蛋白激酶C-α反义核酸对人肝癌细胞HepG2体外增殖及凋亡的影响

目的　探讨蛋白激酶 (PK )C α反义寡核苷酸 (asODN)对人肝癌细胞HepG2体外增殖及凋亡的影响。方法　用RPMI 164 0体外培养和传代HepG2细胞 ,以脂质体 (LP)介导不同浓度PKC αasODN转染人肝癌细胞HepG2 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测其生长指数 (GI) ,软琼脂克隆形成法检测其克隆形成率 ,流式细胞术 (FCM )检测其凋亡率。结果　 0 .10～ 1.0 0 μmol/L的PKC αasODN能显著降低HepG2细胞GI(P <0 .0 5 ) ;0 .0 5～ 1.0 0 μmol/L的PKC αasODN能显著降低其软琼脂克隆形成率 (P <0 .0 1) ,两者均具有量效依赖关系。 0 .5 0～ 1.0 0 μmol/L的PKC αa sODN可使HepG2细胞发生显著凋亡 (P <0 .0 1)。结论　通过PKC αasODN阻断人肝癌细胞HepG2信号转导分子PKC α ,可有效抑制HepG2体外生长增殖 ,并可诱导其凋亡     

Genistein抑制裸鼠肝癌移植瘤侵袭性生长

目的　研究Genistein对裸鼠肾包膜下肝癌移植瘤侵袭性生长的作用及其作用机制。方法　10只裸小鼠分成2 组,每只裸小鼠均建立双侧肾包膜下肝癌移植瘤模型,予Genistein(5 mg/ml)腹腔内注射,共15 d。观察移植瘤生长及对肾实质侵袭能力变化,行肿瘤微血管密度(MVD)的免疫组化检测及MMP2与TIMP2表达的RT PCR检测。结果　Genistein治疗组瘤体积增加(63 .32±8. 96) mm3,显著小于对照组(79 .25±6. 85) mm3,P<0 .05,抑瘤率为20 1%;MVD在Genistein组(10 .422±0 .807)显著低于对照组(22 330±5 696),P<0. 05。MMP2 表达在Genistein组(0 .296±0. 132)显著低于对照组(0. 519±0 .158),P<0 .05;TIMP2 表达两组间并无显著差异,但MMP2/TIMP2比值在Genistein组(0. 498±0.214)显著低于对照组(1 .011±0. 319),P<0 .05。结论　Genistein显著抑制Bel 7402肝癌移植瘤在裸小鼠肾包膜下的侵袭性生长,病理性肿瘤血管生成减少及MMP2表达降低与其抗肿瘤侵袭作用密切相关。     

白藜芦醇与氟尿嘧啶对小鼠肝癌的联合治疗作用

目的　探讨白藜芦醇单独及其与氟尿嘧啶 (5 Fu)联合应用对小鼠移植性肝癌的抑制作用。方法　利用小鼠移植性肝癌H2 2 模型研究白藜芦醇的体内抑瘤作用以及其对氟尿嘧啶抑瘤作用的影响。结果　白藜芦醇治疗组能不同程度抑制小鼠肝脏移植瘤的生长 ,10 0mg/kg和 15mg/kg的白藜芦醇治疗时抑瘤率分别为 36 6 %和 4 9 3% ,与对照组比较有明显差异 (P <0 0 1) ;同时发现白藜芦醇与氟尿嘧啶合用能增加氟尿嘧啶的抑瘤率 ,单用 2 0mg/kg或 10mg/kg的氟尿嘧啶 ,抑瘤率分别为 5 3 1% ,4 3 8% ,而合用 10mg/kg的白藜芦醇后抑瘤率分别为 77 3%、72 7% ,两者有显著性差异 ,且无明显的毒性反应。结论　白藜芦醇能增强氟尿嘧啶的抗癌作用 ,降低其毒性 ;白藜芦醇作为生化调节剂可能用于肿瘤联合化疗。     

