑制骨髓基质细胞的成骨分化及成脂分化。结论阿伦磷酸钠对骨质疏松症的预防和治疗作用可能通过抑制骨髓基质细胞的成脂分化,进而减少脂肪细胞细胞因子的分泌而抑制破骨细胞的形成、激活以及骨吸收功能。     

人参总皂苷对K562细胞STAT5表达的影响

目的探讨人参总皂苷（TSPG）对人红白血病细胞株（K562细胞）信号转导与转录因子5（STAT5）表达的影响。方法紫外-可见分光光度法测定血红蛋白含量及Wright′s染色法检测TSPG诱导K562细胞向红系细胞分化的变化;免疫细胞化学观察TSPG作用前后K562细胞STAT5表达的变化;以ELISA和Western blotting法检测TSPG处理前后K562细胞的细胞质和细胞核中STAT5含量的变化。结果TSPG（200mg/L）诱导K562细胞6h、12h、24h后,随着TSPG作用K562细胞时间的延长,细胞中血红蛋白的含量逐渐增加;而加入AG490（40μmol/L）部分抑制了K562细胞中血红蛋白含量的增加。免疫细胞化学染色可见对照组K562细胞的细胞质和细胞核着色浅淡;经TSPG 200mg/L作用12h后,K562细胞的细胞质和细胞核着色明显加深,表达增强,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）;TSPG（200mg/L）诱导K562细胞6h、12h、24h后,随着TSPG作用K562细胞时间的延长,细胞质和细胞核中STAT5的表达逐渐增强。结论TSPG能增强K562细胞STAT5的表达,这可能是TSPG诱导K562细胞向红系细胞分化的作用机制之一。     

三七皂甙对慢性缺氧性肺动脉高压的影响

目的：研究三七皂甙对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的作用。方法：采用间断常压缺氧法制备大鼠慢性缺氧性肺动脉高压模型，腹腔注射三七皂甙（２５，５０和１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），连续给药２１天。结果：三七皂甙能产生剂量依赖性地抑制慢性缺氧性肺动脉高压的作用，其抑制率分别为１５．９％、４３．９％和７３．４％，并能明显抑制右心室肥厚，其抑制率分别为２２．１％、５５．６％和８３．３％，而对颈动脉血压无明显的影响。三七皂甙（２００ｇ·Ｌ－１）能明显抑制血小板生长因子所诱导的离体肺动脉平滑肌细胞ＤＮＡ的合成。结论：三七皂甙有抑制慢性缺氧性肺动脉高压的作用，可能是通过抑制血小板生长因子促肺动脉平滑肌细胞增殖而抑制肺血管结构重建来实现的。     

吸收促进剂对三七总皂苷小肠吸收的影响

目的:研究三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)的小肠吸收动力学及吸收促进剂对PNS在小肠吸收速率和表观渗透系数的影响。方法:以紫外分光光度法、高效液相色谱法分别测定酚红和PNS的质量浓度,采用大鼠在体肠灌注实验考察吸收过程。结果:当药物质量浓度为40.084～400.840μg.mL-1时,大鼠小肠吸收速率常数和表观渗透系数无显著性差异(P>0.05);部分吸收促进剂能提高PNS在小肠的吸收水平,促吸收强弱顺序为:冰片>卡波姆>聚山梨酯-80,牛胆盐促吸收效果不明显,壳聚糖在一定程度上会延缓PNS的吸收。结论:PNS在大鼠小肠吸收较差,部分吸收促进剂对其吸收有一定的促进作用。     

三七总苷对人胃癌BGC-823细胞Bcl2和Bax表达的影响

目的:探讨三七总苷对胃癌BGC-823细胞Bcl2基因和Bax基因表达的影响。方法:不同浓度三七总苷诱导胃癌细胞BGC-823,实时荧光定量聚合酶链反应检测Bcl2基因和Bax基因的表达情况,免疫印迹检测Bcl2蛋白和Bax蛋白的表达情况,同时采用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变。结果:三七总苷作用后,胃癌细胞Bcl2基因的表达受到明显抑制,而Bax基因的表达则明显上调,Bcl-2/Bax呈上升趋势;流式检测细胞增殖受到抑制。结论:三七总苷可促进胃癌BGC-823细胞凋亡,具有抗胃癌细胞恶性增殖活性。     

人参总皂苷增强成骨分化的间充质干细胞促造血作用研究

目的观察人参总皂苷(TSPG)诱导间充质干细胞向成骨细胞分化的作用,探讨TSPG增强成骨分化的间充质干细胞促造血的可能机制。方法贴壁法培养人源骨髓间充质干细胞(h MSCs),成骨细胞分化和免疫表型进行鉴定。不同剂量的TSPG联合成骨细胞条件诱导液培养h MSCs,MTT法检测细胞增殖活性,对-硝基苯磷酸盐(p NPP)法检测培养上清碱性磷酸酶含量,茜素红染色法观察钙结节数量,Western blot法检测成骨细胞分化转录因子-核心结合蛋白因子2(RUNX2)蛋白表达水平,Elisa法检测培养上清造血相关因子含量,造血祖细胞集落生成实验检测培养上清造血支持能力。结果 MTT和p NPP结果均显示随着TSPG剂量增加,吸光值逐渐增加,呈剂量依赖性。钙结节数量和RUNX2蛋白表达水平明显高于对照组。造血相关生长因子和造血祖细胞集落数明显高于对照组。结论TSPG通过上调RUNX2蛋白表达诱导h MSCs向成骨细胞分化,同时增强成骨分化的MSCs支持造血。     

三七皂甙Rg1、Rb1抗大鼠肝纤维化的作用及机制研究

目的探讨三七皂甙Rg1、Rb1对肝纤维化大鼠线粒体的保护作用及机制。方法将大鼠随机分为4组,分别为对照组、模型组、Rg1、Rb1保护组,用5％CCl4橄榄油胃饲复制大鼠肝纤维化模型,用透射电镜和光镜观察肝细胞形态学变化。用放射免疫法检测Ⅲ型前胶原（ procollagen type Ⅲ,PCⅢ）的水平。用[3H]油酸标记的生物膜法测定肝线粒体分泌型磷脂酶A2（secretory phospholipase A2,sPLA2）活性,用分光光度法测定肝线粒体MDA含量,SOD活性,Ca2＋-ATP酶,总ATP酶活性,用荧光偏振法测定肝线粒体膜的流动性,紫外分光光度法测定呼吸链复合体Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ的活性。结果组织学用电镜检测可见模型组细胞有粗大束状的胶原纤维沉淀。 HE染色和Masson胶原染色切片统计分析得出Rg1、Rb1组的纤维化程度与对照组比较有统计学意义（ P ＜0噜．01）。血清学检查显示Rg1、Rb1组显著抑制血清中ALT、PCⅢ的升高,提高线粒体SOD活性,降低MDA含量,抑制sPLA2的升高,提高线粒体膜Ca2＋-ATP酶活性,总ATP酶活性（ P ＜0．01）;生物物理学证实Rg1、Rb1组增加线粒体膜的流动性,降低膜的微粘度,显著增加呼吸链复合体Ⅲ,Ⅳ的活性（ P ＜0．01）。结论三七皂甙Rg1、Rb1通过对肝纤维化大鼠线粒体显著的保护机理而起到抗肝纤维化的作用。     

三七总皂苷对抗H_2O_2所致大鼠脑微血管内皮细胞损伤的物质基础研究

目的研究三七总皂苷对H2O2致大鼠脑微血管内皮细胞损伤产生保护作用的物质基础。方法分离并培养大鼠脑微血管内皮细胞(RBMEC),以MTT和LDH的释放为指标,观察三七总皂苷(TPNS)、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rd、Re和Rb1对RBMEC损伤的保护作用。结果500μmol·L-1的H2O2对原代培养的RBMEC产生明显的损伤。20～200mg·L-1的TPNS,16·0μmol·L-1的R1,37·5～75·0μmol·L-1的Rg1,8·0～16·0μmol·L-1的Rd及5·4～54·0μmol·L-1的Rb1对H2O2致RBMEC的损伤具有明显的保护作用(P<0·05或P<0·01),Re则无此作用。结论TPNS对H2O2所致原代培养的RBMEC损伤具有明显的保护作用,产生这一作用的主要物质基础可能为Rb1、Rg1和Rd。     