抗人膀胱癌抗独特型抗体佐剂疫苗的动物实验

目的：研究抗独特型抗体佐剂疫苗（Ab2 SAF)对膀胱癌的免疫治疗作用。为临床实验提供动物实验依据，方法：用抗人膀胱癌Ab SAF免疫BALB／C小鼠为实验组；对照组用生理盐水，免疫3次后，于未次免疫后1周，将新鲜人膀胱移行细胞癌组织移植于小鼠肾包膜下，分别于移植后第2，4，6，8和10天处死小鼠，取血清进行抗抗独特型抗体（Ab3)分析，移植瘤行组织学检查，观察宿主淋巴细胞浸润情况及瘤细胞可见了率，结果：实验组小鼠肾包膜下人膀胱癌细胞很快受到排斥，在移植后第6天，淋巴细胞浸润即达高峰，而对照组在第10天才达高峰，瘤细胞可见率，在移植后第6天即明显降低，而对照组呈逐渐下降，实验组Ab3为阳性，而对照组为假阳性或阴性，结论：Ab2作为抗原免疫小鼠后，能够排斥瘤细胞的生长。     

胞嘧啶脱氨酶基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤的研究

目的　观察胞嘧啶脱氨酶基因 (CD)、单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV tk)共表达对裸鼠人肝门部胆管癌皮下移植瘤的治疗作用。方法　用转染有双自杀基因的包装细胞PA3 17产生的病毒上清 ,感染裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤 ,给予前体药物 5 氟胞嘧啶 (5 FC) 5 0 0mg/kg体重和 /或无环鸟苷 (GCV ) 10 0mg/kg体重后 ,1次 /d ,共 10d ,观察肿瘤的生长情况。 结果　双自杀基因在裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤中稳定表达 ,转基因组肿瘤的生长明显受到抑制 (P <0 .0 1) ;CD tK / 5 FC GCV组、CD/ 5 FC组、tK/GCV组抑瘤率分别为 88.3 1%、63 .5 2 %、65 .0 5 %。双自杀基因组与单自杀基因比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　双自杀基因可明显抑制裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤生长 ,较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用     

SCID鼠人肝癌皮下移植及免疫重建复合模型的建立

目的　探索建立稳定的SCID鼠人肝癌皮下移植及免疫重建 (人HCC PBL SCID)复合模型的方法。方法　经SCID鼠腹腔内注射人PBL、皮下接种人肝癌细胞 ,定期检测SCID鼠体内人淋巴细胞及其功能、观察皮下成瘤潜伏期及成瘤率。结果　人HCC PBL SCID复合模型鼠和单纯人HCC SCID模型鼠成瘤率均为 10 0 % ,但前者成瘤潜伏期显著延长、肿瘤明显缩小 (P分别 <0 0 1、<0 0 5 )。人HCC PBL SCID复合模型鼠第 2、4、6周时小鼠血中人IgG分别为 (6 9 8± 11 6 ) μg/ml、(12 5 9± 13 7) μg/ml和(183 1± 9 0 ) μg/ml,人CD3 淋巴细胞占单核细胞分别为 (10 5± 5 2 ) %、(9 7± 2 9) %和 (8 4± 2 4 ) %。复合模型鼠第 4、6周的小鼠脾细胞对HepG2细胞的杀伤力分别为 (2 0 3± 8 7) %和 (2 2 0± 2 3) %。免疫组化检测显示小鼠脾脏、胸腺、肿瘤组织中均有较多的人CD3 淋巴细胞分布。结论　采用腹腔注射人PBL、皮下接种人肝癌细胞的方法可以有效地建立人HCC PBL SCID嵌合模型。此模型较好地模拟了肝癌的人体内情况 ,是肝癌免疫基因治疗的较理想模型。     

肾细胞癌保肾手术安全切除范围的探讨

目的　探讨肾细胞癌保肾手术的安全切除范围。　方法　肾癌根治术标本 10 2例 ,间隔 3mm分层切开 ,假包膜外 2 0mm范围连续切片检查假包膜完整性、假包膜外肾实质及小血管浸润、镜下多中心灶及范围等。　结果　 4 9例 (48.0 % )无完整包膜。假包膜外癌灶分布于 0～ 8mm ,平均 (1.2± 1.9)mm范围 ,其中 30 .4 %在 1～ 8mm范围内。统计学处理 ,取单侧百分位数 ,百分位97.5及 10 0 .0结果分别为 7.4mm和 8.0mm。　结论　保肾手术的切除范围应包括肿瘤外缘 10mm的正常肾实质。如果术前无法确定有否假包膜外癌灶 ,一般不宜施行单纯肿瘤剜出术。     

腹腔注射人淋巴细胞建立人肝癌PBL-SCID嵌合模型

目的　探索建立人肝癌PBL SCID嵌合模型的方法。方法　C57/BL SCID小鼠腹腔注射健康志愿者外周血淋巴细胞(huPBL) 2×107 (1 0 ml),同时右腋部皮下注射 5×105 (0 2 ml)HepG2细胞。第2、4周鼠尾取血ELISA法测定人 IgG含量,用流式细胞仪分析小鼠外周血单个核细胞中人淋巴细胞比例。4周MTT法测定小鼠脾细胞对 HepG2 细胞的杀伤能力,免疫组化检测小鼠脾脏中人淋巴细胞的存在。结果　模型成瘤率为100%,成瘤潜伏期12~18 d。2、4周时小鼠血中人IgG 分别达69 8μg/ml、125 9μg/ml,人淋巴细胞占单核细胞的比例分别为 10 5%和 3 5%。4周时免疫组化检测出人淋巴细胞分布于小鼠脾脏中,小鼠脾细胞对 HepG2 细胞的杀伤力为 20 3%。处死动物,常规病理切片见肿瘤生长。结论　SCID小鼠腹腔注射人淋巴细胞、皮下注射肝癌细胞可建立人肝癌PBL SCID嵌合模型。     

重组腺病毒介导IL-12、IL-2联合基因治疗前列腺癌的实验研究

目的　探讨转移性前列腺癌的治疗方法 ,为前列腺癌免疫基因治疗提供实验依据。　方法　采用重组腺病毒介导IL 12、IL 2联合免疫基因疗法 ,对 6 6只C5 7BL/ 6小鼠前列腺癌模型进行致瘤性和抑瘤性观察。　结果　腺病毒AdmIL 12、AdhIL 2能有效表达目的基因。接种野生型 ,转AdLacZ及转AdmIL 12、AdhIL 2混合RM 1细胞的小鼠致瘤比例分别为 10 / 10、10 / 10及 2 / 10 ;成瘤时间分别为 (12 .3± 1.5 )d、(12 .8± 1.0 )d、(2 2 .5± 2 .1)d ;接种 30d后肿瘤结节直径分别为 (35 .0±2 .0 )mm、(34 .0± 2 .6 )mm、(10 .5± 3.5 )mm。与对照组相比 ,转AdmIL 12、AdhIL 2基因RM 1细胞小鼠致瘤率下降 ,成瘤时间延迟 (P <0 .0 1)、瘤结节小 (P <0 .0 1)。AdmIL 12、AdhIL 2瘤体注射还可抑制肿瘤生长 (P <0 .0 1) ,减少肺转移灶数目 (P <0 .0 1)。　结论　IL 12、IL 2联合基因治疗可诱发前列腺癌小鼠的肿瘤特异性免疫反应。     

C57BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型的建立

目的建立C57BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型并探讨其应用价值.方法用微量注射器在C57BL6近交系小鼠的前列腺左右背外侧叶包膜下接种小鼠前列腺癌RM-1细胞2×106个建立原位移植瘤模型,以皮下移植瘤模型作为对照比较两者的肿瘤转移发生情况及生存期.结果原位模型小鼠全部发生肿瘤转移,其中盆腔淋巴结和肺的转移发生率分别为(10/10)、(8/10),对照组仅有肿瘤的局部生长和浸润,无转移发生;原位模型的小鼠平均生存期为(11.0±2.4)d较对照组(23.0±4.7)d明显缩短,差异有非常显著性(P＜0.01).结论小鼠的前列腺癌原位移植瘤模型较好地模拟了人癌体内的自然生长状况,是观察转移性前列腺癌较为适宜的模型.     