西洋参茎叶皂甙单体Rb_3对大鼠血流动力学及单钙通道活动的影响

单体皂甙Ｒｂ３自西洋参茎叶皂甙中提取。Ｒｂ３３０ｍｇ·ｋｇ－１可使麻醉大鼠在体心脏的ＭＡＰ，±ｄＰ／ｄｔｍａｘ和ＬＶＳＰ减少。用斑片钳的连细胞电压钳法证明．Ｒｂ３３００ｍｇ·Ｌ－１使Ｌ、Ｂ、Ｔ型钙通道的开放时间缩短、开放概率减少，其作用与异搏定３７．５ｍｇ·Ｌ－１相似，与ＢａｙＫ８６１１５μｍｏｌ·Ｌ－１作用相反。确切地证明Ｒｂ３对钙通道有阻滞作用。     

三七总皂苷抑制肝细胞钙超载的机制

目的通过测定大鼠肝细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）,观察三七总皂苷（ＰＮＧＳ）对肝细胞Ｃａ２＋浓度的影响,探讨其抑制肝细胞钙超载的机制。方法胶原酶分离大鼠肝细胞,Ｆｕｒａ ２／ＡＭ技术测定［Ｃａ２＋］ｉ,研究ＰＮＧＳ对静息和被激动状态下肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果１０ｎｍｏｌ·Ｌ－１血管加压素及１０ｎｍｏｌ·Ｌ－１血管紧张素分别使肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ增加２００％和９４％,ｖｅｒａｐａｍｉｌ、ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ和ＰＮＧＳ均能不同程度地抑制血管加压素、血管紧张素激动引起的肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ升高,ＰＮＧＳ的抑制作用显著强于ｖｅｒａｐａｍｉｌ、ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ且呈明显的剂量依赖性。ＰＮＧＳ还能轻度降低静息状态下肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ,而ｖｅｒａｐａｍｉｌ、ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ无此作用。结论ＰＮＧＳ能特异性阻断肝细胞膜上受体依赖性钙通道（ＲＯＣ）,抑制肝细胞的钙内流,阻断肝细胞内源性ＩＰ３途径,防止肝细胞内钙超载。ＰＮＧＳ抑制钙超载机制还可能与其本身轻度结合钙离子有关。     

RNAi沉默Notch1基因对人胶质瘤U251细胞增殖能力的影响

目的探讨沉默Notch1基因对人神经胶质瘤U251细胞增殖能力的影响。方法采用Notch1-shRNA慢病毒感染人胶质瘤U251细胞,筛选稳定低表达Notch1的细胞单克隆,Western blot法检测细胞Notch1蛋白的表达;CCK-8法测定细胞生长;平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;裸鼠种植瘤模型观察Notch1沉默对种植瘤生长的影响。结果成功筛选得到Notch1稳定沉默的U251细胞单克隆,其Notch1蛋白下调(65.3±5.1)%。Notch1稳定沉默细胞的生长增殖能力明显受到抑制,生长曲线与对照组相比明显减慢;Notch1沉默组的平板克隆形成率为(18.6±2.5)%,低于对照组(37.0±3.3)%;Notch1沉默组软琼脂集落形成率(51±5)%,低于对照组(80±4)%;Notch1沉默组裸鼠腋下种植瘤生长速度减慢,30d后瘤重(0.31±0.09)g,明显低于对照组(2.35±0.71)g;统计学分析差异均有显著性。结论RNAi沉默Notch1基因可致人胶质瘤U251细胞的体外增殖和体内成瘤能力下降。