深圳市某两所小学流行性腮腺炎突发疫情的流行病学分析

目的：通过对深圳市某两所小学发生的流行性腮腺炎突发疫情的流行病学特点及差异性进行分析,为制定科学、高效的防控策略提供科学依据。方法2013年5～7月深圳市大鹏新区某两所小学爆发流行性腮腺炎,以学校为整体研究对象,分别标记为学校A（24个班,学生1210例）和学校B（27个班,学生1274例）,对比两所小学的疫情流行病学差异性。结果分析发现,学校A流行性腮腺炎发病率为4.30%,发病班级所占比54.17%,均较学校B1.73%和29.63%高,对比差异有统计学意义（P＜0.05）;分析显示学校A学生出现疫病平均年龄为（11.2±1.1）岁,较学校B（9.34±1.0）岁,对比差异明显（P＜0.05）;且两组疫病患儿在接种疫苗率对比上差异无统计学意义（P＞0.05）;但疫情发生时,学校B疫苗紧急接种率明显高于学校A,对比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论小学作为流行性腮腺炎爆发的主要场所之一,疫病爆发高峰季节前,针对易感染人群给予相应的疫苗接种等预防控制措施,同时加强流行性腮腺炎的监测,对于降低感染人群数量,减轻、遏制疫情有着积极的意义,值得相关防控部门重视。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

Frequency of complications of manipulation of the spine

Summary A survey of all members of the Swiss Medical Association of Manual Medicine was undertaken for the year 1989. Informative data were given by 425 respondents on the frequency of complications of manipulation as related to the spine. The number of thoraco-lumbar manipulations during 1989 (225 working days) was 805 for each respondent, and the number manipulations of the cervical spine 354. Thus, the total number of thoraco-lumbar manipulations was 342 125, and the total number of cervical manipulations was 150 450. The overall incidence of side-effects of transient complications due to cervical spine manipulation such as disturbance of consciousness or radicular signs was 1: 16716. Seventeen patients (ratio 1: 20 125) after manipulation of the lumbar spine presented, in addition to increased pain, a transient sensorimotor deficit with precise radicular distribution. Nine of the 17 patients (ratio 1: 38013) developed a progressive radicular syndrome with sensorimotor defict and radiologically verified disc herniation and had to be referred for surgery. Side effects and complications of cervical and lumbar spine manipulation are rare. Taking in to account the yearly number of manipulations performed by a single physician in Switzerland and the rate of complications, it can be calculated that a physician practicing manual medicine will encoutner one complication due to manipulation of the cervical spine in 47 years and one complication due to lumbar spine manipulation in 38 years of practice. However, it is important that a careful clinical assessment is carried out to avoid complications due to manipulation carried out on the basis of inappropriate indications. Furthermore, the decision as to which technique is indicated for any particular functional disorder of the spine should be made on the basis of rational criteria resting on a knowledge of clinical biomechanics, functional anatomy and neurophysiology. The authors recommend a prospective morbidity study to be carried out among physicians, chiropractors, osteopaths and physiotherapists, taking into account the different indications and therapeutic techniques in relation to complications.     

Pathogenesis of carcinoma of the papilla of Vater

Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7–, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20–, MUC2–). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.     

Oddi括约肌肌电活动实验模型的建立

目的建立研究Oddi括约肌肌电活动的动物模型和实验方法。方法将双极金属钩状电极通过浆膜层置入Oddi括约肌，记录不同条件干预下家兔的Oddi括约肌肌电活动信号，调整电生理实验参数并经放大、滤波及计算机处理后，对其大小、波形、幅度进行分析。结果不同条件干预下的家兔Oddi括约肌的肌电活动在波形、频率、幅度等方面均有明显的不同，具有明显的规律性。重复实验可得到相似的结果。结论使用双极金属钩状电极配以合理的电生理实验参数调整可以稳定地采集到在体的家兔Oddi括约肌肌电活动信号。这为今后广泛、深入地研究Oddi括约肌肌电活动搭建了一个技术平台。     

骨盆骨折的治疗进展

对于骨盆骨折的治疗 ,传统方法以卧硬板床 ,股骨髁上持续骨牵引 ,骨盆兜等保守治疗为主 ,常常引起下肢不等长 ,骶髋痛 ,步态失常等而严重影响生活质量 ,同时长期卧床易引发肺部感染、褥疮、应激性溃疡、泌尿系统结石等并发症而危及生命。下面就骨盆骨折的治疗进展作一综述。1     

主动脉窦瘤破裂外科治疗的临床研究

目的　探讨主动脉窦瘤破裂局部病理改变及其合并主动脉瓣关闭不全的手术方法。方法　 3 6例主动脉窦瘤破裂 (RASV)合并主动脉瓣关闭不全 (AI) 15例、室间隔缺损 (VSD) 2 6例。补片修补 3 5例 ,其中合并VSD的均以一片法修补 ,合并AI的主动脉瓣置换 (AVR) 6例 ,主动脉瓣成形 4例。手术取材作病理检查 5例。结果　本组 3 6例中手术死亡 2例 ( 5 .6% )。存活的 3 4例病人均经门诊复查或通信随访 0 .3～ 18年 ,其中 2例死亡。病理检查见RASV合并VSD的瘤壁为纤维素样坏死或玻璃样变性。结论　主动脉窦壁纤维素样或玻璃样变性可能是其形成的病理基础。合并主动脉瓣关闭不全时应探查其病变程度 ,酌情一期矫正 ,瓣膜损伤明显时宜行主动脉瓣置换 ,对主动脉瓣环细小的病例 ,可借修补VSD和RASV的补片扩大主动脉瓣环。     

复合小剂量阿曲库铵对顺苯磺酸阿曲库铵起效时间的影响

目的观察顺苯磺酸阿曲库铵同时复合阿曲库铵用于全凭静脉诱导的起效时间。方法择期全麻手术患者80例,随机均分为A、B、C、D四组。A组单用3ED95(0.15 mg/kg)顺苯磺酸阿曲库铵作为对照组;另三组分别用3ED95顺苯磺酸阿曲库铵复合阿曲库铵0.05 mg/kg(B组)、0.10 mg/kg(C组)或0.15 mg/kg(D组)。采用TOF-Watch SX肌松监测。静注咪唑安定0.05mg/kg、芬太尼5μg/kg、依托咪酯0.3 mg/kg及相应剂量肌松药,记录起效时间,进行气管插管条件评级。结果B、C、D组肌松起效时间依次加快,均明显短于A组(P<0.01),但B、C、D组之间差异无统计学意义。结论复合小剂量阿曲库铵能缩短3ED95顺苯磺酸阿曲库铵的起效时间。     

静脉皮瓣成活过程的实验研究

我们以兔为实验动物，通过微循环观察及血管内灌注填充剂，研究静脉皮瓣的成活过程。这一过程可分为２个阶段。第一阶段（术后７２小时内）为静脉血营养期：静脉血由静脉干通过小静脉吻合支、微静脉干间吻合支及终末微静脉吻合支回流至另一静脉。术后４８小时内毛细血管内无血液运动。第二阶段（术后７２小时～６周）为动脉血营养及血管改造期：术后７２小时新生血管开始向皮瓣内生长。术后７２无皮瓣动脉同主要来自皮瓣周围正常组织内的新生血管吻合使动脉血分布于整个皮瓣，这是静脉皮瓣成活的关键     

鼻尖、鼻翼缺损修复方法的探讨

１９５７年以来共收治鼻尖、鼻翼缺损１１９例，据情分别采用以下四种方法修复：①全层皮片移植２７例；②游离耳廓复合组织片移植３６例；③鼻唇沟皮瓣移转１２例；④上臂内侧皮管移植４４例，效果较为满意。我们在文章中就选用的原则、手术方法及注意事项等进行了探讨